普魯卡因半數(shù)致死量(LD50)的測定

普魯卡因半數(shù)致死量(LD50)的測定實(shí)驗(yàn)?zāi)康睦斫釲D50的概念，掌握LD50的測定方法及計(jì)算。測定LD50的意義LD50反映藥物的毒性大小。安全性：治療指數(shù)＝LD50/ED50比值大安全性大。安全范圍：當(dāng)藥物的治療效應(yīng)與致死效應(yīng)曲線不平行時，要看ED95和LD5的距離，距離越大越安全。測定LD50的方法很多：寇氏法、目測法、概率單位法、bliss法（加權(quán)概率單位法）等本實(shí)驗(yàn)用的是簡化概率單位法

y=a+bx

方法與步驟預(yù)實(shí)驗(yàn)：摸索上下限

，用少量動物

Dm：摸索出使全部動物死亡的最小劑量Dn：摸索無一動物死亡的最大劑量

標(biāo)記：方法與步驟分組：隨機(jī)分成5個劑量組，每組2只小白鼠。給藥：腹腔注射給藥，統(tǒng)一標(biāo)記

頭黃0.11ml/10g尾黃0.26ml/10g背黃0.15ml/10g白色0.35ml/10g肢黃0.20ml/10g觀察：用藥30min后,觀察小白鼠死亡情況,并記錄各組動物的死亡數(shù)。結(jié)果與統(tǒng)計(jì)劑量(mg/kg)對數(shù)劑量(x)動物數(shù)(n)死亡數(shù)死亡率(%)機(jī)率單位(y)1110.82.04452147.72.16943196.92.29424262.52.41915350.02.5441y=a+bx用直線回歸法求a,b,r注意事項(xiàng)1.動物應(yīng)隨機(jī)分組。2.各小組的動物標(biāo)記要統(tǒng)一。3.劑量由小到大，注射量要準(zhǔn)。抗癲癇藥的抗電驚厥作用實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察苯巴比妥鈉的抗電驚厥作用。原理用一定強(qiáng)度的電流或電壓刺激小白鼠，使其產(chǎn)生全身強(qiáng)直性驚厥，作為癲癇大發(fā)作的病理模型。儀器正面:電源開關(guān)、記時開關(guān)、啟動/停止開關(guān)頻率(HZ):單波寬(ms):0.6×500反面:插上交流輸出插頭(另一端夾鼠耳)電壓開關(guān)、電壓表、電壓旋鈕置于

100-120V方法與步驟:1.篩選：取4只小白鼠用夾子夾住小鼠雙耳，按啟動開關(guān)，觀察小鼠是否有四期產(chǎn)生:即潛伏-強(qiáng)直-陣攣-恢復(fù)。3.觀察:30min后用相同的電流、電壓再刺激，觀察有何變化2.分組及腹腔給藥：甲組－苯巴比妥鈉0.1ml/10g

乙組－生理鹽水0.1ml/10g注意事項(xiàng)夾子要沾水四期產(chǎn)生要明顯用藥前后電壓要一致No驚厥數(shù)未驚厥數(shù)合計(jì)

對照組苯巴比妥組合計(jì)4.結(jié)果處理:用直接概率法小白鼠激怒反應(yīng)小鼠豎立、兩前肢立地對峙、互相撕咬實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察氯丙嗪對躁狂動物的安定作用儀器正面:電源開關(guān)、記時開關(guān)、啟動/停止開關(guān)

頻率(HZ):1波寬(ms):0.6×500反面:插上交流輸出插頭(另一端夾住激怒箱)電壓開關(guān)、電壓表、電壓旋鈕置于

60-80V左右方法與步驟:篩選:挑選一對在一定的時間內(nèi)和固定的電壓中能產(chǎn)生咬斗的小鼠(10-180s)用藥:甲乙兩鼠分別腹腔注入1％氯丙嗪

0.1ml/10g觀察:30min后用同樣的電壓再刺激，觀察兩鼠產(chǎn)生咬斗的時間是否延長(觀察180s)注意事項(xiàng)要求兩只小白鼠性別相同，體重相似。實(shí)驗(yàn)前用砂紙擦清導(dǎo)電銅絲并清除銅絲上的大便。10s前產(chǎn)生咬斗或3min后仍不產(chǎn)生咬斗，應(yīng)重新挑選2只小白鼠用藥前后的電壓要一致。?結(jié)果統(tǒng)計(jì):用配對t檢驗(yàn)法No出現(xiàn)激怒時間(秒)藥前(s)藥后(s)差值(s)12345t=df=P一、LD50測定隨機(jī)分成五個劑量組：

頭黃0.11ml/10g2只

背黃0.15ml/10g2只

尾黃0.20ml/10g2只

肢黃0.26ml/10g2只

白色

0.35ml/10g2只1小時后觀察各組死亡數(shù)。二、抗電驚厥（4只）1.篩選，四期明顯2.苯巴比妥鈉0.1ml/10g2只生理鹽水0.1ml/10g2只3.30min后用同樣的電壓，再刺激三、激怒反應(yīng)（2只）1.篩選，10-180s產(chǎn)生打斗2.1％氯丙嗪0.1ml/10g2只3.30min后用同樣的電壓再刺激，觀察兩鼠產(chǎn)生咬斗的時間是否延長。

各劑量組