衛(wèi)生毒理學(xué)外源化學(xué)物致癌作用課件

1、第八章 外源化學(xué)物致癌作用chemical carcinogenesis衛(wèi)生毒理學(xué)教研室2004.51775年英國Pott 陰囊癌1895年德國Rehn 職業(yè)性膀胱癌1915年日本山極和市川 試驗性皮膚癌1922年英國Kennway 動物皮膚癌1945年英國Case 職業(yè)性膀胱癌腫瘤指有分裂潛能的細胞受致癌因素的作用后發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化和克隆性增生所形成的新生物，在人體任何部位、任何組織都可以發(fā)生腫瘤。化學(xué)致癌作用(chemical carcinogenesis)是指化學(xué)物質(zhì)引起正常細胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化并發(fā)展成腫瘤的過程?；瘜W(xué)致癌物(chemical carcinogen)是指具有化學(xué)致癌作用的化學(xué)物質(zhì)

2、。 第一節(jié) 化學(xué)致癌機制第二節(jié) 化學(xué)致癌物的分類 第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法第一節(jié) 化學(xué)致癌機制一、化學(xué)致癌作用多因素、多基因參與的多階段過程致癌過程有多個與癌腫有關(guān)的基因參與不同器官來源、不同組織類型、臨床階段以至同一種腫瘤在不同地區(qū)所見的遺傳變化是不同的多種環(huán)境致癌物、致癌因子或條件可協(xié)同作用個體的不同遺傳背景對腫瘤的發(fā)生發(fā)展有重要影響二、與致癌作用有關(guān)的代謝活化與滅活： 前致癌物 近致癌物 終致癌物 Precarcinogens proximate carcinogens ultimate carcinogens第一節(jié) 化學(xué)致癌機制三、化學(xué)致癌作用的分子機制：（一）DNA加合

3、物：（二）DNA修復(fù)與致癌過程：（三）癌基因、原癌基因和抑癌基因： 1、癌基因（oncogene）和原癌基因（proto-oncogene）： 2、抑癌基因（anti-oncogene）（四）基因表達調(diào)控異常與腫瘤的發(fā)生：第一節(jié) 化學(xué)致癌機制四、化學(xué)致癌過程：引發(fā)階段 促長階段 進展階段（initiation） （promotion）（progression） 第一節(jié) 化學(xué)致癌機制第一節(jié) 化學(xué)致癌機制前致癌物終致癌物細胞含錯配堿基細胞死亡不分化的癌分化的腫瘤致癌物-DNA加合物引發(fā)的細胞正常細胞活化轉(zhuǎn)移DNA結(jié)合修復(fù)DNA復(fù)制錯配修復(fù)失敗DNA修復(fù)促長進展第二節(jié) 化學(xué)致癌物的分類IARC將化學(xué)

4、物對人類致癌性資料(流行病學(xué)調(diào)查和病例報告)和對實驗動物致癌性資料分為四級（2002，878）：組1，對人類是致癌物。對人類致癌性證據(jù)充分者屬于本組。87組2，對人類是很可能或可能致癌物。又分為兩組，即組2A和組2B。 組2A，對人類很可能(probably)是致癌物，指對人類致癌性證據(jù)有限，對實驗動物致癌性證據(jù)充分。63 組2B，對人類是可能(possible)致癌物，指對人類致癌性證據(jù)有限，對實驗動物致癌性證據(jù)并不充分；或指對人類致癌性證據(jù)不足，對實驗動物致癌性證據(jù)充分。234組3，現(xiàn)有的證據(jù)不能對人類致癌性進行分類。493組4，對人類可能是非致癌物。1根據(jù)致癌機制分類 1.genotox

5、ic carcinogens直接致癌物間接致癌物無機致癌物2.non- genotoxic carcinogens促長劑 激素調(diào)控劑細胞毒劑 過氧化物酶體增殖劑免疫抑制劑 固態(tài)物質(zhì)3.未分類：美舍吡倫第二節(jié) 化學(xué)致癌物的分類一、用于致癌物篩選的短期試驗（一）致突變試驗：基因突變試驗：鼠傷寒沙門氏菌回復(fù)突變試驗(Ames試驗);染色體畸變試驗：體外細胞系細胞遺傳學(xué)分析，小鼠骨髓微核試驗，大鼠骨髓染色體畸變試驗;原發(fā)性DNA損傷：DNA加合物，鏈斷裂，DNA修復(fù)誘導(dǎo)(細菌SOS反應(yīng)，大鼠肝UDS誘導(dǎo))，SCE試驗；體外細胞轉(zhuǎn)化：敘利亞地鼠胚胎細胞，Balb/c 3T3細胞。 第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致

6、癌作用的基本方法一、用于致癌物篩選的短期試驗：（二）哺乳動物短期致癌試驗： 哺乳動物短期致癌試驗又稱為有限體內(nèi)試驗，指時間有限(數(shù)月)，靶器官有限。較受重視的短期致癌試驗有下列四種：1小鼠皮膚腫瘤誘發(fā)試驗：于小鼠皮膚局部連續(xù)涂抹受試物，以觀察皮膚乳頭瘤和癌的發(fā)生，一般20周可結(jié)束實驗，較敏感的小鼠為SENCAR小鼠。此試驗也可設(shè)計為檢測受試物的引發(fā)活性或促長活性。典型的引發(fā)劑為致癌性多環(huán)芳烴，促長劑為佛波醇酯(TPA)。2小鼠肺瘤誘發(fā)試驗：染毒途徑常用腹腔注射，也可灌胃或吸入，一般30周可結(jié)束實驗，觀察肺腫瘤的發(fā)生。較敏感的小鼠為A系小鼠。此試驗也可設(shè)計)b檢測受試物的引發(fā)活性或促長活性。典型

7、的引發(fā)劑為烏拉坦，促長劑為二丁基經(jīng)基甲苯(BHT)。第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法3大鼠肝轉(zhuǎn)化灶誘發(fā)試驗。對大鼠進行肝大部切除術(shù)后，給以受試物，一般可在814周結(jié)束實驗，觀察肝轉(zhuǎn)化灶生成。肝轉(zhuǎn)化灶是癌前病變，有-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶活性升高，G6P酶和ATP酶活性降低，以及鐵攝取能力降低。轉(zhuǎn)化灶可用組織化學(xué)或免疫化學(xué)方法鑒定。此試驗也可設(shè)計為檢測受試物的引發(fā)活性或促長活性。典型的引發(fā)劑為二乙基亞硝胺(DEN)，促長劑為苯巴比妥(PB)。4雌性大鼠乳腺癌誘發(fā)試驗，一般可用SD大鼠(或Wistar大鼠)，實驗周期為6個月。 此四個試驗不是成組試驗，應(yīng)根據(jù)受試物的特點選擇使用。此四個試驗任一試驗得到

8、陽性結(jié)果的意義與長期動物致癌試驗相似，但陰性結(jié)果并不能排除受試物的致癌性。第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法一、用于致癌物篩選的短期試驗：（二）哺乳動物短期致癌試驗：何時應(yīng)考慮進行致癌性評價：人體可能長期暴露于該化學(xué)物；該化學(xué)物或其代謝物的化學(xué)結(jié)構(gòu)與已知致癌物相似；反復(fù)染毒毒性試驗提示該化學(xué)物可能產(chǎn)生癌前病變。如在3種遺傳毒理學(xué)短期試驗均得到陽性結(jié)果，可預(yù)測為遺傳毒性致癌物；如在3種遺傳毒理學(xué)短期試驗均得到陰性結(jié)果，可預(yù)測為非遺傳毒性非致癌物；如經(jīng)5種遺傳毒理學(xué)短期試驗仍不能預(yù)測其致癌性的化學(xué)品，應(yīng)優(yōu)先進行哺乳動物致癌試驗。 第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法ICH(1995)根據(jù)已知

9、的危險因素、擬定的適應(yīng)癥和用藥時間，提出下列進行新藥致癌性研究的范圍，避免不必要的試驗。臨床上連續(xù)應(yīng)用6個月以上的藥品；對慢性或復(fù)發(fā)性疾病需間斷性長期反復(fù)治療的藥品；造成長期暴露的給藥系統(tǒng)。已知屬于對人具有潛在致癌性的同類化合物；構(gòu)效關(guān)系提示具有致癌危險性的物質(zhì)3長期毒性試驗發(fā)現(xiàn)癌前病變3原型或代謝產(chǎn)物在組織內(nèi)長期蓄積，引起局部組織反應(yīng)或其他病理生理反應(yīng)的物質(zhì)。具有遺傳毒性的物質(zhì)往往具有致癌性，如擬長期使用，應(yīng)進行慢性毒性試驗(1年)，檢測早期致癌反應(yīng)。擬用于病人預(yù)期壽命少于3年的藥品不必進行致癌試驗，如腫瘤治療藥等。第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法 局部使用吸收很差的藥物不必進行經(jīng)口致

10、癌試驗。 已具有致癌性資料的藥物的各種酸、堿、鹽應(yīng)提供其在藥物動力學(xué)、藥效學(xué)或安全性方面沒有明顯改變的證據(jù)，對于酯和復(fù)雜的衍生物在確定是否需要進行致癌試驗時也應(yīng)有類似的資料，并應(yīng)個案討論。 基本作為替代治療的內(nèi)源性物質(zhì)不需要進行致癌試驗。但對生物技術(shù)制品，下列情況可考慮進行致癌試驗：生物學(xué)作用明顯不同于天然相應(yīng)物質(zhì)的制品；結(jié)構(gòu)明顯不同于天然相應(yīng)物質(zhì)的制品；在人體引起局部或全身濃度明顯增加的制品。 第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法二、哺乳動物長期致癌試驗：（一）試驗動物 物種和品系：要求用兩種實驗動物，常規(guī)選用大鼠和小鼠，也可用倉鼠。嚙齒類動物對多數(shù)致

11、癌物易感性較高，壽命相對較短，費用也較低，生理和病理學(xué)資料較完備，因此使用最廣泛。在選擇品系時應(yīng)選擇較敏感、自發(fā)腫瘤率低、生活力強及壽命較長的品系。 性別：為接近人類情況，應(yīng)使用同等數(shù)量的雌雄兩種性別的動物。年齡：使用剛斷乳的動物，以保證有足夠長的染毒和發(fā)生癌癥的時間，而且幼年動物解毒酶及免疫系統(tǒng)尚未完善，對致癌作用比較敏感。 （二）劑量選擇和動物數(shù)量 致癌試驗一般設(shè)三個試驗組。美國NCI推薦以最大耐受劑量(MTD)為高劑量。最大耐受劑量是由90天毒性試驗來確定的，此劑量應(yīng)使動物體重減輕不超過對照組的10，并且不引起死亡及導(dǎo)致縮短壽命的中毒癥狀或病理損傷。ICH(1995)提出，高劑量選擇可以

12、根據(jù)：毒性終點，即最大耐受劑量(MTD);藥代動力學(xué)終點，嚙齒動物血漿AUC(時量曲線下面積)為人的25倍；選擇吸收飽和劑量;藥效學(xué)終點，不應(yīng)產(chǎn)生生理學(xué)和內(nèi)穩(wěn)態(tài)紊亂;最大可行劑量，受試物在飼料中最高含量為5。限制劑量為1500mg(kg體重d)。 第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法（二）劑量選擇和動物數(shù)量中及低劑量組則按等比級數(shù)下推，如分別為上一個劑量水平的1/2或1/3。低劑量組應(yīng)不影響動物的正常生長、發(fā)育和壽命，即不產(chǎn)生任何毒性效應(yīng)。但低劑量組應(yīng)高于人的接觸劑量，一般不低于高劑量的10。中劑量組介于高、低劑量之間，如有可能按受試物的毒物動力學(xué)性質(zhì)來確定。對照組除不給受試物外，其他條件均

13、與試驗組相同。同時應(yīng)設(shè)陰性(溶劑或賦形劑)對照組。必要時可設(shè)陽性對照組，陽性致癌物最好與受試物的化學(xué)結(jié)構(gòu)相近。動物數(shù)量：每組至少有雌雄各50只動物，希望在出現(xiàn)第一個腫瘤時，每組還有不少于25只動物。 第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法（三）染毒途徑 經(jīng)口染毒是將受試物給予實驗動物的常用途徑，一般把受試物摻人飼料或飲水中連續(xù)給予動物(57天/周)。若摻入后的適口性不良，可用灌胃法。摻入濃度要定期監(jiān)測，觀察其均勻性和穩(wěn)定性，摻入的濃度一般不超過5。經(jīng)皮染毒，涂敷受試物的面積一般不少于動物體表總面積的10。必須保證受試物與皮膚良好接觸，并防止動物舔食。每天涂

14、抹一次，每周37次。吸入染毒，每天染毒4小時，每周57天。染毒柜內(nèi)受試物濃度應(yīng)定期或連續(xù)監(jiān)測，其分布應(yīng)均勻、恒定。其他注射途徑可根據(jù)需要采用。 第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法（四）試驗期限 ICH(1997)建議參考下面幾條準(zhǔn)則：(1)一般情況下，試驗期限小鼠和倉鼠應(yīng)為18個月，大鼠為24個月；然而對于某些生命期較長或自發(fā)腫瘤率低的動物品系，小鼠和倉鼠可持續(xù)24個月，大鼠可持續(xù)30個月。(2)當(dāng)最低劑量組或?qū)φ战M存活的動物只有25時，也可以結(jié)束試驗，對于有明顯性別差異的試驗，則試驗結(jié)束的時間對不同的性別應(yīng)有所不同，在某種情況下因明顯的毒性作用，只造成高劑量組動物過早死亡，此時不應(yīng)結(jié)束試

15、驗。 一個合格的陰性對照試驗應(yīng)符合下列標(biāo)準(zhǔn)：因自溶、同類自食，或因管理問題所造成的動物損失在任何一組都不能高于10。小鼠和倉鼠在18個月，大鼠在24個月時各組存活的動物不能少于50。 第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法（五）觀察和結(jié)果分析 1一般觀察 每天觀察受試動物一次，主要觀察其外表、活動、攝食情況等。在實驗最初三個月每周稱體重一次，以后每兩周稱體重一次。經(jīng)飼料或飲水給以受試物時，應(yīng)記錄食物消耗量或飲水量，以計算受試物的攝入量。觀察時要注意有無腫瘤出現(xiàn)、腫瘤出現(xiàn)時間及死亡時間。老年動物多病易死，應(yīng)加強巡視，防止動物死亡后未及時刻驗，發(fā)生尸體組織自溶。 2病理檢查 動物自然死亡或處死后必

16、須及時進行病理檢查，包括肉眼和組織切片檢查。組織切片檢查應(yīng)包括已出現(xiàn)腫瘤或可疑腫瘤的器官和肉眼檢查有明顯病變的器官，應(yīng)注意觀察癌前病變。通過病理檢查確定腫瘤的性質(zhì)和靶器官。第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法（五）觀察和結(jié)果分析3結(jié)果分析 統(tǒng)計各種腫瘤的數(shù)量(包括良性和惡性腫瘤)及任何少見的腫瘤、患腫瘤的動物數(shù)、每只動物的腫瘤數(shù)及腫瘤潛伏期。腫瘤發(fā)生率()(實驗結(jié)束時患腫瘤動物總數(shù)/有效動物總數(shù))100 式中，有效動物總數(shù)指最早發(fā)現(xiàn)腫瘤時存活動物總數(shù)。腫瘤潛伏期即從攝入受試物起到發(fā)現(xiàn)腫瘤的時間，因為內(nèi)臟腫瘤不易覺察，通常將腫瘤引起該動物死亡的時間定為發(fā)生腫瘤的時間。應(yīng)對試驗結(jié)果進行仔細的統(tǒng)計

17、學(xué)分析，并研究劑量反應(yīng)關(guān)系。 第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法致癌試驗陽性的判定標(biāo)準(zhǔn)WHO(1969)：(1)對于對照組也出現(xiàn)的一種或數(shù)種腫瘤，試驗組腫瘤發(fā)生率增加；(2)試驗組發(fā)生對照組沒有的腫瘤類型；(3)試驗組腫瘤發(fā)生早于對照組；(4)與對照組比較，試驗組每個動物的平均腫瘤數(shù)增加。 在進行試驗的兩個物種兩種性別動物中，有一種結(jié)果為陽性，即認為該受試物有致癌性。兩個物種兩種性別動物試驗結(jié)果均為陰性時，方能認為未觀察到致癌作用。 第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法結(jié)果報告：應(yīng)著重報告發(fā)現(xiàn)腫瘤的部位、數(shù)量、性質(zhì)、癌前病變，以及其他毒性效應(yīng)；應(yīng)報告

18、劑量反應(yīng)關(guān)系及統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果。如在動物組織中觀察到良性和惡性腫瘤，并有良性腫瘤向惡性化進展的證據(jù)，在進行統(tǒng)計學(xué)分析之前將良性和惡性腫瘤合并是適宜的，但仍希望分別對良性和惡性腫瘤分別進行統(tǒng)計學(xué)處理。評價該試驗不同劑量良性腫瘤和惡性腫瘤的相對數(shù)量可有助于確定該受試動物對受試物的劑量反應(yīng)關(guān)系。另一方面，如果僅觀察到良性腫瘤，并無惡性化進展的證據(jù)，則將此受試物認為是致癌物是不適宜的，此僅提示在該試驗條件下需要進一步研究。 三、人群流行病學(xué)觀察：（一）接觸標(biāo)記 （二）生物效應(yīng)標(biāo)記 （三）敏感性標(biāo)記 第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法四、轉(zhuǎn)基因小鼠在致癌作用的研究

19、 1轉(zhuǎn)癌基因小鼠。與轉(zhuǎn)錄啟動子連接的癌基因轉(zhuǎn)入后可直接在某些特定的組織中高效表達，使該組織細胞處于引發(fā)狀態(tài)，這類轉(zhuǎn)基因動物是研究化學(xué)物致癌作用的敏感體系。攜帶癌基因的轉(zhuǎn)基因動物可用于致癌試驗，試驗周期僅3個月左右，有希望發(fā)展成代替長期動物致癌試驗的試驗系統(tǒng)。這些攜帶有癌基因的轉(zhuǎn)基因動物，可用來研究外源化學(xué)物與腫瘤相關(guān)基因的作用及外源化學(xué)物在致癌不同階段中的作用機制。以各種組織特異性的促長劑處理轉(zhuǎn)入不同癌基因的小鼠，可為致癌過程的研究提供新線索。 四、轉(zhuǎn)基因小鼠在致癌作用的研究：2腫瘤抑制基因敲除小鼠。在P53-/-小鼠，腫瘤(特別是淋巴肉瘤)的發(fā)生比正常小鼠(P53+/+)增加而且提前。由于P

20、53-/-小鼠的腫瘤發(fā)生具有組織特異性，進一步研究這些腫瘤的遺傳學(xué)基礎(chǔ)有助于鑒定P53基因的功能。而半合子小鼠(P53+/-)在出生后6個月內(nèi)自發(fā)癌發(fā)生率低，但在之后發(fā)生淋巴瘤和軟組織肉瘤，其中大部分丟失P53野生型等位基因。這種小鼠對遺傳毒性致癌物敏感性并不增加。這種半合子小鼠也可用于鑒定致癌過程中的協(xié)作基因。而且缺P53小鼠加速形成惡性腫瘤，提示此基因主要在進展階段起作用。P53在腫瘤發(fā)生中的作用有待進一步研究。 第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法四、轉(zhuǎn)基因小鼠在致癌作用的研究：3轉(zhuǎn)穿梭質(zhì)粒的轉(zhuǎn)基因動物小鼠：轉(zhuǎn)入帶有報告基因的穿梭載體，是研究體內(nèi)基因突變的轉(zhuǎn)基因動物模型。常用的靶基因如

21、lacI、lacZ可通過噬菌體體外包裝等方法，從小鼠基因組內(nèi)回收，再在大腸桿菌內(nèi)檢測靶基因突變，可為研究不同器官基因的自發(fā)突變和誘發(fā)突變的分子機制提供有效的方法 。第三節(jié) 觀察化學(xué)毒物致癌作用的基本方法第九章 發(fā)育毒性與致畸作用 衛(wèi)生毒理學(xué)教研室2004.5基本概念致畸作用的毒理學(xué)特點致畸作用機理外源化學(xué)物發(fā)育毒性的評價 第一節(jié)發(fā)育毒性及其評定 第二節(jié)發(fā)育毒性及其評定 基本概念 發(fā)育毒性(developmental toxicity) 指出生前經(jīng)父體和(或)母體接觸外源性理化因素引起的在子代到達成體之前出現(xiàn)的有害作用。具體表現(xiàn)可分為: 生長遲緩:即胚胎與胎仔的發(fā)育過程在外源化學(xué)物影響下，較正常

22、的發(fā)育過程緩慢。 致畸作用:由于外源化學(xué)物干擾，活產(chǎn)胎仔胎兒出生時，某種器官表現(xiàn)形態(tài)結(jié)構(gòu)異常。 功能不全或異常:即胎仔的生化、生理、代謝、免疫、神經(jīng)活動及行為的缺陷或異常。 胚胎或胎仔致死作用 :某些外源化學(xué)物在一定劑量范圍內(nèi)，可在胚胎或胎仔發(fā)育期間對胚胎或胎仔具有損害作用，并使其死亡。 發(fā)育毒性及其評定畸形、畸胎和致畸物 畸形(malformation):器官形態(tài)的異常。 畸胎(terate):具有畸形的胚胎或胎仔。 致畸物或致畸原(teratogen):凡在一定劑量下，能通過母體對胚胎或胎兒正常發(fā)育過程造成干擾，使子代出生后具有畸形的化合物。 致畸試驗:評定外源化學(xué)物是否具有致畸作用的試驗

23、。 發(fā)育毒性及其評定基本概念 胚胎毒性作用(embryotoxicity) 外源化學(xué)物引起的胎仔生長發(fā)育遲緩和功能缺陷不全的損害作用。其中不包括致畸和胚胎致死作用。母體毒性作用(maternaltoxicity) 母體毒性作用是指外源化學(xué)物在一定劑量下，對受孕母體產(chǎn)生的損害作用。具體表現(xiàn)包括體重減輕、出現(xiàn)某些臨床癥伏、直至死亡。 發(fā)育毒性及其評定基本概念 母體毒性作用與致畸作用關(guān)系具有致畸作用，但無母體毒性出現(xiàn)。出現(xiàn)致畸作用的同時也表現(xiàn)母體毒性。不具有特定致畸作用機理，但可破壞母體正常生理穩(wěn)態(tài)。僅具有母體毒性，但不具有致畸作用。在一定劑量下，既不呈現(xiàn)母體毒性，也未見致畸作用。 發(fā)育毒性及其評定

24、基本概念 畸形與變異在胚胎或胎兒出現(xiàn)器官形態(tài)結(jié)構(gòu)異常稱為畸形。機體的形態(tài)結(jié)構(gòu)或生理功能，在同一物種的子代與親代之間或子代的個體之間，有時出現(xiàn)不完全相同的現(xiàn)象，即為變異。 發(fā)育毒性及其評定基本概念 致畸作用的毒理學(xué)特點 器官發(fā)生期的胚胎對致畸物最為敏感劑量與效應(yīng)關(guān)系較為復(fù)雜劑量效應(yīng)關(guān)系復(fù)雜的表現(xiàn)及原因致畸作用的劑量反應(yīng)曲線較為陡峭致畸作用最大無作用劑量問題尚有不同意見 發(fā)育毒性及其評定物種差異以及個體差異在致畸作用中較為明顯在不同動物并不一定都具有致畸作用，引起畸形的類型也不一致。種間差異即同一物種中不同品系之間存在的差異，在致畸作用中也極明顯。 發(fā)育毒性及其評定致畸作用的毒理學(xué)特點 致畸作用機

25、理 Wilsom(1977)提出了畸形發(fā)生的9種機制，包括突變、染色體斷裂、有絲分裂改變、改變核酸完整性或功能、減少前體或底物的補給、減少能源支持、改變膜特性、滲透壓不平衡和酶抑制作用。近年來在分子水平的研究有很大的進展，雖然胚胎有代償機制彌補外源性化學(xué)物的影響，但是，是否產(chǎn)生畸形依賴于在致病過程中的每個步驟在損傷和修復(fù)之間的平衡。 發(fā)育毒性及其評定干擾基因表達基因突變與染色體畸變損傷細胞和分子水平的翻譯細胞調(diào)亡干擾細胞通過胎盤毒性引起發(fā)育毒性干擾母體穩(wěn)態(tài)內(nèi)分泌干擾作用 發(fā)育毒性及其評定致畸作用機理 外源化學(xué)物發(fā)育毒性的評價 傳統(tǒng)常規(guī)致畸試驗動物選擇劑量分組動物交配處理胎仔檢查發(fā)育毒性及其評定動物選擇: 致畸試驗的動物選擇，除參照毒性試驗中選擇動物的一般原則，即食性和對受試物代謝過程與人類接近，體型小，馴服，容易飼養(yǎng)和繁殖及價廉外，還應(yīng)特別注意妊娠過程較短、每窩產(chǎn)仔數(shù)較多和胎盤構(gòu)造及厚度與人類接近等特點。 外源化學(xué)物發(fā)育毒性的評價 發(fā)育毒性及其評定劑量分組 一般應(yīng)先進行預(yù)試，目的是找出引起母體中毒的劑量。最少設(shè)3個劑量組，另設(shè)對照組。原則上最高劑量組，可以引起母體輕度中毒，即進食量減少、體重減輕、死亡不超過10%。最低劑量組不應(yīng)觀察到任何中毒癥狀；中間劑量組可以允許母體出現(xiàn)某些極輕微中毒癥狀。其劑量與高劑量和低劑量成等比級