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微生物病原性球菌實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)膿汁標(biāo)本中病原性球菌的判斷實(shí)驗(yàn)?zāi)康模骸⒄莆詹≡郧蚓男螒B(tài)和培育特色。、熟習(xí)病原性球菌的分別和判斷程序。實(shí)驗(yàn)資料:1)標(biāo)本:膿汁2)培育基:血瓊脂平板、液體培育基3)其余:試管、載玻片、酒精燈、接種環(huán)等實(shí)驗(yàn)方法1)化膿性球菌常用標(biāo)本:化膿部位膿液或分泌物、痰液、咽鑷子、血液、腦脊液、泌尿道分泌液。依據(jù)病變部位,無(wú)菌收集,并置于無(wú)菌容器中。2)分別程序1)用無(wú)菌接種環(huán)取資料少量,拇指推開(kāi)皿蓋。2)在點(diǎn)燃的酒精燈周邊操作。先平行劃線拇指端和食指端平皿直徑的三分之一,旋轉(zhuǎn)平皿90度,接種環(huán)滅菌,此為第一區(qū)。用無(wú)菌接種環(huán)從第一區(qū)帶出細(xì)菌作為第二區(qū)的開(kāi)始,再連續(xù)劃線,大概劃平皿面積的四分之一,再次滅菌接種環(huán),再旋轉(zhuǎn)90度,此區(qū)為第二區(qū)。第三區(qū)方法同第二區(qū)。第三區(qū)與第四區(qū)之間,接種環(huán)不滅菌直接劃線劃滿平皿其余地區(qū)。3)在平皿底部用玻璃鉛筆注明班級(jí)、姓名、日期等信息。置于37攝氏度溫箱,皿底向上,培育18到24小時(shí),備用。4)待血瓊脂平板第四區(qū)上出現(xiàn)菌落,用無(wú)菌接種環(huán)挑取平皿中菌落在點(diǎn)燃的酒精燈周邊接種在液體培育基,用于增菌并編號(hào)。5)試管上用玻璃鉛筆注明班級(jí)、姓名、日期等信息。置于37攝氏度溫箱,皿底向上,培育18到24小時(shí),備用。3)判斷程序)取各液體培育基中的菌液經(jīng)過(guò)涂片→干燥→固定→染色(HE)→顯微鏡察看。依據(jù)染色結(jié)果分為:紫色的革蘭染色陽(yáng)性菌:葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌1/3微生物病原性球菌實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)紅色的革蘭染色陰性菌:淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌)對(duì)革蘭染色陽(yáng)性菌(葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌)進(jìn)行溶血實(shí)驗(yàn)。依據(jù)結(jié)果分為:完滿透明溶血環(huán):葡萄球菌、鏈球菌草綠色溶血環(huán):肺炎鏈球菌)對(duì)出現(xiàn)完滿透明溶血環(huán)的細(xì)菌做過(guò)氧化氫酶實(shí)驗(yàn),依據(jù)結(jié)果分為:陽(yáng)性:葡萄球菌陰性:鏈球菌)對(duì)革蘭染色陽(yáng)性菌(淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌)進(jìn)行分解麥芽糖實(shí)驗(yàn),依據(jù)結(jié)果分為:不分解麥芽糖:淋病奈瑟菌分解麥芽糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣:腦膜炎奈瑟菌4)確診程序依據(jù)判斷程序得出的初步診療,再進(jìn)行確診1)葡萄球菌確實(shí)診①血漿凝結(jié)酶試驗(yàn),判斷致病性葡萄球菌②耐熱核酸酶試驗(yàn),用于檢測(cè)金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的耐熱核酸酶③甘露醇發(fā)酵試驗(yàn),金黃色葡萄球菌可發(fā)酵甘露醇,該試驗(yàn)為陽(yáng)性2)鏈球菌確實(shí)診①桿菌肽試驗(yàn)敏感試驗(yàn),出現(xiàn)抑菌環(huán)者即可初步判斷為A群鏈球菌②膽鹽溶菌試驗(yàn),肺炎鏈球菌陽(yáng)性,草綠色鏈球菌陰性③血清學(xué)判斷試驗(yàn),檢測(cè)鏈球菌群的特異性抗原,出現(xiàn)凝聚者為陽(yáng)性3)肺炎鏈球菌確實(shí)診①莢膜腫脹試驗(yàn),表現(xiàn)陽(yáng)性則為肺炎鏈球菌②菊糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn),肺炎鏈球菌能夠發(fā)酵菊糖③膽鹽溶菌試驗(yàn),肺炎鏈球菌陽(yáng)性4)淋病奈瑟菌確實(shí)診①革蘭染色后鏡檢若發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞內(nèi)有革蘭陰性雙球菌5)腦膜炎奈瑟菌確實(shí)診2/3微生物病原性球菌實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)①分解葡萄糖、麥芽糖、產(chǎn)生少量酸②氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性③血清凝聚試驗(yàn)陽(yáng)性判斷圖解陽(yáng)性:完滿溶血:葡萄球菌葡萄球葡萄球菌過(guò)氧化氫酶實(shí)溶血完滿溶血:驗(yàn)鏈球菌G+鏈球菌實(shí)驗(yàn)陰性:
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