毒理學專題2課件

1、第二章 化學物的致突變作用第一節(jié) DNA的損傷第二節(jié) DNA的修復第三節(jié) 誘變試驗第一節(jié) DNA的損傷一、基因的結(jié)構(gòu)與功能1、DNA的結(jié)構(gòu) DNA的一級、二級、三級結(jié)構(gòu) DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu) DNA的超螺旋結(jié)構(gòu) DNA的三股螺旋結(jié)構(gòu)第一節(jié) DNA的損傷一、基因的結(jié)構(gòu)與功能 2、基因的調(diào)控 轉(zhuǎn)錄前調(diào)控 轉(zhuǎn)錄后調(diào)控 翻譯的調(diào)控 翻譯后的調(diào)控第一節(jié) DNA的損傷二、DNA的化學損傷 DNA損傷：是指在某些因素的作用下，DNA的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變，阻礙DNA的復制與轉(zhuǎn)錄。包括： 基因突變?nèi)旧w畸變DNA鏈斷裂DNA-DNA交聯(lián)和DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)第一節(jié) DNA的損傷二、DNA的化學損傷 1、基因突變 0

2、.2um 4.7106bp 自發(fā)突變和誘發(fā)突變 生物體內(nèi)正常的代謝物和環(huán)境因素的自然本底值均能引起DNA損傷，他所引起的突變?yōu)樽园l(fā)突變第一節(jié) DNA的損傷 點突變和移碼突變 同義突變、錯義突變和無義突變 同義突變：如UUA、UUG、CUU、CUC、CUA、CUG均代表亮氨酸，如UUA中的A被G置換，遺傳信息的含義未改變，這就叫同義突變二、DNA的化學損傷 1、基因突變第一節(jié) DNA的損傷 錯義突變：指堿基的突變使密碼子的堿基組成發(fā)生改變，且導致遺傳信息的含義改變，如CUA中的C被G轉(zhuǎn)換，則原代表亮氨酸的變成了頡氨酸 無義突變：指堿基的突變使代表氨基酸的密碼子變?yōu)殡逆満铣傻慕K止密碼子，如賴氨酸A

3、AG中的C被G轉(zhuǎn)換，則原代表亮氨酸的變成了頡氨酸第一節(jié) DNA的損傷二、DNA的化學損傷 2、染色體畸變 染色體數(shù)目的異常 染色體結(jié)構(gòu)的異常第一節(jié) DNA的損傷二、DNA的化學損傷 3、DNA鏈斷裂 單鏈斷裂（single strand breakage,SSB) 雙鏈斷裂（double strand breakage,DSB)第一節(jié) DNA的損傷二、DNA的化學損傷 、DNA-DNA交聯(lián)和DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián) DPC（DNA-protein crosslinks）第二節(jié) DNA的修復二、堿基切除修復 尿嘧啶或烷化的堿基-N-糖基化酶-排除異常堿基-去嘌啉或嘧啶的位點-核酸內(nèi)切酶-磷酸二酯鍵斷裂

4、-核酸外切酶-DNA修復合成三、核苷酸切除修復 核酸內(nèi)切酶-斷裂-核酸外切酶-切除損傷部位-DNA修復合成-DNA連接酶連接第二節(jié) DNA的修復四、復制后DNA修復 應急修復或SOS修復五、損傷的DNA復制六、錯配修復 5-甲基胞嘧啶殘基脫氨基形成胸腺嘧啶第三節(jié) 誘變試驗 2、成套試驗設計的原因 化學毒物的種類和結(jié)構(gòu)不同 化學毒物的致突變作用機制不同 化學毒物的致突變性有強弱之分第三節(jié) 誘變試驗 3、成套試驗的選擇原則 包括每一類型的遺傳學終點 應盡量包括多種進化程度不同的物種 體內(nèi)試驗與體外試驗結(jié)合 生殖細胞與體細胞結(jié)合第三節(jié) 誘變試驗 4、觀察方法的新進展 轉(zhuǎn)基因小鼠致突變系統(tǒng) Big Blue Mouse,Muta Mouse 微核自動化檢測技術 熒光原位雜交技術第三節(jié) 誘變試驗二、誘變試驗中的一些問題 1、陰性和陽性對照的設立 陰性對照 陽性對照第三節(jié) 誘變試驗二、誘變試驗中的一些問題 2、體外試驗的活化系統(tǒng) 哺乳動物細胞介導 肝S9 純化酶和基因工程第三節(jié) 誘變試驗 致癌物： 遺傳毒性致癌物 非遺傳毒性致癌物 遺傳毒性非致癌物 非遺傳毒性非致癌物 二、誘變試驗中的一些問題第三節(jié) 誘變試驗4、試驗結(jié)果在毒理學安全性評價中的作用致突變試驗的質(zhì)量控制： 設立陰性與陽性對照組 盲法觀察 資料的統(tǒng)計分析 結(jié)果的重現(xiàn)性二、誘變試驗中的一些問題