bwt緒論組織學(xué)課件

1、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院賓文婷B8404 Tel:10/13/2022組織學(xué)胚胎學(xué)histologyembryology和and10/13/2022緒論introduction組織學(xué)10/13/2022醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課形態(tài)學(xué)功能學(xué)正常異常解剖學(xué)組織學(xué)胚胎學(xué)病理解剖學(xué)生理學(xué)生物化學(xué)病理生理學(xué)研究機(jī)體微細(xì)結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功能的學(xué)科組織學(xué)胚胎學(xué)研究個(gè)體發(fā)生、生長(zhǎng)和發(fā)育的科學(xué)10/13/2022 組織學(xué)（histology）：利用顯微鏡研究正常機(jī)體的微細(xì)結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功能的科學(xué)。 組織：細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)組合在一起所構(gòu)成的細(xì)胞群體10/13/2022 德國(guó)學(xué)者Schleiden（1804-1881）和 Schwann（1810

2、-1882）：1838-1839年分別指出細(xì)胞是植物和動(dòng)物結(jié)構(gòu)、功能和發(fā)生的基本單位，創(chuàng)立了細(xì)胞學(xué)說(shuō)。 法國(guó)人Bichat（1771-1822）用放大鏡觀察解剖的組織，1801年首次提出“組織”。10/13/2022 我國(guó)組織學(xué)研究起始于上世紀(jì)之初，組織學(xué)是從人體解剖學(xué)分化出來(lái)的一門(mén)較年輕的科學(xué)。 我國(guó)老一輩組織學(xué)家有馬文昭(1886-1965)、鮑監(jiān)清(1893-1982)、王有琪(1899-)、張作干(1907-1969)、李肇特(1913-)、薛社普(1917-)等。10/13/2022（一）光學(xué)顯微鏡組織學(xué)的研究方法光學(xué)顯微鏡的分辨率最高可達(dá)0.2m，放大約1000倍。1 mm=100

3、0m1m=1000nm1 nm=10A10/13/2022光學(xué)顯微鏡基本結(jié)構(gòu)：1. 照明燈(Lamp)2. 聚光器(Condenser)3. 載物臺(tái)和切片夾(Mechanical stage and specimen retainer)4. 推進(jìn)器(Mechanical stage adjustment knob)5. 物鏡(Objectives)6. 粗細(xì)螺旋(Course and fine focus knob)7. 目鏡(Oculars)8. 照相機(jī)等接口(Connection to camera, etc.)10/13/2022 l）熒光顯微鏡（fluorescence microsc

4、ope）是用來(lái)觀察標(biāo)本中的自發(fā)熒光物質(zhì)或以熒光素染色或標(biāo)記的細(xì)胞和結(jié)構(gòu)2）相差顯微鏡 （phase contrast microscope）是用于觀察組織培養(yǎng)中活細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的 3）暗視野顯微鏡 （dark-field microscope）主要用于觀察因反差或分辨力不足的微小顆粒4）共焦激光掃描顯微鏡（confocal laser scanning microscope，CLSM） 以激光為光源，光束經(jīng)聚焦后落在樣品（組織厚片或細(xì)胞）不同深度的微小一點(diǎn)，并作移動(dòng)掃描，通過(guò)電信號(hào)彩色顯像，經(jīng)過(guò)微機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行二維和三維分析處理10/13/2022掃描電鏡（2）掃描電鏡（SEM）可觀察組織表

5、面的立體結(jié)構(gòu)。組織塊經(jīng)固定后，置于真空鍍膜儀內(nèi)干燥，在標(biāo)本表面先后噴鍍一層碳膜和合金膜，即可置于鏡下觀察。10/13/202210/13/20221.固定fixation2.脫水取新鮮組織，固定劑固定，使組織的蛋白質(zhì)迅速凝固，防止細(xì)胞自溶和組織腐敗。固定后的組織塊(約3-5mm)，需用石蠟包埋成硬塊，由于蠟與水不相溶，所以需將組織中的水脫去。二甲苯酒精固定液10/13/20223.包埋embedding10/13/2022切片機(jī) microtome4.切片包埋后的蠟塊，用切片機(jī)切成 5-10m厚的組織切片(tissue section)，切片貼在載玻片上經(jīng)脫蠟等步驟后進(jìn)行染色。10/13/20

6、22 呈藍(lán)紫色的堿性染料， 含氨基，帶陽(yáng)離子。與帶陰離子的組織結(jié)合，將組織染成藍(lán)紫色。被染成藍(lán)紫色的組織具有嗜堿性(basophilia) 。 呈紅色的酸性染料， 含羧基，帶陰離子。與帶陽(yáng)離子的組織結(jié)合，將組織染成粉紅色。被染成粉紅色的組織具有嗜酸性(acidophilia) 。蘇木精 Hematoxylin伊紅 Eosin5.染色staining由于染料是水溶性的，因此在染色前，需將組織切片入水。10/13/2022 10/13/2022HE染色：蘇木精（Hematoxylin）伊紅（Eosin）染色堿性染料將嗜堿性物質(zhì)（本身酸性）染成藍(lán)色酸性染料將嗜酸性物質(zhì)（本身堿性）染成紅色細(xì)胞核中的D

7、NA、RNA細(xì)胞質(zhì)中的RNA（核糖體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）細(xì)胞質(zhì)膜性結(jié)構(gòu)（線粒體、溶酶體、滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)） 10/13/2022血液涂片其他標(biāo)本制作方法10/13/2022骨磨片(骨、牙等堅(jiān)硬組織可制成薄磨片）。人密質(zhì)骨，硫堇染色。10/13/2022 硝酸銀、氯化金等重金屬鹽微粒附著在細(xì)胞或組織結(jié)構(gòu)表面呈棕黑色或棕黃色。銀染法中組織結(jié)構(gòu)可直接使硝酸銀還原的稱親銀性（argentaffin ）, 無(wú)直接還原作用，需加入還原劑方能顯色的稱嗜銀性（argyrophilia)。2、特殊染色（物理吸附作用的染色方法）10/13/2022特殊染色（物理吸附作用的染色方法） 用甲苯胺藍(lán)（to1uidine blue）

8、等堿性染料染色后呈紫紅色，這種現(xiàn)象稱異染性(metachromasia)。 蘇丹染料顯示脂肪組織，染料溶于脂肪內(nèi)，細(xì)胞內(nèi)的脂滴顯色10/13/2022肝糖原 3、組織化學(xué)histochemistry 和 細(xì)胞化學(xué)cytochemistry通過(guò)化學(xué)原理顯示組織切片或細(xì)胞內(nèi)某種化學(xué)成分，進(jìn)行定位、定量及與功能相關(guān)的研究。如糖類、脂類、酶、核酸等與試劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，形成有色終末產(chǎn)物。10/13/2022過(guò)碘酸 Schiff反應(yīng)(periodic acid Schiff reaction)：簡(jiǎn)稱 PAS反應(yīng)，是確定組織或細(xì)胞中有無(wú)多糖存在的一種方法。 原理：多糖PA氧化醛Schiff試劑紫紅色沉淀10/13/202210/13/2022從多細(xì)胞生物機(jī)體中用無(wú)菌操作的方法，在體外模擬體內(nèi)條件下（如適合PH值、溫度、營(yíng)養(yǎng)條件等），使細(xì)胞或組織繼續(xù)生存、生長(zhǎng)并進(jìn)行傳代繁殖的方法。4、組織培養(yǎng)tissue culture10/13/2022組織培養(yǎng)可研究各種理化因子對(duì)活細(xì)胞的直接影響，可觀察某種因素對(duì)細(xì)胞增殖、分化、代謝、運(yùn)動(dòng)、吞噬、分泌等動(dòng)態(tài)過(guò)程，并能記錄觀察結(jié)果。獲得在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)難達(dá)到的研究目的。10/13/2022分類原代培養(yǎng)（Primary culture）：直接從體內(nèi)獲取組織細(xì)胞的首次培養(yǎng) 。傳代培養(yǎng)（Subculture）：從原代培養(yǎng)的細(xì)胞中分取一部分細(xì)胞進(jìn)行