習慣性流產(chǎn)的抗凝血酶原抗體IgG、IgM檢測的初步應用的論文

習慣性流產(chǎn)的抗凝血酶原抗體、IgM檢的步應用的論文【摘要】目建人血漿抗凝酶原抗體aptiggigm的接elisa檢方法，并用于檢測原因不明習慣性流產(chǎn)病人。方法采用人凝血酶原包被微孔板，以堿性磷酸酶標記的抗人為測抗體35例因不明習慣性流產(chǎn)患者血漿中的抗凝血酶原抗體igg、igmigg+igm進檢測，同時計算其陽性率和優(yōu)勢比，95%信限果所方法線性范圍廣穩(wěn)性特性、重性較好。原因不明習慣性流產(chǎn)患者血清中抗凝血酶原抗體igg、igm、igg+igm陽率分別%和20%對照組分別%和5%值別為、及。結(jié)論該是一種較好的抗血酶原抗體iggigm定測定法。原因不明習慣性流產(chǎn)的apt較高于正常婦女，可以作為原不明習慣性流產(chǎn)患者的輔助診斷指標之一?！娟P鍵詞】抗血酶原抗體；抗脂抗體；流ofantibodies，inwithlinweizhangyi1，yuezhen2rong，lv（entrybureau，internationaltravelcarecenterchina’，，chinaabstract：toestablishanphaseelisamethodfortheof（aptiggandigmandapplyinpatientswithunknownrecurrentapurifiedprothrombinforlabeledgoatantihumanorigmasantibodyappliedtoaptorigmlevelsin35patientswithaboreion.theirratesand（with95%，）wereprecisiongoodlinearitygoodsensitivity，reproducibilityandpositiveigg，igm，igg+igmwere%，%and，respectivelywithrecurrentlosscomparedwith，inthevalue，aptmoreinwiththaninassayvalidatedforthedetectionof，igg，，in.keywords；antiphospholipidantibody；abortion抗磷脂抗體apa）是一族主要針對磷脂結(jié)蛋白的異質(zhì)性抗體抗磷脂抗體綜合（antiphospholipid組與抗磷脂抗體有關的疾病，典型表現(xiàn)有血栓形成和習慣性流產(chǎn)abortion年研究表明，低親和力的抗凝酶原抗體（antiprothrombin，apt與抗磷脂抗體綜合征有關[1。我們參考了國外有關文獻，在國內(nèi)首次建立了抗凝血酶原抗體igg、igm的elisa檢方法，并檢測了部分原因不明習慣性流產(chǎn)病人。資和方法主要試劑與儀器人凝酶原純和高抗原結(jié)合性微孔板maxisorp分購自和公。牛血清白蛋白）自roche公司。堿性磷酸酶標記的山羊抗人igg、igm購自公。底物（pnitrophenylphosphate）為公司產(chǎn)品。酶標儀為bio公產(chǎn)品。樣本及分組原因不明習慣性流產(chǎn)habitualabortion病例均有2次上的自然流產(chǎn)或死胎史，由婦產(chǎn)科醫(yī)師對患者按診療常規(guī)進行體檢進行一些相關的特殊檢查擇排除了子宮畸形、內(nèi)分泌異常、染色體異常等明確流產(chǎn)原因的患者，例，年齡～，中位年齡歲。

對照組選門診健康、非妊娠婦女體檢者0例無心、肺、肝、腎疾病，無明顯婦科疾病，pt及aptt皆正常，年齡25歲，中位年齡歲采集靜脈血枸酸109mmol/l（∶92心，制備乏血小板血漿。elisa定測定血漿aptigg以pbs釋的病人凝血酶原過夜，包被微孔板，孔100μl沖%tween）洗滌3次，封閉液）室溫封閉（每孔200μl入封閉液∶50稀的待測血漿（每溫反應1滌5次以封閉液∶稀的堿性磷酸酶標的山羊抗人igg或（孔μl溫孵育h。滌5次，加入新鮮配制的底物溶液1mg/ml，乙醇胺，mgcl2，ph，每孔各μl溫色后，加3mnaoh終反應（每孔50μl讀吸光度）。空白對照孔以封閉液代替待測血。我們設定一高滴aptigg或病的血漿apt或igm含為100％，經(jīng)系列倍比稀釋后建立標準曲線。待測血漿或igm可通過值標準曲線，結(jié)果以相當于標定血漿的百分數(shù)表示。所有的樣本均設立復孔，取其平均值。連續(xù)測定40份正常人新鮮乏血小板血漿，以其幾何均值＋2sd作參考值上限結(jié)果標準曲線以一滴度或igm病的血漿經(jīng)列倍比稀釋后建立標準曲線稀釋度范圍（1∶1600∶50內(nèi)，即對應于igg或igm3%～內(nèi)aptigg或活性的對數(shù)值與a405有極好的線性關系r2=方法的批內(nèi)和批間精密度將2不同含量的標本一板內(nèi)重復測定次cv分為4%（平均含量為39%和6%平均含量為樣，將這二樣本連續(xù)測定批cv分別為（平均含量為39%和（平均含量為91%兩組igmigg+igm檢測采本法分對原因不明習慣性流產(chǎn)組和正常對照組檢測apt、、igg+igm原因不明習慣性流產(chǎn)組患者血清中抗凝血酶原抗體、、igg+igm陽率分別為%20%對照組分別為、和5%，值別為、，提示原因不明習慣性流產(chǎn)病人的apt高正常婦女。在原因不明習慣性流產(chǎn)病人中apt陽性的風險高于正常婦女a(chǎn)pt的iggigmigg+igm的值別為、。見表。表135例因不明習慣性流產(chǎn)病人血清的apt體病例組陽性比討論針對磷脂－蛋白復合物的抗磷脂抗體已經(jīng)被證明與部分血栓和習慣性流產(chǎn)有關脂抗體的檢測對于習慣性流產(chǎn)的診斷、預防和治療均有重要意[1]?？鼓冈贵w（）是抗磷脂抗體家族主要成員之一，其與凝血酶原以低親和力結(jié)合磷脂（或類似表面）與凝血酶原結(jié)合后，可以富集抗原位點或者使隱藏的抗原位點暴露，從而使apt凝血酶原的結(jié)合大大增強，這是apt病機制和檢方法的理論依[2]有多篇文章對和習慣性流產(chǎn)的關系進行了研究，但目前還沒有一致的結(jié)，4]這除了與以往發(fā)表的報道多數(shù)是回顧性研究有關外乏標準化測定方（樣本大小對組的選擇、統(tǒng)計方法、取樣時間究體存在其它血栓性疾病危險因素等均可以影響結(jié)論[于習慣性流產(chǎn)主要與染色體異常分失調(diào)剖學異常和感染有關有20％的病例原因不明。近來研究認為免疫因素，如存在抗磷脂抗體，是其重要原因。因此本文選擇了不明原因的習慣性流產(chǎn)患者作為研究對象。采用elisa方檢測apt可分為單純以凝血原包被和以凝血酶原－磷脂復合物包被二大類。在已發(fā)表文章中，前者占絕大多數(shù)，為檢的主流方法。目前尚apt際標準品以及標準化的elisa操規(guī)[2]等[對elisa各種條件和材料選用進行較為詳盡的研究，為的標準化做了大量的工作。我們據(jù)此國內(nèi)首次建立了定量測定血

漿apt、igm的elisa方，從結(jié)果看，此法線性范圍較寬復好，能適應大樣本測定，是一種較好的aptigm定測定法。應上述方法，我們首次測定了例明原因的習慣性流產(chǎn)患者的血漿apt、含量。原因不明習慣性流產(chǎn)患者血清中抗凝血酶原抗體igg、陽率分別為%、%和，照組分別%%5%分別為、及；且原因不