麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究培訓(xùn)課件

1、 冠心病的治療，要解決血氧供需平衡，不是減少心肌耗氧，就是增加冠脈供血血管新生背景與概念血管新生的研究方法促進(jìn)治療性血管新生的方法麝香保心丸促血管新生研究提 要1麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022 冠心病的治療，要解決血氧供需平衡，提 要1麝香保心治療性血管新生研究背景Folkman在1970年代早期發(fā)現(xiàn)血管新生：腫瘤生長:血管生長因子與血管新生相關(guān)1983年, Kumar 等發(fā)現(xiàn)：心肌梗塞后有“血管生長因子” 1980年代中期，確定并純化了多種與血管新生有關(guān)的多肽1994年 Jeff Isners 實驗室倡導(dǎo)將血管生成用于心血管研究中。Ellis Ungers 實驗室

2、發(fā)現(xiàn)應(yīng)用促血管生成的蛋白質(zhì)可以改善冠脈側(cè)支。Judah Folkman （1933-2008）美國國家科學(xué)院院士，于70年代提出了腫瘤新生血管學(xué)說，該理論后被心血管領(lǐng)域應(yīng)用于促血管新生研究2麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022治療性血管新生研究背景Folkman在1970年代早期發(fā)現(xiàn)血側(cè)支血管形成的種類微血管生長（Angiogenesis）血管發(fā)生（Vasculogenesis）動脈生成（Arteriogenesis） 三者的機(jī)理是不同的3麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022側(cè)支血管形成的種類微血管生長（Angiogenesis）3麝血管新生(ang

3、iogenesis) 相當(dāng)于廢墟上重建 在缺血區(qū)域現(xiàn)有血管基礎(chǔ)上通過芽生(sprouting)、分枝方式形成成熟的血管，由初級網(wǎng)狀血管結(jié)構(gòu)到復(fù)雜網(wǎng)狀血管結(jié)構(gòu)的過程。 血管內(nèi)皮細(xì)胞基底膜降解、細(xì)胞外基質(zhì)消化吸收。 內(nèi)皮細(xì)胞向血管生長刺激物方向移行和增殖。 移行的血管內(nèi)皮細(xì)胞伸展，彼此相連形成血管芽孢。 血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖使中空的管腔延長。4麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022血管新生(angiogenesis) 相當(dāng)于廢墟上重建4麝血管發(fā)生（Vasculogenesis）相當(dāng)于原材料新建血管增生來源于中胚層前體的內(nèi)皮細(xì)胞原位分化、增殖形成初級毛細(xì)血管叢。血管重構(gòu)初級毛細(xì)血管形

4、成互相連接、分支眾多、成熟的血管結(jié)構(gòu)。5麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022血管發(fā)生（Vasculogenesis）相當(dāng)于原材料新建5麝動脈生成（Arteriogenesis）相當(dāng)于休閑動脈的動員原有的側(cè)支血管正常心臟冠脈間存在的交通吻合血管，直徑20至200m ,呈薄壁樣管狀結(jié)構(gòu)，通常狀態(tài)下呈關(guān)閉狀態(tài)。開放不僅僅是一個被動過程，開放后會出現(xiàn)一系列細(xì)胞生長因子分泌、DNA合成和細(xì)胞增殖 等血管主動生長過程。6麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022動脈生成（Arteriogenesis）相當(dāng)于休閑動脈的動員治療性血管新生（Therapeutic Angi

5、ogenesis ）手術(shù)搭橋（冠脈旁路血管移植術(shù)）藥物搭橋（藥物促進(jìn)的治療性血管新生） 通過藥物、基因治療或其他手段促進(jìn)冠狀動脈的血管新生，以達(dá)到改善心肌缺血癥狀和患者預(yù)后的目的。7麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022治療性血管新生（Therapeutic Angiogene治療性血管新生的意義生長因子：FGF,VEGF血管新生細(xì)胞活化側(cè)枝循環(huán)建立心肌缺血冠脈狹窄冠脈病變減輕或防止心肌缺血壞死預(yù)防和延緩缺室壁瘤形成改善臨床癥狀和預(yù)后增加供需失衡中的供給量8麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022治療性血管新生的意義生長因子：FGF,VEGF血管新生細(xì)胞活

6、血管新生的研究方法和進(jìn)展9麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022血管新生的研究方法和進(jìn)展9麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物篩選模型雞胚絨毛尿囊膜實驗 雞胚絨毛尿囊膜(CAM)實驗 目前血管新生藥物初步研究主要采用CAM 模型。CAM 作為一項研究體內(nèi)血管效應(yīng)的技術(shù)，實驗材料易得、操作簡便、實驗周期短、結(jié)果易于觀察，尤其適用于大批量血管效應(yīng)藥物的初步篩選。10麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022篩選模型雞胚絨毛尿囊膜實驗 雞胚絨毛尿囊膜(CAM)實驗動物急性心肌缺血模型 兔、鼠選擇性冠狀動脈結(jié)扎、栓塞造成動物缺血模型，給予干預(yù)后觀察梗死周邊區(qū)血管新生情

7、況。大鼠心梗模型的制備11麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022動物急性心肌缺血模型 兔、鼠選擇性冠狀動脈結(jié)扎慢性心肌缺血模型3周后左冠造影狹窄明顯、前向血流緩慢12麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022慢性心肌缺血模型3周后左冠造影狹窄明顯、前向血流緩慢12麝香血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)：因為人臍靜脈(HUV) 在某些方面具有與動脈生物學(xué)特征相似的優(yōu)點，較之動物血管內(nèi)皮更符合人體情況。增殖：MTT比色法遷移：Transwell小室體外成血管：體外血管生成試劑盒分泌：培養(yǎng)液內(nèi)NO、VEGF人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)13麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)

8、研究10/5/2022血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)：因為人臍靜脈(HUV) 在血管生長因子/抑制因子 干預(yù)因素對組織生長因子/抑制因子的影響生長因子：VEGF、 bFGF，TGF、促血管生成素-1（Ang-1）抑制因子：血管新生抑制素、內(nèi)皮細(xì)胞抑制素、組織金屬蛋白酶抑制劑、血栓反應(yīng)素-1，2 (thrombospodin-1&2，TSP-1&2)、血小板因子-4(PF-4)等 缺血心肌中的VEGF染色顆粒14麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022血管生長因子/抑制因子 干預(yù)因素對組織生長因子/抑制因促進(jìn)治療性血管新生的方法促血管生長因子的應(yīng)用干細(xì)胞移植藥物干預(yù)15麝香保

9、心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022促進(jìn)治療性血管新生的方法促血管生長因子的應(yīng)用15麝香保心丸治外源性輸注生長因子目前，研究最廣泛的血管生成生長因子家族為VEGF和FGF。給急性心肌梗死動物冠脈內(nèi)注射bFGF，心肌梗死的面積顯著縮小，缺血或梗塞心肌內(nèi)毛細(xì)血管及小動脈數(shù)目增加。 VEGF是一種內(nèi)皮細(xì)胞特異性有絲分裂原和活體血管新生誘導(dǎo)物。VEGF因其對內(nèi)皮細(xì)胞作用的特異性而廣泛應(yīng)用于實驗性肢體及心肌缺血的研究。 16麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022外源性輸注生長因子目前，研究最廣泛的血管生成生長因子家族為V導(dǎo)入生長因子基因 近來病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染已作為一

10、種血管形成生長因子釋放的方法應(yīng)用于慢性缺血動物模型。 VEGF基因，PDGF基因 將含VEGFcDNA的真核表達(dá)載體pVS121吸附在球囊上，并定位轉(zhuǎn)移至梗塞冠狀動脈近心端。轉(zhuǎn)染VEGF基因后心肌血管密度明顯增加，有效促進(jìn)了血管新生。17麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022導(dǎo)入生長因子基因 近來病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染已作為臨床試驗結(jié)果：并不理想首次：冠脈內(nèi)和靜脈內(nèi)灌注VEGF165蛋白，在60天的運(yùn)動耐量、心肌灌注、心絞痛癥狀或功能分級等方面，治療組并未獲得顯著性益處。 FGF血管重建臨床試驗(FIRST)：一次冠脈內(nèi)灌注FGF-2，患者功能狀況和癥狀分級顯著改善，但90天后

11、運(yùn)動耐量和心肌灌注與安慰劑相比沒有差異VEGF、FGF的一系列雙盲、隨機(jī)的臨床研究并沒有成功的提出絕對清晰的治療效果證據(jù)，與獲臨床承認(rèn)仍有很大的差距。 18麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022臨床試驗結(jié)果：并不理想首次：冠脈內(nèi)和靜脈內(nèi)灌注VEGF165 骨髓干祖細(xì)胞移植成人EPC和造血干細(xì)胞發(fā)生于共同的干細(xì)胞，都來源于造血器官骨髓。 有希望促進(jìn)血管新生并改善心功能，為缺血性心臟病提供了一種新的治療選擇。用PCR法對人工血管內(nèi)側(cè)再內(nèi)皮化細(xì)胞的基因進(jìn)行分析，證實移植的骨髓細(xì)胞能參與內(nèi)皮的形成。19麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022 骨髓干祖細(xì)胞移植成人

12、EPC和造血干細(xì)胞發(fā)生于共同的干細(xì)胞胞外基質(zhì)的研究在血管新生過程中，內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管腔形成不但與促進(jìn)/拮抗血管生成因子有關(guān)，而且也受基質(zhì)降解蛋白酶和細(xì)胞間基質(zhì)的調(diào)節(jié)。胞外基質(zhì)的重建可能產(chǎn)生促或抗血管生成效應(yīng)。蛋白酶類重塑胞外基質(zhì)可以促進(jìn)細(xì)胞遷移，這是血管新生的重要條件。 胞外基質(zhì)分子和胞外基質(zhì)重塑事件在血管新生調(diào)節(jié)中扮演了一個關(guān)鍵角色。20麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022胞外基質(zhì)的研究在血管新生過程中，內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管腔形Miranda D. Grounds, et al. The Journal of Histochemistry & Cytoche

13、mistry 2002,50(5): 589610 干細(xì)胞移植21麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022Miranda D. Grounds, et al. TheNature/Vol428/3 April 2004/664-8 145例HSC移植入正?；蛘邠p傷的成年小鼠心臟的實驗研究，沒有發(fā)現(xiàn)由干細(xì)胞轉(zhuǎn)分化而來的心肌，并且干細(xì)胞移植組相對于假移植組心肌細(xì)胞數(shù)量沒有明顯的增加，為心肌修復(fù)的臨床研究提出了質(zhì)疑。 心臟功能上的改善可能是由于移植對左心室重塑的影響或者是產(chǎn)生了新生血管，而不是心肌再生。過去兩年來，開展了一些使用骨髓祖細(xì)胞進(jìn)行心臟修復(fù)臨床試驗。在目前研究中，HSC不

14、能轉(zhuǎn)化形成新的心肌，動搖了這些試驗的理論基礎(chǔ)。 造血干細(xì)胞（HSC）治療的不足22麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022Nature/Vol428/3 April 2004/664干細(xì)胞治療心肌梗死患者的臨床試驗Study n Cell Type /Treatment Mode of Delivery End Point P Janssens et al67BMMNCsIntracoronaryLV ejection fraction0.36BOOST60BMMNCsIntracoronaryLV ejection fraction0.0026ASTAMI100BMMNCs

15、IntracoronaryLV ejection fraction0.05*REPAIR-AMI204BMMNCsIntracoronaryLV ejection fraction0.021Zohlnhoefer et al114G-CSFSubcutaneousInfarct size0.79STEMMI62G-CSFSubcutaneousLV systolic wall thickening1.00BMMNCs 骨髓單核細(xì)胞; G-CSF, 粒細(xì)胞集落刺激因子; *LV ejection fraction was higher in the control group.Circulati

16、on. 2006;114:353-358. 23麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022干細(xì)胞治療心肌梗死患者的臨床試驗Study n CIs stem cell therapy for cardiac repair ready for patients? 24麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022Is stem cell therapy for cardi 作為一項新生事物，干細(xì)胞移植可能是治療缺血性心臟病令人激動的新選擇。尤其是那些有大面積心肌梗死患者，因其預(yù)后不佳，更有可能從細(xì)胞移植治療中獲益。但迄今為止，臨床試驗結(jié)果相互矛盾，仍然處于實驗性治療階段

17、。25麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022 作為一項新生事物，干細(xì)胞移植可能是治療缺血促進(jìn)血管新生 中醫(yī)藥如何？ 中醫(yī)藥益氣活血、祛瘀生新等許多治療法則以及臨床的有效性，也為中醫(yī)藥血管新生的研究提供了理論和臨床依據(jù)。26麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022促進(jìn)血管新生 中醫(yī)藥如何？ 中醫(yī)藥益氣活血、祛瘀生血管新生研究的中醫(yī)藥理論基礎(chǔ)“活血生肌”、“袪瘀生新”創(chuàng)傷愈合不良、潰瘍不愈、心肌缺血側(cè)枝代償不足等。戴瑞鴻，冠心病心肌缺血的治療性血管生成與中醫(yī)藥中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2000,20(3).-163-16427麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研

18、究10/5/2022血管新生研究的中醫(yī)藥理論基礎(chǔ)“活血生肌”、“袪瘀生新”創(chuàng)傷愈麝香保心丸的血管新生研究28麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022麝香保心丸的血管新生研究28麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生中西醫(yī)結(jié)合治療冠心病的特色“血”“脈”兩條途徑，整體治療，體現(xiàn)中醫(yī)藥特色活血化瘀復(fù)方丹參滴丸丹參片益氣活血芳香溫通麝香保心丸血脈降低血粘度抗血小板抗凝溶栓血管擴(kuò)張 內(nèi)皮保護(hù)血管新生中西醫(yī)結(jié)合治療心腦血管疾病29麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022中西醫(yī)結(jié)合治療冠心病的特色“血”“脈”兩條途徑，整體治療，體30麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究1

19、0/5/202230麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/3/202起效時間： 麝香保心丸和硝酸甘油相似，最快30秒，一般在35分鐘之內(nèi)心電圖有效率： 麝香保心丸和硝酸甘油無顯著性差異副反應(yīng)： 麝香保心丸的副反應(yīng)明顯低于硝酸甘油。麝香保心丸與硝酸酯類療效對比31麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022起效時間：麝香保心丸與硝酸酯類療效對比31麝香保心丸治療性血保護(hù)血管內(nèi)皮，抑制動脈粥樣硬化麝香保心丸能提高內(nèi)源性一氧化氮合酶(eNOS)基因的表達(dá)，增強(qiáng)血管一氧化氮合酶(NOS)活力，以及抗炎、減少脂質(zhì)浸潤等途徑保護(hù)血管內(nèi)皮臨床可見長期治療后血管內(nèi)皮功能改善，動脈粥樣硬化

20、程度減輕 與緩釋單硝酸異山梨酯（DRIM）比較反應(yīng)性充血肱動脈內(nèi)徑明顯增加麝香保心丸組頸動脈IMT顯著變薄32麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022保護(hù)血管內(nèi)皮，抑制動脈粥樣硬化麝香保心丸能提高內(nèi)源性一氧化氮麝香保心丸的促血管新生作用對血管生長因子的影響雞胚絨毛尿囊膜（CAM）試驗大鼠缺血動物模型臨床研究（心肌核素顯像)對腫瘤及斑塊血管新生的影響對骨髓干細(xì)胞的動員對生長因子受體的影響（正在進(jìn)行）尸檢回顧性分析（正在進(jìn)行）33麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022麝香保心丸的促血管新生作用對血管生長因子的影響33麝香保心丸體外細(xì)胞學(xué)實驗麝香保心丸促進(jìn)培養(yǎng)的

21、牛腎上腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和形成管腔結(jié)構(gòu)（ 生理鹽水對照組細(xì)胞 ） （麝香保心丸組細(xì)胞） 麝香保心丸促進(jìn)血管新生作用的證據(jù)汪珊珊，李勇等。麝香保心丸對雞胚絨毛尿囊膜及培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞的促血管生成作用，中國中西醫(yī)結(jié)合雜志2003,23(2) 34麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022體外細(xì)胞學(xué)實驗（ 生理鹽水對照組細(xì)胞 ） （麝香保心丸組細(xì)胞麝香保心丸的促血管新生作用的證據(jù)體外組織學(xué)實驗：麝香保心丸能促進(jìn)雞胚絨毛尿囊膜的血管生成作用（加有生理鹽水的CAM）（加有麝香保心丸的CAM）汪珊珊，李勇等。麝香保心丸對雞胚絨毛尿囊膜及培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞的促血管生成作用，中國中西醫(yī)結(jié)合

22、雜志2003,23(2) 35麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022麝香保心丸的促血管新生作用的證據(jù)體外組織學(xué)實驗：麝香保心丸能增加心肌梗塞大鼠心肌VEGF含量（免疫組化染色）資料來源:麝香保心丸對實驗性心肌梗塞大鼠心臟的促血管生成作用中成藥 2002；24（6）：446-449（生理鹽水組） （麝香保心丸組）促進(jìn)缺血心肌血管生長因子表達(dá)36麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022增加心肌梗塞大鼠心肌VEGF含量（免疫組化染色）資料來源:麝1、2. 小、大劑量麝香保心丸 3. 貝復(fù)濟(jì)與肝素聯(lián)用組 4. 模型組 5. 假手術(shù)組 6 .正常組 7 .卡托普利組

23、在體研究：大鼠心肌梗死模型梗死邊緣區(qū) 1 2 3 4 5 6 7麝小 麝大 bFGF M F N K37麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/20221、2. 小、大劑量麝香保心丸 3. 貝復(fù)濟(jì)與肝素聯(lián)用麝香保心丸對內(nèi)皮祖細(xì)胞的影響A為LSCM激發(fā)綠色為結(jié)合FITC-UEA-I的EPCs；B為LSCM激發(fā)紅色的為攝取DiI-Ac-LDL的EPCs；C為LSCM激發(fā)呈現(xiàn)橙色為FITC-UEA-I和攝取DiI-Ac-LDL的EPCs（C為正在鑒定的分化祖細(xì)胞）梁春、吳宗貴等，中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，June2009,Vol.29,No.638麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5

24、/2022麝香保心丸對內(nèi)皮祖細(xì)胞的影響A為LSCM激發(fā)綠色為結(jié)合FIT麝香保心丸對分化祖細(xì)胞的影響與對照組比較，麝香保心丸1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml組可以增加EPCs增殖、遷移、粘附、及體外血管形成能力。39麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022麝香保心丸對分化祖細(xì)胞的影響與對照組比較，麝香保心丸1mg/中藥促血管新生作用的可能機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)麝香保心丸培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞釋放 VEGF 和 bFGF 增加，VEGF與bFGF 的 mRNA表達(dá)增高。麝香保心丸使血管生長抑制因子的減少。麝香保心丸提高內(nèi)皮祖細(xì)胞（EPCs）遷徙、粘附和血管形成能力。40麝香保心丸治

25、療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022中藥促血管新生作用的可能機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)40麝香保心丸治療性血管雙向調(diào)節(jié) 對斑塊血管新生的抑制在同一動物雙模型（同時有心肌缺血和動脈粥樣斑塊）發(fā)現(xiàn)：麝香保心丸促進(jìn)缺血心肌血管新生麝香保心丸抑制斑塊血管新生41麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022雙向調(diào)節(jié) 對斑塊血管新生的抑制在同一動對斑塊內(nèi)新生血管的影響 對照組斑塊 麝香保心丸組斑塊 CD34 免疫組化染色 CD34 免疫組化染色 250倍 CD34抗原是跨膜細(xì)胞糖蛋白，主要表達(dá)于人或鼠的造血干細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞中，有學(xué)者認(rèn)為CD34為細(xì)胞間黏附及信號傳導(dǎo)提供了條件，促使內(nèi)皮細(xì)胞分

26、裂 、新生的細(xì)胞在CD34的參與下向血管外遷移黏附，構(gòu)建成新生血管的骨架。42麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022對斑塊內(nèi)新生血管的影響CD34抗原是跨膜細(xì)胞糖蛋白，主斑塊內(nèi)MMP-3陽性面積比較，能抑制基質(zhì)降解 對照組斑塊 麝香保心丸組斑塊 MMP-3 免疫組化染色 MMP-3 免疫組化染色 放大250倍 斑塊內(nèi)新生血管情況43麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022斑塊內(nèi)MMP-3陽性面積比較，能抑制基質(zhì)降解斑塊內(nèi)新生斑塊內(nèi)的血管新生研究證實：具有促進(jìn)治療性血管新生作用的中成藥麝香保心丸，能特異性地抑制斑塊內(nèi)的血管生長，改變斑塊內(nèi)的基質(zhì)變化，抑制基質(zhì)

27、降解，從而有利于斑塊的穩(wěn)定。中國中西醫(yī)結(jié)合雜志 2008.05.28; 44麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022斑塊內(nèi)的血管新生研究證實：具有促進(jìn)治療性血管新生作用的中成藥麝香保心丸對裸鼠人LoVo結(jié)腸癌的影響麝香保心丸對腫瘤組織血管生成因子（VFGF、bFGF）的影響組別 n 肝轉(zhuǎn)移數(shù) 瘤重（g） 抑瘤率（）模型組 10 10 0.670.10 0小劑量組 10 10 0.590.08 11.4中劑量組 10 9 0.510.11* 23.6大劑量組 10 9 0.490.08* 27.1麝香保心丸對腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的影響藥學(xué)實踐雜志 2007 ， 25（5）：29545

28、麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022麝香保心丸對裸鼠人LoVo結(jié)腸癌的影響麝香保心丸對腫瘤組織血結(jié) 論臨床常用的冠心病治療藥物中，麝香保心丸等有明確的促血管新生作用。中藥促血管新生的機(jī)理復(fù)雜，可能涉及血管生長因子及其受體，以及血管抑制因子等多方面。對同時伴有的心梗范圍受限、心室重構(gòu)的改善和心功能的改善，血管新生可能是參予機(jī)理之一。雙向調(diào)節(jié)：抑制斑塊內(nèi)血管新生和基質(zhì)降解，穩(wěn)定斑塊；降低腫瘤微血管密度，減少腫瘤生長和轉(zhuǎn)移。46麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022結(jié) 論臨床常用的冠心病治療藥物中，麝香保心丸等有明確的促血麝香保心丸的血管新生研究2002年，

29、發(fā)現(xiàn)麝香保心丸對心肌梗塞大鼠的促血管新生2003年，發(fā)現(xiàn)麝香保心丸促進(jìn)CAM血管新生及血管內(nèi)皮細(xì)胞管腔結(jié)構(gòu)形成2004年，麝香保心丸促進(jìn)血管新生研究結(jié)果發(fā)表于美國life science雜志2006年，麝香保心丸促進(jìn)血管新生系列研究榮獲中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會科學(xué)技術(shù)獎2007年，發(fā)現(xiàn)麝香保心丸的雙向血管新生調(diào)節(jié)2008年，發(fā)現(xiàn)麝香保心丸對內(nèi)皮祖細(xì)胞的動員作用47麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022麝香保心丸的血管新生研究2002年，發(fā)現(xiàn)麝香保心丸對心肌梗塞治療各種類型的心絞痛Meta分析（25項）48麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022治療各種類型的心絞痛M

30、eta分析（25項）48麝香保心丸麝香保心丸治療后增加心肌灌注 總有效率 70.6%羅海明，戴瑞鴻等。麝香保心丸改善心肌缺血作用的核心臟影像學(xué)研究，中國中西醫(yī)結(jié)合雜志1996,16(6):325-5 心肌影像學(xué)實驗SPECT49麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022麝香保心丸治療后增加心肌灌注 總有效率 70.6%羅海明，10例病人（CAG或OMI），麝香保心丸長期治療后對心肌灌注/代謝的改善服藥前PET心肌掃描 6月時PET心肌掃描PET評價麝香保心丸對冠心病心肌血流的影響50麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/202210例病人（CAG或OMI），麝香保心

31、丸長期治療后對心肌灌注心肌影像學(xué)實驗PET10例受試者共取得180個心肌節(jié)段作靜息負(fù)荷和麝香保心丸治療前后自身對照分析 相對冠脈血流儲備分?jǐn)?shù)治療前后無顯著差異，但治療后似有可提高相對儲備分?jǐn)?shù)的趨勢。(P0.077 )相對血流密度分?jǐn)?shù)相對血流密度分?jǐn)?shù)51麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022心肌影像學(xué)實驗PET10例受試者共取得180個心肌節(jié)段作臨床研究表11強(qiáng)化治療組與常規(guī)治療組給藥方案組別藥物用法與用量隨訪中位時間強(qiáng)化治療組（抗血小板，調(diào)脂，抗缺血等）麝香保心丸2丸次，3次日；胸痛時12丸含服27月常規(guī)治療組（抗血小板，調(diào)脂，抗缺血等）胸痛時12丸含服27月每丸22.5m

32、g，每日含服3次。兩組在治療期間均不得使用其他抗缺血中藥。藥物由試驗藥品由上海和黃藥業(yè)提供，生產(chǎn)批號G040603G060603。上海市科委基金：中藥現(xiàn)代化專項課題04DZ19856資助52麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022臨床研究表11強(qiáng)化治療組與常規(guī)治療組給藥方案組別藥物用法與 治療穩(wěn)定性心絞痛減少危險事件主要臨床事件：心梗、心絞痛住院或急診、卒中、心衰、心血管原因住院或急診*53麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022 治療穩(wěn)定性心絞痛減少危險事件主要臨床事件：心梗、心絞治療穩(wěn)定性心絞痛減少危險事件總臨床事件：主要臨床事件其他原因住院或急診*54

33、麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022治療穩(wěn)定性心絞痛減少危險事件總臨床事件：主要臨床事件其長期服用治療穩(wěn)定性心絞痛*55麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022長期服用治療穩(wěn)定性心絞痛*55麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)麝香保心丸合并用藥情況 入組時6個月隨訪研究結(jié)束時對照組麝香保心丸組對照組麝香保心丸組對照組麝香保心丸組抗血小板類777674757876ACEI/ARB類555250494645受體阻斷劑403938363538他汀類464842433335鈣離子拮抗劑373933343031硝酸酯類29 30*24 17*2721利尿劑566697洋

34、地黃類323264200名冠心病穩(wěn)定性心絞痛患者：硝酸酯類藥物在治療6個月時明顯減少。 56麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022麝香保心丸合并用藥情況 入組時6個月隨訪研究結(jié)束時對照組麝麝香保心丸治療性血管新生作用小結(jié) 麝香保心丸具有明確的促血管新生的作用，且臨床應(yīng)用能取得良好的收益 促進(jìn)治療性血管新生通過對機(jī)體自身的生長因子及受體調(diào)節(jié)，促進(jìn)缺血心肌血管新生治療性血管新生的雙向調(diào)節(jié)機(jī)制麝香保心丸促進(jìn)缺血心肌血管新生的同時，通過保護(hù)內(nèi)皮、抑制炎癥、改善缺氧等因素，抑制斑塊內(nèi)血管新生對冠心病的遠(yuǎn)期預(yù)后有改善作用，合并應(yīng)用化學(xué)藥物安全57麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究

35、10/5/2022麝香保心丸治療性血管新生作用小結(jié) 麝香保心丸具有明確的促血麝香保心丸的系統(tǒng)生物學(xué)研究58麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022麝香保心丸的系統(tǒng)生物學(xué)研究58麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)系統(tǒng)生物學(xué)破解中藥黑匣需要知道中藥復(fù)方的物質(zhì)組成；這些物質(zhì)組成在藥物中是否穩(wěn)定可控；進(jìn)入人體的代謝情況如何；進(jìn)入人體的多種物質(zhì)成分在機(jī)體中發(fā)揮什么樣的生物效應(yīng)。對疾病的轉(zhuǎn)歸有何影響中藥復(fù)方“理論上”要解決的問題 系統(tǒng)研究中藥復(fù)方的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、配伍規(guī)律、廣泛的藥理及其作用機(jī)理，為打破長久以來困擾中醫(yī)藥研究的“黑匣”問題提供了契機(jī)。59麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究

36、10/5/2022系統(tǒng)生物學(xué)破解中藥黑匣需要知道中藥復(fù)方的物質(zhì)組成；中藥復(fù)方“ 化學(xué)物質(zhì)組學(xué)明確了28個藥物入血成分 代謝組學(xué)麝香保心丸調(diào)節(jié)心梗時炎癥反應(yīng)、能量代謝、心肌肥大的代謝過程麝香保心丸對心梗相關(guān)功能基因/差異基因的影響 基因組學(xué)血管新生關(guān)鍵促進(jìn)因子/抑制因子研究 蛋白組學(xué)冠心病治療相關(guān)受體調(diào)控研究麝香保心丸增效減毒機(jī)理研究測定了蟾酥等藥物組分的體內(nèi)代謝中藥干預(yù)系統(tǒng)機(jī)體應(yīng)答系統(tǒng)麝香保心丸系統(tǒng)生物學(xué)研究 專項名稱： “重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項 麝香保心丸現(xiàn)代科學(xué)研究與技術(shù)創(chuàng)新 申報專題編號： 2008ZX09202 60麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022 化學(xué)物

37、質(zhì)組學(xué)明確了28個藥物 代謝組學(xué)麝香保心丸調(diào)分離并鑒定95個化合物現(xiàn)代分離技術(shù)與LC-MS快速分離鑒定鑒定入血成分30個血清藥物化學(xué)化學(xué)物質(zhì)組學(xué)研究Chromatography：2010,11(4):417-430Biomedical Chromatography：2011, 7(3): 824-831復(fù)方化學(xué)成分研究體內(nèi)化學(xué)成分研究麝香保心丸化學(xué)物質(zhì)組學(xué)研究1- hydroxyl-cinobufagin nicotinamide adenine 61麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022分離并鑒定現(xiàn)代分離技術(shù)與鑒定入血成分30個血清藥物化學(xué)化學(xué)物抑制心室擴(kuò)大，心肌重構(gòu)減弱

38、危險因素內(nèi)皮保護(hù)括冠狀動脈促血管新生抑制血栓形成縮小心梗面積增強(qiáng)心肌收縮心肌損傷保護(hù)促生物利用度Ca+胞內(nèi)濃度PAF膠原蛋白TXA2 PGI2NOICAM-1 VCAM-1抗凝血酶活性心律耗氧量纖溶酶活性纖維蛋白原TFAATNF，IL血管收縮血壓升高EC 增殖胰島素活性Ca+胞內(nèi)濃度血管內(nèi)皮細(xì)胞分化VEGFBcl-2/BaxAng 心肌營養(yǎng)成分脂肪代謝NO，SOD脂質(zhì)過氧化中性粒細(xì)胞進(jìn)潤麝香麝香酮 麝香-1 甲醇提取肉桂肉桂酸桂皮醛蘇合香冰片龍腦蟾酥bufalin牛黃人參Rg1Rb1Re牛黃酸膽酸鵝去氧膽酸熊去氧膽酸麝香保心丸中的組效關(guān)系研究體現(xiàn)了君臣佐使配伍，減毒增效，整合調(diào)節(jié)特點62麝香保

39、心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022抑制心室擴(kuò)大，心肌重構(gòu)減弱危險因素內(nèi)皮保護(hù)括冠狀動脈促血管新麝香保心丸機(jī)制研究 -基因組學(xué)研究 進(jìn)一步篩選得到34個共性差異基因。其中14個基因在麝香保心丸組和心肌缺血組中呈現(xiàn)表達(dá)量相反的結(jié)果?？梢婘晗惚Ｐ耐鑼@14個基因的作用明顯（逆向表達(dá)）。這些基因主要與心肌能量代謝相關(guān)。 63麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022麝香保心丸機(jī)制研究 -麝香保心丸差異基因涉及的信號通路分析 麝香保心丸作用后的差異基因涉及能量代謝、整聯(lián)蛋白、催化活性、氧化應(yīng)激、肌動蛋白、激肽原酶激活、胰島素生長因子，而這些靶點多為心血管疾病中的重要分子

40、機(jī)制。 64麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022麝香保心丸差異基因涉及的信號通路分析 1.Tpm1基因（原肌球蛋白家族，可以阻止心臟突發(fā)死亡） 重點差異基因Real-time PCR 分析麝香保心丸組陽性藥組 模型組中，Tpm1基因表達(dá)明顯增加，麝香保心丸干預(yù)后其表達(dá)恢復(fù)正常，使Tpm1對心肌收縮的調(diào)節(jié)恢復(fù)正常，保護(hù)心臟收縮功能；結(jié)合病理形態(tài)可知麝香保心丸對心臟的恢復(fù)及保護(hù)作用更強(qiáng)。65麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/20221.Tpm1基因（原肌球蛋白家族，可以阻止心臟突發(fā)死亡） Fndc1和 Fn1基因 （纖維連接蛋白家族，與心臟組織纖維化呈正相關(guān)）

41、 麝香保心丸干預(yù)后， Fndc1基因表達(dá)顯著下調(diào)，纖維化減輕，推測麝香保心丸具有抑制缺血心肌纖維化的作用 。 麝香保心丸干預(yù)后Fn1基因表達(dá)上調(diào)至正常水平麝香保心丸對心肌缺血后纖維化過程具有抑制或逆轉(zhuǎn)的作用。Fndc1結(jié)果Fn1結(jié)果66麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022Fndc1和 Fn1基因 麝香保心丸干預(yù)后， 血液代謝組學(xué)評價-心梗后治療術(shù)后5h術(shù)后15d3-15d動態(tài)變化體內(nèi)調(diào)控途徑：a：減少類固醇生成，抑制心肌細(xì)胞的肥大，促進(jìn)心肌功能的恢復(fù) b：調(diào)控糖酵解過程，恢復(fù)能量代謝所需能量的正常供應(yīng) c：抑制花生四烯酸代謝通路，減輕心肌梗死后的炎癥反應(yīng)麝香保心丸代謝組學(xué)

42、評價67麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022 血液代謝組學(xué)麝香保心丸組模型組正常組從圖中可以看出盡管麝香保心丸組沒有回調(diào)至正常狀態(tài)，但仍然和模型組有明顯改變，并且向正常組偏移。可以看出麝香保心丸組對心肌梗死有預(yù)保護(hù)作用。麝香保心丸代謝組學(xué)評價血液代謝組學(xué)評價-心梗預(yù)保護(hù)麝香保心丸組68麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022麝香保心丸組模型組正常組從圖中可以看出盡管麝香保心丸組沒有回尿液代謝組學(xué)評價術(shù)后15d3-15d動態(tài)變化麝香保心丸對心肌梗死大鼠體內(nèi)異常代謝物的回調(diào)作用明顯Mol BioSyst：2011, 7(3): 824-831麝香保心丸代謝組學(xué)評價69麝香保心丸治療性血管新生和系統(tǒng)生物學(xué)研究10/5/2022尿液代謝組學(xué)評價術(shù)后15d3-15d動態(tài)變化麝香保心丸對心肌IF = 4.015麝香保心丸主