大小鼠眼眶取血方法附圖

大小鼠眼眶取血方法附圖第一頁(yè)，共二十二頁(yè)。交流提綱實(shí)驗(yàn)環(huán)境實(shí)驗(yàn)材料動(dòng)物處理取血容量時(shí)間安排具體操作.血樣處理問(wèn)題討論大鼠PK取血第二頁(yè)，共二十二頁(yè)。環(huán)境材料B毛細(xì)管

0.9mm×100mm，看個(gè)人習(xí)慣使用，經(jīng)常一管三斷，30mm/管，棄去中間段。EP管加入0.1%肝素鈉（＞150U/mg）0.1mL，均勻潤(rùn)濕，50℃以下干燥；適用1mL全血的抗凝，效果良好。取血時(shí)必須提前檢查管的質(zhì)量，標(biāo)號(hào)分組，適當(dāng)多備。C抗凝EP管D計(jì)時(shí)工具A通風(fēng)臺(tái)面長(zhǎng)時(shí)間操作，透氣通風(fēng)寬敞臺(tái)面，便于多組多步驟同時(shí)操作Page

3第三頁(yè)，共二十二頁(yè)。Page

4動(dòng)物處理實(shí)驗(yàn)期間，補(bǔ)充體液，目前常規(guī)為：取血后灌胃給予等統(tǒng)計(jì)生理鹽水/葡萄糖溶液。動(dòng)物體重要求一般不低于250g給藥前禁食12-24h，給藥前提前0.5-1.0h按0.5-1.0%（V/W）給水實(shí)驗(yàn)之后，外用消炎藥涂布眼部第四頁(yè)，共二十二頁(yè)。Page

5容量時(shí)間注射一般呈現(xiàn)降低趨勢(shì)，給藥后較短時(shí)間內(nèi)采集的點(diǎn)數(shù)適當(dāng)增加；灌胃存在Cmax-tmax，需通過(guò)考察tmax，根據(jù)一般原則，適當(dāng)調(diào)整時(shí)間間隔。取血容量時(shí)間安排選點(diǎn)一般原則預(yù)實(shí)驗(yàn)建立藥物性質(zhì)給藥途徑分布相3-4個(gè)點(diǎn)吸收相3-4個(gè)點(diǎn)吸收相3-4個(gè)點(diǎn)

一般12h內(nèi)取血不超過(guò)動(dòng)物質(zhì)量2.0%（v/w）

每次0.25-0.5mL第五頁(yè)，共二十二頁(yè)。Page

6大鼠眼眶取血流程6樣品搖勻1.將大鼠按壓在鼠籠上，拇+中+食指固定住頭部3.右手持毛細(xì)管從眼內(nèi)眥部，與鼠面成45

℃夾角，旋轉(zhuǎn)刺入2.緊握頸部，壓迫頸兩側(cè)，使眼突出，眶后靜脈叢充血4.固定身體，壓住后肢，放松手指，調(diào)整毛細(xì)管，流暢出血。5.取血完成，立即除去頸部壓力，將采血器拔出，按壓止血。6血樣管輕輕混勻，防止凝血、溶血。2壓迫頸部3旋轉(zhuǎn)刺入4固定采血5去管止血1左手保定第六頁(yè)，共二十二頁(yè)。1左手保定Step1.將大鼠按壓在鼠籠上，拇+中+食指固定住頭部Step1A建議籠子內(nèi)放置重物防止搖晃；B一定要帶手套；C開(kāi)始必須牢牢固定住頭部

頭部亂動(dòng)，扎位置容易得偏離，且易被咬傷；D可在此時(shí)將大鼠取血側(cè)的胡須剪掉，防止接觸凝血。Page

7大鼠眼眶取血流程第七頁(yè)，共二十二頁(yè)。2壓迫頸部Step2.緊握頸部，壓迫頸兩側(cè)，使眼突出，眶后靜脈叢充血Step2A可用管試探性觸碰眼球是否已經(jīng)突出；B此時(shí)大鼠反抗掙扎最厲害，保證抓緊的同時(shí)，不能太過(guò)，使其窒息死亡。Page

8大鼠眼眶取血流程第八頁(yè)，共二十二頁(yè)。3旋轉(zhuǎn)刺入Step3.眼內(nèi)眥部，45

℃夾角，旋轉(zhuǎn)刺入，旋轉(zhuǎn)退出。Step3A針頭斜面先向眼球，刺入后再轉(zhuǎn)一定角度使斜面對(duì)著眼眶后界；B刺入深度，小鼠約2-3mm，大鼠約4-5mm。當(dāng)感到有阻力時(shí)即停止推進(jìn)，同時(shí)，管退出約0.1-0.5mm，邊退邊旋轉(zhuǎn)；C不要使用管的尖銳鋒利端插入，易留玻璃碎片在眼內(nèi)，造成持續(xù)傷害，使得下次反抗增加；D拿管的手要保持干凈，帶血漬的手指不要接觸管的兩端，易造成凝血，可用醇水擦洗。Page

9大鼠眼眶取血流程第九頁(yè)，共二十二頁(yè)。4固定采血Step4.固定身體，壓住后肢，放松手指，調(diào)整毛細(xì)管，流暢出血。Step4A一般血流速度快，證明插破了眼眶動(dòng)脈，如果血流速度慢，證明要調(diào)整毛細(xì)管的位置，血液都流到組織中了，沒(méi)順毛細(xì)管流出來(lái)；B出血過(guò)程中如遇到出血不暢不用著急拔毛細(xì)管可以調(diào)整一下毛細(xì)管的扎入位置或深或淺的挑正一下血會(huì)重新流出；C如看見(jiàn)血液已經(jīng)在毛細(xì)管中凝固必須迅速拔除毛細(xì)管，再搽干凈眼睛，重新?lián)Q管扎針；D等到出血后將力道轉(zhuǎn)移到大鼠的身體上大鼠出現(xiàn)亂動(dòng)的情況很大的一部分力是他的后肢使出來(lái)的保證她的后肢無(wú)法亂蹬就能很好的保定大鼠，然后將中指和食指處解除一半的力道，可以保證血液的順暢Page

10大鼠眼眶取血流程第十頁(yè)，共二十二頁(yè)。5去管止血Step5.取血完成，立即除去頸部壓力，將采血器拔出，按壓止血Step5A當(dāng)?shù)玫剿璧难亢?，即除去加于頸部的壓力，同時(shí)，將采血器拔出，以防止術(shù)后穿刺孔出血。B盡量把眼睛周?chē)难獫n搽干凈，避免結(jié)塊影響下次取血。6樣品搖勻Step6.血樣管輕輕混勻，防止凝血、溶血Page

11大鼠眼眶取血流程第十一頁(yè)，共二十二頁(yè)。大鼠眼眶取血流程Page

12第十二頁(yè)，共二十二頁(yè)。大鼠眼眶取血流程Page

13第十三頁(yè)，共二十二頁(yè)。大鼠眼眶取血流程Page

14第十四頁(yè)，共二十二頁(yè)。Page

15第十五頁(yè)，共二十二頁(yè)。大鼠眼眶取血流程Page

16第十六頁(yè)，共二十二頁(yè)。Page

17大鼠眼眶取血流程第十七頁(yè)，共二十二頁(yè)。Page

18大鼠眼眶取血流程第十八頁(yè)，共二十二頁(yè)。Page

19大鼠眼眶取血流程第十九頁(yè)，共二十二頁(yè)。大鼠眼眶取血流程Page

20第二十頁(yè)，共二十二頁(yè)。大鼠眼眶取血流程Page

21第二十一頁(yè)，共二十二頁(yè)。血樣處理

血樣處理血清不抗凝血漿肝素鈉抗凝A全血37℃水浴0.5~1h，短時(shí)間內(nèi)（<30min）低速（<4000）離心（10min