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文檔簡介

1、關(guān)于影響血液凝固因素第1頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三影響血液凝固的因素實驗?zāi)康模?了解血液凝固的基本過程及影響血液凝固的一些因素實驗原理: 血液由流體狀態(tài)變?yōu)椴荒芰鲃拥哪z凍狀凝塊的過程稱為血液凝固。本質(zhì)是可溶性纖維蛋白原轉(zhuǎn)換為不可溶性纖維蛋白多聚體。纖維蛋白交織成網(wǎng),從而形成血凝塊。血液凝固過程: 凝血酶原酶復(fù)合物形成 凝血酶原 凝血酶 纖維蛋白質(zhì) 纖維蛋白第2頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三凝血酶原酶復(fù)合物的形成中有兩個途徑,內(nèi)源性和外源性。內(nèi)源性是指參與凝血的全部物質(zhì)均在血液中。外源性是指在凝血的過程中有其他組織的凝血物質(zhì)。Ca2+在

2、血液凝固中的作用:FII、FVII、FIX、FX這四個因子的生化特征是分子上都有Ca2+ 結(jié)合的部位,通過與Ca2+ 結(jié)合發(fā)生變構(gòu),暴露出與磷脂結(jié)合的部位來參與凝血。因此Ca2+在血凝過程中具有很重要的作用。血小板在凝血過程中的作用:(1)激活的血小板為凝血因子提供磷脂表面,參與內(nèi)外源性凝血途徑因子X和凝血酶原的激活;(2)血小板質(zhì)膜表面結(jié)合有許多凝血因子,如纖維蛋白原、FV、FXI、FXIII,這些因子的相繼激活可加速凝血過程;(3)血小板激活后,釋放顆粒的內(nèi)容物,如:顆粒內(nèi)纖維蛋白原的釋放,可增加纖維蛋白的形成,加固凝塊。第3頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三肝素在

3、凝血過程中的作用;肝素在體內(nèi)和體外都有抗凝作用,主要通過增加抗凝血酶的活性而發(fā)揮間接抗凝作用,使血液不凝。溫度對血液凝固的影響:適宜酶發(fā)揮效能的溫度(37左右)環(huán)境中,血凝速度加快。接觸面光滑程度對血液凝固的影響:接觸面越粗糙血液凝固速度越快第4頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三實驗材料動物: 家兔,23kg,雌雄均可藥品:20%烏拉坦溶液、肝素、草酸鉀、0.025mol/L氯化鈣溶液、肺組織浸液、富血小板血漿、少血小板血漿、生理鹽水、石蠟油器材:小燒杯、帶橡皮刷的玻璃棒或竹簽、清潔小試管9支、水浴裝置一套、冰塊、棉花、移液器(1ml、0.2ml)第5頁,共22頁,20

4、22年,5月20日,14點48分,星期三實驗方法1.觀察內(nèi)源性與外源性凝血的過程 取干凈小試管3支,編號后按表7-2加入各種成分搖勻后靜置,在加入0.025mol/LCaCl2溶液的同時開始計時,每15傾斜一次,觀察是否開始凝血,并分別記錄3支試管的血凝時間,比較3個管的血液凝固時間。比較血液凝固的時間(1與2比,2與3比),分析產(chǎn)生差別原因第6頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三2.觀察影響血液凝固的理化因素取小試管7支,編號并按表7-4準備后,取家兔頸動脈血,每管2ml立即計時,每15傾斜試管一次,以觀察血液是否凝固,至血液呈凝膠狀不再流動時記錄血凝時間。第7頁,共2

5、2頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三3.觀察纖維蛋白原在凝血過程中的作用取血10ml,注入兩個小燒杯中,一杯靜置,另一杯用試管刷輕輕攪拌,幾分鐘后試管刷上結(jié)成紅色血團,用水沖洗,觀察纖維蛋白的形狀,比較兩杯的血凝情況。第8頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三注意事項1每試管口徑大小及取血量應(yīng)基本一致,判斷試管傾斜角度(45)、間隔時間(30s/次)、標準(血液不見流動)都應(yīng)一致。2采血有先有后,計時不應(yīng)統(tǒng)一要求,各組和個人應(yīng)分別單獨計時。3棉花不要壓試管太緊,要松軟。4用石蠟油將試管表面全部潤滑后,將石蠟油倒入水池中。5取血前先準備好冰塊,取完血后立即把第3

6、號試管放入水浴鍋,4號試管放入裝有冰塊的燒杯中。第9頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三出血時間和凝血時間的測定實驗?zāi)康模簩W習出血時間和凝血時間測定的方法實驗原理: 出血時間是指從針刺使毛細血管破損,血液自行流出到自行停止的時間。當毛細血管受損時,受傷血管可立即引起收縮反應(yīng),從而局部血流減慢,有利于血小板粘著并聚集于血管的破損處,形成松軟止血栓 。接著部分血小板破裂,釋放出血小板因子,在局部迅速出現(xiàn)血凝塊,使出血停止。出血時間的測定可以反映毛細血管及血小板功能正常與否。 凝血時間是指血液流出體外至凝固所需要的時間。它反應(yīng)的是血液本身的凝血過程是否正常。凝血時間的延長常見于

7、一些凝血因子缺乏或異常的疾病。第10頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三實驗材料對象:人藥品 :75%酒精棉球器材:采血針、載玻片、濾紙條、秒表第11頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三實驗方法:1出血時間的測定(1)以75%酒精棉球消毒耳垂或中指指端腹側(cè),待酒精自然揮發(fā)后,用消毒采血針刺入上述部位23mm 深,讓血液自然流出,切勿擠壓,從血流流出算起計算時間。(2)每隔半分鐘用濾紙吸干流出的血流一次,直到吸不到血液為止。(3)記錄開始出血到止血的時間,或以濾紙上的血點數(shù)0.5分鐘來計算,其結(jié)果即為出血時間(分)。第12頁,共22頁,2022年,5月

8、20日,14點48分,星期三2凝血時間的測定(1)以75%的酒精棉球消毒,待酒精自然揮發(fā)后用消毒采血針刺入上述部位23mm深,讓血液自然流 出,用棉球輕輕拭去第一滴血液,待血液重新自然流出即開始計時。(2)將第二滴血置于玻片上,每隔半分鐘用大頭針挑血一次,直到挑起細纖維狀的血絲,即表示開始凝血.從開始流出到挑起細纖維狀的血絲所需要的時間即為凝血時間。第13頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三注意事項1各種用具嚴格消毒。2針刺手指或耳垂不宜過淺,深度23mm使血可自然流出為宜。如針刺部位深度不夠,流血量太少不能用力擠壓局部,應(yīng)重新針刺。3用濾紙吸血時,注意不要用濾紙觸及皮膚

9、傷口,以免影響結(jié)果的準確性。4測定凝血時,應(yīng)嚴格每隔半分鐘用大頭針挑血一次,不可太頻繁,同時每次挑動血液要按一定方向和順序進行,以免破壞纖維蛋白的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)而造成不凝的假象。第14頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三ABO血型的鑒定實驗?zāi)康模簩W習ABO血型鑒定的實驗方法,加深對ABO血型劃分的理解實驗原理:是指紅細胞膜上特異性抗原的類型。根據(jù)紅細胞膜上是否有A或B抗原可分為四種血型:A型、B型、AB型和O型。當凝集原遇到與其相對抗的凝集素會發(fā)生凝集。根據(jù)抗原抗體反應(yīng)原理,利用已知的血清凝集素(抗A凝集素、抗B凝集素)來確定未知的紅細胞膜上的凝集原(A凝集原和B凝集原)的種類

10、,從而鑒定ABO血型。 第15頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三+含B抗原的紅細胞抗B抗體紅細胞凝集反應(yīng)抗B第16頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三血型的抗原和抗體分布情況第17頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三實驗材料對象:人藥品:抗A抗體和抗B抗體,生理鹽水器材:采血針、凹玻片、75%酒精棉球、顯微鏡第18頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三實驗方法1取雙凹片一塊,用蠟筆在兩端分別寫上A、B字 樣,在兩側(cè)凹內(nèi)分別滴一滴抗A抗體和抗B抗體。2用鑷子夾取75%酒精棉球,消毒指端或耳垂及采血針,用采血針采一滴血,用玻片一角刮取少許血液在抗A抗體中搖勻,在再用玻片另一角刮取少許在抗B抗體中搖勻。3將玻片輕輕轉(zhuǎn)動數(shù)次,使血液血清充分混合,放置1015min后肉眼觀察有無凝集現(xiàn)象,若肉眼不能判斷是否凝集,應(yīng)放在顯微鏡下觀察,鑒定結(jié)果。 第19頁,共22頁,2022年,5月20日,14點48分,星期三Rh血型系統(tǒng) 人類紅細胞含有一種與恒河猴的紅細胞相同的凝集原稱為Rh 因子含Rh因子 Rh陽性不含Rh因子Rh陰性輸血原則1當給人體輸入血型不相容的血液時,在血管內(nèi)會發(fā)生紅細胞凝集反應(yīng),且在補體作用下, 凝集紅細胞破裂,發(fā)生溶血反應(yīng),甚至危及生命.因此血型鑒定是安

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