葡萄籽原花青素對(duì)大鼠酒精性肝損傷的預(yù)防作用課件

葡萄籽原花青素對(duì)大鼠

酒精性肝損傷的預(yù)防作用小組成員：王萌李亞偉馬藝萍魏婕班級(jí)：08級(jí)臨本2班目錄研究背景研究目的及意義研究現(xiàn)狀及進(jìn)展研究項(xiàng)目創(chuàng)新性研究項(xiàng)目可行性分析研究項(xiàng)目技術(shù)路線(xiàn)及主要實(shí)驗(yàn)方法研究預(yù)期結(jié)果研究工作進(jìn)度的初步安排研究背景原花青素：是一類(lèi)由黃烷-3-醇縮合而成的聚多酚類(lèi)物質(zhì),具有抑制脂質(zhì)過(guò)氧化、抗癌、抗過(guò)敏、抗突變、抗衰老等生物活性。葡萄籽原花青素：是從葡萄籽中提取的原花青素低聚物，迄今為止源于植物的最高效的抗氧化劑之一。酒精性肝損傷：是由于長(zhǎng)期飲酒而導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)促氧化物質(zhì)產(chǎn)生明顯增多和抗氧化物質(zhì)的減少，使肝臟代謝障礙，最終致肝細(xì)胞壞死或凋亡的疾病。研究現(xiàn)狀分析—葡萄籽原花青素葡萄籽原花青素抗糖尿病抗心血管疾病抗腫瘤其他作用抗傷害和鎮(zhèn)痛預(yù)防牙周病葡萄籽原花青素研究進(jìn)展----清除自由基、抗氧化活性作用GSPE含有大量的活性酚羥基，是氫的供體，能有效的清除多種活性氧自由基，具有極強(qiáng)的抗氧化活性。GSPE可明顯降低大鼠肝、腦組織自發(fā)性丙二醛(MDA)的生成，并對(duì)CCl4、H2O2和鐵離子—抗壞血酸等自由基引發(fā)劑誘導(dǎo)的肝脂質(zhì)過(guò)氧化具有明顯的拮抗作用，可減輕肝組織GSH耗竭，具有明顯的抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用與清除自由基的效應(yīng)。GSPE能有效地清除O2·－、·OH、H2O2、ONOO－和全血嗜中性白細(xì)胞“呼吸爆發(fā)”產(chǎn)生的多種活性氧，有效地抑制脂質(zhì)過(guò)氧化研究現(xiàn)狀分析—酒精性肝損傷（如酒精性脂肪肝）酒精性肝損傷發(fā)病機(jī)制防治與治療1酒精及其代謝物對(duì)肝細(xì)胞的毒性作用2氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過(guò)氧化作用3內(nèi)毒素、細(xì)胞因子及炎癥介質(zhì)在酒精性肝損傷中的作用1戒酒2營(yíng)養(yǎng)治療：蛋白質(zhì)、鋅3藥物治療：糖皮質(zhì)激素、己酮可可堿、秋水仙堿、磷脂肽膽堿4其它酒精性肝病研究進(jìn)展----自由基損害作用抗生素可通過(guò)抑制腸道LPS的產(chǎn)生顯著減輕慢性乙醇接觸引起的小鼠肝臟組織脂質(zhì)過(guò)氧化。乙醇在代謝過(guò)程中可直接誘導(dǎo)P-4502E1的活性,產(chǎn)生大量自由基和ROS。自由基除直接損傷肝細(xì)胞外,還可以通過(guò)增加肝細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化的敏感性,引起肝細(xì)胞損傷。研究項(xiàng)目創(chuàng)新性經(jīng)文獻(xiàn)檢索，發(fā)現(xiàn)已有葡萄籽原花青素在肝臟缺血-再灌注損傷中起保護(hù)作用，但尚未見(jiàn)葡萄籽原花青素預(yù)防酒精性肝損傷相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。故研究?jī)?nèi)容具有創(chuàng)新性。主要實(shí)驗(yàn)方法酒精性肝損傷動(dòng)物模型：第一組的的大鼠灌胃給予生理鹽水（15ml.kg-1.d-1,每3d增加2.5ml.kg-1.d-1至25ml.kg-1.d-1），之后保持此量灌胃,作為空白對(duì)照組；第二組第三組大鼠灌胃給予酒脂混合（3:2）乳液（劑量15ml.kg-1.d-1，每3d增加2.5ml.kg-1.d-1至25ml.kg-1.d-1之后保持此量灌胃)，連續(xù)10周，復(fù)制慢性酒精中毒模型。參照文獻(xiàn)報(bào)道方法(扈國(guó)杰,李佃貴.酒精性脂肪肝大鼠模型的建立及新清肝飲煎劑的防治作用[J].中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)2004，3；123-125)肝臟組織學(xué)檢查用HE染色，計(jì)算肝組織中脂肪細(xì)胞占總細(xì)胞百分率。肝組織丙二醛(MDA)測(cè)定采用丙二醛測(cè)試盒(TBA法)方法.谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)測(cè)定采用試劑盒，北京利德曼生化技術(shù)有限公司生產(chǎn)。谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的含量測(cè)定采用試劑盒(丙酮酸氧化酶法)，上海百祥生物科技有限公司提供。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：數(shù)據(jù)表示為均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)誤（XSD），采用方差分析檢驗(yàn)，p<0.05為有顯著性差異。主要實(shí)驗(yàn)方法研究可行性分析理論可行性技術(shù)可行性條件可行性本項(xiàng)目主要檢查肝臟大體及組織學(xué)變，肝組織脂質(zhì)過(guò)氧化指標(biāo)丙二醛(MDA)。檢查血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)變化，技術(shù)難度適中，在老師指導(dǎo)下可以完成實(shí)驗(yàn)。葡萄籽原花青素具有抑制脂質(zhì)過(guò)氧化的作用，而酒精性肝病致病原因之一是由于脂質(zhì)過(guò)氧化化作用，本項(xiàng)目探究葡萄籽原花青素對(duì)酒精性肝損傷的預(yù)防作用，在理論上是可行的。機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)將提供本項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，該實(shí)驗(yàn)室具備本項(xiàng)目所需的實(shí)驗(yàn)儀器、器械、藥品及飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等條件。預(yù)期結(jié)果葡萄籽原花青素對(duì)酒精性肝損傷具有預(yù)防作用，其作用機(jī)制與抗肝組織脂質(zhì)過(guò)氧化有關(guān)。研究工作進(jìn)度的初步安排2011.06.15~2011.07.15物品的購(gòu)買(mǎi)

大鼠30只合計(jì)1800元（北京華阜康生物科技服務(wù)有限公司）葡萄籽原花青素一瓶合計(jì)200元（上海森一化工有限公司）大鼠飼料100元負(fù)責(zé)人:王萌、李亞偉、魏婕、馬藝萍2011.07.15~2011.09.16大鼠酒精性肝損傷模型的制備

負(fù)責(zé)人：王萌李亞偉魏婕馬藝萍研究工作進(jìn)度的初步安排2011.09.17~2011.09.18處死大鼠提取血液，測(cè)定AST和ALT的含量，解剖大鼠，觀(guān)察肝臟大體，制備肝組織玻片負(fù)責(zé)人：王萌李亞偉魏婕馬藝萍2011.09.19