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文檔簡介

1、腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)3. 其中鼠疫耶爾森菌、傷寒沙門菌對(duì) 人致病性較強(qiáng)。此外,許多細(xì)菌既 是正常菌群,也是條件致病菌。在 機(jī)體抵抗力下降,寄居部位的改變 或菌群失調(diào)時(shí)能引起機(jī)會(huì)感染。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)23. 其中鼠疫耶爾森菌、傷寒沙門菌對(duì)腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)2二、臨床意義 占臨床分離菌總數(shù)的50和-總數(shù)的 80, 將近50的敗血癥70以上的泌尿 道感染和大量的腸道感染是由腸桿菌科 細(xì)菌引起的。 1. 人類腸道外感染 除志賀菌較少引起腸外 感染,大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、產(chǎn) 酸克雷伯菌、奇異變形桿菌、產(chǎn)氣腸桿 菌、陰溝腸桿菌、粘質(zhì)沙雷菌等均可引 起泌尿道、呼吸道、傷口和中樞神經(jīng)系 統(tǒng)的感染

2、;腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)3二、臨床意義腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)3 且往往為醫(yī)院感染。鼠疫耶爾森菌可 引起烈性傳染病鼠疫。2. 人類腸道感染 埃希菌屬、志賀菌屬、沙門菌屬和耶 爾森菌屬。主要引起各種急、慢性腸 道感染、食物中毒、旅行者腹瀉及腸 熱癥等。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)4 且往往為醫(yī)院感染。鼠疫耶爾森菌可腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)三、共同特性 (1) 1. 形態(tài)結(jié)構(gòu) -桿狀或球桿狀、無芽孢、多數(shù)有鞭 毛,能運(yùn)動(dòng)。致病性菌株有菌毛。 2. 抗原成分 抗原是細(xì)胞壁成分脂多糖。以核 心多糖為中心的三層結(jié)構(gòu),內(nèi)側(cè)是脂類 A, 為內(nèi)毒素的毒性成分。外側(cè)是由重復(fù) 的特異多糖,決定抗原的特異性。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)5三、共同特性 (1)腸

3、桿菌科知識(shí)培訓(xùn)5 H抗原是不耐熱的蛋白質(zhì)抗原,氨基酸 序列和空間構(gòu)型決定H抗原的特異性。 表面抗原是包繞在抗原外側(cè)的多糖抗 原,由多糖結(jié)構(gòu)決定抗原特異性。大腸 埃希菌稱K抗原、傷寒沙門菌稱Vi抗原 和志賀菌稱B抗原等。 O抗原和H抗原是腸桿菌科血清學(xué)分 群和分型的依據(jù)。表面抗原存在時(shí)可阻 斷??乖c相應(yīng)抗體之間的反應(yīng),加熱 處理能消除表面抗原的阻斷作用。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)6 H抗原是不耐熱的蛋白質(zhì)抗原,氨基酸腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)6 共同特性 (2) 3. 變異性 S-R變異是初次分離的細(xì)菌,菌體 抗原上都有特異性多糖鏈,菌落為光滑 型。在人工培養(yǎng)基中反復(fù)傳代時(shí),細(xì)胞 壁上特異性多糖鏈消失而核心多糖仍

4、保 留,菌落變?yōu)榇植谛汀?H-O變異是有鞭毛的細(xì)菌, 失去鞭 毛,動(dòng)力也隨之消失,稱H-O變異, 有 時(shí)見于新分離的菌株中。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)7 共同特性 (4. 培養(yǎng)和生化特性 營養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上生長 良好;兼性厭氧,主要生化特性包括發(fā) 酵葡萄糖(產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣),觸酶陽性, 氧化酶陰性,可將硝酸鹽還原至亞硝酸 鹽。5. 抵抗力 抵抗力不強(qiáng),加熱6030min即被殺 死,不耐干燥,對(duì)一般化學(xué)消毒劑均敏 感。對(duì)低溫有耐受力。能耐膽鹽,能抵 抗染料的抑菌作用。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)84. 培養(yǎng)和生化特性 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)8 四、微生物檢驗(yàn) 1. 標(biāo)本采集 腸外標(biāo)本:采自不同的感染部位如血液 、

5、體液、呼吸道、傷口、尿液及其他各 種標(biāo)本。 腸道標(biāo)本:疾病早期留取新鮮糞便,挑 取粘液膿血部分進(jìn)行培養(yǎng)。應(yīng)在2h內(nèi)進(jìn) 行,以利志賀菌等檢出。如不能及時(shí)培 養(yǎng)應(yīng)冷藏待檢。 2. 直接鏡檢 -桿菌,形態(tài)及染色性無鑒別 意義。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)9 四、微生物檢驗(yàn)?zāi)c3分離培養(yǎng)鑒定 (1) 腸外標(biāo)本:采自無菌部位的標(biāo)本用血 瓊脂,血培養(yǎng)時(shí)可用肉湯增菌。其他 標(biāo)本中含有雜菌,需用選擇性培養(yǎng)基 以增加分離率,常用伊紅美藍(lán)(EMB) 瓊脂,因?yàn)镋MB能促進(jìn)腸桿菌科細(xì) 菌生長并抑制其他-菌。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)103分離培養(yǎng)鑒定 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)10 (2) 腸道標(biāo)本:常用的選擇鑒別培養(yǎng)基(如EMB)和針對(duì)沙門菌

6、和志賀菌的強(qiáng)選擇鑒別培養(yǎng)基,(如SS瓊脂)。如疑耶爾森菌感染可用耶爾森菌選擇瓊脂(CIN)。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)11 (2) 腸道標(biāo)本:常用的選擇鑒別培腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)1 腸桿菌科細(xì)菌鑒定1) 常規(guī)生化鑒定:為實(shí)驗(yàn)室最常用的方 法。各菌屬(種)主要生化特性有助 于鑒定細(xì)菌。2) 鑒定試劑盒:選用標(biāo)準(zhǔn)化和商品化的 微生物鑒定試劑盒,特點(diǎn)是質(zhì)量可 靠穩(wěn)定鑒定能力強(qiáng),并與編碼技術(shù) 結(jié)合,可用儀器讀取結(jié)果,實(shí)現(xiàn)自 動(dòng)化,并提高了工作效率。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)12 腸桿菌科細(xì)菌鑒定腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)123) 血清學(xué)鑒定:用特異性抗血清進(jìn) 行血清學(xué)分型鑒定后才能作出最 終報(bào)告。4) 分子生物學(xué)鑒定:可鑒定至科、

7、 屬 、種、血清型和腸毒素基因 等。甚 至可區(qū)分致病菌株和非 致病菌株。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)133) 血清學(xué)鑒定:用特異性抗血清進(jìn)腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)13 耐藥性問題日趨嚴(yán)重。粘質(zhì)沙雷菌對(duì)青霉素G等抗生素天然耐藥,而大多數(shù)是形成的獲得性耐藥。有染色體或質(zhì)粒介導(dǎo)的超廣譜-內(nèi)酰胺酶或AmpC酶而產(chǎn)生的耐藥性。已出現(xiàn)了耐多種抗菌藥物的多重耐藥菌株,因此必須根據(jù)抗菌藥物敏感試驗(yàn)選用抗生素,并作好耐藥性監(jiān)控工作。同時(shí)細(xì)菌的耐藥譜還可成為醫(yī)院感染流行病學(xué)調(diào)查中的標(biāo)志。(五) 抗菌藥物敏感試驗(yàn)?zāi)c桿菌科知識(shí)培訓(xùn)14 耐藥性問題日趨嚴(yán)重。粘質(zhì)沙雷菌對(duì)青霉(五) 抗菌藥物一、分 類 埃希菌屬包括5個(gè)種: 大腸埃希菌是腸道

8、中G-桿菌的主要 成員, 常引起腸內(nèi)外的感染,是腹 瀉和泌尿道感染的主要病原菌。 蟑螂埃希菌偶而檢出并有潛在的致 病性。 第二節(jié) 埃希菌屬腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)15一、分 類第二節(jié) 埃希菌屬腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)15 弗格森埃希菌; 赫爾曼埃希菌; 傷口埃希菌。 最近還發(fā)現(xiàn)稱為不脫胺凝聚埃 希菌 G+Cmol為 4852。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)16 弗格森埃希菌; 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)16二、臨床意義 1. 致病因素 侵襲力 K抗原能抗吞噬,并有抵抗抗體和 補(bǔ)體的作用。菌毛能幫助細(xì)菌粘附于 粘膜表面稱定殖因子,能使細(xì)菌定殖 產(chǎn)生毒素而引起相應(yīng)的癥狀,直接侵 犯粘膜引起炎癥。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)17二、臨床意義 腸桿菌科

9、知識(shí)培訓(xùn)17 內(nèi)毒素 具有發(fā)熱、休克、DIC等病理作用。 腸毒素 產(chǎn)生不耐熱和耐熱腸毒素兩種腸 毒素:均可使腸道細(xì)胞中cAMP 的水平升高,引起腸液大量分泌 而導(dǎo)致腹瀉。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)18 內(nèi)毒素 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)18二、臨床意義 2. 所致疾病 腸道外感染 是臨床分離的G-桿菌中最常見的 菌種,可引起泌尿系等各種類型的感染。 引起泌尿系感染的菌株以血清型01、 2、6為多見,本菌還可引起菌血癥、 膽囊炎、肺炎及新生兒腦膜炎等。 常 見于腹腔內(nèi)膿腫、腸穿孔繼發(fā)腹膜炎、 腸道手術(shù)后繼發(fā)感染或大面積灼傷創(chuàng)面 感染。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)19二、臨床意義 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)19 有時(shí)與類桿菌、糞腸球菌混合

10、感染。產(chǎn) 生的膿液粘稠,有糞臭味。該菌對(duì)一般 抗生素敏感,易產(chǎn)生超廣譜-內(nèi)酰胺酶,而導(dǎo)致對(duì)第三代頭孢菌素耐藥。 腸道內(nèi)感染 其中有些菌株能引起輕微腹瀉至霍亂 樣嚴(yán)重腹瀉,并能引起致死性并發(fā)癥如 溶血性尿毒綜合征。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)20 有時(shí)與類桿菌、糞腸球菌混合感染。產(chǎn)腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)2(1) 腸毒素型大腸埃希菌(ETEC): 引起兒童腹瀉和旅行者腹瀉,類似輕型 霍亂樣腹瀉。該菌產(chǎn)生耐熱腸毒素(ST) 和不耐熱腸毒素(LT)。(2) 腸致病性大腸埃希菌(EPEC): 引起嬰幼兒腸道感染, 血清型是055、 0111等, 是嬰兒腹瀉的重要病原菌。(3) 腸侵襲型大腸埃希菌(EIEC): 類似于志

11、賀菌,侵犯腸粘膜細(xì)胞,引起 菌痢樣癥狀,出現(xiàn)膿血粘液便。引起腸道感染的大腸埃希菌腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)21(1) 腸毒素型大腸埃希菌(ETEC):引起腸道感染的大腸埃(4) 腸出血型大腸埃希菌(EHEC),多為食 源性感染,通過糞-口途徑傳播。致病 因子是菌毛和Vero毒素,血清型是0157 :H7,可引起出血性結(jié)腸炎,有2 7發(fā)展成溶血性尿毒綜合征,出現(xiàn)溶 血性貧血,血小板減少性紫癜和急性腎 衰竭,死亡率為310。(5) 腸凝聚型大腸埃希菌(EaggEC):代表 一群不產(chǎn)生LT或ST,不能用O:H血清 分型,可粘附于Hep-2細(xì)胞的菌株。與 世界各地慢性腹瀉有關(guān)。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)22(4) 腸出血

12、型大腸埃希菌(EHEC),多為食腸桿菌科知識(shí)培三、微生物特性 1. 形態(tài)結(jié)構(gòu) G-直短桿狀, 大小為1.01.5m, 多數(shù)有鞭毛能運(yùn)動(dòng), 引起腸外感染的菌株有莢膜(微 莢膜)和周身菌毛。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)23三、微生物特性腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)232. 抗原成分 O抗原是多糖磷脂復(fù)合物(LPS),耐 熱加熱100不能滅活,已有171種 是血清學(xué)分型的基礎(chǔ)。 H抗原是不耐熱的蛋白質(zhì),已知有56 種,均為單相菌株。 K抗原是多糖莢膜抗原,對(duì)熱穩(wěn)定, 能阻止O凝集。血清型別按O:K:H 的順序以數(shù)字表示。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)242. 抗原成分 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)243. 培養(yǎng)特性 兼性厭氧,營養(yǎng)要求不高,在普通

13、瓊脂上生長良好,形成圓形光滑、濕 潤的菌落,在選擇培養(yǎng)基上可發(fā)酵乳 糖形成有色菌落。IMViC 試驗(yàn)結(jié)果為 +-。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)253. 培養(yǎng)特性 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)25四、微生物檢驗(yàn) (1) 腸道外感染標(biāo)本 1. 標(biāo)本采集 血液標(biāo)本以無菌操作技術(shù)采集靜脈血 5ml注入血液培養(yǎng)瓶。痰標(biāo)本取清晨口 腔清潔后從深部咳出的痰液。膿、分泌 物等標(biāo)本用無菌棉拭子直接采取。 2. 直接涂片染色檢查 除血液標(biāo)本外,膿、痰、分泌物等標(biāo)本 均作涂片染色檢查。尿液和各種體液離 心后取沉淀物作涂片, 可見G-短桿菌。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)26四、微生物檢驗(yàn) (1) 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)263. 分離培養(yǎng)鑒定 (1) 血液標(biāo)本

14、接種肉湯增菌培養(yǎng),待生 長后移種血平板。體液標(biāo)本取離心 沉淀物接種于血平板。尿液標(biāo)本應(yīng) 同時(shí)作菌落計(jì)數(shù)。膿、痰和分泌物 標(biāo)本可直接接種于血平板。35孵 育1824h后觀察菌落形態(tài)。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)273. 分離培養(yǎng)鑒定 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)27(2) 鑒別培養(yǎng)基上挑選有色菌落,用生 化反應(yīng)、血清學(xué)試驗(yàn)鑒定到屬和種。 典型的生化反應(yīng)特征: TSIA(雙糖鐵)產(chǎn)酸產(chǎn)酸產(chǎn)氣, CIT(枸櫞酸鹽)陰性,URE(脲酶)陰性, IND(吲哚)陽性, MOT(動(dòng)力)+-, ORN(鳥氨酸)+-。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)28(2) 鑒別培養(yǎng)基上挑選有色菌落,用生腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)28四、微生物檢驗(yàn)(2) 腸道內(nèi)感染標(biāo)本

15、引起腹瀉的ETEC、EPEC 、EIEC和EHEC具有與腸道外感染的大腸埃希菌相似的生物學(xué)特性,但分別具有特殊的血清型、腸毒素或毒力因子。 檢驗(yàn)程序同腸道外標(biāo)本。采集腹瀉 和食物中毒患者糞便和殘留食物,肛拭標(biāo)本,接種腸道選擇鑒別培養(yǎng)基分離培養(yǎng)和鑒定 。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)29四、微生物檢驗(yàn)(2) 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)29腸道感染大腸埃希菌鑒定 1) ETEC 生化反應(yīng)、血清分型加腸毒素 測(cè)定:生化反應(yīng)符合大腸埃希菌,但血 清型別與致病沒有一定的聯(lián)系。主要依 賴ST和LT腸毒素的檢測(cè)。 2) EPEC 生化反應(yīng)加血清分型:用多價(jià)抗 血清檢測(cè)O抗原,進(jìn)行特異性抗血清的 凝集試驗(yàn),陽性的菌株測(cè)定凝集滴度以

16、 排除交叉反應(yīng),同時(shí)做H抗原測(cè)定 (O:H分型)。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)30腸道感染大腸埃希菌鑒定腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)303)EIEC 生化反應(yīng)、血清分型加腸毒素測(cè)定:用O:H血清分型,賴氨酸脫羧酶陰性,無動(dòng)力,常見的血清型0152和0124,與志賀菌相似,主要的鑒別試驗(yàn)是醋酸鈉、葡萄糖銨利用試驗(yàn)和粘質(zhì)酸鹽產(chǎn)酸試驗(yàn),大腸埃希菌三者均陽性,而志賀菌三者均陰性。4)EHEC 血清分型加生化反應(yīng):應(yīng)常規(guī)作0157:H7的培養(yǎng),必須經(jīng)生化反應(yīng)證實(shí)為大腸埃希菌。凡山梨醇陰性的大腸埃希菌0157:H7分離株無須再做毒素的檢測(cè),因?yàn)榫a(chǎn)生Vero毒素。5)EaggEC 用液體培養(yǎng)-凝集試驗(yàn),檢測(cè)細(xì)菌對(duì)細(xì)胞的粘附性或用

17、DNA探針技術(shù)。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)313)EIEC 生化反應(yīng)、血清分型加腸毒素測(cè)定:用O:H血清 可致多種感染,輕者為自愈性胃腸炎,重者可引起致死性傷寒。傷寒和副傷寒A、B引起胃腸炎、菌血癥和腸熱癥;豬霍亂沙門菌引起胃腸炎和敗血癥,兒童多見。 第三節(jié) 沙門菌腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)32 可致多種感染,輕者為自愈性胃第三節(jié) 沙門菌腸桿菌科一、分 類 沙門菌屬是腸桿菌科中最復(fù)雜的菌 屬。根據(jù)O抗原分群,再根據(jù)H抗原 分血清型,將沙門菌屬分為6個(gè)亞屬 (亞屬 1-6,其中亞屬3再分為3a和3b, 見表7。8),絕大多數(shù)(99)沙門菌 的臨床分離株是亞群1中的菌種。本 屬細(xì)菌DNA G+C含量為50-53。 腸

18、桿菌科知識(shí)培訓(xùn)33一、分 類腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)33二、臨床意義 (一) 致病因素 1. 侵襲力 有Vi抗原的具有侵襲力,穿過小腸 上皮被吞噬后,由于Vi抗原的保護(hù), 反 而在細(xì)胞內(nèi)繁殖,并隨吞噬細(xì)胞至機(jī)體 其他部位,故稱細(xì)胞內(nèi)寄生菌。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)34二、臨床意義腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)342. 內(nèi)毒素 有較強(qiáng)的內(nèi)毒素,可引起發(fā)熱,白 細(xì)胞改變,中毒性休克,并能激活 補(bǔ)體,導(dǎo)致一系列病理生理變化。3. 腸毒素 某些沙門菌(如鼠傷寒沙門菌)能產(chǎn) 生類似大腸埃希菌的腸毒素。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)352. 內(nèi)毒素 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)35(二)所致疾病 1. 胃腸炎 最常見,引起腹瀉,伴有低熱,惡心 和嘔吐。 2.

19、菌血癥或敗血癥 以豬霍亂沙門菌感染為多,表現(xiàn)為高熱 寒戰(zhàn)。常伴有膽囊炎、骨髓炎。血培養(yǎng) 陽性而便培養(yǎng)陰性。 3. 腸熱癥 由傷寒沙門菌引起。血培養(yǎng)或肥達(dá)反應(yīng) 陽性。經(jīng)口感染,穿過小腸上皮到達(dá)淋 巴結(jié),進(jìn)入血流,第一次菌血癥。出現(xiàn) 發(fā)熱等癥狀。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)36(二)所致疾病 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)36 隨血流播散至肝、脾等器官中繼續(xù)繁 殖,再次進(jìn)入血流擴(kuò)散,第二次菌血癥, 出現(xiàn)持續(xù)高熱、肝脾腫大、皮疹和全身中 毒癥狀。細(xì)菌隨膽汁進(jìn)入腸腔,經(jīng)糞便排 出。 潛伏期720天,典型病程3-4周,發(fā)病 2周后機(jī)體出現(xiàn)免疫反應(yīng),使疾病好轉(zhuǎn), 但同時(shí)也引起遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng),導(dǎo)致腸壁 淋巴結(jié)壞死潰瘍,可造成腸穿孔而

20、危及生 命。4. 攜帶者 約3患者成為攜帶者,糞便持續(xù)排菌達(dá) 1年以上。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)37 隨血流播散至肝、脾等器官中繼續(xù)繁腸桿菌科知識(shí)三、微生物特性 1. 形態(tài)染色 G-桿菌細(xì)長,1.03.0m, 有鞭毛, 無芽胞 和莢膜。 2. 抗原結(jié)構(gòu)有3種: O抗原為多糖類脂蛋白質(zhì)復(fù)合物,能耐 受100 2.5 h。共有58種,是分群的依據(jù), 凡 含共同抗原的血清型歸為一個(gè)群,沙門菌含 一種或數(shù)種O抗原,每群以O(shè)加上數(shù)字及括號(hào) 大寫英文字母順序編排,如02群(A),Z以后 直接加數(shù)字表示,如051群。刺激機(jī)體產(chǎn)生 IgM抗體, 與相應(yīng)抗血清反應(yīng)呈顆粒狀凝集。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)38三、微生物特性腸桿菌

21、科知識(shí)培訓(xùn)38 H抗原 為蛋白質(zhì)抗原,加熱被破壞。有兩個(gè) 相,第一相稱特異相,用a、b、c表示, 是定型的依據(jù)。刺激機(jī)體產(chǎn)生的IgG 抗體,與相應(yīng)的抗血清呈絮狀反應(yīng)。 表面抗原 為Vi抗原有保護(hù)作用??勺柚筄抗原 與相應(yīng)抗體發(fā)生凝集,故在沙門菌血 清學(xué)鑒定時(shí)應(yīng)加以注意。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)39 H抗原 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)39三、微生物特性 3. 培養(yǎng)特性 兼性厭氧,生長溫度3537,最適 生長pH為6.87.8;營養(yǎng)要求不高,在腸道 選擇性培養(yǎng)基上因不發(fā)酵乳糖形成透明菌 落,在SS瓊脂上形成黑色的菌落。 4. 抵抗力 不強(qiáng),加熱601h或6520min,在水 中能活23周,糞便中呵存活12個(gè)月 5

22、. 變異性 有S-R變異、H-O變異和位相變異等具 有雙相H抗原菌變成單相菌 。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)40三、微生物特性 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)40四、微生物檢驗(yàn) 1. 采集標(biāo)本 傷寒沙門菌發(fā)病第l周取血。第2、3 周取糞便、尿液做培養(yǎng)的分離率高。 2. 直接鏡檢 革蘭陰性桿菌。直接用膠乳凝集試驗(yàn) 檢測(cè)病人標(biāo)本或增菌培養(yǎng)物沙門菌抗 原,可快速診斷。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)41四、微生物檢驗(yàn)?zāi)c桿菌科知識(shí)培訓(xùn)413. 分離培養(yǎng)與鑒定 常用腸道鑒別培養(yǎng)基或選擇培養(yǎng) 基。在菌最較少時(shí),血液和骨髓液 分離培養(yǎng)用增菌肉湯。35-37孵 育,選擇透明的可疑菌落做鑒定。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)423. 分離培養(yǎng)與鑒定腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)

23、42 沙門菌的鑒定1. 用生化試驗(yàn)將可疑菌落鑒定到屬和種, 基本 生化反應(yīng)特征: TSIA(雙糖鐵) 產(chǎn)堿產(chǎn)酸 或產(chǎn)堿產(chǎn)酸產(chǎn)氣,H2S陽性、CIT(枸櫞酸 鹽) 陽或陰性、URE (脲酶)陰性、IND(吲哚) 陰性、MOT(動(dòng)力)陽性、VP陰性、ORN(鳥 氨酸)陽性。凡臨床分離菌乳糖、吲哚陽性, 或脲酶陽性者,均不考慮為沙門菌。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)43 沙門菌的鑒定腸2. 血清學(xué)分型: 用抗血清對(duì)所分離菌種的O抗原、Vi 抗原、第一、二相H抗原進(jìn)行凝集試 驗(yàn)。先用多價(jià)O抗血清(A-F)進(jìn)行分群 ,95以上都屬A-F群,對(duì)早期診斷 有重要意義。再分別用單價(jià)因子血清 定群,用H因子血清檢查H抗原。

24、綜合O、H及Vi因子血清的檢查結(jié) 果進(jìn)行判斷。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)442. 血清學(xué)分型:腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)44 (五) 抗體檢測(cè)(肥達(dá)反應(yīng)) 用已知傷寒、副傷寒沙門菌的O、H 抗原,檢測(cè)受檢血清中有無相應(yīng)的抗體 的半定量試管內(nèi)凝集試驗(yàn),稱為肥達(dá)反 應(yīng)。能輔助診斷傷寒,甲、乙、丙型副 傷寒沙門菌引起的腸熱癥。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)45 (五) 抗體檢測(cè)(肥達(dá)反應(yīng))腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)451. 方法 將受檢血清用生理鹽水作倍比稀 釋,分別加入等量傷寒沙門菌O、H 抗原及副傷寒沙門菌甲、乙、丙的 H抗原,進(jìn)行試管內(nèi)凝集試驗(yàn),凡 血清最高稀釋度出現(xiàn)明顯凝集者為 凝集效價(jià)。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)461. 方法 腸桿菌科知識(shí)

25、培訓(xùn)462. 結(jié)果解釋 (1) 正常值:各地區(qū)有所不同,O 80, H1:160,A、B,Cl:80; 或第二份血清效價(jià)增高4倍以上具有 診斷意義。 (2) O抗原的抗體為IgM,出現(xiàn)較早,H 抗體為IgG,出現(xiàn)較遲。O高H不高, 可能為疾病早期;周后復(fù)查如升高 為腸熱癥。H高O不高,可能以往 患過傷寒或接受過預(yù)防接種,為回憶 反應(yīng)。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)472. 結(jié)果解釋腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)47、分 類 將志賀菌屬分為4個(gè)血清群(種):A群為 痢疾志賀菌;B群為福氏志賀菌;C群為鮑 特志賀菌;D群為宋內(nèi)志賀菌。 最近將生化性狀相近的A、B,C群歸為 一群,統(tǒng)稱志賀菌A、B、C血清群;而將 生化特征與之

26、相異,鳥氨酸脫羧酶和-半 乳糖苷酶均陽性的宋內(nèi)志賀菌單列出來。 DNA G+Cmol為4953。 第四節(jié) 志賀菌屬腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)48、分 類第四節(jié) 志賀菌屬腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)48二、臨床意義(一)致病因素 1. 侵襲力 因菌毛的作用,細(xì)菌粘附在腸粘膜表面; 2. 內(nèi)毒素 造成粘膜細(xì)胞死亡發(fā)炎,并形成毛細(xì)血 管血栓,導(dǎo)致壞死脫落和潰瘍,臨床出現(xiàn) 膿血便;并引起全身中毒癥狀,導(dǎo)致發(fā)熱 、意識(shí)障礙,甚至中毒性休克; 3. 外毒素 A群志賀菌和型產(chǎn)生志賀毒素,有 細(xì)胞毒、腸毒素和神經(jīng)毒等生物學(xué)活性。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)49二、臨床意義腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)49(二) 所致疾病 有以下3種臨床類型: 1急性細(xì)菌

27、性痢疾 表現(xiàn)為腹痛發(fā)熱,有里急后重現(xiàn)象, 便中含有粘液和血。很少進(jìn)血流,中毒 性菌痢見于小兒,常無消化道癥狀而表 現(xiàn)為全身中毒癥狀,往往造成死亡。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)50(二) 所致疾病腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)502. 慢性細(xì)菌性痢疾 菌痢治療不徹底,造成反復(fù)發(fā)作 遷延不愈,超過2個(gè)月視為慢性菌 ??;3. 攜帶者 有恢復(fù)期帶菌、慢性帶菌和健康 帶菌等3種,是主要的傳染源。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)512. 慢性細(xì)菌性痢疾 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)51三、微生物特性 1. G-桿菌,菌體短小,無芽胞莢膜和鞭 毛,有菌毛 2. 抗原成分 有群和型特異性兩種O抗原,是分類依 據(jù)根據(jù)生化反應(yīng)和O抗原的不同,分為 A 、B、C、D

28、4個(gè)血清群和40余個(gè)血清型。 O抗原耐熱,加熱100、60min不被破壞。K抗原能阻斷O凝集。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)52三、微生物特性腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)523. 變異性 有S-R變異、耐藥性變異。多重耐藥性 問題己成為嚴(yán)重的醫(yī)學(xué)問題。4. 培養(yǎng)特性 兼性厭氧,生長溫度37,pH7.27.4 。營養(yǎng)要求不高,能在普通培養(yǎng)基上生 長。在鑒別培養(yǎng)基上形成無色半透明的 菌落。5. 抵抗力 比其他腸道細(xì)菌抵抗力低,在1石炭酸 中15-30min和加熱6010min即被殺死腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)533. 變異性 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)53四、微生物檢驗(yàn) 1. 標(biāo)本采集 在治療前采集粘液膿血便作床邊 接種,不能及時(shí)接種可置甘

29、油保存 液送檢; 2. 直接鏡檢 G-桿菌。膠乳凝集試驗(yàn)和免疫熒 光技術(shù)檢測(cè)抗原。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)54四、微生物檢驗(yàn)?zāi)c桿菌科知識(shí)培訓(xùn)543. 核酸檢測(cè) 志賀菌攜帶一個(gè)非結(jié)合型大質(zhì)粒, 能 編碼與侵襲性相關(guān)的外膜蛋白, 是產(chǎn) 生痢疾綜合征的重要致病因子, 從中 2.5kb侵襲相關(guān)區(qū)段中設(shè)計(jì)出ipaH引 物, 可用于檢測(cè)志賀菌序列。4. 分離培養(yǎng) 用鑒別培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基,取可疑 菌落鑒定。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)553. 核酸檢測(cè) 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)55 志賀菌鑒定(1) 1.生化試驗(yàn) 鑒定到屬和種 基本生化反應(yīng)特征: TSIA(雙糖鐵)產(chǎn)堿產(chǎn)酸、不產(chǎn)氣, CIT(枸櫞酸鹽)陰性, URE(脲酶)陰性,

30、 MOT(動(dòng)力) 陰性, YP陰性。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)56 志賀菌鑒定(1) 腸桿菌科 志賀菌鑒定(2)2. 血清學(xué)鑒定 先用志賀菌屬4種多價(jià) (A群1,2型、B群 16型、C群l6型及D群)作玻片凝集試 驗(yàn),凝集者再進(jìn)一步作定型。 A群:即痢疾志賀菌,為一群甘露醇陰性 的菌株,共有10個(gè)血清型(1)0),其O抗 原從1 X共10種均為獨(dú)立的血清理,腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)57 志賀菌鑒定(2)腸桿菌 群:即福氏志賀菌,有6個(gè)血清型和X、Y 2個(gè)變型。6型菌株缺少共同的群抗原,故多價(jià)血清中應(yīng)包含6型因子血清,否則將會(huì)造成漏檢。 C群:即鮑特志賀菌。本菌共有15個(gè)血清群, D群:即宋內(nèi)志賀菌:僅有個(gè)血清

31、型,但有光滑型(S)和粗糙型(R)兩種茵落; R型菌 不被S型血清所凝集;因此診斷血清應(yīng)含有S及R兩種因子血清腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)58 群:即福氏志賀菌,有6個(gè)血清型腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)58 包括3種人類致病菌:鼠疫耶爾森菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌和假結(jié)核耶爾森菌。還可從臨床標(biāo)本中分離到弗氏、中間、克氏、輿氏、伯氏、莫氏、羅氏和魯氏等8種耶爾森菌。第五節(jié) 耶爾森菌屬腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)59 包括3種人類致病菌:鼠疫耶爾森第五節(jié) 耶爾森菌一、鼠疫耶爾森菌 (一) 臨床意義 是烈性自然疫源性傳染病鼠疫的 病原菌。 1致病因素 有內(nèi)毒素和鼠毒素兩種毒素。鼠 毒素與毒力有關(guān),作用于心血管系 統(tǒng),引起不可逆性休克與死亡

32、,該 毒素存在于細(xì)胞內(nèi),菌細(xì)胞裂解或 白溶后釋放。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)60一、鼠疫耶爾森菌腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)602臨床類型 1) 腺鼠疫:局部淋巴結(jié)(多為腹股溝淋 巴結(jié))的腫脹、壞死和膿腫; 2) 敗血型鼠疫:由細(xì)菌侵入血流大量 繁殖所致??稍?-3天內(nèi)死亡; 3) 肺鼠疫:由腺鼠疫、敗血型鼠疫繼 發(fā)而成,可通過呼吸道在人與人之 間直接傳播,引起原發(fā)性肺鼠疫, 死亡率極高。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)612臨床類型 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)61(二) 微生物特性 1. G-桿狀,0.51.0m,兩極濃染, 有莢膜,無芽胞和鞭毛。 2. 抗原構(gòu)造構(gòu)造復(fù)雜,重要的有(1)F1 抗原:是封套抗原。特異性高,抗原 性強(qiáng),產(chǎn)生的

33、抗體有良好的保護(hù)作 用; (2)VW抗原:是菌體的表面 抗原,與本菌的毒力和侵襲力有關(guān)。 (3)T抗原:為為鼠毒素,有良好的抗 原性和免疫原性,可脫毒成類毒素 制成抗毒素。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)62(二) 微生物特性腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)623. 兼性厭氧,生長溫度為2730,最 適pH為6.97.2, 血瓊脂培養(yǎng)48h后形成 粗糙菌落,肉湯培養(yǎng)48h后形成菌膜,稍 加搖動(dòng)后的菌膜鐘乳石狀下垂;本菌動(dòng) 力為陰性;IMViC試驗(yàn)反應(yīng)模式為+ 、苯丙氨酸脫氨酶、脲酶、硫化氫 均為陰性;不液化明膠,當(dāng)穿刺培養(yǎng)時(shí) 菌沿穿刺線縱樹狀發(fā)育;分解葡萄糖產(chǎn) 酸不產(chǎn)氣,對(duì)多數(shù)糖不分解:腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)633. 兼性厭氧,生

34、長溫度為2730,最腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)(三) 微生物檢驗(yàn) 鼠疫耶爾森菌傳染性極強(qiáng),故應(yīng)嚴(yán)格遵守操 作規(guī)程,一旦疑為本菌,應(yīng)立即向省市疾病控 制中心等部門報(bào)告,并將菌種送檢驗(yàn)中心或?qū)?業(yè)實(shí)驗(yàn)室作進(jìn)一步的鑒定。鼠疫的確診主要依 賴病原學(xué)診斷,須經(jīng)全面生化反應(yīng)、噬菌體裂 解試驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)才得以作出最終鑒定。診斷 確立后除對(duì)患者進(jìn)行隔離治療外,對(duì)疫區(qū)及有 關(guān)人員須采取有效的預(yù)防隔離措施,防止疫情 擴(kuò)散。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)64(三) 微生物檢驗(yàn)?zāi)c桿菌科知識(shí)培訓(xùn)64二、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌 天然寄居在多種動(dòng)物體內(nèi),如豬、鼠 、家畜和兔等。通過污染食物(牛奶、豬 肉等)和水,經(jīng)糞口途徑或因接觸染疫 動(dòng)物而感染。

35、本菌具有侵襲性及腸毒素 為人獸共患病原菌,通過污染食物和水源 經(jīng)消化道傳播,或因接觸帶菌動(dòng)物而感 染。臨床表現(xiàn)以小腸、結(jié)腸炎為多見,還 可引起結(jié)節(jié)性紅斑、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎等自 身免疫性疾病。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)65二、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)65(一) 微生物特性 1G-球桿菌,偶有兩極濃染,無芽胞莢 膜,35無動(dòng)力,2225有動(dòng)力。 2根據(jù)O抗原可分為血清型,我國主要 為O9、O8、O5、O3等幾種血清型與 致病性有關(guān)。3培養(yǎng)特性 兼性厭氧, 耐低溫,在440均能生長,最適 溫度為2028。在普通瓊脂上生 長良好。不發(fā)酵乳糖,能分解葡萄糖和 蔗糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,硫化氫陰性,脲酶陽 性,VP試

36、驗(yàn)22-25陽性,35-37 陰性,鳥氨酸脫羧酶陽性。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)66(一) 微生物特性腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)66(三) 微生物檢驗(yàn)與鑒定 1. 采集糞便、食物,也取血液,尿液 等標(biāo)本。 2. 直接涂片鏡檢 G-球桿菌。 3. 冷增菌 糞便標(biāo)本可用7ml M15 Ph7.4 PBS 4增菌2-3周。 4. 耶爾森菌專用選擇培養(yǎng)基(CIN)的 分離, 培養(yǎng)48h后, 菌落為粉紅色。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)67(三) 微生物檢驗(yàn)與鑒定腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)67 生化反應(yīng)特征:TSIA(三糖鐵)產(chǎn)酸 產(chǎn)酸,不產(chǎn)氣,H2S陰性, CIT(枸櫞酸 鹽)陰性,URE(脲酶)陽性,PHE(苯丙氨 酸)陰性,OXI(氧化酶

37、)陰性,IND(吲哚) 陰性陽性,ORN(烏氨酸)陽性MOT(動(dòng) 力),V-P,-半乳糖苷酶)等結(jié)果與培養(yǎng) 溫度有關(guān)(22-25陽性,35陰性)。5. 血清定型。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)68 生化反應(yīng)特征:TSIA(三糖鐵)產(chǎn)酸腸桿菌四、假結(jié)核耶爾森菌 鼠和鳥類是天然宿主,人類感染少 見。多數(shù)病例為腸道感染,有時(shí)可引 起腸系膜淋巴結(jié)炎,癥狀類似闌尾炎。 標(biāo)本接種選擇鑒別培養(yǎng)基, 孵育24h 后為無色(乳糖陰性)的小菌落; 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)69四、假結(jié)核耶爾森菌腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)69 生化反應(yīng)特征:TSIA(三糖鐵)產(chǎn)堿產(chǎn)酸、不產(chǎn)氣,H2S陰性,CIT(枸櫞酸鹽)陰性,URE(脲酶)陽性,PHE(苯丙氨酸

38、)陰性,OXI(氧化陰性,V-P陰性,IND(吲哚)陰性,MOT(動(dòng)力)22-25陽性;35陰性;可與鼠疫耶爾森菌區(qū)別。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)70 生化反應(yīng)特征:TSIA(三糖鐵)產(chǎn)堿腸桿菌科知五、其他耶爾森菌 弗氏、中間、克氏、奧氏、伯氏 、莫氏、羅氏和魯氏耶爾森菌亦可 從腸道內(nèi)外標(biāo)本分離到,生化性狀 相似,均能在4以及在CIN上生長, 在冷凍食品中增殖,具有潛在的致 病性。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)71五、其他耶爾森菌腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)71、分 類 包括4個(gè)種:弗勞地拘櫞酸桿菌, 異型拘櫞酸桿菌, 無丙二酸鹽枸櫞酸 桿菌和無丙二酸鹽拘櫞酸桿菌生物 群1群。第六節(jié) 枸櫞酸桿菌屬腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)72、分 類第六

39、節(jié) 枸櫞酸桿菌屬腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)72二、臨床意義 為條件致病菌,與腹瀉和腸道外感 染有關(guān)。 1. 異型枸櫞酸桿菌引起新生兒腦炎、 敗血癥; 2. 弗勞地枸櫞酸桿菌引起胃腸道感 染,也可致菌血癥及許多感染; 3. 無丙二酸鹽拘櫞酸桿菌很少在腸 道外部位分離到;有時(shí)與G-無芽 胞厭氧菌(產(chǎn)黑色素類桿菌等)合 并感染。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)73二、臨床意義腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)73三、微生物特性 1. 為G-桿菌,有動(dòng)力(周身鞭毛)、無 芽孢、無莢膜。 2. 兼性厭氧,營養(yǎng)要求不高,能在普 通瓊脂上生長。在血平板形成邊緣 整齊,直徑2-4mm的不溶血菌落。 在腸道選擇培養(yǎng)基上為乳糖發(fā)酵的 菌落。 3. 弗勞地

40、枸櫞酸桿菌可產(chǎn)生硫化氫, 生化特性和抗原結(jié)構(gòu)與沙門菌屬 相似,應(yīng)注意鑒別。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)74三、微生物特性腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)74四、微生物檢驗(yàn) 1. 直接鏡檢 G-桿菌 ; 2. 分離培養(yǎng)與鑒定 取可疑菌落乳糖 發(fā)酵菌株產(chǎn)生綠色金屬光澤; SS上 菌落中央黑色,周圍透明; 3. 將可疑菌落用生化、血清學(xué)試驗(yàn)進(jìn) 步鑒定到屬和種。 符合腸桿菌科和拘櫞酸桿菌屬的基本 特性。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)75四、微生物檢驗(yàn)?zāi)c桿菌科知識(shí)培訓(xùn)75五、枸櫞酸桿菌屬鑒定 1. 屬的鑒別 生化反應(yīng)與沙門 菌屬(亞屬1和3)及愛德華菌 屬相似, 主要鑒別點(diǎn)是賴氨 酸脫羧酶陰性。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)76五、枸櫞酸桿菌屬鑒定腸桿

41、菌科知識(shí)培訓(xùn)762.種間鑒別:弗勞地枸櫞酸桿菌大部分菌株吲哚陰性,硫化氫多數(shù)陽性(80)而其他幾個(gè)菌種相反,異型拘櫞酸桿菌的生化特征為丙二酸鹽和側(cè)金盞花醇陽性,無丙二酸鹽枸椽酸桿菌及生物l群之間的區(qū)別是后者棉子糖和蜜二糖陽性。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)772.種間鑒別:弗勞地枸櫞酸桿菌大部分菌株吲哚陰性,硫化氫多數(shù)六、基本生化反應(yīng)特征 TSI(三糖鐵)產(chǎn)酸產(chǎn)酸產(chǎn)氣或產(chǎn)堿 產(chǎn)酸產(chǎn)氣,產(chǎn)生硫化氫,CIT(枸櫞 酸鹽)陽性,URE (脲酶)陰性陽性, IND(吲哚)陽性陰性,MOT(動(dòng)力)陽 性,V-P陰性,ORN(烏氨酸)陽性陰 性,ARG(精氨酸)陽性,LYS(賴氨酸) 陰性。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)78六、基

42、本生化反應(yīng)特征腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)78一、分 類 克雷伯菌屬共有7個(gè)種:肺炎克雷 伯菌、產(chǎn)酸(催娩)克雷伯菌、解鳥氨 酸克雷伯菌、植生克雷伯菌、臭鼻克 雷伯菌、鼻硬結(jié)克雷伯菌和土生克雷 伯菌。第七節(jié) 克雷伯菌屬腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)79一、分 類第七節(jié) 克雷伯菌屬腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)79二、臨床意義(1) 肺炎克雷伯菌 可引起典型的原發(fā)性肺炎;該菌在 口咽帶菌率為16,住院病人中 高達(dá)20,是酒精中毒者,糖尿病人 和慢性阻塞性肺部疾病患者并發(fā)肺部 感染的潛在危險(xiǎn)因素。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)80二、臨床意義(1)腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)80 也能引起肺外感染,包括腸炎和腦膜炎(嬰兒),泌尿道感染(兒童和成人)及菌血癥:由該

43、菌引起的免疫低下患者感染或醫(yī)院感染不斷增多,本菌對(duì)氨芐西林天然耐藥,對(duì)頭孢菌素、妥布霉素、阿米卡早和多粘菌素B等敏感,易產(chǎn)生對(duì)第三代頭孢菌素耐藥。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)81 也能引起肺外感染,包括腸炎和腦腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)8二、臨床意義(2) 本菌屬存在于人和動(dòng)物的胃腸道內(nèi), 將近半數(shù)的產(chǎn)酸克雷伯菌分離自糞便, 其次是血液:土生和植生克雷伯菌也 存在于自然界中,攜帶耐藥質(zhì)粒,能 引起多重耐藥菌感染。 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)82二、臨床意義(2)腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)82 臭鼻克雷伯菌經(jīng)常從萎縮性鼻炎和鼻粘膜的化膿性感染中分離到,亦有引起角膜潰瘍的報(bào)道,以及從血、尿和其他組織中分離出該菌的報(bào)告,致病范圍比以往所認(rèn)識(shí)

44、的更為廣泛。 鼻硬結(jié)克雷伯菌引起呼吸道粘膜、口咽部 鼻和鼻旁竇的感染,導(dǎo)致肉芽腫性病變和硬結(jié)形成 腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)83 臭鼻克雷伯菌經(jīng)常從萎縮性鼻炎和鼻腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)83三、微生物特性 1. 形態(tài)結(jié)構(gòu) G-桿菌 無鞭毛無芽胞, 有明顯的莢膜。 2. 兼性厭氧,營養(yǎng)要求不高,形成較大 、凸起灰白色的粘液菌落,易發(fā)生融 合,用接種針沾取時(shí)可挑出長絲狀細(xì) 絲。發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸在MAC培養(yǎng)基形成 紅色的菌落,紅色可擴(kuò)散至菌落周圍 的培養(yǎng)中。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)84三、微生物特性腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)843. 基本生化反應(yīng)特征: TSI(三糖鐵)產(chǎn) 酸產(chǎn)酸產(chǎn)氣或產(chǎn)酸產(chǎn)酸,CIT(枸 櫞酸鹽)陽性,URE(脲酶)陽性

45、陰性, IND (吲哚)陰性,V-P陽性,MOT(動(dòng) 力)陰性,ORN(鳥氨酸)陰性,丙二酸 鹽陽性,DNA酶陰性。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)853. 基本生化反應(yīng)特征: TSI(三糖鐵)產(chǎn)腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)1. 標(biāo)本直接鏡檢G-桿菌, 有明顯的莢 膜。2. 標(biāo)本接種在血瓊脂或腸道選樣鑒別 培養(yǎng)基,37培養(yǎng)挑選粘稠的粉紅 色易融合的可疑菌落,進(jìn)一步鑒定到 屬和種。3. 鑒定 氧化酶陰性,葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣, 動(dòng)力陰性,吲哚陰性(產(chǎn)酸克雷伯菌 和解鳥氨酸克雷伯菌陽性),脲酶陽 性。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)861. 標(biāo)本直接鏡檢G-桿菌, 有明顯的莢腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)86 克雷伯菌的鑒定1. 屬的鑒定:動(dòng)力陰性,鳥氨酸脫羧

46、 酶陰性(解鳥氨酸克雷伯菌陽性)。2. 種的鑒定:肺炎克雷伯菌吲哚陰性, 不能在5和10生長,能在41生 長。而產(chǎn)酸克雷伯菌吲哚陽性, 能在 10和4l生長,不能在5生長。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)87 克雷伯菌的鑒定腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)83. 血清學(xué)鑒定 莢膜腫脹試驗(yàn),可用特異性抗血清進(jìn)行 莢膜腫脹試驗(yàn)加以確認(rèn)。 方法是將待檢菌接種于華弗(Worfel- Ferguson)培養(yǎng)基(有利于莢膜的產(chǎn)生), 35 1824h培養(yǎng)后,取1滴培養(yǎng)物加于載玻片 上,加墨汁(或美藍(lán)液)1滴,再加抗血清1 滴,混合后加蓋玻片,置顯微鏡油鏡下觀 察,在菌體周圍出現(xiàn)較大的空白圈者判為 陽性:同時(shí)作不加抗血清的空白對(duì)照以進(jìn) 行

47、對(duì)比。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)883. 血清學(xué)鑒定腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)88腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)培訓(xùn)課件一、分 類 1. 腸桿菌屬 包括產(chǎn)氣、陰溝、日勾 維、坂崎、泰洛、河生(分2個(gè)生物 群)、中間、阿氏、致癌、溶解和 超壓腸桿菌11個(gè)種。 2. 多源菌屬 包括聚團(tuán)和彌散多源菌2 個(gè)種。 3. 哈夫尼菌屬 包括蜂房哈夫尼菌1個(gè) 種。第八節(jié) 腸桿菌屬、多源菌屬、 哈夫尼菌屬腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)90一、分 類第八節(jié) 腸桿菌屬、多源菌屬、腸桿菌科知識(shí)培二、臨床意義 腸桿菌是正常菌群,能引起條件 致病性感染。常見的是陰溝和產(chǎn)氣 腸桿菌,可引起泌尿道、呼吸道和 傷口感染,敗血癥和腦膜炎, 有很 高的死亡率。治療過程中易產(chǎn)生多

48、 重耐藥性。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)91二、臨床意義腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)91 坂崎腸桿菌能引起新生兒腦膜炎和敗血癥,死亡率高達(dá)75。日勾維腸桿菌能引起泌尿道感染。 可從血和腦脊液中分離得到泰洛腸桿菌,可從血液、尿液、糞便、傷口和呼吸道中分離得到阿氏腸桿菌。 河生腸桿菌是水中的細(xì)菌,尚無引起感染的證據(jù)。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)92 坂崎腸桿菌能引起新生兒腦膜炎和腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)92三、微生物特性 1. G-粗短桿菌,有周鞭毛無芽胞,有 些菌株有莢膜。 2. 兼性厭氧,營養(yǎng)要求不高,在普通 培養(yǎng)基上能夠生長,形成大而濕潤 的粘液狀菌落,選擇培養(yǎng)基上形成 乳糖發(fā)酵的菌落。腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)93三、微生物特性腸桿菌科知識(shí)培訓(xùn)933. 生化特性及抗原結(jié)構(gòu)(莢膜抗原)與肺 炎克雷伯菌相似,應(yīng)注意鑒別。生化 反應(yīng)特征是:TSI(三糖鐵)產(chǎn)酸/產(chǎn)酸 產(chǎn)氣或產(chǎn)酸/產(chǎn)酸,CIT(枸櫞酸鹽)陽 性,URE(脲酶)和IND(吲哚)陽性/陰 性,MO

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