微生物的顯微鏡直接計數(shù)法_第1頁
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1、關(guān)于微生物的顯微鏡直接計數(shù)法第1頁,共11頁,2022年,5月20日,15點(diǎn)4分,星期三實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)使用目鏡測微尺和鏡臺測微尺在顯微鏡下測定微生物大小的方法。學(xué)習(xí)使用血球記數(shù)板測定微生物數(shù)量的方法。第2頁,共11頁,2022年,5月20日,15點(diǎn)4分,星期三實驗材料顯微鏡、目鏡測微尺、鏡臺測微尺、血球記數(shù)板、酵母菌懸液、蓋玻片、無菌滴管、吸水紙、擦鏡紙。第3頁,共11頁,2022年,5月20日,15點(diǎn)4分,星期三實驗步驟測定酵母菌細(xì)胞的大小測定的工具:目鏡測微尺 鏡臺測微尺目鏡測微尺每格實際代表的長度隨物鏡的放大倍數(shù)而改變,也會因使用不同的顯微鏡而產(chǎn)生誤差,因此在使用前必須用鏡臺測微尺進(jìn)行校正

2、。 目鏡測微尺的每格長度(m)=鏡臺測微尺10/目鏡測微尺第4頁,共11頁,2022年,5月20日,15點(diǎn)4分,星期三酵母菌顯微直接計數(shù) 方法:活菌計數(shù)法平板菌落計數(shù)法;總菌計數(shù)法血球計數(shù)板或霍瑟(Peroff Hausser)細(xì)菌計數(shù)板(二者原理和部件相同,只是厚薄不同而已)。 細(xì)胞數(shù)/ml=100小格內(nèi)細(xì)胞總數(shù)100400101000稀釋倍數(shù)細(xì)胞數(shù)/ml=80小格內(nèi)細(xì)胞總數(shù)80400101000稀釋倍數(shù)第5頁,共11頁,2022年,5月20日,15點(diǎn)4分,星期三取清潔無油的血球計數(shù)板,在計數(shù)室上面加蓋血蓋片。 取酵母菌液,搖勻,用滴管由蓋玻片邊緣滴一小滴,使菌液自行滲入,計數(shù)室內(nèi)不得有氣泡

3、。用4鏡觀察并將計數(shù)室移至視野中央。 在4鏡下計數(shù):計數(shù)4個(或5個)中格的平均值,然后求得每個中格的平均值。乘上16(或25)就得出計數(shù)區(qū)總菌數(shù),最后再換算到每mL菌液中的含菌數(shù)。注意事項:計上不計下,計左不計右。出芽計一半第6頁,共11頁,2022年,5月20日,15點(diǎn)4分,星期三實驗結(jié)果目鏡測微尺標(biāo)定結(jié)果: 目鏡下 倍物鏡目鏡測微尺每格長度是 m。菌號酵母的直徑大小測定結(jié)果目鏡測微尺格數(shù) 實際直徑/m12345均值第7頁,共11頁,2022年,5月20日,15點(diǎn)4分,星期三將顯微計數(shù)結(jié)果記錄于下表中。T表示五個中方格中的總菌數(shù);D表示菌液稀釋倍數(shù)。 各中格中菌數(shù)TD二室平均值個/ml12345第一室第二室第8頁,共11頁,2022年,5月20日,15點(diǎn)4分,星期三問題與討論為什么目鏡測微尺必須用鏡臺測微尺來校正?在顯微鏡下直接測定微生物數(shù)量有什么優(yōu)缺點(diǎn)?第9頁,共11頁,2022年,5月20日,15點(diǎn)4分,星期三本次實驗課結(jié)束請確保血球計數(shù)板清洗干凈!請值日生同學(xué)留下值日下周再見!第10頁,共11頁,202

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