金玄痔科熏洗散的抗炎鎮(zhèn)痛活性物質(zhì)篩選

1、金玄痔科熏洗散的抗炎鎮(zhèn)痛活性物質(zhì)挑選【摘要】目的闡釋金玄痔科熏洗散抗炎和鎮(zhèn)痛作用的物質(zhì)基矗方法采用蛋清致大鼠足跖腫脹實(shí)驗(yàn)及二甲苯致小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn),觀察金玄痔科熏洗散提取純化物質(zhì)的抗炎作用;并采用熱板致痛實(shí)驗(yàn)觀察其對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果金玄痔科熏洗散方中的超臨界2萃取物、皂苷與黃酮合提物和礦物藥分別對(duì)蛋清所致大鼠足跖腫脹具有消腫作用,皂苷與黃酮合提物對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的急性炎癥模型有顯著抑制作用,3種藥物組分均對(duì)熱刺激所致小鼠疼痛有明顯的鎮(zhèn)痛作用,可顯著進(jìn)步痛閾值。結(jié)論金玄痔科熏洗散有效部位群為超臨界2萃取物、皂苷與黃酮合提物和礦物藥。【關(guān)鍵詞】金玄痔科熏洗散;抗炎鎮(zhèn)痛;超臨界2萃取物;

2、皂苷與黃酮合提物;礦物藥studynativesitesfanti-inflaatryandanalgesiinjinxuanzhikexunxisanzhangen-ying,zhulu,enli,etal(hubeikeylabratryfresuresieneandheistryinhineseediine,hubeillegeft,uhan430061,hina)abstrat：bjetivetexplaintheaterialfundatinfanti-inflaatryandanalgesieffetsfjinxuanzhikexunxisan.ethdstheftsellinge

3、xperientsinratandxylene-induedearedeaexperientsinuseereadptedtbservetheanti-inflaatryeffetsftheaterialextratedandpurifiedfrjinxuanzhikexunxisan.thehtplate-induedpainexperientfrstudyingtheanalgesieffetasestablished.resultstheaterialfsuperritial2extrat,sapninsandflavnidsextratandineralsinjinxuanzhikex

4、unxisanhadainhibitingeffetnegg-induedftsellinginrat,sapninsandflavnidsextrathadadistintinhibitingeffetnxylene-induedearedeainuse.everyextrathadbviusanalgesieffetsnhtplate-induedpainandsignifiantlyinreasedthethreshldfpain.nlusintheativeingredientgrupsfjinxuanzhikexunxisanaretheaterialfsuperritial2ext

5、rat,sapninsandflavnidsextratandinerals.keyrds：jinxuanzhikexunxisan;anti-inflaatryandanalgesi;theaterialfsuperritial2extrat;thesapninsandflavnidsextrat;inerals金玄痔科熏洗散為武漢馬應(yīng)龍藥業(yè)集團(tuán)股份消費(fèi)的中藥制劑,是著名老中醫(yī)陳繼民在多年臨床經(jīng)歷根底上研制開發(fā)的新藥品種。該制劑由玄明粉、馬齒莧、金銀花、枯礬、荊芥組方制成,為淺棕黃色粉末劑,具有清熱解毒、消腫止痛、祛風(fēng)燥濕之成效。為討論該制劑的藥效物質(zhì)根底,筆者對(duì)其各化學(xué)物質(zhì)部位進(jìn)展了藥理挑

6、選研究,以期討論金玄痔科熏洗散的藥效物質(zhì)根底,為其臨床治療痔科疾患提供科學(xué)根據(jù)。1實(shí)驗(yàn)材料1.1動(dòng)物昆明種小鼠,1822g,雌性;istar大鼠,雄性,120150g,均為spf級(jí),湖北疾病預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心提供,動(dòng)物答應(yīng)證號(hào)：sxk(鄂)2022-0005。1.2藥物與儀器金玄痔科熏洗散,武漢馬應(yīng)龍藥業(yè)集團(tuán)股份消費(fèi),批號(hào)090311;空白對(duì)照藥：雙蒸水,實(shí)驗(yàn)室自制;玄明粉、馬齒莧、金銀花、枯礬、荊芥為馬應(yīng)龍藥業(yè)集團(tuán)股份提供;金玄痔科熏洗散超臨界2萃取物、大孔吸附樹脂水洗部位和大孔吸附樹脂醇洗部位(皂苷與黃酮合提物)由本實(shí)驗(yàn)室自制。分析天平bp211d,電子天平j(luò)a2022,恒溫水浴鍋。1

7、.3供試藥物的制備金玄痔科熏洗散的藥液制備：取金玄痔科熏洗散藥粉283g,參加1l吐溫80,繼參加雙蒸水至1000l,配制成相當(dāng)于0.49g原藥材/l的藥液。超臨界2萃取物的藥液制備：按金玄痔科熏洗散處方配伍比例,取植物藥金銀花、荊芥和馬齒莧10kg,采用超臨界2萃獲得超臨界2萃取物360g,取超臨界2萃取物37.4g,參加1l吐溫80,繼參加雙蒸水至1000l,配制成相當(dāng)于1.04g原藥材/l的藥液。大孔吸附樹脂純化物的藥液制備：萃取后的藥渣以60%乙醇滲漉,搜集滲漉液100l,濃縮至25l,參加d101大孔吸附樹脂柱,分別用水和70%乙醇洗脫。搜集水洗部位150l,濃縮至7.2l,取濃縮液

8、754l,參加1l吐溫80,繼參加雙蒸水至1000l,配制成相當(dāng)于1.04g原藥材/l的藥液;搜集70%醇洗部位250l,濃縮至8.6l,取濃縮液897l,參加1l吐溫80,繼參加雙蒸水至1000l,配制成相當(dāng)于1.04g原藥材/l的藥液。礦物藥液的制備：取玄明粉313g,枯礬157g,參加1l吐溫80,繼參加雙蒸水至1000l,配制成相當(dāng)0.47g原藥材/l的藥液。2統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用spss13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)展方差齊性分析,各組采用lsd檢驗(yàn),計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)以xs表示。3實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果3.1對(duì)蛋清所致大鼠足趾腫脹的影響1-2選取istar大鼠100只,按體重隨機(jī)分成10組,即空白對(duì)照組(空白組)、金

9、玄痔科熏洗散組(金玄組)、超臨界2萃取物高劑量組(萃高組)、水洗部位高劑量組(水高組)、皂苷與黃酮合提物高劑量組(合高組)、礦物藥高劑量組(礦高組)、超臨界2萃取物低劑量組(萃低組)、水洗部位低劑量組(水低組)、皂苷與黃酮合提物低劑量組(合低組)、礦物藥低劑量組(礦低組)。每組按表1所示劑量,每日于40以300l藥液熏洗30in,空白組在一樣條件下以等量的水熏洗,連續(xù)6d。實(shí)驗(yàn)當(dāng)日于每鼠右后足踝關(guān)節(jié)處用記號(hào)筆作一明晰橫線,測量大鼠足趾容積為原始足跖容積。于每鼠右后足跖皮下注射50%蛋清溶液0.05l之后立即給藥1次,分別于1、2、4、7h測量鼠足跖容積,計(jì)算足跖腫脹率足跖腫脹率(%)=(腫脹后

10、各時(shí)間點(diǎn)足容積-腫脹前足容積)/腫脹前足容積100%。結(jié)果見表1。表1對(duì)蛋清所致大鼠足趾腫脹的影響注：與空白組一樣時(shí)間點(diǎn)比擬,p0.05,p0.01(下同)3.2對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響2-3取昆明種小鼠100只,均為雌鼠,體重2022g,按體重分層隨機(jī)分成10組(同“3.1項(xiàng)分組)。每組按表2所示劑量,每日用40藥液1l涂抹右耳1次,30in后重復(fù)1次,空白組在同等條件下用等量水涂抹,連續(xù)6d。于末次給藥30in后,將二甲苯0.05l涂抹于小鼠右耳兩面,左耳不涂作為對(duì)照,15in后將小鼠脫頸椎處死,用直徑9的打孔器分別在小鼠左、右耳同一部位打下圓耳片,精細(xì)稱重,計(jì)算耳腫脹度耳腫脹度(%

11、)=(右耳重-左耳重)/左耳重100%。結(jié)果見表2。3.3對(duì)熱刺激所致小鼠疼痛的影響2-3取雌性昆明種小鼠,體重1822g,選取根底痛閾在1030s之間的小鼠120只,按體重分層隨機(jī)分成10組(同“3.1項(xiàng)分組)。每組按表3所示劑量,每日用40、30l藥液泡足30in,空白組在同等條件下用等量的水泡足,連續(xù)5d。于實(shí)驗(yàn)前日測定小鼠的根底痛閾。測量給藥后30、60、90in的小鼠痛,比擬各組間痛閾差異。結(jié)果見表3。表2對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響表3對(duì)熱板所致小鼠痛閾的影響4討論中醫(yī)理論認(rèn)為,肛腸疾患多為風(fēng)、濕、熱、瘀侵襲人體所致,痔瘡是肛腸疾病中的常見病和多發(fā)玻中藥熏洗療法是中醫(yī)學(xué)治療肛腸疾病

12、的一種獨(dú)特方法,相對(duì)于口服、外用膏栓劑等給藥途徑具有明顯優(yōu)勢,先熏后洗能使藥物直接作用于肛腸的病變部位,令患處腠理舒暢、氣血流通。金玄痔科熏洗散方中君藥玄明粉清熱消腫,臣藥馬齒莧和金銀花清熱解毒、涼血消腫,佐藥枯礬和荊芥收濕斂瘡、止血化腐、祛風(fēng)勝濕。諸藥合用,共奏清熱解毒、消腫止痛、祛風(fēng)燥濕之成效。為闡釋金玄痔科熏洗散抗炎鎮(zhèn)痛的藥效物質(zhì)根底,筆者采用熱板法疼痛模型和蛋清致大鼠足跖腫脹、二甲苯致小鼠耳廓腫脹等急性炎癥模型,將方中植物藥視為整體,對(duì)其不同提取純化物質(zhì)部位及礦物藥進(jìn)展挑選研究,并與金玄痔科熏洗散進(jìn)展比擬。研究結(jié)果說明,金玄痔科熏洗散對(duì)蛋清所致大鼠足跖腫脹、二甲苯所致小鼠耳廓腫脹等急性炎癥模型均有明顯的抑制作用,對(duì)熱刺激所致小鼠疼痛有明顯的鎮(zhèn)痛作用。綜合比擬,金玄痔科熏洗散方中3味植物藥不同提取純化物質(zhì)部位及礦物藥的藥理作用,皂苷與黃酮合提物抗炎鎮(zhèn)