正交法優(yōu)選槐花米中蘆丁的提取工藝

1、正交法優(yōu)選槐花米中蘆丁的提取工藝【摘要】采用微波預(yù)處理-水提結(jié)合工藝,采用正交實驗方案，以蘆丁粗品收率為指標(biāo),考察微波功率、微波處理時間、槐花米含水量、粒度、提取溶劑用量、提取時間等因素對蘆丁的提取收率影響,并與水提取方法進(jìn)展比擬。實驗結(jié)果說明,微波預(yù)處理-水提結(jié)合工藝提取效率高,工藝簡單。【關(guān)鍵詞】槐花米；蘆丁；微波預(yù)處理；水提??；正交試驗槐花米是一種常用中藥,屬豆科植物槐SphrajapniaL.的枯燥花及花蕾,其主要有效成分是蘆丁,能調(diào)節(jié)毛細(xì)血管的浸透性,保持和恢復(fù)血管的正常彈性。以槐米為原料提取蘆丁,有多種提取工藝如水提法、酸堿法1、醇提法2等,但是這些提取法的共同弊端就是提取周期較長

2、,有效成分的提取率較低。1986年Ganzler等3成功地應(yīng)用微波爐進(jìn)展有機(jī)化合物的提取以來,微波提取就廣泛應(yīng)用于樣品中有機(jī)污染物、天然化合物及生物活性成分的提取等。微波輔助提取可以顯著進(jìn)步目的成分的提取率,減少對提取溶劑的限制,到達(dá)強化與優(yōu)化傳熱傳質(zhì)的目的4。本研究以利用微波技術(shù)改造傳統(tǒng)工藝為出發(fā)點,考察微波預(yù)處理-水提取結(jié)合工藝的主要影響因素,從而尋求其最正確提取工藝。1試驗局部1.1材料槐花米藥材由廣州致信藥業(yè)中藥飲片廠提供經(jīng)植物粉碎機(jī)粉碎為槐花米粉粒過篩,制備細(xì)、中、粗3種粒度的粉粒備用。粗粒0.9,0.2中粒0.9,細(xì)粒0.2；蒸餾水、蘆丁標(biāo)準(zhǔn)對照品為中國藥品生物制品檢定所提供；其他

3、試劑均為分析純。1.2主要設(shè)備與儀器格蘭仕變頻微波爐；循環(huán)水真空抽濾系統(tǒng)；真空枯燥箱。1.3實驗方法選用不同粒度的槐花米藥材,準(zhǔn)確稱量10g,參加一定量的蒸餾水,混合均勻。在變頻微波爐中,以不同程度的微波功率、輔助時間進(jìn)展微波照射。每份樣品待其冷卻后,重復(fù)照射一次。微波預(yù)處理后,以不同程度的提取溶劑用量與提取時間進(jìn)展煎煮提取提取過程中保持溶劑恒定。將提取液趁熱抽濾，濾液靜置過夜。析出淡黃色沉淀，抽濾，沉淀物用水洗3次，抽干，60真空枯燥，得蘆丁粗品，計算粗品收率。1.4定性分析取蘆丁粗品適量以少量乙醇溶解后點于同一聚酰胺薄層板上,點的位置要高于展開劑,以甲醇-丙酮-苯-(822)為展開劑,展開

4、后取出,晾干，以1%三氯化鋁甲醇溶液噴霧顯色，顯色前后分別于紫外燈(波長為254n)下檢測,與蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品對照,確認(rèn)提取物中含有蘆叮2結(jié)果2.1正交實驗方案水分是最易極化的物質(zhì),對微波呈強烈選擇性吸收。一定條件下,微波場對生物組織的影響表現(xiàn)為功率窗的效應(yīng),微波輻照時間表達(dá)了微波能量的積累。水提取影響因素很多,其中最主要的3個因素是粒度、提取溶劑用量和提取時間。因此根據(jù)實驗與分析,結(jié)合微波提取因素和水提取因素,選用正交表L18(37),研究微波預(yù)處理-水提取結(jié)合工藝主要因素：微波功率、微波時間、藥材含水量質(zhì)量為10g的藥材,微波輻照時參加的含水量、粒度、提取溶劑用量、提取時間對槐花米中蘆丁提取特性

5、的影響,并進(jìn)展了優(yōu)選條件的驗證和各因素的顯著性分析。選定實驗因素與程度見表1。表1槐花米微波輔助提取因素及程度表略2.2正交實驗直觀分析以蘆丁粗品為指標(biāo),正交實驗直觀分析結(jié)果見表2、表3。由表2、表3可見,以蘆丁粗品為指標(biāo)成分進(jìn)展分析時,各因素對實驗結(jié)果的重要性為：FADEB,優(yōu)選條件組合是A3B11D2E2F3,即：微波功率560,輻照時間2in2次,基質(zhì)含水量40L,粒度為中粒,提取溶劑用量120L,提取時間2.5h。從方差分析表可以看出，所考察的因素對蘆丁收率均無統(tǒng)計學(xué)意義P0.05，但從表3可以看出，這些因素對于蘆丁的收率有一定的影響。綜上所述，優(yōu)選條件組合是A3B11D2E2F3。表

6、2L18(37)槐花米微波輔助提取正交實驗結(jié)果略表3蘆丁粗品的直觀分析略表4蘆丁粗品的方差分析略2.4優(yōu)選條件的驗證以蘆丁粗品為指標(biāo),優(yōu)選條件組合是A3B11D2E2F3,即：微波功率560(80%功率檔),輻照時間2in2次,基質(zhì)含水量20L,粒度為中粒,提取溶劑用量120L,提取時間2.5h,重復(fù)實驗3次,蘆丁粗品平均收率22.54%。單純用水提取方法，即粒度為中粒,提取溶劑用量120L,提取時間2.5h,重復(fù)實驗3次,得到的蘆丁粗品平均收率14.52%。微波預(yù)處理-水提取結(jié)合工藝得到蘆丁粗品平均收率明顯高于單純用水提取方法得到的收率。3討論微波是電磁波的一局部，微波所具有的非熱效應(yīng)可以松

7、弛氫鍵，擊穿細(xì)胞膜，加速溶質(zhì)分子對基體的浸透和目的組分的溶劑化，進(jìn)步提取效率。天然植物中的有效成分往往包埋在有表皮保護(hù)的內(nèi)部薄壁細(xì)胞或者液泡內(nèi)，破壁非常困難。微波加熱導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)極性物質(zhì)，尤其是水分子吸收微波能，產(chǎn)生大量熱量，使細(xì)胞內(nèi)溫度迅速升高，液態(tài)水汽化產(chǎn)生的壓力將細(xì)胞膜和細(xì)胞壁沖破，形成微小孔洞，進(jìn)一步加熱導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)部和細(xì)胞壁水分減少，細(xì)胞收縮，外表出現(xiàn)裂紋?？锥春土鸭y的存在使胞外液容易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，溶解并釋放細(xì)胞內(nèi)有效成分。在含水的溶劑萃取極性化合物時，微波輔助提取顯示出較大優(yōu)勢6。本實驗采用了微波處理加水提的方法提取槐花米中的有效成分蘆叮第一步采用微波輻照,通過微波加熱使基質(zhì)材料內(nèi)部的細(xì)微組織構(gòu)造發(fā)生變化,減小提取過程中目的成分在基質(zhì)材料內(nèi)部的傳質(zhì)阻力；第二步水提取,保持提取過程中蘆丁成分在基質(zhì)材料內(nèi)外較高的濃度差,所以提取效率高,工藝簡單。通過正交實驗得到了提取的優(yōu)選條件組合，即：微波功率560,輻照時間2in2次,基質(zhì)含水量40L,粒度為中粒,提取溶劑用量120L,提取時間2.5h。這一方法與單一的水提法相比，提取效率大大進(jìn)步?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1王新南.亞硫酸鈉在蘆丁消費中的應(yīng)用.醫(yī)藥工業(yè)，1983，6：34.2李松武，等.蘆丁提取新工藝.中成藥，1990，129：12.3Ganzlerk,SalgA,ValkK.Advanesithsuperritialf