骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查操作流程

1、骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查操作流程骨髓細(xì)胞檢驗(yàn)一、骨髓的取材骨髓取材方式主要有兩種，即骨髓穿刺術(shù)及環(huán)鉆術(shù)，后者又稱骨髓 活檢。特別適合用于“干抽”情況下且可看到造血組織的天然結(jié)構(gòu)，能 判斷造血組織與脂肪組織的比例，有助于對再生障礙時(shí)病情嚴(yán)重程度的 估計(jì)，也有助于骨髓纖維化、骨髓轉(zhuǎn)移癌及MDS的診斷。（一）骨髓穿刺部位胸骨穿刺 在第二與第三肋骨之間的胸骨正中線上穿刺，穿刺針 長度固定在1cm以下。脊突穿刺第三、四腰椎脊突為穿刺點(diǎn)，在此處進(jìn)行穿刺。骼前上棘穿刺骼骨前上棘后約3cm處。骼后上棘穿刺此處骨質(zhì)較薄，容易穿刺，骨髓液較豐富，若作 骨髓培養(yǎng)，須取5ml10ml骨髓液。（二）骨髓穿刺時(shí)應(yīng)注意的問題骨髓

2、穿刺一般由臨床醫(yī)生自行操作，檢驗(yàn)人員也應(yīng)了解以下有關(guān)問題：穿刺前必須向患者作耐心的解釋，以盡量減少患者的恐懼心理。穿刺術(shù)必須嚴(yán)格無菌操作，盛骨髓的玻片不能接觸穿刺針頭。骨髓抽取量不宜過多，一般以少于0.2ml為最好。抽量過多可導(dǎo) 致外周血液稀釋，失去診斷意義。穿刺困難時(shí)，只要針芯有一小 滴骨髓即可涂片，若需要作細(xì)菌培養(yǎng)或其它檢查，也應(yīng)先抽少量 涂片，然后再抽所需量。干抽的意義干抽是指多部位多次穿刺均抽不出骨髓?？梢娪诠?髓造血細(xì)胞異常增生，如白血病、真性紅細(xì)胞增多癥等，更易見 骨髓纖維化癥?？隙ǜ沙闀r(shí)可用環(huán)鉆術(shù)取活檢標(biāo)本，同時(shí)將環(huán)鉆 針內(nèi)沾有的骨髓液涂片。骨髓液稀釋 此情況由于吸取骨髓液用力過

3、大或穿刺針頭刺入骨 髓血竇所致，可見涂片上骨髓小粒及脂肪滴減少，各階段細(xì)胞比 例失調(diào)，中性粒細(xì)胞分葉核桿狀核，無巨核細(xì)胞、組織嗜堿細(xì) 胞、網(wǎng)狀細(xì)胞等。穿刺部位的差異骨髓造血組織分布不均，且某些病變也可限于 局部，因此穿刺部位的不同，其結(jié)果可有顯著差異。如再生障礙 性貧血，特別是慢性再障，往往遠(yuǎn)心部位的骼骨最易首先受損， 棘突次之，而胸骨則可再生良好。即或是同一部位的骼骨也有灶 性增生現(xiàn)象，可致兩次穿刺結(jié)果不相同。某些疾病診斷陽性率也 因穿刺部位而異。多發(fā)性骨髓瘤、轉(zhuǎn)移癌時(shí)，均以病變部位穿刺 陽性率最高。因此對一些疑難病例最好是多部位穿刺。死亡病例若需作骨髓穿刺明確診斷時(shí)，應(yīng)在死亡后半小時(shí)內(nèi)進(jìn)

4、行。（三）骨髓穿刺成功的指標(biāo)在抽搐骨髓的瞬間，病人有特殊的疼痛感。在黃白色的骨髓小粒，多集中于片尾部。鏡下有骨髓內(nèi)特有的細(xì)胞，如巨核細(xì)胞、幼紅細(xì)胞、漿細(xì)胞及網(wǎng)狀細(xì)胞等。粒細(xì)胞的桿狀核與分葉核的比值大于外周血，網(wǎng)織紅細(xì)胞、有核細(xì)胞值均應(yīng)高于外周血。二、骨髓涂片骨髓涂片的制備是一項(xiàng)重要的工作，絕對不可忽視。有時(shí)骨髓取材良好，但由于玻片的不清潔或推片技術(shù)不佳，而不能得到滿意 的涂片。如涂片太厚細(xì)胞重疊則無法辨認(rèn)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)；涂片太薄， 細(xì)胞過于分散，則影響檢查速度和準(zhǔn)確性，甚至漏診或誤診。因此 必須制備薄厚適宜、分布均勻的涂片。（一）涂片制備取髓液一滴置于載玻片的一端，以邊緣平齊的推片（最好比載片稍

5、窄或磨去兩角）的一端放在骨髓液的前方，逐漸后移接觸骨髓液， 使骨髓沿推片散開，將推片與載片保持約30角，平穩(wěn)地向前推進(jìn) 至玻片的另一端，載片上便留下一薄層骨髓液膜。圖片制成后，在 空氣中揮動，使其迅速干燥，以免細(xì)胞皺縮。（二）涂片的要求及注意事項(xiàng)玻片要干凈，不能用手指觸摸玻片表面。一張良好的骨髓涂 片，要求厚薄適宜，頭、體、尾明顯，細(xì)胞分布均勻。骨髓內(nèi)纖維蛋白原含量高，易凝固，穿刺后應(yīng)立即涂片。應(yīng) 選擇有骨髓粒部分涂片。圖片干燥后用鉛筆在髓膜頭部寫上姓名、編號、日期。骨髓液一般不用抗凝劑，必要時(shí)可用肝素抗凝，但用量不宜 過多，否則影響細(xì)胞形態(tài)。三、骨髓涂片的染色骨髓中有核細(xì)胞量多，又有許多幼稚細(xì)胞，因此染色時(shí)應(yīng)注意以下 問題：涂片要新鮮，涂片后立即進(jìn)行染色，如不能立即染色，應(yīng)先 固定后保存，但也不宜保存過久，否則血漿蛋白質(zhì)分解，使 染色背景變藍(lán)，效果不佳。固定時(shí)間比血片稍長或另用無染料的甲醇或乙醇固定 5min10min。染液的用量應(yīng)多于染血片，但不宜過濃，染色時(shí)間要長些， 使幼稚細(xì)胞受色均勻，結(jié)構(gòu)清楚。最好用瑞特和吉氏混合染液染色。細(xì)胞染色時(shí)間長短除與氣溫有關(guān)外，也與細(xì)胞增生情況，各 批染液的性能有關(guān)，故要將染色中的涂片，在顯微鏡下觀 察，待顆粒清楚，胞核與胞質(zhì)分明，著色滿意后再終止染 色，然后再沖洗、待干、鏡檢。染色過深的涂片，可用瑞特染液滴加于涂片上馬上沖洗。過 淺可復(fù)染，