PCR實驗入門經(jīng)驗總結(jié)

1、PCR 實驗入門經(jīng)驗總結(jié)一、PCR二、各區(qū)必備物品清單三、PCRPCRPCR些年，分子診斷行業(yè)快速發(fā)展，使得很多從業(yè)者關(guān)于PCR了一個新的階段，但是鑒于實驗室基本知識仍然是非常重要的一環(huán)。一、PCR 實驗室設(shè)計原則4區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可適當合并且。使用實PCR提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀，則標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并且。二、各區(qū)必備物品清單試劑儲存和準備區(qū)（1）功能：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反映混合液的準備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。820（覆蓋 1000 。標本制備區(qū)（2）功能：核酸（RNA、NA）提取、貯存及其加入至擴增反映

2、管。關(guān)于于涉及臨床樣本的操作，應契合生物安全二級實驗室防護設(shè)備、個人防護和操作規(guī)矩的要求。必備物品：2-820或-80水浴箱或加熱模塊，微量加樣器（覆蓋0.2-1000，生物安全柜。擴增區(qū)（3）功能：cNA 合成、NA 擴增及檢測。必備物品：核酸擴增儀（或熒光定量PCR04（4）功能：擴增片段的進一步分析測定，如雜交、酶切電泳、變性高效液相分析、測序等。必備物品：雜交儀、電泳儀、測序儀等，微量加樣器（覆蓋 100。消耗品：一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭，專用工2區(qū)，防爆夾2區(qū) PCR管架（2區(qū)、傳遞窗，其他物品。三、PCR 基本工作原則進入各工作區(qū)域應當嚴格依照單一方向進行試劑儲存

3、和準備區(qū)標本制備區(qū)擴增區(qū)擴增產(chǎn)物分析區(qū)。得混用。（例如不同的顏色離開各工作區(qū)域時，不得將工作服帶出。擴增產(chǎn)物分析區(qū)的方向進行。不同的實驗區(qū)域應當有其各自的清潔用具以防止交叉污染。應當可耐受諸如次氯酸鈉的化學物質(zhì)的消毒清潔作用。實驗臺表面的紫外照射應當方便有效。可移動紫外燈254nm波長，在工作完成后調(diào)至實驗臺上6090cm內(nèi)照射。（b此紫外照射擴增片段必需延長照射時間，最好是照射過夜。四、注意事項(一)試劑儲存和準備區(qū)貯存試劑和用于標本制備的消耗品等材料應當直接運送至試劑貯存和準備區(qū)，不能經(jīng)過擴增檢測區(qū)，試劑盒中的陽性關(guān)于照品及質(zhì)控品不應當保存在該區(qū)，應當保存在標本處理區(qū)。(二)標本制備區(qū)由于在樣本混合、核酸純化進程中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染， 可經(jīng)過在本區(qū)內(nèi)設(shè)立正壓條件