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1、康美膚燒傷膏對(duì)燙傷創(chuàng)面I L 6、I L 8表達(dá)的影響及療效觀察摘耍n的:觀察康美膚燒傷膏對(duì)燙傷創(chuàng)而的療效及IL-6、IL-8的表達(dá)情況。 方法:用免疫紐織化學(xué)方法分析在燙傷后第1、3、5、7、14天創(chuàng)面組織白細(xì)胞 介索表達(dá)水平的變化。結(jié)果:IL-6. IL-8在康美膚燒傷膏治療組和對(duì)照組于傷后 的表達(dá)均有高峰,對(duì)照組和治療組的表達(dá)高峰吋間均為傷后第3天,峰值低于對(duì) 照組。結(jié)論:康美膚燒傷膏對(duì)創(chuàng)面具有一定療效,與IL-6 IL-8的表達(dá)有關(guān)。關(guān)鍵詞康美膚燒傷膏;白細(xì)胞介素6;白細(xì)胞介素8Abstract Objective: To treat the burned wounds with Ka

2、ngmeifu Burns Ointme nt and observe the expression levels of In terleu kin in the process of wound heali ng. Methods: Imm un o histochemistry an a lysis methods were conducted to examine the expressions of Interleukin in both groupsat 1,3,5,7,14 days after scalding Results: IL6、IL-8 had one peaks re

3、spectively in both groups. The peaks in the blank control group and Kangmeifu BumsOintment treated occurred at the 3 days,and the peak value was a little lower than that in the blank control group Con elusion: Kan gmeifu BurnsOintme nt can inhibit the processof wound tije healing through enhancing I

4、L-6 IL-8 expression.of wound tiKey word Kangmeifu BurnsOintment; IL-6; IL-8康美膚燒傷膏是根據(jù)閩南名醫(yī)黃金鋼驗(yàn)方,由福建地產(chǎn)藥材九龍?zhí)?、金線蓮、 冰片等組成的中藥外用軟膏劑,臨床丄主治各種II度燒傷,對(duì)淺II度、深I(lǐng)I度和 殘余創(chuàng)面愈合均有一定的作用1。在創(chuàng)面愈合過程中,白細(xì)胞介索(IL6、IL-8) 等細(xì)胞因子參與多方面和多層次的調(diào)控2。為探討其在促進(jìn)創(chuàng)面愈合過程中的 分子機(jī)制,本文進(jìn)行了下述實(shí)驗(yàn),以探討康美膚燒傷膏對(duì)燙傷創(chuàng)而愈合中IL6、 IL-8表達(dá)的影響。1材料與方法1.1材料、試劑與動(dòng)物康美膚燒傷膏(自制);白

5、細(xì)胞介素(IL6、IL8)試劑盒(武漢博士德生物工程 有限公司);SD大鼠,體重180220 g,雌雄各半,由福建醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心 提供。合格證號(hào):9GXK (閩20040002號(hào))。1.2模型建立造模前24 h,大鼠用8%硫化鈉脫毛,面積約30 cm2,用戊巴比妥鈉(30 mg/kg)腹腔麻醉,浸入100C水浴槽孔(面積約30cm2)內(nèi)持續(xù)燙15s,造成面 積約30cm2的圓形深I(lǐng)I度創(chuàng)而,病理切片證實(shí)。將大鼠隨機(jī)分成2組,各1 5 只。治療組:傷后創(chuàng)面用康美膚燒傷膏均勻涂抹,1次/d;對(duì)照組:傷后創(chuàng)面不 用藥,用清水清洗,1次/d。分別于傷后1、3、5、7、14d取創(chuàng)面組織標(biāo)本, 用4%甲

6、醛固定,石蠟包埋,備用。1.3觀察指標(biāo)1.3.1大體及組織學(xué)觀察觀察大鼠兩組創(chuàng)面愈合吋間、分泌物、結(jié)痂及感染 情況;燙傷后不同吋間兩紐創(chuàng)面的病理紐織學(xué)觀察。1.3.2免疫組織化學(xué)染色分析創(chuàng)傷后第1、3、5、7、14天,取部分創(chuàng)基及 少許周圍正常皮膚,置液氮中保存?zhèn)溆?。?chuàng)面組織經(jīng)4%甲醛固定,常規(guī)石蠟包 埋。4 um厚連續(xù)切片,免疫組化染色按相應(yīng)試劑盒說明進(jìn)行,苯胺顯色,蘇 木精伊紅復(fù)染,脫水透明,中性樹膠封片。將IL-6和IL-8的表達(dá)情況分為三個(gè) 等級(jí):陰性(一)胞漿或胞膜未見著色;陽(yáng)性(+ )胞漿內(nèi)顆粒較細(xì),顯色高于 背景;強(qiáng)陽(yáng)性(+)胞漿內(nèi)陽(yáng)性顆粒粗而多,顯色明顯。2結(jié)果2.1大體及組織

7、學(xué)觀察大鼠燙傷后2d創(chuàng)面干燥結(jié)痂,痂皮呈淡黃色,質(zhì)地較軟,無(wú)杲常分泌物及 感染等。治療組第14天創(chuàng)面愈合率為(43.836.42)%,明顯高于對(duì)照組的(33.08 土5.34)%(P0.05)。組織學(xué)觀察可見治療組創(chuàng)面炎性滲出及水腫程度均較對(duì) 照組輕(圖1)。圖1大鼠II度燙傷皮膚創(chuàng)面組織學(xué)觀察A正常皮膚;B燙傷創(chuàng)而;C康美膚燒傷膏組創(chuàng)而組織炎癥反應(yīng)輕;D自然愈合組創(chuàng)面組織炎癥滲出明顯結(jié)果見表1。由表可知,IL6呈高水平表達(dá),兩組創(chuàng)而均于傷后第1天開始, 在中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞中表達(dá)IL-6,第3天達(dá)高峰,第5天起表達(dá)水平逐漸下 降。但用藥組的IL6峰值較對(duì)照組低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05

8、)o IL8呈高 水表1兩組創(chuàng)面不同時(shí)相點(diǎn)IL6、IL8表達(dá)的比較(只)與對(duì)照組比較,*P0.05平表達(dá),用藥組與對(duì)照組在傷后第I天,均可見淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞IL8的 表達(dá);第3天成纖維細(xì)胞中亦有明顯表達(dá),第5天起表達(dá)水平緩慢下降;但對(duì) 照組明顯低于用藥組,兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)o見表I。3討論研究表明,IL6能誘導(dǎo)B細(xì)胞的終末分化,刺激漿細(xì)胞瘤和雜交瘤的生長(zhǎng), 誘導(dǎo)肝細(xì)胞產(chǎn)牛急性期蛋白質(zhì),刺激造血干細(xì)胞,刺激T細(xì)胞和胸腺細(xì)胞3olL-8 能趨化和激活中性粒細(xì)胞,趨化嗜堿性粒細(xì)胞和釋放組胺,促進(jìn)T淋巴細(xì)胞參與 免疫應(yīng)答作用,增加內(nèi)皮細(xì)胞的通透能力4。IL6、IL8是介導(dǎo)應(yīng)激、炎

9、癥、免 疫反應(yīng)等急性期反應(yīng)重要的介質(zhì)Z-5-7,在燒傷早期和膿毒癥等兩者顯著升 高,其變化與動(dòng)物燒傷后臟器功能衰竭的發(fā)生、預(yù)后有密切關(guān)系。由本實(shí)驗(yàn)可知,在燙傷創(chuàng)面組織IL6表達(dá)中,治療組和對(duì)照組兩組創(chuàng)面均于傷后 第1天開始,在中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞中表達(dá),第3天達(dá)高峰,第5天起表達(dá) 水平逐漸下降。但治療組的創(chuàng)面愈合中,第14天創(chuàng)面愈合率明顯大于對(duì)照組的 (P0.05);同吋,IL6的表達(dá)峰值明顯低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在IL8 表達(dá)中,傷后第I天用藥組和對(duì)照組創(chuàng)面淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞中均有表達(dá),傷后 第3天在成纖維細(xì)胞中亦有人量表達(dá),而后隨著炎癥的消退表達(dá)逐漸減弱。表明 IL8作為一種促炎性

10、細(xì)胞因子,參與了創(chuàng)面修復(fù)的病理生理發(fā)展過程。傷后第3 天,用藥組IL8的表達(dá)明顯低于對(duì)照組,此現(xiàn)象一直維持到實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)束。實(shí)驗(yàn) 表明康美膚燒傷膏對(duì)創(chuàng)面愈合具有一定療效,與IL-6. IL-8的表達(dá)有關(guān),也提示 了 IL6、IL8的表達(dá)水平可作為燒燙傷治療過程創(chuàng)面愈合的指標(biāo)參考。徐偉,洪振豐,王瑞國(guó)康美膚燒傷膏制備工藝的研究J福建中醫(yī)學(xué)院學(xué) 報(bào),2007,17(1):24-25.Deveci M, Eski M, Qngezer K, et a1. Bfectsof cerium nitrate bathing and promp bum wound excision on IL6 and TN

11、F-q levels in bumed ratsJ Burns, 2000, 26(6): 41-45.王徳昌,吳秋合嚴(yán)重?zé)齻颊哐獫{IL-6. IL-8水平及其與感染的關(guān)系J 中華燒傷雜志,2000,16(3): 185-186.Baggiolini M. Chemokinesin pathology and medicineJ. J Intern Med, 2001, 250(6): 91-92.張紅金,陳德昌,湯大明,等燙傷對(duì)小鼠皮膚內(nèi)炎性細(xì)胞因子基因表達(dá)的影 響J 中國(guó)急救醫(yī)學(xué),2003,23:147-148.Xue H,McCauley RL,Zheng W,Martini DX.A

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