白蛋白及人血丙種球蛋白

白蛋白及人血丙種球蛋白白蛋白及人血丙種球蛋白1.什么是白蛋白及人血丙種球蛋白2.白蛋白及人血丙種球蛋白的作用3.白蛋白及人血丙種球蛋白的提取工藝4.白蛋白國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)分析5.白蛋白國(guó)內(nèi)外研究和發(fā)展趨勢(shì)白蛋白白蛋白（又稱(chēng)清蛋白）是由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成，在血漿中的半壽期約為15-19天，是血漿中含量最多的蛋白質(zhì)，占血漿總蛋白的40%-60%。.白蛋白的生理作用

（1）維持血漿膠體滲透壓的恒定

白蛋白是血漿中含量最多、分子最小、溶解度大、功能較多的一種蛋白質(zhì)。血漿膠體滲透壓的維持主要依靠血漿中的白蛋白，膠體滲透壓是使靜脈端組織間液重返回血管內(nèi)的主要?jiǎng)恿?。?dāng)血漿白蛋白因病理?xiàng)l件引起下降時(shí)，血漿的膠體滲透壓也隨之下降，可導(dǎo)致血液中的水份過(guò)多進(jìn)入組織液而出現(xiàn)水腫。

（2）血漿白蛋白的運(yùn)輸功能血漿白蛋白能與體內(nèi)許多難溶性的小分子有機(jī)物和無(wú)機(jī)離子可逆地結(jié)合形成易溶性的復(fù)合物，成為這些物質(zhì)在血液循環(huán)中的運(yùn)輸形式。由此可見(jiàn)白蛋白屬于非專(zhuān)一性的運(yùn)輸?shù)鞍?，在生理上具有重要性，與人體的健康密切相關(guān)。救命藥白蛋白告急！

目前，白蛋白的唯一來(lái)源是人類(lèi)血漿，由于血液資源有限，加上艾滋病、肝炎等血液傳染病的威脅，白蛋白資源變得越來(lái)越緊缺。近幾年我國(guó)各大主要城市、醫(yī)院相繼出現(xiàn)了白蛋白告急的情況，迫使國(guó)家出臺(tái)了多種限制性措施，同時(shí)也導(dǎo)致了救命藥白蛋白進(jìn)入走私和黑市高價(jià)交易等畸形現(xiàn)象。隨著人們生活水平的提高和血液資源的進(jìn)一步緊張，白蛋白的緊缺狀況將日益嚴(yán)峻。白蛋白：目前白蛋白的價(jià)格已經(jīng)納入國(guó)家法定定價(jià)，它有國(guó)家發(fā)改委來(lái)進(jìn)行制定最高的零售價(jià)格。如國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的20G（凍干粉）/瓶人血白蛋白，統(tǒng)一最高零售價(jià)格為609元，白蛋白價(jià)格國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的10g:50ml/瓶人血白蛋白，統(tǒng)一最高零售價(jià)格為360元。人血丙種球蛋白：別名：普通丙種球蛋白、人血丙球、免疫血清球蛋白、丙種球蛋白人血球蛋白的生理作用：本品為專(zhuān)供靜脈注射用免疫球蛋白制劑，是以低溫乙醇法從健康人鮮血漿分離制備的制品，可增加機(jī)體免疫力，有補(bǔ)充抗體和免疫調(diào)節(jié)作用，從而提高機(jī)體對(duì)多種細(xì)菌、病毒的抵抗能力，主要用于預(yù)防麻疹、傳染性肝炎、脊髓灰質(zhì)炎、水痘等，也可用于其他細(xì)菌性、病毒性感染丙種球蛋白的應(yīng)用

丙種球蛋白中抗體含量隨來(lái)源人群的免疫狀態(tài)、身體素質(zhì)、生活水平、飲食習(xí)慣、居住環(huán)境、遺傳因素的不同而異，其適應(yīng)證也是有限的，僅對(duì)下述疾病的防治有效。１.預(yù)防麻疹自前麻疹疫苗廣泛應(yīng)用以來(lái)已很少用丙種球蛋白。２.預(yù)防甲型病毒性肝炎在接觸具有傳染性的患者后７-１４天內(nèi)注射丙種球蛋白，保護(hù)時(shí)間４-８周，對(duì)已發(fā)病者無(wú)效，也不能預(yù)防乙型肝炎。３.預(yù)防脊髓灰質(zhì)炎由于活疫苗糖丸的普遍應(yīng)用，已基本不用丙種球蛋白。但對(duì)未接受疫苗接種而與病人有密切接觸的兒童宜盡早給予丙種球蛋白。注后１周內(nèi)發(fā)病者癥狀較輕，２～５周內(nèi)不發(fā)病可認(rèn)為已獲得保護(hù)。被動(dòng)免疫可維持３～６周。４.預(yù)防風(fēng)疹孕婦患風(fēng)疹后胎兒可能發(fā)生先天性風(fēng)疹綜合癥（早天及多種先天性畸形），故孕婦接觸風(fēng)疹后可注射丙種球蛋白有一定效果，但不能制止感染，僅使癥狀減輕。

應(yīng)用中的不良反應(yīng)及注意事項(xiàng)１.丙種球蛋白有一定的注射反應(yīng)，注射處有一定疼痛，甚至有全身發(fā)熱反應(yīng)，可持續(xù)１～２天。除特別制劑外不能靜注，因可能出現(xiàn)寒戰(zhàn)、發(fā)熱、蕁麻疹、喉頭水腫、虛脫、過(guò)敏性休克等。２.丙種球蛋白使用不當(dāng)可使急性感染變成慢性或遷延性病程。３.丙種球蛋白有攜帶乙型肝炎表面抗原的可能性，引起輸入后乙型肝炎。４.液體狀態(tài)的丙種球蛋白因含有少量蛋白水解酶，在保存過(guò)程中自行水解，效果減低。如發(fā)生混濁、沉淀則不可再用。５.１歲以?xún)?nèi)嬰幼兒正是自體合成丙種球蛋白、產(chǎn)生抗體之時(shí)，誤用丙種球蛋白會(huì)抑制抗體的產(chǎn)生，故除非必要?jiǎng)t不宜用。６.胎盤(pán)血制造的丙種球蛋白的制劑中含有少量血型特質(zhì)Ａ和Ｂ，當(dāng)Ｏ型血婦女使用后可產(chǎn)生抗Ａ或抗Ｂ抗體，抗體最初為ＩｇＭ，以后變?yōu)椋桑鏓，妊娠時(shí)能透過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒體內(nèi)，引起新生兒溶血癥。工藝流程白蛋白的工藝流程1.將人血漿泵入不銹鋼夾層反應(yīng)釜內(nèi)，開(kāi)啟攪拌,用Na2co3

溶液調(diào)PH為8.6，再泵入等體積的2%利凡諾溶液，充分?jǐn)嚢韬箪o置2~4h，分離上清液（供生產(chǎn)丙種球蛋白用）與絡(luò)合溶液。2.解離溶液用無(wú)菌蒸餾水稀釋?zhuān)孟←}酸調(diào)至弱酸性，加氯化鈉0.15%~0.2%，不斷攪拌進(jìn)行解離。充分解離后，加熱至65oC維持1h，立即用冷卻水冷卻。白蛋白的工藝流程3.分離冷卻后，解離液用藍(lán)式離心機(jī)分離，離心液在用不銹鋼壓濾器過(guò)濾。4.超濾上述過(guò)濾液用超濾機(jī)超濾濃縮5.熱處理濃縮液在60oC恒溫處理10h，滅活病毒6.澄清和除菌以不銹鋼壓濾器澄清過(guò)濾，再用微濾除菌人血丙種球蛋白的工藝流程1.取白蛋白制備過(guò)程中絡(luò)合后剩下的上清液，在不銹鋼反應(yīng)釜中進(jìn)行攪拌。用1mol/L的鹽酸調(diào)PH7.0，加23%的結(jié)晶硫酸銨，充分?jǐn)嚢韬箪o置4h以上以沉淀完全。2.虹吸上清液，將下部混懸液泵入藍(lán)式離心機(jī)中離心得沉淀。人血丙種球蛋白的工藝流程3.將沉淀用適量無(wú)熱源蒸餾水溶解，在不銹鋼壓濾機(jī)中進(jìn)行澄清過(guò)濾。4.用超濾機(jī)超濾濃縮，再經(jīng)過(guò)微濾除菌，置于2~6oC環(huán)境下存放1個(gè)月以上。5.用不銹鋼壓濾器再一次澄清過(guò)濾，除菌分裝可得成品。白蛋白及人血丙種球蛋白

白蛋白的儲(chǔ)存

白蛋白的正確保存極為重要，一旦處理不當(dāng)，辛辛苦苦生產(chǎn)的白蛋白成品就會(huì)失活、變性、變質(zhì)，使前面的全部制備工作化為烏有，損失慘重。要想從溶液中除去多余水分，采用的方法是在常溫或高溫條件下進(jìn)行蒸發(fā)，但這樣會(huì)使生物活性物質(zhì)加速被破壞，并且改變了這些物質(zhì)的溶解度，所以不宜采用。

要想在干燥過(guò)程中最大限度地減少生物活性物質(zhì)被破壞，唯一的方法就是使溶液在低溫下干燥。但是，溫度的降低不但會(huì)使溶液凝固，還會(huì)使水的蒸氣壓力降低從而難以揮發(fā)，這就需要大大降低氣壓使固態(tài)的水直接升華成為水蒸氣。凍干技術(shù)就是在這一理論基礎(chǔ)上產(chǎn)生的。

凍干技術(shù)是先將生物大分子溶液中的水凍成冰，然后在低溫和高真空的條件下使冰升華，成為固體干粉。當(dāng)白蛋白溶液冷卻至冰點(diǎn)時(shí)，純水首先結(jié)冰形成初結(jié)晶。初結(jié)晶過(guò)程中若白蛋白所處的溫度低，熱交換速度大時(shí)，溫度下降可達(dá)每秒50oC或更高，這種冷凍方法叫速凍。反之，當(dāng)白蛋白所處的溫度高，熱交換速度小時(shí)，這種冷凍方法叫慢凍。

通過(guò)凍干得到白蛋白固體樣品有許多優(yōu)點(diǎn)：一個(gè)是由固態(tài)直接升華為氣態(tài)，所以樣品不起泡

不報(bào)沸。一個(gè)是得到的干粉樣品不黏壁易取出。一個(gè)是凍干后的樣品是疏松的粉末，易溶于水。一個(gè)是在低溫低壓的條件下干燥，白蛋白不容易氧化變質(zhì)，同時(shí)壓力低使得空氣稀薄有滅菌或抑制某些細(xì)菌的作用。一個(gè)是脫水徹底，適合于長(zhǎng)途運(yùn)輸和長(zhǎng)期保存。凍干特別適用于對(duì)熱敏感、易吸濕、易氧化的白蛋白。由于白蛋白對(duì)熱敏感，因此，要低溫保存。一般可根據(jù)白蛋白的用途決定其保存溫度是4oC、-20oC還是-80oC或-196oC液氮中。白蛋白解凍時(shí)勿直接由-20oC或-80oC移至37oC條件解凍，因?yàn)闇囟雀淖兲蠡蛱?，容易引起白蛋白凝結(jié)而發(fā)生沉淀。國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢(shì)

要解決白蛋白緊缺的唯一出路是用基因工程的方法進(jìn)行體外重組生產(chǎn)。我國(guó)已有為數(shù)不多的幾家企業(yè)在進(jìn)行白蛋白的重組開(kāi)發(fā)，但均屬研發(fā)性階段。開(kāi)發(fā)最早的企業(yè)是華北制藥，早在1997年就作為國(guó)家重大專(zhuān)項(xiàng)開(kāi)始研發(fā)重組白蛋白，由于技術(shù)等原因進(jìn)展緩慢，據(jù)悉目前已達(dá)到生產(chǎn)表達(dá)水平，但目前的產(chǎn)品還只能用于工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基級(jí)白蛋白，還未進(jìn)入臨床試驗(yàn)。其他企業(yè)均處在早期研發(fā)階段。國(guó)外的重組白蛋白研究遠(yuǎn)遠(yuǎn)領(lǐng)先于我國(guó)。早在1981年美國(guó)的Genentech公司就在細(xì)菌大腸桿菌中首先表達(dá)了重組人血白蛋白。至此以后，英國(guó)Delta生物技術(shù)公司、日本綠十字和美國(guó)的默克公司相繼投入了大量的人力物力，在酵母中成功表達(dá)了重組白蛋白，并達(dá)到了規(guī)模化生產(chǎn)的水平。目前，英國(guó)Delta公司的重組白蛋白已在藥物輔料領(lǐng)域得到了歐洲藥物監(jiān)管部門(mén)的審批，而作人血白蛋白替代品的注射藥物重組白蛋白還都處在臨床階段，估計(jì)在今后幾年內(nèi)得到審批。國(guó)內(nèi)外現(xiàn)有份額和市場(chǎng)優(yōu)勢(shì)分析

白蛋白在國(guó)際市場(chǎng)上的蛋白藥物中銷(xiāo)量占首位，占所有蛋白藥物總和的40%。白蛋白是急需補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)和蛋白質(zhì)的多種疾病患者不可缺少的治療劑，更是醫(yī)院臨床的急救藥和重癥手續(xù)的必備藥、救命藥，每年的用藥量可