弧菌屬Vibrio pacini的檢驗

1、弧菌屬Vibrio pacini的檢驗1、菌體大小與形態(tài):G-，菌體短小，直或彎桿菌（0.5-0.8m 1.4-2.6m），以1根或幾根極生鞭毛運動，無莢膜，無芽孢。2、培養(yǎng)特性與代謝特征:多數(shù)在普通培養(yǎng)基上生長良好；兼性厭氧，具呼吸和發(fā)酵兩種代謝類型。所有的種可在25生長，多數(shù)在30生長。pH值6.0-9.0。Na+刺激所有種生長，并且為多數(shù)種所必需。氧化酶陽性。不產(chǎn)色或產(chǎn)黃色。可代謝D-葡萄糖和其他碳水化合物，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。還原硝酸鹽(產(chǎn)氣弧菌、梅氏弧菌和病海魚弧菌除外)。多數(shù)種發(fā)酵麥芽糖、甘露糖和海藻糖。多數(shù)對弧菌抑制劑O/129敏感。生態(tài)特性:發(fā)現(xiàn)于各種鹽度的水生生境，最常見于海、海岸、

2、海面和海生動物的消化道，有的在淡水中也有發(fā)現(xiàn)。有的是人病原菌，有的對海洋脊椎和無脊椎動物致病。 最重要的人病原菌：霍亂弧菌（V.cholerea）可引起霍亂；副溶血弧菌（V. parahaemolyticus）污染過的魚和貝類引起人食物中毒；創(chuàng)傷弧菌（V.vulnificus）可引起高致死性的敗血癥?；【鷻z驗方法：（一）霍亂弧菌 (V. cholerae)分型：霍亂弧菌血清學(xué)分型生物學(xué)性狀：革蘭陰性 彎曲弧形或逗點狀，首尾相接魚群樣平行排列單端極鞭毛，有普通菌毛和性菌毛懸滴觀察：細菌運動，非常活潑，呈穿梭樣或流星狀。培養(yǎng)特性：霍亂弧菌檢驗方法：鑒別試驗;霍亂紅試驗、粘絲試驗、O/129敏感試驗

3、、雞紅細胞凝集試驗、多粘菌素B敏感試驗、噬菌體裂解試驗、耐鹽培養(yǎng)試驗霍亂紅試驗：粘絲試驗：、O/129敏感試驗雞紅細胞凝集試驗多粘菌素B敏感試驗噬菌體裂解試驗V-P試驗?zāi)望}試驗（二）副溶血弧菌（V. parahaemolyticus）具嗜鹽性，為海產(chǎn)魚弧菌病的病原菌，一般在20-28引起魚發(fā)病。人類食用或接觸污染本菌的魚、器具類等引致食物中毒。1、形態(tài)特征培養(yǎng)特性：系革蘭陰性菌 呈弧狀、桿狀、絲狀等形態(tài)。菌體一端有單鞭毛、運動活潑、無莢膜、無芽孢2、培養(yǎng)特性兼性厭氧,菌落中等大小，培養(yǎng)24h時直徑約2mm。最適生長溫度是30-37，42仍可生長。生長pH 5.6-9.6(8.0)。代時10-2

4、0 min，增殖速度是大腸桿菌和志賀氏菌的2倍。多數(shù)菌株對弧菌抑制劑O/129不敏感，是弧菌屬中少有的例外。生長繁殖時必須有鈉離子。在含2.5% NaCl培養(yǎng)基上生長良好，不含NaCl的培養(yǎng)基不能生長，具嗜鹽性。培養(yǎng)特征：綿羊血平板不溶血， TCBS瓊脂上的菌落發(fā)綠, 利用甘露醇。臨床意義：鑒定依據(jù)：致病性與毒力因子致病菌株多數(shù)能裂解人、兔等紅細胞，可用溶血反應(yīng)區(qū)分致病與非致病株，稱為神奈川(Kanagawa)試驗。溶血性菌株：產(chǎn)生耐熱直接溶血素(Thermostable Direct Haemolysin, TDH)，屬穿孔毒素，為不含糖或脂的蛋白質(zhì)，MW32-44kD，與霍亂弧菌非01群及擬態(tài)弧菌產(chǎn)生的TDH相似。在神奈川試驗陰性的菌株中，還發(fā)現(xiàn)一種不耐熱的毒素磷酸脂酶A2，是本菌的毒力因子。人食用本菌污染的海魚、貝類等常引致食物中毒，潛伏期2-36h，表現(xiàn)為水樣腹瀉、嘔吐及發(fā)熱，一般能很快康復(fù)。4、微生物學(xué)診斷取病變組織接種嗜鹽菌選擇培養(yǎng)基或SS平板。挑取可疑菌落進一步作生化試驗，神奈川試驗檢測其毒素，也可用PCR技術(shù)檢測毒素基因。由副溶血弧菌引起的對蝦紅腿病，可取病變組織50g，剪碎后加入50ml滅菌的氯化鈉慶大霉素增菌液，增菌18 h，在液面下無菌吸取3ml菌液