藥物分析 14 中藥分析課件

1、中藥及其制劑分析概論基本要求概 述中藥及其制劑分析中待測成分的提取分離與純化方法中藥及其制劑分析的一般程序基本要求一、掌握中藥及其制劑測定前的提取純化方法。二、熟悉中藥及其制劑分析的一般程序與方法。三、了解中藥及其制劑的分類。一、概 述（一）中藥及其制劑定義 1中藥：以中醫(yī)藥學(xué)理論體系的術(shù)語表述其性能、功效和使用規(guī)律，并且只有當(dāng)按中醫(yī)藥學(xué)理論指導(dǎo)其臨床應(yīng)用的傳統(tǒng)藥物，才可稱之謂中藥。 2中藥制劑（中成藥）：用中藥為原料，按中醫(yī)藥學(xué)理論譴藥、配伍和組方，以一定制備工藝和方法制成一定劑型的藥物制劑。（二）中藥及其制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 1現(xiàn)狀：中國藥典已收載中藥品種2165種，其中中藥材1155種，中藥制

2、劑1063種。中藥及其制劑的質(zhì)量控制主要包括鑒別、檢查和含量測定。 2進(jìn)展：如何確定中藥制劑質(zhì)量評價的指標(biāo)是關(guān)鍵問題。只有在天然藥物化學(xué)、藥理學(xué)、藥劑學(xué)、藥物分析以及臨床和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)等方面進(jìn)行深入的研究，探明中藥制劑的作用機(jī)理、主要成分及相互的作用關(guān)系后，才能評價其質(zhì)量的客觀指標(biāo)，制定出比較完善的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。（三）中藥制劑分析的特點(diǎn) 由于中藥制劑的組成十分復(fù)雜，因此給分析測試帶來一定困難，中藥制劑分析的樣品一般需要經(jīng)過提取、純化等預(yù)處理過程，以排除干擾組分的干擾。但過于繁瑣預(yù)處理不宜作為藥品常規(guī)檢驗(yàn)的方法。中藥制劑中有效成分的含量一般較低，因此要求方法有較高的靈敏度。 2質(zhì)量分析要點(diǎn)注射劑：為了確

3、保中藥注射劑的質(zhì)量穩(wěn)定、可控，中藥注射劑在固體中藥材品種、產(chǎn)地和采收期的前提下，需制訂中藥材、有效部位或中間體、注射劑的指紋圖譜。 HPLC 色譜指紋圖譜 GC 中藥指紋圖譜 光譜指紋圖譜 TLC 脫氧核糖核酸指紋圖譜。二、中藥及其制劑分析中待測成分的 提取分離與純化方法（一）提取方法1萃取法 2冷浸法3回流提取法4連續(xù)回流提取法：使用索氏提取器連續(xù)進(jìn)行提取， 提取效率高。5水蒸氣蒸餾法：適用于揮發(fā)性組分的提取。組分對 熱應(yīng)穩(wěn)定。 7超臨界流體萃取法1）超臨界流體：是指當(dāng)壓力和溫度物質(zhì)的臨界點(diǎn)時， 所形成的單一相態(tài)。 常用的超臨界流體 物質(zhì) 臨界溫度 臨界壓力 優(yōu)點(diǎn) （） （KPa） CO2

4、31 7390 較低的臨界溫度、惰性 、無毒、純凈、價廉 N2O 36 7290 NH3 132 11300 2）超臨界流體特點(diǎn)： 具有與液體相似的密度：具有與液體相似的較強(qiáng)的溶 解能力； 溶質(zhì)在其中擴(kuò)散系數(shù)與氣體相似：具有傳質(zhì)快，提取 時間短的優(yōu)點(diǎn)，提取完全一般僅需數(shù)十分鐘； 表面張力為零：很容易滲透到樣品的里面，帶走測定 組分； 選擇性強(qiáng)：通過改變萃取的條件，如溫度、壓力等，可以選擇性的萃取某些組分； 在通常狀態(tài)下即成為氣體：萃取后溶劑立即變?yōu)闅怏w 而逸出，容易達(dá)到濃集的目的。裝置（二）鑒別試驗(yàn)1鑒別試驗(yàn)的重要性：中藥及其制劑的鑒別可以通過確認(rèn)其中所含藥味的存在或某些特征成分的檢出而達(dá)到鑒

5、別的目的。目前部分中藥尚無含量測定項(xiàng)目，因此，鑒別就成為中藥制劑質(zhì)量控制的一個非常重要的環(huán)節(jié)。2鑒別方法 性狀鑒別 顯微鑒別：顯微化學(xué)反應(yīng)鑒別法 理化法鑒別：微量升華法 熒光與光譜鑒別法 顏色反應(yīng)及沉淀反應(yīng)鑒別法 色譜鑒別：紙色譜法 毛細(xì)管分析法 TLC、GC、HPLC顯微化學(xué)反應(yīng)鑒別法： 一般可取藥材切片或粉末，中成藥取粉末，置載玻片上，滴加各種試劑，加蓋玻片，在顯微鏡下觀察產(chǎn)生的結(jié)晶、沉淀物，以及特殊的顏色變化，作為鑒別特征。該法可以確定基礎(chǔ)品種中特殊化學(xué)成分的存在及在組織中的分布。例： 黃連：纖維素鮮黃色 左金丸 均含石細(xì)胞：不能采用 吳茱萸：腺毛例：黃連粉末+水+稀鹽酸 黃色結(jié)晶 檳榔

6、粉末+水+稀鹽酸 濾液+碘化鉍鉀渾濁顯微觀察：紅石榴球形或方形結(jié)晶振搖微熱過濾載玻片上2）TLC法薄層板：最多的是硅膠G板，也可另加0.2%0.5%的CMC作為黏合劑，可用軟鋁筆在板上做標(biāo)記；能經(jīng)受一般的化學(xué)試劑處理，如用含濃硫酸的顯色劑處理后，可將酸在水中洗去，然后烘干保存。一般通用的展開劑：無水乙醇-苯（1：4） 苯-氯仿（1：3） 丙酮-甲醇（1：1）顯色方法：紫外燈下觀察熒光斑點(diǎn) 選用顯色劑供試品溶液的制備： 一份：+鹽酸至pH3樣品 粉末 濾液 +乙醚 一份：+碳酸鈉至pH11提取液殘渣+乙醇供試品溶液粉碎水煮沸過濾回收乙醚溶解（三）雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查項(xiàng)目：水分、灰分、酸不溶性灰分、砷

7、鹽、重金屬、農(nóng)藥殘留量、浸出物、揮發(fā)油、總氮測定等。1水分檢查法 中國藥典（2000年版一部）附錄收載以下四種方法： 烘干法 甲苯法 69.3 減壓干燥法 GC法。2總灰分和酸不溶性灰分總灰分：是指藥材或制劑經(jīng)加熱熾灼灰化遺留的無機(jī)物，包括藥物本身所含無機(jī)鹽（稱為生理灰分） 、泥土、砂石等藥材外表黏附的無機(jī)雜質(zhì)。酸不溶性灰分：主要是外來雜質(zhì)，如泥土、砂石總灰分+稀鹽酸 殘渣濾紙殘渣：外來雜質(zhì)水浴過濾水洗濾紙熾灼恒重碳酸鹽生理灰分溶解，而泥砂（硅酸鹽）不溶4農(nóng)藥殘留量 農(nóng)藥的來源 常用的農(nóng)藥：有機(jī)氯類：艾氏劑、氯丹、六六六等 有機(jī)磷類：三硫磷、氯硫磷、蠅毒磷等 檢查原則：農(nóng)藥不明的樣品測定總氯量

8、、總磷量， 已知農(nóng)藥的樣品可采用GC法測定某個農(nóng)藥 的量。 總氯量的測定 樣品細(xì)粉+乙腈-水 濾液+石油醚 萃取液 （65:35） 攪拌過濾萃取濃縮氧瓶燃燒吸收液：硫氰酸銨比色法GC測定取樣 萃取農(nóng)藥 柱純化 GC測定 測定有機(jī)氯時，使用電子捕獲檢測器（ECD）； 測定有機(jī)磷時，使用火焰光度檢測器（FPD）。上法得的石油醚萃取液總磷量的測定洗脫液吸收液：磷鉬酸比色法柱層析濃縮 氧瓶燃燒掃描方式： 單波長 雙波長 測定波長選在被 測組分的最大吸 收波長， 參比波長選在組 分無吸收的位置 上，若背景有均 勻污染時，可選 擇背景光譜中與 測定波長的等吸 收處。定量方法：外標(biāo)法 若曲線經(jīng)過原點(diǎn)，可用一點(diǎn)法校正；若曲線不經(jīng)過原點(diǎn)，用二點(diǎn)法校正；必要時，可采用多點(diǎn)法校正。內(nèi)標(biāo)法 將內(nèi)標(biāo)加入供試液中，以組分與內(nèi)標(biāo)峰面積比值作為定量依據(jù)。（五）檢驗(yàn)記錄1要求：原始