細(xì)菌和病毒的遺傳課件

第七章細(xì)菌和病毒的遺傳浙江大學(xué)1遺傳學(xué)第九章第七章細(xì)菌和病毒的遺傳浙江大學(xué)1遺傳學(xué)第九章本章重點(diǎn)1．細(xì)菌影印法研究。2．細(xì)菌和病毒的四種遺傳分析方法：轉(zhuǎn)化、接合、性導(dǎo)、轉(zhuǎn)導(dǎo)。3．掌握F+、F–、F'、Hfr×F+的特點(diǎn)。4．理解和掌握中斷雜交和重組作圖的原理。5．噬菌體結(jié)構(gòu)和基因重組特點(diǎn)。浙江大學(xué)2遺傳學(xué)第九章本章重點(diǎn)1．細(xì)菌影印法研究。浙江大學(xué)2遺傳學(xué)第九章細(xì)菌和藍(lán)綠藻：

一個(gè)線條狀或環(huán)狀染色體(單倍體結(jié)構(gòu))；無典型的有絲分裂和減數(shù)分裂；染色體傳遞和重組方式與真核生物不同。病毒：

比細(xì)菌更簡(jiǎn)單；在寄主細(xì)胞內(nèi)以集團(tuán)形式產(chǎn)生；屬于只有一條染色體的單倍體。E.coliT4Phage浙江大學(xué)3遺傳學(xué)第九章細(xì)菌和藍(lán)綠藻：病毒：E.coliT4Phage浙江大第一節(jié)細(xì)菌和病毒遺傳

研究的意義浙江大學(xué)4遺傳學(xué)第九章第一節(jié)細(xì)菌和病毒遺傳

研究的意義浙江大學(xué)4遺傳1.大?。杭?xì)胞較小、長(zhǎng)約1~2

(1＝1/1000mm)、寬約0.5；2.結(jié)構(gòu)：鞭毛、細(xì)胞壁、質(zhì)膜、間體、核質(zhì)體、核糖體3.遺傳物質(zhì)：?jiǎn)蝹€(gè)主染色體、一個(gè)或多個(gè)小染色體(質(zhì)粒)4.涂布和繁殖：每個(gè)細(xì)胞在較短時(shí)間內(nèi)(如一夜)能裂殖到107個(gè)子細(xì)胞

成為肉眼可見的菌落或克隆(clone)。一、細(xì)菌：浙江大學(xué)5遺傳學(xué)第九章1.大小：細(xì)胞較小、長(zhǎng)約1~2一、細(xì)菌：浙江大學(xué)5遺5.

生理特性突變：①.營(yíng)養(yǎng)缺陷型：

喪失合成某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)能力，不能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；

原養(yǎng)型：野生菌株則可在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。用不同的選擇性培養(yǎng)基

測(cè)知突變的特性。②.

抗性突變型：

如抗藥性或抗感染性。例如：青霉素（penr）抗性突變的菌落。培養(yǎng)基中加有青霉素浙江大學(xué)6遺傳學(xué)第九章5.生理特性突變：②.抗性突變型：培養(yǎng)基中浙江大學(xué)測(cè)定突變的方法──影印法：

黎德伯格等（LederbergJ.和LederbergE.M.,1952）設(shè)計(jì)。LederbergJ.,1958Nobel獎(jiǎng)獲得者，發(fā)現(xiàn)細(xì)菌轉(zhuǎn)導(dǎo)和接合無鏈霉素吸附細(xì)菌絲絨印在母板上再印在選擇培養(yǎng)基上鏈霉素篩選出抗鏈霉素的菌系從模板中挑出抗性和敏感菌系浙江大學(xué)7遺傳學(xué)第九章測(cè)定突變的方法──影印法：LederbergJ.,195病毒分類：

寄主：動(dòng)物、植物、細(xì)菌等；

遺傳物質(zhì)：DNA或RNA。二、病毒：

單倍體，僅一條染色體。病毒

蛋白質(zhì)外殼核酸。煙草花葉病毒腺病毒T4噬菌體愛滋病病毒RNADNADANRNA浙江大學(xué)8遺傳學(xué)第九章病毒分類：二、病毒：煙草花葉病毒腺病毒T4噬菌噬菌體對(duì)于分子生物學(xué)研究具有重要意義。浙江大學(xué)9遺傳學(xué)第九章噬菌體對(duì)于分子生物學(xué)研究具有重要意義。浙江大學(xué)9遺傳學(xué)1．世代周期短：

大腸桿菌（E.coli）20分鐘可繁殖一代。2．便于管理和生化分析：

個(gè)體小，一般在1至幾之間，操作管理方便。三、細(xì)菌和病毒在遺傳研究中的優(yōu)越性：浙江大學(xué)10遺傳學(xué)第九章1．世代周期短：三、細(xì)菌和病毒在遺傳研究中的優(yōu)越性：浙江3．便于研究基因突變：

裸露的DNA分子（有的病毒為RNA分子），容易受環(huán)境條件的影響而發(fā)生突變；單倍體生物，不存在顯性掩蓋隱性問題，隱性突變也能表現(xiàn)出來。4．便于研究基因的作用：

影印培養(yǎng)，易檢出營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變，有利于從生化角度來研究基因的作用。5．便于研究基因重組：

細(xì)菌具有轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)和接合作用，可以進(jìn)行精密的遺傳分析。浙江大學(xué)11遺傳學(xué)第九章3．便于研究基因突變：浙江大學(xué)11遺傳學(xué)第九章6.便于研究基因結(jié)構(gòu)、功能及調(diào)控機(jī)制：

細(xì)菌和病毒的遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單，易于進(jìn)行基因定位、結(jié)構(gòu)分析和分離，基因的表達(dá)調(diào)控也適于采用生理生化的方法進(jìn)行深入研究。7.便于進(jìn)行遺傳操作：

染色體結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，沒有組蛋白和其它蛋白的結(jié)合，更宜于進(jìn)行遺傳工程的操作。浙江大學(xué)12遺傳學(xué)第九章6.便于研究基因結(jié)構(gòu)、功能及調(diào)控機(jī)制：浙江大學(xué)12第二節(jié)噬菌體的遺傳分析浙江大學(xué)13遺傳學(xué)第九章第二節(jié)噬菌體的遺傳分析浙江大學(xué)13遺傳學(xué)第九章1.結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單：

蛋白質(zhì)外殼、核酸、某些碳水化合物、脂肪等。2.多樣性的原因：外殼的蛋白質(zhì)種類、染色體類型和結(jié)構(gòu)。3.兩大類：

①烈性噬菌體：T噬菌體系列（T1~T7）；

②溫和性噬菌體:P1和λ噬菌體。一、噬菌體的結(jié)構(gòu)：T4噬菌體從大腸桿菌中釋放浙江大學(xué)14遺傳學(xué)第九章1.結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單：一、噬菌體的結(jié)構(gòu)：T4噬菌體從浙江大學(xué)㈠、烈性噬菌體：

1.

結(jié)構(gòu)大同小異，外貌一般呈蝌蚪狀：頭部：雙鏈DNA分子的染色體；

T偶列噬菌體

頸部：中空的針狀結(jié)構(gòu)及外鞘；

尾部：由基板、尾針和尾絲組成。浙江大學(xué)15遺傳學(xué)第九章㈠、烈性噬菌體：浙江大學(xué)15遺傳學(xué)第九章2.T偶列噬菌體的侵染過程（如T4噬菌體）：

尾絲固定于大腸桿菌，遺傳物質(zhì)注入

破壞寄主細(xì)胞遺傳物質(zhì)

合成噬菌體遺傳物質(zhì)和蛋白質(zhì)

組裝許多新的子噬菌體

溶菌酶裂解細(xì)菌

釋放出大量噬菌體。T4噬菌體侵染大腸桿菌的生活周期浙江大學(xué)16遺傳學(xué)第九章2.T偶列噬菌體的侵染過程（如T4噬菌體）：尾絲固定于㈡、溫和性噬菌體：例如λ和P1噬菌體，λ和P1各代表一種略有不同的溶源性類型。λ噬菌體結(jié)構(gòu)浙江大學(xué)17遺傳學(xué)第九章㈡、溫和性噬菌體：例如λ和P1噬菌體，λ和P1各代表λ噬菌體

①.λ噬菌體：噬菌體侵入后，細(xì)菌不裂解附在E.coli染色體上的gal和bio位點(diǎn)間的attλ座位上

整合到細(xì)菌染色體，并能阻止其它λ噬菌體的超數(shù)感染。λ噬菌體特定位點(diǎn)的整合1.溶源性噬菌體的生活周期：浙江大學(xué)18遺傳學(xué)第九章①.λ噬菌體：噬菌體侵入后，細(xì)菌不裂解附在E.co②.P1噬菌體：

不整合到細(xì)菌的染色體上，而是獨(dú)立存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。浙江大學(xué)19遺傳學(xué)第九章②.P1噬菌體：浙江大學(xué)19遺傳學(xué)第九章裂解途徑溶原途徑o

原噬菌體：整合到宿主基因組中的噬菌體。僅少數(shù)基因活動(dòng)，表達(dá)出阻礙物關(guān)閉其它基因。原噬菌體經(jīng)誘導(dǎo)可轉(zhuǎn)變?yōu)榱倚允删w

裂解途徑。浙江大學(xué)20遺傳學(xué)第九章裂解途徑溶原途徑o原噬菌體：整合到浙江大學(xué)20遺傳2.P1和λ噬菌體的特性：①．P1和λ各代表不同的溶源性類型：

P1噬菌體：侵入后并不整合到細(xì)菌的染色體上，獨(dú)立存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)；

λ噬菌體：通過交換整合到細(xì)菌染色體上。②．溶源性細(xì)菌分裂

兩個(gè)子細(xì)胞：P1噬菌體復(fù)制則使每個(gè)子細(xì)胞中至少含有一個(gè)拷貝；λ噬菌體隨細(xì)胞染色體復(fù)制而復(fù)制，細(xì)胞中有一個(gè)拷貝。③．共同特點(diǎn)：核酸既不大量復(fù)制，也不大量轉(zhuǎn)錄和翻譯。浙江大學(xué)21遺傳學(xué)第九章2.P1和λ噬菌體的特性：浙江大學(xué)21遺傳學(xué)第九章P1和λ噬菌體的生活周期特性浙江大學(xué)22遺傳學(xué)第九章P1和λ噬菌體的生活周期特性浙江大學(xué)22遺傳學(xué)第九章1.

噬菌體遺傳性狀分為兩類：

形成的噬菌斑形狀：

指噬菌斑大小、邊緣清晰度、透明程度。

寄主范圍：指噬菌體感染和裂解的菌株范圍。二、T2噬菌體的基因重組與作圖：浙江大學(xué)23遺傳學(xué)第九章1.噬菌體遺傳性狀分為兩類：二、T2噬菌體的基因重組與作①.

正常噬菌體r

+：

噬菌斑小而邊緣模糊。

r

–突變體（rapidlysis，速溶性）：

噬菌斑大而邊緣清楚。②.

寄主范圍突變體：

指能克服噬菌體抗性的突變體。

例：T2h+噬菌體：只侵染大腸桿菌B株

半透明噬菌斑。

T2h

–突變株：能利用B株和B/2株

透明噬菌斑。2．T2噬菌體的研究最為廣泛：

T2phage浙江大學(xué)24遺傳學(xué)第九章①.正常噬菌體r+：2．T2噬菌體的研究最為廣泛：T2

h

–和h+均能感染B株

可用T2兩個(gè)親本h

–r+和h+r

–同時(shí)感染B株。h

–r+(透明，小)×h+r

–

(半透明，大)

↓同時(shí)感染B菌株

獲得噬菌體子代

親本型：h

–r+，h+r

–

重組型：h

–r

–，h+r+E.coliB株③．雙重感染：浙江大學(xué)25遺傳學(xué)第九章h–和h+均能感染B株可用T2E.coliB

將親本型和重組型混合子代

↓感染混合有B和B/2菌株的培養(yǎng)基

↓h

–r+(親)：噬菌斑透明、小，邊緣模糊h+r

–

(親)：噬菌斑半透明、大，邊緣清楚h

–r

–

(重組)：噬菌斑透明、小，邊緣清楚h+r+(重組)：噬菌斑半透明、小，邊緣模糊④．重組值計(jì)算：

重組值

=

重組噬菌斑數(shù)/總噬菌斑數(shù)×100%

=[(h+r++h

–r

–)/(h+r

–+h

–r++h+r++h

–r

–)]×100%去掉%即可作為圖距。h+r

-浙江大學(xué)26遺傳學(xué)第九章將親本型和重組型混合子代④．重組值計(jì)算：h+r-浙江⑤．不同速溶菌的突變型在表現(xiàn)型上不同，可分別寫成ra、rb、

rc等，用rx–h+×rx+h

–獲得試驗(yàn)結(jié)果列于下表：雜交組合各基因型（%）重組值

r-h+r+h-r+h+

r-h-

rah+×ra+h-34.042.012.012.024.0/100=24%

rbh+×rb+h-

32.056.0

5.9

6.412.3/100.3=12.3%

rch+×rc+h-39.059.0

0.7

0.9

1.6/99.6=1.6%

分別作出ra、rb、rc與h的三個(gè)連鎖圖:浙江大學(xué)27遺傳學(xué)第九章⑤．不同速溶菌的突變型在表現(xiàn)型上不同，可分別寫成ra、rb、再做雜交：rcrb+

×rc+rb

↓結(jié)果表明:rc–

rb的重組值>rb–

h∴

h位于rb及rc之間，排列順序rc–

h–

rb。由于T2噬菌體的連鎖圖是環(huán)狀的，所以2、3排列都對(duì)。四種可能的基因排列連鎖圖:1

2

3

4

hrcrarb浙江大學(xué)28遺傳學(xué)第九章再做雜交：rcrb+×rc+rb四種可能的基因排列連三、噬菌體的基因重組與作圖：

凱澤（Kaiser

A.

D.,

1955）最先進(jìn)行λ噬菌體的重組作圖試驗(yàn)。紫外線照射處理

獲5個(gè)噬菌體突變系，產(chǎn)生不同噬菌斑：

s系：小噬菌斑；

mi系：微小噬菌斑；

c系：完全清亮的噬菌斑；

co1系：中央環(huán)之外部分表現(xiàn)清亮的噬菌斑；

co2系：更濃密的中央環(huán)噬菌斑。浙江大學(xué)29遺傳學(xué)第九章三、噬菌體的基因重組與作圖：凱澤（KaiserA.凱澤利用λ噬菌體sco1mi與噬菌體+++進(jìn)行雜交作圖：遺傳圖譜浙江大學(xué)30遺傳學(xué)第九章凱澤利用λ噬菌體sco1mi與噬菌體+++進(jìn)行雜交作圖：遺浙第三節(jié)細(xì)菌的遺傳分析浙江大學(xué)31遺傳學(xué)第九章第三節(jié)細(xì)菌的遺傳分析浙江大學(xué)31遺傳學(xué)第九章概念：某些細(xì)菌通過其細(xì)胞膜攝取周圍供體的染色體片段，將此外源DNA片段通過重組整合到自己染色體組的過程。

1928年，格里費(fèi)斯（GriffithF.）在肺炎雙球菌中發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。1944年，阿委瑞（AveryO.T.）進(jìn)行肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化試驗(yàn)；證實(shí)遺傳物質(zhì)是DNA；轉(zhuǎn)化是細(xì)菌交換基因的方法之一。

一、轉(zhuǎn)化（transformation）：浙江大學(xué)32遺傳學(xué)第九章概念：某些細(xì)菌通過其細(xì)胞膜攝取周圍供體的染色體一、轉(zhuǎn)化（t轉(zhuǎn)化的條件：細(xì)菌活躍攝取外源DNA分子；具備重組程序所必需的酶。轉(zhuǎn)化三種細(xì)菌：肺炎雙球菌；枯草桿菌；流感嗜血桿菌。轉(zhuǎn)化的兩個(gè)例子：①.

用兩個(gè)帶有不同抗性的肺炎雙球菌群體混合

可以

發(fā)現(xiàn)帶有雙抗性的細(xì)菌。

細(xì)菌裂解DNA殘留其它細(xì)菌攝取轉(zhuǎn)化。②.

枯草桿菌活細(xì)胞表面分泌DNA，可被其它細(xì)胞攝取。浙江大學(xué)33遺傳學(xué)第九章轉(zhuǎn)化的條件：細(xì)菌活躍攝取外源DNA分子；浙江大學(xué)33遺㈠、供體與受體的互作：①.

轉(zhuǎn)化片斷的大?。?/p>

肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化：DNA片斷至少有800bp；

枯草桿菌的轉(zhuǎn)化：DNA片斷至少有16000bp。②.

供體DNA分子存在的數(shù)目：

供體DNA分子數(shù)目與特定基因的成功轉(zhuǎn)化有關(guān)。

鏈霉素抗性基因轉(zhuǎn)化：每個(gè)細(xì)胞含有10個(gè)DNA分子之前，

抗性轉(zhuǎn)化體數(shù)目一直與DNA分子

存在數(shù)目成正比。

原因：細(xì)菌的細(xì)胞壁或細(xì)胞膜上有固定數(shù)量的DNA接受

座位，故一般細(xì)菌攝取的DNA分子數(shù)<10個(gè)。浙江大學(xué)34遺傳學(xué)第九章㈠、供體與受體的互作：浙江大學(xué)34遺傳學(xué)第九章③．受體的生理狀態(tài)：感受態(tài)是處于剛停止DNA合成、而蛋白質(zhì)合成繼續(xù)活躍進(jìn)行時(shí)的狀態(tài)?；钴S合成的蛋白質(zhì)可使細(xì)菌細(xì)胞壁易于接受轉(zhuǎn)化DNA。

只有感受態(tài)受體細(xì)胞才能攝取并轉(zhuǎn)化外源DNA，而這種感受態(tài)也只能發(fā)生在細(xì)菌生長(zhǎng)周期的某一時(shí)間范圍內(nèi)。

浙江大學(xué)35遺傳學(xué)第九章③．受體的生理狀態(tài)：浙江大學(xué)35遺傳學(xué)第九章㈡、轉(zhuǎn)化DNA的攝取和整合過程：①.

結(jié)合與穿入：

DNA分子結(jié)合在接受座位上(可逆)，可被DNA酶降解；接受座位飽和性。

DNA攝取(不可逆)，不受DNA酶破壞。

穿入后，由外切酶或DNA移位酶降解其中一條鏈。

②.聯(lián)會(huì)：

按各個(gè)位點(diǎn)與其相應(yīng)的受體DNA片段聯(lián)會(huì)。親緣關(guān)系越遠(yuǎn)，聯(lián)會(huì)越小、轉(zhuǎn)化的可能性越小。浙江大學(xué)36遺傳學(xué)第九章㈡、轉(zhuǎn)化DNA的攝取和整合過程：②.聯(lián)會(huì)：浙江大學(xué)③．整合(重組)：

是指單鏈的轉(zhuǎn)化DNA與受體DNA對(duì)應(yīng)位點(diǎn)的置換穩(wěn)定地進(jìn)入到受體DNA。對(duì)同源DNA具有特異性。異源DNA，視親緣關(guān)系遠(yuǎn)近也可發(fā)生不同頻率整合。浙江大學(xué)37遺傳學(xué)第九章③．整合(重組)：浙江大學(xué)37遺傳學(xué)第九章黎德伯格等用枯草桿菌進(jìn)行轉(zhuǎn)化和重組試驗(yàn)：

DNA片段進(jìn)入受體細(xì)胞后，可與受體染色體發(fā)生重組。緊密連鎖的兩個(gè)基因有較多的機(jī)會(huì)在同一個(gè)DNA片段中同時(shí)整合到受體染色體中。浙江大學(xué)38遺傳學(xué)第九章黎德伯格等用枯草桿菌進(jìn)行轉(zhuǎn)化和重組試驗(yàn)：浙江大學(xué)38遺三者并發(fā)轉(zhuǎn)化的頻率高，故這3個(gè)基因是連鎖的，其中his2和tyr1連鎖最為緊密：trp2his2tyr1341340

單交換時(shí)，染色體開環(huán)易降解，故不存在單交換類型；只有雙交換和偶數(shù)的多交換才有效。浙江大學(xué)39遺傳學(xué)第九章三者并發(fā)轉(zhuǎn)化的頻率高，故這3個(gè)基因是連鎖的，trp2hi二、接合（conjugation）：1.

概念：是指原核生物的遺傳物質(zhì)從供體（donor）轉(zhuǎn)移到受體（receptor）內(nèi)的過程。特點(diǎn)：需通過細(xì)胞的直接接觸。

浙江大學(xué)40遺傳學(xué)第九章二、接合（conjugation）：1.概念：是指原核生物不同營(yíng)養(yǎng)缺陷型的大腸桿菌：A菌株：Met-bio-

thr+leu+，

需加甲硫氨酸和生物素。B菌株：Met+bio+thr-leu-，

需加蘇氨酸和亮氨酸。

A菌株和B菌株?duì)I養(yǎng)缺陷型，

不能在基本培養(yǎng)上生長(zhǎng)。

AB菌株混合培養(yǎng)，在完全

培養(yǎng)基上，幾小時(shí)后離心，涂

布基本培養(yǎng)基上，長(zhǎng)出原養(yǎng)型

（Met+bio+thr+leu+）菌落。2．實(shí)例：黎德伯格和塔特姆（1946年）：浙江大學(xué)41遺傳學(xué)第九章不同營(yíng)養(yǎng)缺陷型的大腸桿菌：2．實(shí)例：黎德伯格和塔特姆（194這種原養(yǎng)型細(xì)胞如何出現(xiàn)？A菌株B菌株

A、B菌株分別培養(yǎng)在基本培養(yǎng)基上

一邊加壓和吸引使培養(yǎng)液充分混合結(jié)果任何一臂的培養(yǎng)基上均未長(zhǎng)出原養(yǎng)型細(xì)菌?！嘀苯咏佑|(接合)是原養(yǎng)型細(xì)胞出現(xiàn)的必要條件。海斯（HayesW.,1952）證明：接合過程是一種單向

轉(zhuǎn)移，A菌株遺傳物質(zhì)

B菌株，從供體（donor）到受體（receptor）。濾片大分子可通過，細(xì)菌不能通過U型管的實(shí)驗(yàn)（Davis，1950）浙江大學(xué)42遺傳學(xué)第九章這種原養(yǎng)型細(xì)胞如何出現(xiàn)？A菌株B菌株A、B菌株分別培養(yǎng)在⑴．F因子：致育因子（性因子），是一種附加體。

攜帶F因子的菌株稱為供體菌或雄性，用F＋表示。未攜帶F因子的菌株為受體菌或雌性，用F－表示。㈠、F因子及F＋向F－的轉(zhuǎn)移：⑵．F因子的組成：

染色體外遺傳物質(zhì)，環(huán)狀DNA；40~60個(gè)蛋白質(zhì)基因；2~4個(gè)/細(xì)胞(雄性內(nèi))。浙江大學(xué)43遺傳學(xué)第九章⑴．F因子：致育因子（性因子），是一種附加體。㈠、F因子及⑶．F因子的三種狀態(tài)：

以大腸桿菌為例：①．沒有F因子，即F－；

②．一個(gè)自主狀態(tài)F因子，即F＋；

③．一個(gè)整合到自己染色體內(nèi)的F因子，即Hfr。浙江大學(xué)44遺傳學(xué)第九章⑶．F因子的三種狀態(tài)：浙江大學(xué)44遺傳學(xué)第九章⑷．自主狀態(tài)時(shí)

F因子獨(dú)立進(jìn)行分裂。浙江大學(xué)45遺傳學(xué)第九章⑷．自主狀態(tài)時(shí)浙江大學(xué)45遺傳學(xué)第九章⑸．F因子的傳遞：

帶F因子的細(xì)菌較少。具有F因子的菌株可以作為供體。

∵F因子中有形成F性傘毛（Fpilus）的基因接合管

F＋細(xì)胞中的F因子由接合管向F－傳遞

F－受體變成F＋。

F＋×F－：先形成接合管，F(xiàn)因子的DNA邊轉(zhuǎn)移邊復(fù)制，F(xiàn)－細(xì)胞

F＋細(xì)胞。浙江大學(xué)46遺傳學(xué)第九章⑸．F因子的傳遞：F＋×F－：先形成接合管，浙江大在Hfr×F－結(jié)合時(shí)，細(xì)菌染色體由一小段單鏈的F因子為前導(dǎo)而轉(zhuǎn)移到F-受體

邊進(jìn)入邊合成。一般僅小部分細(xì)菌染色體能夠轉(zhuǎn)入，接合中斷

受體細(xì)胞為F－，F(xiàn)因子仍留在供體內(nèi)。

F因子整合到細(xì)菌染色體上（F＋Hfr細(xì)胞），其繁殖與細(xì)菌染色體同步進(jìn)行。

此時(shí)，細(xì)菌基因的重組頻率增加4倍

以上，∴染色體上整合有F因子的菌株，

稱為Hfr菌株。Hfr×F－㈡、Hfr細(xì)胞的形成及染色體的轉(zhuǎn)移：浙江大學(xué)47遺傳學(xué)第九章在Hfr×F－結(jié)合時(shí)，細(xì)菌染色體由一小段單鏈的F因子降解單交換雙交換受體內(nèi)基因子供體外基因子部分二倍體：

當(dāng)F＋或Hfr的細(xì)菌染色體進(jìn)入F－后，在一個(gè)短時(shí)期內(nèi)，F(xiàn)－細(xì)胞內(nèi)的某些位點(diǎn)就會(huì)成為二倍體DNA。cb+a+c+ba部分二倍體中發(fā)生交換:

單數(shù)交換：打開環(huán)狀染色體，產(chǎn)生一個(gè)線性染色體，這種

細(xì)胞是不能成活的。

偶數(shù)交換：產(chǎn)生可遺傳的重組體和片段。浙江大學(xué)48遺傳學(xué)第九章降解單交換雙交換受體內(nèi)供體外基因子部分二倍體：c部分二倍體中㈢、中斷雜交試驗(yàn)及染色體連鎖圖：

50年代，雅科（JacobF.）和沃爾曼（WollmanE.）：

中斷雜交試驗(yàn)：發(fā)現(xiàn)接合時(shí)遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移是直線進(jìn)行。其方法為：⑴．Hfr菌株與F－菌株混合培養(yǎng)。Hfr菌株：strs

a+b+c+d+對(duì)鏈霉素敏感F-菌株：

strr

a-b-c-d-

抗鏈霉素⑵．不同時(shí)間取樣攪拌器中斷雜交稀釋含鏈霉素完全培養(yǎng)基殺死Hfr細(xì)菌抗str細(xì)菌菌落影印培養(yǎng)法：鑒定a+b+c+d+各基因轉(zhuǎn)移時(shí)間。浙江大學(xué)49遺傳學(xué)第九章㈢、中斷雜交試驗(yàn)及染色體連鎖圖：50年代，雅科（Jaco⑶．實(shí)例：Hfr菌株：蘇氨酸(thr+)、亮氨酸(leu+)、抗疊氮化物(azir)、抗T1噬菌體(tonr)、半乳糖(gal

b+)、乳糖(lac+)。F-菌株：thr-、leu-、azis、tons、

galb-、lac-型。①．8分鐘時(shí)：thr+進(jìn)入F-細(xì)胞；8.5分鐘時(shí)：leu+進(jìn)入F-細(xì)胞；②．9分鐘時(shí)：出現(xiàn)疊氮化物抗性

的菌落，少數(shù)azir基因進(jìn)入F-細(xì)胞；③．11分鐘時(shí)：出現(xiàn)抗噬菌體T1的F-細(xì)菌；④．18和25分鐘時(shí)：分別出現(xiàn)乳糖

和半乳糖發(fā)酵基因，即lac+和gal

b+進(jìn)入F-細(xì)胞。88.591118浙江大學(xué)50遺傳學(xué)第九章⑶．實(shí)例：①．8分鐘時(shí)：thr+進(jìn)入F-細(xì)胞；891118浙①．重組體中各標(biāo)志基因進(jìn)入F-細(xì)胞中時(shí)間不同，達(dá)到最高水平的時(shí)間也不同；②．隨時(shí)間的推遲，某個(gè)基因的重組率增加；一定程度后，重組率便不再增加。如：10’tonr首次出現(xiàn)，15’時(shí)40%、25’后80%?！郒fr中基因是按一定的線性順序依次進(jìn)入F-菌株的。

浙江大學(xué)51遺傳學(xué)第九章①．重組體中各標(biāo)志基因進(jìn)浙江大學(xué)51遺傳學(xué)第九章

thr

leu

azi

ton

lac

gal

FO

88.59

11

18

25

時(shí)間(分鐘)

以基因出現(xiàn)的時(shí)間為標(biāo)準(zhǔn)

作出E.coli的遺傳連鎖圖。浙江大學(xué)52遺傳學(xué)第九章thrleuazitonlac⑷．用一種大腸桿菌的不同Hfr菌株進(jìn)行中斷雜交實(shí)驗(yàn)，作出連鎖圖，其基因向F-細(xì)胞轉(zhuǎn)移的順序不同。───────────────────────────Hfr類型

原點(diǎn)基因轉(zhuǎn)移順序───────────────────────────

HfrH

Othrprolacpurgalhisglythi

1

Othrthiglyhisgalpurlacpro

2

Opro

thrthiglyhisgalpurlac

3

Opurlacprothrthiglyhisgal

AB312

Othithrprolacgurgalhisgly───────────────────────────

轉(zhuǎn)移的順序是不是隨機(jī)？例如：thrthigly。浙江大學(xué)53遺傳學(xué)第九章⑷．用一種大腸桿菌的不同Hfr菌株進(jìn)行中斷雜交實(shí)驗(yàn)，作出浙Hfr1和HfrAB312菌系的中斷雜交試驗(yàn)及其連鎖圖：開始開始結(jié)束結(jié)束浙江大學(xué)54遺傳學(xué)第九章Hfr1和HfrAB312菌系的中斷雜交試驗(yàn)及其連鎖圖：開始差異：不同Hfr菌株轉(zhuǎn)移的原點(diǎn)(O)和轉(zhuǎn)移方向不同。進(jìn)一步說明F因子和細(xì)菌染色體都是環(huán)狀。

浙江大學(xué)55遺傳學(xué)第九章差異：不同Hfr菌株轉(zhuǎn)移浙江大學(xué)55遺傳學(xué)第九章㈣、重組作圖：

兩基因轉(zhuǎn)移時(shí)間間距＜2分鐘時(shí)，中斷雜交法的圖距不夠精確，應(yīng)采用傳統(tǒng)的重組作圖法。

例：二個(gè)基因緊密連鎖:

lac-（乳糖不發(fā)酵）ade-（腺嘌呤缺陷型）完全培養(yǎng)基混合培養(yǎng)完全培養(yǎng)基（無腺嘌呤、加鏈霉素）

F-ade+lac+

未發(fā)生交換F-ade+lac-基因間發(fā)生交換Hfrlac+ade+（strs）×F-lac-ade-（strr）F-ade+菌落加乳糖浙江大學(xué)56遺傳學(xué)第九章㈣、重組作圖：完全培養(yǎng)基混合培養(yǎng)完全培養(yǎng)基F-ade+l基因間重組頻率：

兩個(gè)位點(diǎn)間的時(shí)間約為1分鐘，約相當(dāng)于20%的重組值。浙江大學(xué)57遺傳學(xué)第九章基因間重組頻率：浙江大學(xué)57遺傳學(xué)第九章三、性導(dǎo)（sexduction）:

性導(dǎo)：指接合時(shí)由F'

因子所攜帶的外源DNA整合到細(xì)菌染色體的過程。

F因子整合過程：可逆：發(fā)生環(huán)出時(shí)，F(xiàn)因子又可重新離開染色體。整合環(huán)出浙江大學(xué)58遺傳學(xué)第九章三、性導(dǎo)（sexduction）:性導(dǎo)：指接合時(shí)由F'Adelberg和Burns(1959)：

F因子偶爾在環(huán)出時(shí)不夠準(zhǔn)確，會(huì)攜帶出染色體上的一些基因，這種因子稱為F'

因子。

F'

因子攜帶染色體的節(jié)段大?。簭囊粋€(gè)標(biāo)準(zhǔn)基因到半個(gè)細(xì)菌染色體。浙江大學(xué)59遺傳學(xué)第九章Adelberg和Burns(1959)：浙江大學(xué)59

F’因子使細(xì)菌帶有某些突出的特點(diǎn)：⑴．F'

因子轉(zhuǎn)移基因頻率極高，如同F(xiàn)+因子轉(zhuǎn)移頻率；⑵．F'

因子自然整合率極高，并且整合在一定的座位上?！邤y帶與細(xì)菌染色體一樣的同源區(qū)段；而正常F因子可在不同座位整合。浙江大學(xué)60遺傳學(xué)第九章F’因子使細(xì)菌帶有某些浙江大學(xué)60遺傳學(xué)第九章雅科和阿代爾伯格發(fā)現(xiàn)：

特殊的Hfr菌株能把lac+等位基因高頻率地轉(zhuǎn)移到Flac-受體中?！撷伲甽ac基因位于遠(yuǎn)端，中斷雜交實(shí)驗(yàn)中只有1/1000重組率；

②．由F'

攜帶lac+基因進(jìn)入受體后可在lac位點(diǎn)上形成部分二倍體F'

lac+/lac-。浙江大學(xué)61遺傳學(xué)第九章雅科和阿代爾伯格發(fā)現(xiàn)：浙江大學(xué)61遺傳學(xué)第九章性導(dǎo)在大腸桿菌遺傳研究中的作用：①．分離出大量F'

因子（每個(gè)F'

因子攜帶有不同大腸桿菌基因）

利用不同基因在一起的并發(fā)性導(dǎo)的頻率來作圖；②．通過性導(dǎo)產(chǎn)生部分二倍體

確定等位基因位置、顯隱性關(guān)系；③.性導(dǎo)形成的部分二倍體可用作互補(bǔ)測(cè)驗(yàn)確定兩個(gè)突變類型是否屬于同一個(gè)基因。浙江大學(xué)62遺傳學(xué)第九章性導(dǎo)在大腸桿菌遺傳研究中的作用：浙江大學(xué)62遺傳學(xué)第九并發(fā)性導(dǎo)(co-sexduction):

是建立遺傳圖的另一手段，兩個(gè)位點(diǎn)必須密切相連才能處在同一個(gè)F'

因子上。

獲得兩個(gè)位點(diǎn)間重組率

每個(gè)片段的連鎖群。性導(dǎo)作圖法與轉(zhuǎn)導(dǎo)作圖法相同。浙江大學(xué)63遺傳學(xué)第九章并發(fā)性導(dǎo)(co-sexduction):浙江大學(xué)63遺

1.

概念：指以噬菌體為媒介進(jìn)行的細(xì)菌遺傳物質(zhì)重組，是細(xì)菌遺傳物質(zhì)傳遞和交換方式之一。

2.

特點(diǎn)：

以噬菌體為媒介

細(xì)菌的一段染色體被錯(cuò)誤地包裝在噬菌體的蛋白質(zhì)外殼內(nèi)通過感染轉(zhuǎn)移到另一個(gè)受體細(xì)胞內(nèi)。

∵

感染細(xì)菌的能力決定于噬菌體的

蛋白質(zhì)外殼。四、轉(zhuǎn)導(dǎo)（transduction）：浙江大學(xué)64遺傳學(xué)第九章1.概念：指以噬菌體為媒介進(jìn)行的細(xì)菌遺傳物質(zhì)重組，四、轉(zhuǎn)3.

例如：

黎德伯格與津德（1951）發(fā)現(xiàn)鼠傷寒沙門氏菌中轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象。

⑴.將兩個(gè)沙門氏菌的營(yíng)養(yǎng)缺陷型進(jìn)行雜交：phe-

trp-

tyr-

met+

his+

×

phe+

trp+

tyr+

met-

his-

↓混合培養(yǎng)在基本培養(yǎng)基發(fā)現(xiàn)原養(yǎng)型的菌落

頻率為1/105

浙江大學(xué)65遺傳學(xué)第九章3.例如：浙江大學(xué)65遺傳學(xué)第九章⑵.

產(chǎn)生上述結(jié)果的原因:

①.是否屬于恢復(fù)突變?

高頻率出現(xiàn)不可能是回復(fù)突變。

②.是否屬于接合、性導(dǎo)?

戴維斯U型管試驗(yàn)(防止細(xì)胞直接接觸)

結(jié)果也獲得野生型

重組體，排除由于接合或性導(dǎo)而產(chǎn)生基因重組可能性。

③.是否屬于轉(zhuǎn)化?

結(jié)果表現(xiàn)為不受DNA酶的影響，排除了由于DNA片斷通過濾片

經(jīng)轉(zhuǎn)化實(shí)現(xiàn)基因重組可能性。⑶.

唯一可能的結(jié)論是：這種重組通過一種過濾性因子實(shí)現(xiàn)。這種過濾性因子稱為FA，不受DNA酶的影響。FA為噬菌體P22（溶源性）。浙江大學(xué)66遺傳學(xué)第九章⑵.產(chǎn)生上述結(jié)果的原因:②.是否屬于接合、性導(dǎo)?③.㈠、普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)：轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒同源重組錯(cuò)誤包裝(1/1000機(jī)率)轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒：把細(xì)菌染色體片段包裝在噬菌體蛋白質(zhì)外殼內(nèi)而產(chǎn)生

的假噬菌體（不包含噬菌體的遺傳物質(zhì)）。１.作用：可轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)菌染色體組的任何部分。浙江大學(xué)67遺傳學(xué)第九章㈠、普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)：轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒同源重組錯(cuò)誤包裝(1/1000機(jī)率)

以普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體P1為例，測(cè)定大腸桿菌的leu（亮氨酸合成)、thr（蘇氨酸合成）、azi(疊氮化鈉抗性）三個(gè)基因的順序。2．測(cè)定細(xì)菌基因間的連鎖關(guān)系：噬菌體P1大腸桿菌leu+、thr+、azi+

P1后代含轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒大腸桿菌leu-、thr-、azi-

侵染侵染釋放浙江大學(xué)68遺傳學(xué)第九章以普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體2．測(cè)定細(xì)菌基因間的連鎖關(guān)系：噬菌體P基本培養(yǎng)基2azi，leu+整合thr+細(xì)菌生長(zhǎng)azir與azis個(gè)數(shù)leu+與leu–個(gè)數(shù)受體菌特定培養(yǎng)（接上圖）基本培養(yǎng)基1azi，thr+整合leu+細(xì)菌可生長(zhǎng)azir與azis個(gè)數(shù)

thr+與thr–個(gè)數(shù)基本培養(yǎng)基3aziLeu+thr+細(xì)菌生長(zhǎng)azir與azis個(gè)數(shù)浙江大學(xué)69遺傳學(xué)第九章基本培養(yǎng)基2整合thr+azir與azis個(gè)數(shù)leu+與l三個(gè)位點(diǎn)之間的連鎖關(guān)系：實(shí)驗(yàn)1：

2種可能排列：

azileuthr

leuazi

thr實(shí)驗(yàn)2：肯定三個(gè)基因的順序是：

azileuthr實(shí)驗(yàn)3：

證明這一順序，因?yàn)閘eu+和thr+片段之間從未攜帶有azir。

每個(gè)選擇的標(biāo)記基因進(jìn)行多次試驗(yàn)：

實(shí)驗(yàn)選擇的標(biāo)記基因未選擇的標(biāo)記基因頻率1leu+

50%azir2%thr+2thr+

3%leu+0%azir3leu+thr+0%azir

浙江大學(xué)70遺傳學(xué)第九章三個(gè)位點(diǎn)之間的連鎖關(guān)系：每個(gè)選擇的標(biāo)記基因進(jìn)行多次試通過合轉(zhuǎn)導(dǎo)關(guān)系求出兩基因之間的物理距離：由以上公式可知：轉(zhuǎn)導(dǎo)DNA的平均長(zhǎng)度約為１個(gè)病毒基因組的大??；通過試驗(yàn)測(cè)知兩個(gè)基因的合轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率，就可估算出兩個(gè)基因間的物理距離。浙江大學(xué)71遺傳學(xué)第九章通過合轉(zhuǎn)導(dǎo)關(guān)系求出兩基因之間的物理距離：由以上公式可知：浙不正常的環(huán)出：

攜帶出部分

細(xì)菌染色體區(qū)段

的噬菌體，又叫

特殊性轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒。

裂解起始：

正常環(huán)出。溶源起始：

在染色體的特定位點(diǎn)整合。㈡、特殊性轉(zhuǎn)導(dǎo)：由溫和噬菌體進(jìn)行的轉(zhuǎn)導(dǎo)。浙江大學(xué)72遺傳學(xué)第九章不正常的環(huán)出：

攜帶出部分

細(xì)菌染色體區(qū)段

的噬菌體，又重組性轉(zhuǎn)導(dǎo)：

再次整合：

導(dǎo)致溶源性轉(zhuǎn)導(dǎo)。特點(diǎn)：轉(zhuǎn)導(dǎo)僅限于靠近原噬菌體附著點(diǎn)的基因。浙江大學(xué)73遺傳學(xué)第九章特點(diǎn)：轉(zhuǎn)導(dǎo)僅限于靠近原噬菌體附著點(diǎn)的基因。浙江大學(xué)7以λ噬菌體為例：λdgal顆粒形成過程：浙江大學(xué)74遺傳學(xué)第九章以λ噬菌體為例：λdgal顆粒形成過程：浙江大學(xué)7噬菌體的侵入，導(dǎo)致重組性轉(zhuǎn)導(dǎo)。浙江大學(xué)75遺傳學(xué)第九章噬菌體的侵入，導(dǎo)致重組性轉(zhuǎn)導(dǎo)。浙江大學(xué)75遺傳學(xué)第九章

應(yīng)用中斷雜交技術(shù)、重組作圖、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)相結(jié)合細(xì)菌非常詳細(xì)的染色體連鎖圖譜。1963年，E.coli已定位近100個(gè)基因(右圖)；

1990年，定位基因已超過1400個(gè)；

1997年完成全部測(cè)序：4639221對(duì)堿基，其功能基因已基本了解。浙江大學(xué)76遺傳學(xué)第九章應(yīng)用中斷雜交技術(shù)、重組作圖、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)浙江大學(xué)76本章小結(jié)1．細(xì)菌研究的影印培養(yǎng)法：浙江大學(xué)77遺傳學(xué)第九章本章小結(jié)1．細(xì)菌研究的影印培養(yǎng)法：浙江大學(xué)2．噬菌體的類型；

⑴．烈性噬菌體：能破壞寄主細(xì)胞原有的遺傳物質(zhì)

組裝成許多子噬菌體

使細(xì)菌裂解

釋放出子噬菌體。⑵．溫和性噬菌體：

特點(diǎn)：

①.核酸不大量復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯，具有溶源性的生活周期；

②.λ噬菌體能通過交換而整合到細(xì)菌染色體上；

③.P1噬菌體獨(dú)立存在于細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)內(nèi)；

④.通過誘導(dǎo)(如紫外線)可轉(zhuǎn)變?yōu)榱倚允删w。浙江大學(xué)78遺傳學(xué)第九章2．噬菌體的類型；浙江大學(xué)78遺傳學(xué)第九章⑶.

噬菌體的基因重組與作圖：

通過雙重感染兩種噬菌體進(jìn)行雜交重組的噬菌斑兩基因之間的遺傳距離。浙江大學(xué)79遺傳學(xué)第九章⑶.噬菌體的基因重組與作圖：浙江大學(xué)79遺傳學(xué)第九轉(zhuǎn)化接合3．細(xì)菌遺傳分析中的基因轉(zhuǎn)移：浙江大學(xué)80遺傳學(xué)第九章轉(zhuǎn)化接合3．細(xì)菌遺傳分析中的基因轉(zhuǎn)移：浙江大學(xué)80遺傳轉(zhuǎn)導(dǎo)性導(dǎo)浙江大學(xué)81遺傳學(xué)第九章轉(zhuǎn)導(dǎo)性導(dǎo)浙江大學(xué)81遺傳學(xué)第九章第一章緒言第二章遺傳的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)第三章遺傳物質(zhì)的分子基礎(chǔ)第四章孟德爾遺傳第五章連鎖遺傳和性連鎖第六章染色體變異第七章細(xì)菌和病毒的遺傳第八章基因表達(dá)與調(diào)控第九章基因工程與基因組學(xué)第十章基因突變第十一章細(xì)胞質(zhì)遺傳第十二章遺傳與發(fā)育第十三章數(shù)量遺傳第十四章群體遺傳與進(jìn)化退出課件第一章緒言第二章遺傳的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)第三章孟德爾遺傳第四章連鎖遺傳和性連鎖第五章數(shù)量性狀遺傳第六章基因突變第七章染色體變異第八章細(xì)胞質(zhì)遺傳第九章細(xì)菌和病毒的遺傳第十章遺傳物質(zhì)的分子基礎(chǔ)第十一章基因表達(dá)與調(diào)控第十二章基因工程與基因組學(xué)第十三章遺傳與發(fā)育第十四章群體遺傳與進(jìn)化返回首頁(yè)浙江大學(xué)82遺傳學(xué)第九章第一章緒言第一章緒言浙江大學(xué)82遺傳學(xué)第九章第七章細(xì)菌和病毒的遺傳浙江大學(xué)83遺傳學(xué)第九章第七章細(xì)菌和病毒的遺傳浙江大學(xué)1遺傳學(xué)第九章本章重點(diǎn)1．細(xì)菌影印法研究。2．細(xì)菌和病毒的四種遺傳分析方法：轉(zhuǎn)化、接合、性導(dǎo)、轉(zhuǎn)導(dǎo)。3．掌握F+、F–、F'、Hfr×F+的特點(diǎn)。4．理解和掌握中斷雜交和重組作圖的原理。5．噬菌體結(jié)構(gòu)和基因重組特點(diǎn)。浙江大學(xué)84遺傳學(xué)第九章本章重點(diǎn)1．細(xì)菌影印法研究。浙江大學(xué)2遺傳學(xué)第九章細(xì)菌和藍(lán)綠藻：

一個(gè)線條狀或環(huán)狀染色體(單倍體結(jié)構(gòu))；無典型的有絲分裂和減數(shù)分裂；染色體傳遞和重組方式與真核生物不同。病毒：

比細(xì)菌更簡(jiǎn)單；在寄主細(xì)胞內(nèi)以集團(tuán)形式產(chǎn)生；屬于只有一條染色體的單倍體。E.coliT4Phage浙江大學(xué)85遺傳學(xué)第九章細(xì)菌和藍(lán)綠藻：病毒：E.coliT4Phage浙江大第一節(jié)細(xì)菌和病毒遺傳

研究的意義浙江大學(xué)86遺傳學(xué)第九章第一節(jié)細(xì)菌和病毒遺傳

研究的意義浙江大學(xué)4遺傳1.大?。杭?xì)胞較小、長(zhǎng)約1~2

(1＝1/1000mm)、寬約0.5；2.結(jié)構(gòu)：鞭毛、細(xì)胞壁、質(zhì)膜、間體、核質(zhì)體、核糖體3.遺傳物質(zhì)：?jiǎn)蝹€(gè)主染色體、一個(gè)或多個(gè)小染色體(質(zhì)粒)4.涂布和繁殖：每個(gè)細(xì)胞在較短時(shí)間內(nèi)(如一夜)能裂殖到107個(gè)子細(xì)胞

成為肉眼可見的菌落或克隆(clone)。一、細(xì)菌：浙江大學(xué)87遺傳學(xué)第九章1.大小：細(xì)胞較小、長(zhǎng)約1~2一、細(xì)菌：浙江大學(xué)5遺5.

生理特性突變：①.營(yíng)養(yǎng)缺陷型：

喪失合成某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)能力，不能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；

原養(yǎng)型：野生菌株則可在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。用不同的選擇性培養(yǎng)基

測(cè)知突變的特性。②.

抗性突變型：

如抗藥性或抗感染性。例如：青霉素（penr）抗性突變的菌落。培養(yǎng)基中加有青霉素浙江大學(xué)88遺傳學(xué)第九章5.生理特性突變：②.抗性突變型：培養(yǎng)基中浙江大學(xué)測(cè)定突變的方法──影印法：

黎德伯格等（LederbergJ.和LederbergE.M.,1952）設(shè)計(jì)。LederbergJ.,1958Nobel獎(jiǎng)獲得者，發(fā)現(xiàn)細(xì)菌轉(zhuǎn)導(dǎo)和接合無鏈霉素吸附細(xì)菌絲絨印在母板上再印在選擇培養(yǎng)基上鏈霉素篩選出抗鏈霉素的菌系從模板中挑出抗性和敏感菌系浙江大學(xué)89遺傳學(xué)第九章測(cè)定突變的方法──影印法：LederbergJ.,195病毒分類：

寄主：動(dòng)物、植物、細(xì)菌等；

遺傳物質(zhì)：DNA或RNA。二、病毒：

單倍體，僅一條染色體。病毒

蛋白質(zhì)外殼核酸。煙草花葉病毒腺病毒T4噬菌體愛滋病病毒RNADNADANRNA浙江大學(xué)90遺傳學(xué)第九章病毒分類：二、病毒：煙草花葉病毒腺病毒T4噬菌噬菌體對(duì)于分子生物學(xué)研究具有重要意義。浙江大學(xué)91遺傳學(xué)第九章噬菌體對(duì)于分子生物學(xué)研究具有重要意義。浙江大學(xué)9遺傳學(xué)1．世代周期短：

大腸桿菌（E.coli）20分鐘可繁殖一代。2．便于管理和生化分析：

個(gè)體小，一般在1至幾之間，操作管理方便。三、細(xì)菌和病毒在遺傳研究中的優(yōu)越性：浙江大學(xué)92遺傳學(xué)第九章1．世代周期短：三、細(xì)菌和病毒在遺傳研究中的優(yōu)越性：浙江3．便于研究基因突變：

裸露的DNA分子（有的病毒為RNA分子），容易受環(huán)境條件的影響而發(fā)生突變；單倍體生物，不存在顯性掩蓋隱性問題，隱性突變也能表現(xiàn)出來。4．便于研究基因的作用：

影印培養(yǎng)，易檢出營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變，有利于從生化角度來研究基因的作用。5．便于研究基因重組：

細(xì)菌具有轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)和接合作用，可以進(jìn)行精密的遺傳分析。浙江大學(xué)93遺傳學(xué)第九章3．便于研究基因突變：浙江大學(xué)11遺傳學(xué)第九章6.便于研究基因結(jié)構(gòu)、功能及調(diào)控機(jī)制：

細(xì)菌和病毒的遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單，易于進(jìn)行基因定位、結(jié)構(gòu)分析和分離，基因的表達(dá)調(diào)控也適于采用生理生化的方法進(jìn)行深入研究。7.便于進(jìn)行遺傳操作：

染色體結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，沒有組蛋白和其它蛋白的結(jié)合，更宜于進(jìn)行遺傳工程的操作。浙江大學(xué)94遺傳學(xué)第九章6.便于研究基因結(jié)構(gòu)、功能及調(diào)控機(jī)制：浙江大學(xué)12第二節(jié)噬菌體的遺傳分析浙江大學(xué)95遺傳學(xué)第九章第二節(jié)噬菌體的遺傳分析浙江大學(xué)13遺傳學(xué)第九章1.結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單：

蛋白質(zhì)外殼、核酸、某些碳水化合物、脂肪等。2.多樣性的原因：外殼的蛋白質(zhì)種類、染色體類型和結(jié)構(gòu)。3.兩大類：

①烈性噬菌體：T噬菌體系列（T1~T7）；

②溫和性噬菌體:P1和λ噬菌體。一、噬菌體的結(jié)構(gòu)：T4噬菌體從大腸桿菌中釋放浙江大學(xué)96遺傳學(xué)第九章1.結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單：一、噬菌體的結(jié)構(gòu)：T4噬菌體從浙江大學(xué)㈠、烈性噬菌體：

1.

結(jié)構(gòu)大同小異，外貌一般呈蝌蚪狀：頭部：雙鏈DNA分子的染色體；

T偶列噬菌體

頸部：中空的針狀結(jié)構(gòu)及外鞘；

尾部：由基板、尾針和尾絲組成。浙江大學(xué)97遺傳學(xué)第九章㈠、烈性噬菌體：浙江大學(xué)15遺傳學(xué)第九章2.T偶列噬菌體的侵染過程（如T4噬菌體）：

尾絲固定于大腸桿菌，遺傳物質(zhì)注入

破壞寄主細(xì)胞遺傳物質(zhì)

合成噬菌體遺傳物質(zhì)和蛋白質(zhì)

組裝許多新的子噬菌體

溶菌酶裂解細(xì)菌

釋放出大量噬菌體。T4噬菌體侵染大腸桿菌的生活周期浙江大學(xué)98遺傳學(xué)第九章2.T偶列噬菌體的侵染過程（如T4噬菌體）：尾絲固定于㈡、溫和性噬菌體：例如λ和P1噬菌體，λ和P1各代表一種略有不同的溶源性類型。λ噬菌體結(jié)構(gòu)浙江大學(xué)99遺傳學(xué)第九章㈡、溫和性噬菌體：例如λ和P1噬菌體，λ和P1各代表λ噬菌體

①.λ噬菌體：噬菌體侵入后，細(xì)菌不裂解附在E.coli染色體上的gal和bio位點(diǎn)間的attλ座位上

整合到細(xì)菌染色體，并能阻止其它λ噬菌體的超數(shù)感染。λ噬菌體特定位點(diǎn)的整合1.溶源性噬菌體的生活周期：浙江大學(xué)100遺傳學(xué)第九章①.λ噬菌體：噬菌體侵入后，細(xì)菌不裂解附在E.co②.P1噬菌體：

不整合到細(xì)菌的染色體上，而是獨(dú)立存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。浙江大學(xué)101遺傳學(xué)第九章②.P1噬菌體：浙江大學(xué)19遺傳學(xué)第九章裂解途徑溶原途徑o

原噬菌體：整合到宿主基因組中的噬菌體。僅少數(shù)基因活動(dòng)，表達(dá)出阻礙物關(guān)閉其它基因。原噬菌體經(jīng)誘導(dǎo)可轉(zhuǎn)變?yōu)榱倚允删w

裂解途徑。浙江大學(xué)102遺傳學(xué)第九章裂解途徑溶原途徑o原噬菌體：整合到浙江大學(xué)20遺傳2.P1和λ噬菌體的特性：①．P1和λ各代表不同的溶源性類型：

P1噬菌體：侵入后并不整合到細(xì)菌的染色體上，獨(dú)立存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)；

λ噬菌體：通過交換整合到細(xì)菌染色體上。②．溶源性細(xì)菌分裂

兩個(gè)子細(xì)胞：P1噬菌體復(fù)制則使每個(gè)子細(xì)胞中至少含有一個(gè)拷貝；λ噬菌體隨細(xì)胞染色體復(fù)制而復(fù)制，細(xì)胞中有一個(gè)拷貝。③．共同特點(diǎn)：核酸既不大量復(fù)制，也不大量轉(zhuǎn)錄和翻譯。浙江大學(xué)103遺傳學(xué)第九章2.P1和λ噬菌體的特性：浙江大學(xué)21遺傳學(xué)第九章P1和λ噬菌體的生活周期特性浙江大學(xué)104遺傳學(xué)第九章P1和λ噬菌體的生活周期特性浙江大學(xué)22遺傳學(xué)第九章1.

噬菌體遺傳性狀分為兩類：

形成的噬菌斑形狀：

指噬菌斑大小、邊緣清晰度、透明程度。

寄主范圍：指噬菌體感染和裂解的菌株范圍。二、T2噬菌體的基因重組與作圖：浙江大學(xué)105遺傳學(xué)第九章1.噬菌體遺傳性狀分為兩類：二、T2噬菌體的基因重組與作①.

正常噬菌體r

+：

噬菌斑小而邊緣模糊。

r

–突變體（rapidlysis，速溶性）：

噬菌斑大而邊緣清楚。②.

寄主范圍突變體：

指能克服噬菌體抗性的突變體。

例：T2h+噬菌體：只侵染大腸桿菌B株

半透明噬菌斑。

T2h

–突變株：能利用B株和B/2株

透明噬菌斑。2．T2噬菌體的研究最為廣泛：

T2phage浙江大學(xué)106遺傳學(xué)第九章①.正常噬菌體r+：2．T2噬菌體的研究最為廣泛：T2

h

–和h+均能感染B株

可用T2兩個(gè)親本h

–r+和h+r

–同時(shí)感染B株。h

–r+(透明，小)×h+r

–

(半透明，大)

↓同時(shí)感染B菌株

獲得噬菌體子代

親本型：h

–r+，h+r

–

重組型：h

–r

–，h+r+E.coliB株③．雙重感染：浙江大學(xué)107遺傳學(xué)第九章h–和h+均能感染B株可用T2E.coliB

將親本型和重組型混合子代

↓感染混合有B和B/2菌株的培養(yǎng)基

↓h

–r+(親)：噬菌斑透明、小，邊緣模糊h+r

–

(親)：噬菌斑半透明、大，邊緣清楚h

–r

–

(重組)：噬菌斑透明、小，邊緣清楚h+r+(重組)：噬菌斑半透明、小，邊緣模糊④．重組值計(jì)算：

重組值

=

重組噬菌斑數(shù)/總噬菌斑數(shù)×100%

=[(h+r++h

–r

–)/(h+r

–+h

–r++h+r++h

–r

–)]×100%去掉%即可作為圖距。h+r

-浙江大學(xué)108遺傳學(xué)第九章將親本型和重組型混合子代④．重組值計(jì)算：h+r-浙江⑤．不同速溶菌的突變型在表現(xiàn)型上不同，可分別寫成ra、rb、

rc等，用rx–h+×rx+h

–獲得試驗(yàn)結(jié)果列于下表：雜交組合各基因型（%）重組值

r-h+r+h-r+h+

r-h-

rah+×ra+h-34.042.012.012.024.0/100=24%

rbh+×rb+h-

32.056.0

5.9

6.412.3/100.3=12.3%

rch+×rc+h-39.059.0

0.7

0.9

1.6/99.6=1.6%

分別作出ra、rb、rc與h的三個(gè)連鎖圖:浙江大學(xué)109遺傳學(xué)第九章⑤．不同速溶菌的突變型在表現(xiàn)型上不同，可分別寫成ra、rb、再做雜交：rcrb+

×rc+rb

↓結(jié)果表明:rc–

rb的重組值>rb–

h∴

h位于rb及rc之間，排列順序rc–

h–

rb。由于T2噬菌體的連鎖圖是環(huán)狀的，所以2、3排列都對(duì)。四種可能的基因排列連鎖圖:1

2

3

4

hrcrarb浙江大學(xué)110遺傳學(xué)第九章再做雜交：rcrb+×rc+rb四種可能的基因排列連三、噬菌體的基因重組與作圖：

凱澤（Kaiser

A.

D.,

1955）最先進(jìn)行λ噬菌體的重組作圖試驗(yàn)。紫外線照射處理

獲5個(gè)噬菌體突變系，產(chǎn)生不同噬菌斑：

s系：小噬菌斑；

mi系：微小噬菌斑；

c系：完全清亮的噬菌斑；

co1系：中央環(huán)之外部分表現(xiàn)清亮的噬菌斑；

co2系：更濃密的中央環(huán)噬菌斑。浙江大學(xué)111遺傳學(xué)第九章三、噬菌體的基因重組與作圖：凱澤（KaiserA.凱澤利用λ噬菌體sco1mi與噬菌體+++進(jìn)行雜交作圖：遺傳圖譜浙江大學(xué)112遺傳學(xué)第九章凱澤利用λ噬菌體sco1mi與噬菌體+++進(jìn)行雜交作圖：遺浙第三節(jié)細(xì)菌的遺傳分析浙江大學(xué)113遺傳學(xué)第九章第三節(jié)細(xì)菌的遺傳分析浙江大學(xué)31遺傳學(xué)第九章概念：某些細(xì)菌通過其細(xì)胞膜攝取周圍供體的染色體片段，將此外源DNA片段通過重組整合到自己染色體組的過程。

1928年，格里費(fèi)斯（GriffithF.）在肺炎雙球菌中發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。1944年，阿委瑞（AveryO.T.）進(jìn)行肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化試驗(yàn)；證實(shí)遺傳物質(zhì)是DNA；轉(zhuǎn)化是細(xì)菌交換基因的方法之一。

一、轉(zhuǎn)化（transformation）：浙江大學(xué)114遺傳學(xué)第九章概念：某些細(xì)菌通過其細(xì)胞膜攝取周圍供體的染色體一、轉(zhuǎn)化（t轉(zhuǎn)化的條件：細(xì)菌活躍攝取外源DNA分子；具備重組程序所必需的酶。轉(zhuǎn)化三種細(xì)菌：肺炎雙球菌；枯草桿菌；流感嗜血桿菌。轉(zhuǎn)化的兩個(gè)例子：①.

用兩個(gè)帶有不同抗性的肺炎雙球菌群體混合

可以

發(fā)現(xiàn)帶有雙抗性的細(xì)菌。

細(xì)菌裂解DNA殘留其它細(xì)菌攝取轉(zhuǎn)化。②.

枯草桿菌活細(xì)胞表面分泌DNA，可被其它細(xì)胞攝取。浙江大學(xué)115遺傳學(xué)第九章轉(zhuǎn)化的條件：細(xì)菌活躍攝取外源DNA分子；浙江大學(xué)33遺㈠、供體與受體的互作：①.

轉(zhuǎn)化片斷的大?。?/p>

肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化：DNA片斷至少有800bp；

枯草桿菌的轉(zhuǎn)化：DNA片斷至少有16000bp。②.

供體DNA分子存在的數(shù)目：

供體DNA分子數(shù)目與特定基因的成功轉(zhuǎn)化有關(guān)。

鏈霉素抗性基因轉(zhuǎn)化：每個(gè)細(xì)胞含有10個(gè)DNA分子之前，

抗性轉(zhuǎn)化體數(shù)目一直與DNA分子

存在數(shù)目成正比。

原因：細(xì)菌的細(xì)胞壁或細(xì)胞膜上有固定數(shù)量的DNA接受

座位，故一般細(xì)菌攝取的DNA分子數(shù)<10個(gè)。浙江大學(xué)116遺傳學(xué)第九章㈠、供體與受體的互作：浙江大學(xué)34遺傳學(xué)第九章③．受體的生理狀態(tài)：感受態(tài)是處于剛停止DNA合成、而蛋白質(zhì)合成繼續(xù)活躍進(jìn)行時(shí)的狀態(tài)?；钴S合成的蛋白質(zhì)可使細(xì)菌細(xì)胞壁易于接受轉(zhuǎn)化DNA。

只有感受態(tài)受體細(xì)胞才能攝取并轉(zhuǎn)化外源DNA，而這種感受態(tài)也只能發(fā)生在細(xì)菌生長(zhǎng)周期的某一時(shí)間范圍內(nèi)。

浙江大學(xué)117遺傳學(xué)第九章③．受體的生理狀態(tài)：浙江大學(xué)35遺傳學(xué)第九章㈡、轉(zhuǎn)化DNA的攝取和整合過程：①.

結(jié)合與穿入：

DNA分子結(jié)合在接受座位上(可逆)，可被DNA酶降解；接受座位飽和性。

DNA攝取(不可逆)，不受DNA酶破壞。

穿入后，由外切酶或DNA移位酶降解其中一條鏈。

②.聯(lián)會(huì)：

按各個(gè)位點(diǎn)與其相應(yīng)的受體DNA片段聯(lián)會(huì)。親緣關(guān)系越遠(yuǎn)，聯(lián)會(huì)越小、轉(zhuǎn)化的可能性越小。浙江大學(xué)118遺傳學(xué)第九章㈡、轉(zhuǎn)化DNA的攝取和整合過程：②.聯(lián)會(huì)：浙江大學(xué)③．整合(重組)：

是指單鏈的轉(zhuǎn)化DNA與受體DNA對(duì)應(yīng)位點(diǎn)的置換穩(wěn)定地進(jìn)入到受體DNA。對(duì)同源DNA具有特異性。異源DNA，視親緣關(guān)系遠(yuǎn)近也可發(fā)生不同頻率整合。浙江大學(xué)119遺傳學(xué)第九章③．整合(重組)：浙江大學(xué)37遺傳學(xué)第九章黎德伯格等用枯草桿菌進(jìn)行轉(zhuǎn)化和重組試驗(yàn)：

DNA片段進(jìn)入受體細(xì)胞后，可與受體染色體發(fā)生重組。緊密連鎖的兩個(gè)基因有較多的機(jī)會(huì)在同一個(gè)DNA片段中同時(shí)整合到受體染色體中。浙江大學(xué)120遺傳學(xué)第九章黎德伯格等用枯草桿菌進(jìn)行轉(zhuǎn)化和重組試驗(yàn)：浙江大學(xué)38遺三者并發(fā)轉(zhuǎn)化的頻率高，故這3個(gè)基因是連鎖的，其中his2和tyr1連鎖最為緊密：trp2his2tyr1341340

單交換時(shí)，染色體開環(huán)易降解，故不存在單交換類型；只有雙交換和偶數(shù)的多交換才有效。浙江大學(xué)121遺傳學(xué)第九章三者并發(fā)轉(zhuǎn)化的頻率高，故這3個(gè)基因是連鎖的，trp2hi二、接合（conjugation）：1.

概念：是指原核生物的遺傳物質(zhì)從供體（donor）轉(zhuǎn)移到受體（receptor）內(nèi)的過程。特點(diǎn)：需通過細(xì)胞的直接接觸。

浙江大學(xué)122遺傳學(xué)第九章二、接合（conjugation）：1.概念：是指原核生物不同營(yíng)養(yǎng)缺陷型的大腸桿菌：A菌株：Met-bio-

thr+leu+，

需加甲硫氨酸和生物素。B菌株：Met+bio+thr-leu-，

需加蘇氨酸和亮氨酸。

A菌株和B菌株?duì)I養(yǎng)缺陷型，

不能在基本培養(yǎng)上生長(zhǎng)。

AB菌株混合培養(yǎng)，在完全

培養(yǎng)基上，幾小時(shí)后離心，涂

布基本培養(yǎng)基上，長(zhǎng)出原養(yǎng)型

（Met+bio+thr+leu+）菌落。2．實(shí)例：黎德伯格和塔特姆（1946年）：浙江大學(xué)123遺傳學(xué)第九章不同營(yíng)養(yǎng)缺陷型的大腸桿菌：2．實(shí)例：黎德伯格和塔特姆（194這種原養(yǎng)型細(xì)胞如何出現(xiàn)？A菌株B菌株

A、B菌株分別培養(yǎng)在基本培養(yǎng)基上

一邊加壓和吸引使培養(yǎng)液充分混合結(jié)果任何一臂的培養(yǎng)基上均未長(zhǎng)出原養(yǎng)型細(xì)菌?！嘀苯咏佑|(接合)是原養(yǎng)型細(xì)胞出現(xiàn)的必要條件。海斯（HayesW.,1952）證明：接合過程是一種單向

轉(zhuǎn)移，A菌株遺傳物質(zhì)

B菌株，從供體（donor）到受體（receptor）。濾片大分子可通過，細(xì)菌不能通過U型管的實(shí)驗(yàn)（Davis，1950）浙江大學(xué)124遺傳學(xué)第九章這種原養(yǎng)型細(xì)胞如何出現(xiàn)？A菌株B菌株A、B菌株分別培養(yǎng)在⑴．F因子：致育因子（性因子），是一種附加體。

攜帶F因子的菌株稱為供體菌或雄性，用F＋表示。未攜帶F因子的菌株為受體菌或雌性，用F－表示。㈠、F因子及F＋向F－的轉(zhuǎn)移：⑵．F因子的組成：

染色體外遺傳物質(zhì)，環(huán)狀DNA；40~60個(gè)蛋白質(zhì)基因；2~4個(gè)/細(xì)胞(雄性內(nèi))。浙江大學(xué)125遺傳學(xué)第九章⑴．F因子：致育因子（性因子），是一種附加體。㈠、F因子及⑶．F因子的三種狀態(tài)：

以大腸桿菌為例：①．沒有F因子，即F－；

②．一個(gè)自主狀態(tài)F因子，即F＋；

③．一個(gè)整合到自己染色體內(nèi)的F因子，即Hfr。浙江大學(xué)126遺傳學(xué)第九章⑶．F因子的三種狀態(tài)：浙江大學(xué)44遺傳學(xué)第九章⑷．自主狀態(tài)時(shí)

F因子獨(dú)立進(jìn)行分裂。浙江大學(xué)127遺傳學(xué)第九章⑷．自主狀態(tài)時(shí)浙江大學(xué)45遺傳學(xué)第九章⑸．F因子的傳遞：

帶F因子的細(xì)菌較少。具有F因子的菌株可以作為供體。

∵F因子中有形成F性傘毛（Fpilus）的基因接合管

F＋細(xì)胞中的F因子由接合管向F－傳遞

F－受體變成F＋。

F＋×F－：先形成接合管，F(xiàn)因子的DNA邊轉(zhuǎn)移邊復(fù)制，F(xiàn)－細(xì)胞

F＋細(xì)胞。浙江大學(xué)128遺傳學(xué)第九章⑸．F因子的傳遞：F＋×F－：先形成接合管，浙江大在Hfr×F－結(jié)合時(shí)，細(xì)菌染色體由一小段單鏈的F因子為前導(dǎo)而轉(zhuǎn)移到F-受體

邊進(jìn)入邊合成。一般僅小部分細(xì)菌染色體能夠轉(zhuǎn)入，接合中斷

受體細(xì)胞為F－，F(xiàn)因子仍留在供體內(nèi)。

F因子整合到細(xì)菌染色體上（F＋Hfr細(xì)胞），其繁殖與細(xì)菌染色體同步進(jìn)行。

此時(shí)，細(xì)菌基因的重組頻率增加4倍

以上，∴染色體上整合有F因子的菌株，

稱為Hfr菌株。Hfr×F－㈡、Hfr細(xì)胞的形成及染色體的轉(zhuǎn)移：浙江大學(xué)129遺傳學(xué)第九章在Hfr×F－結(jié)合時(shí)，細(xì)菌染色體由一小段單鏈的F因子降解單交換雙交換受體內(nèi)基因子供體外基因子部分二倍體：

當(dāng)F＋或Hfr的細(xì)菌染色體進(jìn)入F－后，在一個(gè)短時(shí)期內(nèi)，F(xiàn)－細(xì)胞內(nèi)的某些位點(diǎn)就會(huì)成為二倍體DNA。cb+a+c+ba部分二倍體中發(fā)生交換:

單數(shù)交換：打開環(huán)狀染色體，產(chǎn)生一個(gè)線性染色體，這種

細(xì)胞是不能成活的。

偶數(shù)交換：產(chǎn)生可遺傳的重組體和片段。浙江大學(xué)130遺傳學(xué)第九章降解單交換雙交換受體內(nèi)供體外基因子部分二倍體：c部分二倍體中㈢、中斷雜交試驗(yàn)及染色體連鎖圖：

50年代，雅科（JacobF.）和沃爾曼（WollmanE.）：

中斷雜交試驗(yàn)：發(fā)現(xiàn)接合時(shí)遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移是直線進(jìn)行。其方法為：⑴．Hfr菌株與F－菌株混合培養(yǎng)。Hfr菌株：strs

a+b+c+d+對(duì)鏈霉素敏感F-菌株：

strr

a-b-c-d-

抗鏈霉素⑵．不同時(shí)間取樣攪拌器中斷雜交稀釋含鏈霉素完全培養(yǎng)基殺死Hfr細(xì)菌抗str細(xì)菌菌落影印培養(yǎng)法：鑒定a+b+c+d+各基因轉(zhuǎn)移時(shí)間。浙江大學(xué)131遺傳學(xué)第九章㈢、中斷雜交試驗(yàn)及染色體連鎖圖：50年代，雅科（Jaco⑶．實(shí)例：Hfr菌株：蘇氨酸(thr+)、亮氨酸(leu+)、抗疊氮化物(azir)、抗T1噬菌體(tonr)、半乳糖(gal

b+)、乳糖(lac+)。F-菌株：thr-、leu-、azis、tons、

galb-、lac-型。①．8分鐘時(shí)：thr+進(jìn)入F-細(xì)胞；8.5分鐘時(shí)：leu+進(jìn)入F-細(xì)胞；②．9分鐘時(shí)：出現(xiàn)疊氮化物抗性

的菌落，少數(shù)azir基因進(jìn)入F-細(xì)胞；③．11分鐘時(shí)：出現(xiàn)抗噬菌體T1的F-細(xì)菌；④．18和25分鐘時(shí)：分別出現(xiàn)乳糖

和半乳糖發(fā)酵基因，即lac+和gal

b+進(jìn)入F-細(xì)胞。88.591118浙江大學(xué)132遺傳學(xué)第九章⑶．實(shí)例：①．8分鐘時(shí)：thr+進(jìn)入F-細(xì)胞；891118浙①．重組體中各標(biāo)志基因進(jìn)入F-細(xì)胞中時(shí)間不同，達(dá)到最高水平的時(shí)間也不同；②．隨時(shí)間的推遲，某個(gè)基因的重組率增加；一定程度后，重組率便不再增加。如：10’tonr首次出現(xiàn)，15’時(shí)40%、25’后80%?！郒fr中基因是按一定的線性順序依次進(jìn)入F-菌株的。

浙江大學(xué)133遺傳學(xué)第九章①．重組體中各標(biāo)志基因進(jìn)浙江大學(xué)51遺傳學(xué)第九章

thr

leu

azi

ton

lac

gal

FO

88.59

11

18

25

時(shí)間(分鐘)

以基因出現(xiàn)的時(shí)間為標(biāo)準(zhǔn)

作出E.