發(fā)酵工程試題及答案72227

第第答：在補(bǔ)料分批培養(yǎng)的基礎(chǔ)上間歇放掉部分發(fā)酵液（帶放）稱為半連續(xù)培養(yǎng)。某些品種采取這種方式，如四環(huán)素發(fā)酵優(yōu)點(diǎn)放掉部分發(fā)酵液，再補(bǔ)入部分料液，使代謝有害物得以稀釋有利于產(chǎn)物合成，提高了總產(chǎn)量。缺點(diǎn)代謝產(chǎn)生的前體物被稀釋，提取的總體積增大13、發(fā)酵工程主題微生物有什么特點(diǎn)？答：發(fā)酵工程所利用的微生物主要是細(xì)菌、放線菌，酵母菌和霉菌特點(diǎn)：（1）對周圍環(huán)境的溫度、壓強(qiáng)、滲透壓、酸堿度等條件有極大的適應(yīng)能力（2）有極強(qiáng)的消化能力（3）有極強(qiáng)的繁殖能力第三套、選擇題：（每小題2分，共32分）1、下列有關(guān)大腸桿菌的敘述，正確的是（）A、大腸桿菌以復(fù)制方式進(jìn)行繁殖，其擬核是一個(gè)環(huán)狀DNA分子B、在含葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基上，大腸桿菌首先利用乳糖作碳源C、用大腸桿菌工程菌生產(chǎn)干擾素時(shí)，應(yīng)及時(shí)添加核酸等生長因子D、處于對數(shù)期的大腸桿菌，常作為生產(chǎn)用的菌種和科研的材料2、酵母菌培養(yǎng)過程中的生長曲線如圖所示：于產(chǎn)生次級代謝產(chǎn)物的時(shí)期是2、酵母菌培養(yǎng)過程中的生長曲線如圖所示：于產(chǎn)生次級代謝產(chǎn)物的時(shí)期是a、b、c、d分別表示不同的生長時(shí)期，其中適A、aA、aB、bC、cD、d3、下列對根瘤菌的敘述，正確的是（A根瘤菌在植物根外也能固氮A根瘤菌在植物根外也能固氮C土壤浸水時(shí)，根瘤菌固氮量減少B根瘤菌離開植物根系不能存活D大豆植株生長所需的氮都來自根瘤菌4、發(fā)酵工程的第一個(gè)重要工作是從混雜的微生物群體中選擇優(yōu)良的單一純種，獲得純種的方法不包括：（）A.根據(jù)微生物對碳源需要的差別，使用含不同碳源的培養(yǎng)基B.根據(jù)微生物缺乏生長因子的種類，在培養(yǎng)基中增減不同的生長因子C.利用高溫高壓消滅不需要的雜菌D.根據(jù)微生物對抗生素敏感性的差異，在培養(yǎng)基中加入不同的抗生素5、下面關(guān)于微生物最適生長溫度判斷，正確的是（）微生物群體生長繁殖速度最快的溫度發(fā)酵的最適溫度積累某一代謝產(chǎn)物的最適溫度無法判斷6、發(fā)酵法生產(chǎn)酵母菌時(shí)，正確的措施是（）

A、密閉隔絕空氣B、用萃取、離子交換獲得產(chǎn)品C、在穩(wěn)定期獲得菌種D、使菌體生長長期處于穩(wěn)定期7．下表為某培養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述正確的是（）成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水含量10g10g2g0.4g0.065g1000mLA、從化學(xué)成分看該培養(yǎng)基屬于合成培養(yǎng)基，從用途看該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基B、培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖，屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨C、該培養(yǎng)基缺少能提供生長因子的物質(zhì)D、該培養(yǎng)基PH調(diào)好后就可以接種菌8.右圖是某種微生物體內(nèi)某一物質(zhì)代謝過程的示意圖。下列有關(guān)酶活性調(diào)節(jié)的敘述，錯誤的是A.T物質(zhì)既是酶③催化生成的產(chǎn)物，又是酶③的反饋抑制物B.戊物質(zhì)通過與酶④結(jié)合導(dǎo)致酶④結(jié)構(gòu)變化而使其活性下降C當(dāng)丁物質(zhì)和戊物質(zhì)中任意一種過量時(shí)，酶①的活性都將受到抑制D.若此代謝途徑的終產(chǎn)物不斷排出菌體外，則可消除丙物質(zhì)對酶①的抑制作用9．屬于細(xì)菌細(xì)胞特殊結(jié)構(gòu)的為（）A、莢膜B、細(xì)胞壁C、細(xì)胞膜D、核質(zhì)體10．下列關(guān)于幾種微生物的營養(yǎng)代謝和生長繁殖的描述，正確的是A.根瘤菌通過生物固氮，制造了含氮養(yǎng)料和含碳有機(jī)物B.接種到培養(yǎng)基上的青霉菌，進(jìn)入對數(shù)期能大量積累青霉素C培養(yǎng)液中溶解氧量的變化，會影響酵母菌的生長繁殖和代謝途徑D.用32P標(biāo)記的噬菌體感染細(xì)菌，在新形成的噬菌體中都能檢測到32P11．下列關(guān)于通過發(fā)酵工程生產(chǎn)谷氨酸的敘述，錯誤的是．．A.發(fā)酵時(shí)需不斷通入無菌空氣，否則會積累乳酸B.發(fā)酵時(shí)常采用的培養(yǎng)基為液體天然培養(yǎng)基。從自然界分離的野生型菌株可直接用于生產(chǎn)D.當(dāng)菌體生長進(jìn)入穩(wěn)定期時(shí)，補(bǔ)充營養(yǎng)物可提高谷氨酸產(chǎn)量12．圖甲是果醋發(fā)酵裝置。發(fā)酵初期不通氣，溶液中有氣泡產(chǎn)生；中期可以聞到酒香；后期接種醋酸菌，適當(dāng)升高溫度并通氣，酒香逐漸變成醋香。圖乙中能表示整個(gè)發(fā)酵過程培養(yǎng)液pH變化的曲線是（）由TEJA.①B.②C.③D.④13．生產(chǎn)實(shí)踐中配制微生物發(fā)酵所需要的培養(yǎng)基時(shí)，一般遵循“經(jīng)濟(jì)節(jié)約”的原則。如“以野（野生植物）代家（栽培植物）”、“以纖（秸稈）代糖（淀粉）”、“以氮（非蛋白氮）代朊（蛋白氮）”、

“以烴代糧”等。下列表述不正確的是（）A.“以野代家”培養(yǎng)微生物時(shí)，需要加入更多的生長因子B.“以纖代糖”能為某些微生物的生長提供碳源和能源C.“以氮代朊”是因?yàn)殇@鹽、硝酸鹽等是微生物常用的氮源D.“以烴代糧”培養(yǎng)的微生物可以用于凈化被石油污染的海域14、下述那個(gè)時(shí)期細(xì)菌群體倍增時(shí)間最快（）A穩(wěn)定期B衰亡期C對數(shù)期D延滯期15、下面關(guān)于連續(xù)培養(yǎng)的說法中，敘述不正確的是（）A.恒化連續(xù)培養(yǎng)的控制對象是菌體密度B.恒濁連續(xù)培養(yǎng)中微生物菌體以最高生長速率生長C.恒化連續(xù)培養(yǎng)的產(chǎn)物是不同生長速率的菌體D.恒濁連續(xù)培養(yǎng)無生長限制因子16．大腸桿菌某個(gè)品系能夠合成干擾素，一制藥廠引進(jìn)該品系菌株后對其培養(yǎng)研究。在特定的培養(yǎng)基中，接入少量菌種后，每3h測定一次菌體密度和劇體密度萬個(gè)pH0.177,474.yxW6.721.SxIO1142.0x10,6.372.P2xIO46,430.057.491.4X5820.0377.502.1*IOd567.3fi培養(yǎng)基的pH,并作記錄。但由于一時(shí)疏忽弄亂了記錄的順序。請根據(jù)下表的記錄數(shù)據(jù)，判斷以下說法中錯誤的是（）A.該品系大腸桿菌的培育是采用了基因工程的方法B.可以通過培養(yǎng)基的pH由大到小調(diào)整記錄順序C.樣本pH為6.43,菌體密度為2.2x104是培養(yǎng)到24h時(shí)測量的結(jié)果D.樣本PH為6.37,菌體密度為2.0x104時(shí)，處于細(xì)菌生長的對數(shù)期二、填空題：（每空2分,共20分）17、在大腸桿菌培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮、和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、、等優(yōu)點(diǎn),因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。18、在微生物培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污染,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅,其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能。19、通常,對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的20、若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn),使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。21、培養(yǎng)大腸桿菌時(shí),在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是。22、對細(xì)菌簡單染色法的一般步驟是。常用的染料有和等。23、在混合菌樣中獲得純菌株的方法主要有和24、在微生物培養(yǎng)過程中，引起培養(yǎng)基pH值改變的原因主要有和等。25、實(shí)驗(yàn)室常用的有機(jī)氮源有和等，無機(jī)氮源有和等。為節(jié)約成本，工廠中常用等做有機(jī)氮源。26、在微生物學(xué)奠基時(shí)代（生理學(xué)期）公認(rèn)的代表人物為和。前者的主要業(yè)績有等，后者的主要業(yè)績有等。三、名詞解釋（每題4分，共16分）27、發(fā)酵工程：利用微生物特定性狀和功能，通過現(xiàn)代化工程技術(shù)生產(chǎn)有用物質(zhì)或直接應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)的技術(shù)體系，是將傳統(tǒng)發(fā)酵于現(xiàn)代的DNA重組、細(xì)胞融合、分子修飾和改造等新技術(shù)集合并發(fā)展起來的發(fā)酵技術(shù)。28、次級代謝產(chǎn)物是指微生物在一定生長時(shí)期，以初級代謝產(chǎn)物為前體物質(zhì)，合成一些對微生物的生命活動無明確功能的物質(zhì)過程，這一過程的產(chǎn)物，即為次級代謝產(chǎn)物。29、連續(xù)培養(yǎng)：發(fā)酵過程中一邊補(bǔ)入新鮮料液一邊放出等量的發(fā)酵液，使發(fā)酵罐內(nèi)的體積維持恒定。達(dá)到穩(wěn)態(tài)后，整個(gè)過程中菌的濃度，產(chǎn)物濃度，限制性基質(zhì)濃度都是恒定的。30、BOD：生化需氧量，又稱生物需氧量，是水中有機(jī)物含量的一個(gè)間接指標(biāo)。一般指在1L的污水或待測水樣中所含的一部分易氧化的有機(jī)物，當(dāng)微生物對其氧化、分解時(shí)，所消耗的水中溶解氧的毫克數(shù)。四、簡答題（每題8分，共32分）1、不同時(shí)間染菌對發(fā)酵有什么影響，染菌如何控制？答：（1）種子培養(yǎng)期染菌：由于接種量較小，生產(chǎn)菌生長一開始不占優(yōu)勢，而且培養(yǎng)液中幾乎沒有抗生素（產(chǎn)物）或只有很少抗生素（產(chǎn)物）。因而它防御雜菌能力低，容易污染雜菌。如在此階段染菌，應(yīng)將培養(yǎng)液全部廢棄。（2）發(fā)酵前期染菌：發(fā)酵前期最易染菌，且危害最大。原因：發(fā)酵前期菌量不很多，與雜菌沒有競爭優(yōu)勢；且還未合成產(chǎn)物（抗生素）或產(chǎn)生很少，抵御雜菌能力弱，在這個(gè)時(shí)期要特別警惕以制止染菌的發(fā)生。措施：可以用降低培養(yǎng)溫度，調(diào)整補(bǔ)料量，用酸堿調(diào)pH值，縮短培養(yǎng)周期等措施予以補(bǔ)救。如果前期染菌，且培養(yǎng)基養(yǎng)料消耗不多，可以重新滅菌，補(bǔ)加一些營養(yǎng)，重新接種再用。（3）發(fā)酵中期染菌：發(fā)酵中期染菌會嚴(yán)重干擾產(chǎn)生菌的代謝。雜菌大量產(chǎn)酸，培養(yǎng)液pH下降；糖、氮消耗快，發(fā)酵液發(fā)粘，菌絲自溶，產(chǎn)物分泌減少或停止，有時(shí)甚至?xí)挂旬a(chǎn)生的產(chǎn)物分解。有時(shí)也會使發(fā)酵液發(fā)臭，產(chǎn)生大量泡沫。措施：降溫培養(yǎng)，減少補(bǔ)料，密切注意代謝變化情況。如果發(fā)酵單位到達(dá)一定水平可以提前放罐，或者抗生素生產(chǎn)中可以將高單位的發(fā)酵液輸送一部分到染菌罐，抑制雜菌。（4）發(fā)酵后期染菌：發(fā)酵后期發(fā)酵液內(nèi)已積累大量的產(chǎn)物，特別是抗生素，對雜菌有一定的抑制或殺滅能力。因此如果染菌不多，對生產(chǎn)影響不大。如果染菌嚴(yán)重，又破壞性較大，可以提前放罐。發(fā)酵染菌后的措施：染菌后的培養(yǎng)基必須滅菌后才可放下水道。滅菌方法：可通蒸汽滅菌，也可加入過氧乙酸等化學(xué)滅菌劑攪拌半小時(shí)，才放下水道。否則由于各罐的管道相通，會造成其它罐的染菌，而且直接放下水道也會造成空氣的污染而導(dǎo)致其它罐批染菌。凡染菌的罐要找染菌的原因，對癥下藥，該罐也要徹底清洗，進(jìn)行空罐消毒，才可進(jìn)罐。染菌厲害時(shí)，車間環(huán)境要用石灰消毒，空氣用甲醛熏蒸。特別，若染噬菌體，空氣必須用甲醛蒸汽消毒。3、發(fā)酵過程主要分析項(xiàng)目有哪些？答：發(fā)酵過程主要分析項(xiàng)目如下：pH、排氣氧、排氣CO2和呼吸熵、糖含量、氨基氮和氨氮、磷含量、菌濃度和菌形態(tài)。4、簡述工業(yè)發(fā)酵產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝流程。答：①培養(yǎng)基制備②、無菌空氣制備③、菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)④、發(fā)酵培養(yǎng)⑤、通過化學(xué)工程技術(shù)分離、提取、精制。試題參考答案：一、選擇題（共48分）1-5:DCCCA;6-10:CBCAC;11-16:CBACAD二、填空題17、溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短18、滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)19、鑒定（或分類）20、滅菌21、將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生.22、涂片、干燥、固定、染色、水洗、鏡檢；美藍(lán)；結(jié)晶紫23、稀釋涂布平板法；劃線平板法24、營養(yǎng)成份的消耗；代謝物的累積25、蛋白胨；牛肉膏；硫酸銨；硝酸鈉;豆餅粉26、巴斯德；柯赫；巴斯德消毒法；微生物純培養(yǎng)法補(bǔ)充協(xié)議書出借方：（以下簡稱甲方）借款方：（以下簡稱乙方）甲乙雙方在借款協(xié)議基礎(chǔ)之上，經(jīng)過協(xié)商，甲乙雙方在自愿的基礎(chǔ)上簽訂本補(bǔ)充協(xié)議，雙方以資共同遵守。一、