抗原抗體及其結合反應演示文稿

抗原抗體及其結合反應演示文稿第一頁，共三十五頁?？乖贵w及其結合反應第二頁，共三十五頁。第一節(jié)抗原一、抗原的特性免疫原性、免疫反應性特異性二、用于免疫測定的抗原分類天然、合成多肽、基因重組第三頁，共三十五頁。第二節(jié)抗體一、抗體的特性特異性、多樣性、免疫原性二、用于免疫測定的抗體分類多克隆、單克隆、基因工程三、抗體產生的規(guī)律初次應答、再次應答第四頁，共三十五頁。第三節(jié)抗原抗體結合反應的原理抗原抗體反應:指抗原與相應抗體之間所發(fā)生的特異性結合反應。抗原表位與抗體高變區(qū)間的結構互補抗原表位與抗體高變區(qū)的緊密接觸抗原抗體之間的結合力親水膠體轉化為疏水膠體物質基礎第五頁，共三十五頁。一、抗原抗體結合力靜電引力范德華引力氫鍵疏水作用力抗原抗體結合力示意圖第六頁，共三十五頁。１.靜電引力（electrostaticforces）抗原和抗體分子帶有相反電荷的氨基和羧基基團之間相互吸引的力。又稱為庫倫引力第七頁，共三十五頁。2.范德華引力（VonderWaalsforces）

抗原和抗體相互接近時，由于分子的極化作用而出現的引力。

范德華引力<靜電引力第八頁，共三十五頁。3.氫鍵結合力供氫體上的氫原子與受氫體原子間的引力供氫體：羧基、氨基和羥基受氫體：羧基氧、羧基碳和肽鍵氫鍵具有高度的方向性第九頁，共三十五頁。4.疏水作用力（疏水鍵）

兩個疏水基團在水溶液中相接觸時，由于對水分子排斥而趨向聚集力。第十頁，共三十五頁。二、抗原抗體的親和力和親合力抗原抗體親和力示意圖第十一頁，共三十五頁?？乖贵w親合力示意圖第十二頁，共三十五頁。三、液相中抗原抗體的結合反應抗原抗體復合物

(疏水膠體)可見反應電解質

抗原

(親水膠體)抗體﹢第十三頁，共三十五頁。四、固相表面抗原抗體的結合反應1.抗原抗體結合反應時間2.反應體積3.解離速度4.固相化抗原或抗體的構象第十四頁，共三十五頁。第四節(jié)抗原抗體結合反應的特點特異性可逆性比例性階段性第十五頁，共三十五頁。

親水膠體轉化為疏水膠體示意圖親水膠體疏水膠體可見反應第十六頁，共三十五頁。一、特異性抗原抗體反應特異性示意圖第十七頁，共三十五頁。特異性示意圖第十八頁，共三十五頁。交叉反應（crossreactions）抗原抗體交叉反應示意圖第十九頁，共三十五頁。二、可逆性可逆性：抗原與相應抗體結合成復合物后，在一定條件下又可解離為游離抗原與抗體的特性影響因素：抗體對相應抗原的親合力環(huán)境因素對復合物的影響第二十頁，共三十五頁。

【Ag】+【Ab】【Ag-Ab】

解離后抗原抗體仍保持原有特性。一定條件：低pH、高濃度鹽等。Ab1第二十一頁，共三十五頁。比例性：抗原與抗體發(fā)生可見反應需遵循一定的量比關系最適比：沉淀物最多時的抗原抗體的濃度比或量比等價帶:

抗原與抗體分子比例合適范圍前帶：

抗體過量后帶：

抗原過量三、比例性第二十二頁，共三十五頁。

抗原抗體反應比例性示意圖第二十三頁，共三十五頁。四、階段性第一階段：特異性結合階段第二階段：反應可見階段第二十四頁，共三十五頁。第五節(jié)影響抗原抗體結合反應的因素抗原抗體本身因素反應基質因素實驗環(huán)境因素第二十五頁，共三十五頁。一、抗原抗體本身因素抗原:理化性狀、表位種類和數目抗體:來源、特異性、親和性、效價第二十六頁，共三十五頁。來源R型Ab：等價帶寬，易出現可見反應。H型Ab：等價帶窄，易出現前帶或后帶McAb:不宜用于凝集和沉淀反應。濃度：是相對Ag而言，比例要合適，故實驗前

需滴定，以求最適Ag與Ab比例。

特異性與親和力：關鍵因素，選擇特異性與親和力高的Ab。第二十七頁，共三十五頁。二、反應基質因素非特異性因素，如蛋白、鹽、藥物等第二十八頁，共三十五頁。三、實驗環(huán)境因素電解質:0.85%生理鹽水或緩沖液酸堿度:pH6~8溫度:37℃最適第二十九頁，共三十五頁。(一）電解質作用：中和膠體表面電荷，破壞水化層，使Ag-Ab聚集。常用：0.85%NaCl溶液，緩沖液、Ca2+、Mg2+等。第三十頁，共三十五頁。（二）酸堿度

抗原抗體反應中一般以pH6-8為宜，有補體參與的反應最適pH為7.2-7.4酸凝集：當pH為3左右時，接近細菌Ag的等電點，可出現非特異性凝集。第三十一頁，共三十五頁。（三）溫度

最適溫度為37℃或室溫18-25℃為宜。若溫度高于56℃，可導致已結合了的抗原抗體復合物解離，甚至分子變性。第三十二頁，共三十五頁。抗原抗體反應類型反應類型實驗技術結果判斷凝集反應直接凝集試驗觀察凝集現象間接凝集試驗同上抗球蛋白試驗同上沉淀反應液相沉淀試驗觀察沉淀，檢測濁度免疫電泳技術觀察掃描沉淀峰、沉淀弧補體參與的反應補體溶血試驗觀察測定溶血現象補體結合試驗同上第三十三頁，共三十五頁。反應類型實驗技術結果判斷中和反應病毒中和試驗檢測病毒感染性毒素中和試驗檢測外毒素毒性標記免疫反應熒光免疫技術檢測熒光現象放射免疫技術檢測放射性強度酶免疫技術檢測酶底物顯色