組織胚胎學理論 第1章緒論課件

普通高等教育國家級十一五規(guī)劃教材

《組織學與胚胎學》理論課件組織學第1章緒論石玉秀中國醫(yī)科大學

一、組織學的研究內容

組織學（histology）：研究機體微細結構及其

相關功能的科學。組織上皮組織結締組織肌肉組織神經組織細胞細胞間質器官和系統(tǒng)（細胞外基質）細胞：是機體形態(tài)結構與功能的基本單位。組織：由細胞和細胞間質(又稱細胞外基質)組成的群體結構，是構成機體器官的基本成分。器官：具有一定的形態(tài)結構，并執(zhí)行特定的生理功能。系統(tǒng)：由一些結構連續(xù)、功能相關的器官組合而成，完成連續(xù)的生理活動。細胞-組織-器官-系統(tǒng)人體器官分類－組織學特征實質性器官中空性中央：大空腔表面：被模如：消化腺、淋巴器官、內分泌腺、腎臟等。如：心血管、消化管、呼吸道等內部：實質－行使功能管壁：分3?4層組織學結構觀察組織學結構光鏡結構－用光學顯微鏡觀察的結構（LM）(lightmicroscope,LM簡稱光鏡)電鏡結構－電子顯微鏡下觀察的結構（EM）(electronmicroscope,EM簡稱電鏡）又稱超微結構(ultrastructure)

蘇木精

伊紅

堿性染料酸性染料

染成紅色

（嗜酸性）細胞核中的染色質、細胞質中的核糖體

細胞質細胞間質成份

染成藍色（嗜堿性）常用染色方法：HE染色（Hematoxylin）（Eosin）HE染色嗜堿性：可使細胞核內的染色質及細胞質內的核糖體等結構染成藍紫色。嗜酸性：可使多數(shù)細胞的細胞質染成粉紅色。中性：與兩種染液親合力都不強。組織結構的嗜色性嗜堿性嗜酸性普通光學顯微鏡是觀察組織細胞微細結構最常用的工具，分為光學部分機械部分起放大作用光鏡的分辨率約為0.2μm可放大1500倍左右（lightmicroscope，LM）幾種特殊顯微鏡術

（1）相差顯微鏡(phasecontrastmicroscope)用于觀察生活細胞和末經染色細胞的形態(tài)結構。神經干細胞培養(yǎng)(2)熒光顯微鏡(fluorescencemicrscope)

是用以觀察細胞、組織內熒光物質的分布。

神經球CLSM圖像HumanneuronalprecursorcellsCLSM海馬MR、GR共存

(三)電子顯微鏡技術

（electronmicroscope,EM）

透射電鏡(transmissionelectronmicroscope,TEM)觀察細胞內部結構分辨率為0.1-0.2nm,可放大幾萬－幾十萬倍掃描電鏡（scanningelectronmicroscope,SEM)觀察組織或細胞表面的立體結構冰凍蝕刻（freezeetchingmethod）觀察細胞斷裂表面形態(tài)結構分析電鏡X–射線顯微分析術（X–raymicroanalysis）研究細胞、組織內元素種類分布和含量掃描電鏡與照片SEMSEM1.纖毛2.微絨毛冰凍蝕刻細胞

冷凍斷裂腎小球右下線粒體

冰凍蝕刻照片分析電鏡－X線微區(qū)分析圖片分析電鏡X線微區(qū)分析糖類顯示法－PAS反應：過碘酸—希夫反應(periodicacidSchiffreaction，PAS)：檢測組織或細胞中有無多糖存在。

原理：多糖PA氧化醛Schiff試劑紫紅色沉淀(四)組織化學和細胞化學技術

PAS反應陽性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在

PAS陽性小腸上皮組織細胞化學染色圖片酶細胞化學神經元ACP酶陽性

脂類顯示法蘇丹Ⅲ

脂類顯示法蘇丹Ⅲ

鋨酸髓鞘染色

核酸顯示法

利用抗原（antigen,Ag），抗體（antibody）特異結合的原理，用已知抗體檢測未知抗原的一種方法。免疫細胞化學原理免疫細胞化學－PAP法免疫細胞化學－ABC法(六)原位雜交術原位雜交(insituhybridization)是一種敏感性高、特異性強的，能在組織細胞原位進行的核酸分子雜交技術。常用的標記物有兩種：1、放射性同位素，如3H、14C、

32P、35S、125I，2、為非放射性物質，如地高辛等。

非放射性原位雜交海馬GAP－43mRNA(七)放射自顯影術放射自顯影術(autoradiograph)旨在追蹤某些物質在體內、組織或細胞中的分布與代謝徑路。放射自顯影甲狀腺125I同位素注入取材制標本涂核乳膠暗室曝光顯影、定影染色LM觀察(八)組織培養(yǎng)和組織工程組織工程基本方法示意圖A獲取組織B分離、培養(yǎng)種子細胞C制備三維支架D將種子細胞種植于支架E將細胞-支架復合物植入組織缺損處細胞培養(yǎng)－神經干細胞培養(yǎng)

(九)組織細胞定量術1．顯微分光光度術應用顯微分光光度計(microspectrophotometer)對組織和細胞內化學成分進行定量分析。2．形態(tài)計量術運