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文檔簡介
厭氧性細(xì)菌及檢驗(yàn)
臨床微生物教研室
袁小澎厭氧性細(xì)菌及檢驗(yàn)
臨床微生物教研室1一定義有氧條件下不能生長,無氧條件(不是絕對)下才可以生長的一類細(xì)菌1836年P(guān)asteur提出臨床上日益受到重視,60%臨床標(biāo)本存在厭氧菌感染---------------------需要重視一定義有氧條件下不能生長,無氧條件(不是絕對)下才可以生長的2病原性真菌檢驗(yàn)臨床微生物學(xué)課件3二分類
1有芽孢厭氧性細(xì)菌一個梭菌屬包括83個種2無芽孢厭氧性細(xì)菌40多個菌屬,300多個菌種和亞種二分類1有芽孢厭氧性細(xì)菌4三感染分布原因臨床癥狀三感染分布5厭氧菌在正常人體內(nèi)的分布厭氧菌皮膚上呼吸道口腔腸道尿道陰道一芽孢菌G+桿菌梭狀芽孢桿菌屬二無芽孢菌(一)G+的桿菌雙歧桿菌(二)G-的桿菌類桿菌屬(三)G+的球菌消化球菌屬(四)G-的球菌韋榮氏菌屬000+000+++±++++++++++++++++±0+±±±±++++厭氧菌在正常人體內(nèi)的分布厭氧菌皮膚上呼吸道口腔腸道尿道陰道一6致病的原因1組織缺氧或氧化還原電勢降低穿刺傷等封閉性傷口,血管壓迫,腫瘤壓迫等等2機(jī)體免疫力低下致病的原因1組織缺氧或氧化還原電勢降低7臨床的癥狀1感染部位產(chǎn)生大量氣體,組織膿腫和壞死,皮下有捻發(fā)音,是產(chǎn)氣夾膜梭菌感染的特征2分泌物有惡臭,或?yàn)榘导t色,分泌物涂片經(jīng)革蘭氏染色,發(fā)現(xiàn)細(xì)菌,而培養(yǎng)陰性的3其它等等臨床的癥狀1感染部位產(chǎn)生大量氣體,組織膿腫和壞8厭氧菌標(biāo)本的采集和送檢標(biāo)本的采集和送檢------------1標(biāo)本決不能被正常菌群污染;2應(yīng)盡量避免空氣厭氧菌標(biāo)本的采集和送檢標(biāo)本的采集和送檢-----------9標(biāo)本的采集標(biāo)本來源收集的方法封閉性膿腫婦女生殖道下呼吸道分泌物胸腔竇道,子宮腔,深部創(chuàng)傷組織尿道針管抽取后穹隆穿刺抽取肺穿刺術(shù)胸腔穿刺術(shù)靜脈注射的塑料導(dǎo)管穿入無菌外科切開上陰部膀胱穿刺標(biāo)本的采集標(biāo)本來源收集的方法封閉性膿腫針管抽取10標(biāo)本的送運(yùn)與處理針筒送運(yùn)法無菌小瓶送運(yùn)法棉拭送運(yùn)法大量標(biāo)本送運(yùn)法組織塊送運(yùn)法厭氧袋送運(yùn)法標(biāo)本的送運(yùn)與處理針筒送運(yùn)法11分離和鑒定
分離和鑒定
12病原性真菌檢驗(yàn)臨床微生物學(xué)課件13檢驗(yàn)的方法1直接鏡檢一些特殊的特點(diǎn),臨床工作中的總結(jié)可對初步判斷及臨床應(yīng)用做早一步的指導(dǎo)作用檢驗(yàn)的方法1直接鏡檢142分離培養(yǎng)
1初步培養(yǎng)1)培養(yǎng)基的選擇強(qiáng)化血瓊脂平板卡那萬古霉素凍溶血瓊脂平板七葉苷膽汁平板等等2分離培養(yǎng)
1初步培養(yǎng)152)標(biāo)本的接種每份標(biāo)本應(yīng)接種3個培養(yǎng)平板,分別放置于有氧,無氧和含5%~10%的CO2的容器中,有時需要專用的培養(yǎng)基2)標(biāo)本的接種16
3)厭氧培養(yǎng)法a厭氧罐培養(yǎng)法b氣袋法c氣體噴射法d厭氧手套箱法e其它等等
3)厭氧培養(yǎng)法172次代培養(yǎng)和厭氧菌的確定2次代培養(yǎng)和厭氧菌的確定183分離培養(yǎng)中可能失敗的原因1)培養(yǎng)前為做標(biāo)本的直接涂片和染色鏡檢2)標(biāo)本在空氣中放置太久或接種時時間過長3)未用新鮮配制的培養(yǎng)基3分離培養(yǎng)中可能失敗的原因194)未用選擇性培養(yǎng)基5)無合適的厭氧罐或裝備出現(xiàn)問題6)培養(yǎng)時間不足7)…..4)未用選擇性培養(yǎng)基20鑒定實(shí)驗(yàn)1形態(tài)和染色重要的是為下一步的鑒定提供參考,時間
破傷風(fēng)梭菌革蘭氏染色改變拉絲實(shí)驗(yàn)加KOH30g/l一滴,能拉絲為陰性不能為陽性鑒定實(shí)驗(yàn)1形態(tài)和染色21PH
痤瘡丙酸桿菌7.0時陰性及多型性6.0及以下革蘭氏陽性桿菌
PH222菌落性狀1)色素產(chǎn)黑色素類桿菌2~10天可產(chǎn)生黑色素;溶齒放線菌培養(yǎng)3~4天產(chǎn)生粉紅色色素2)溶血產(chǎn)氣夾膜梭菌在新鮮的血瓊脂平板上可產(chǎn)生雙溶血環(huán)3)熒光2菌落性狀233抗生素敏感實(shí)驗(yàn)4一些特殊的敏感實(shí)驗(yàn)——聚茴香腦磺酸鈉敏感實(shí)驗(yàn)5生化特性6氣液相色撲7PCR等等3抗生素敏感實(shí)驗(yàn)24有芽孢的厭氧菌簡介梭菌屬G+陳舊性培養(yǎng)基G-有芽孢的厭氧菌簡介25四破傷風(fēng)梭菌大量存在于人和動物的腸道糞便污染傷口被污染導(dǎo)致----------注意消毒清潔芽孢為于頂部,呈鼓槌壯,直徑比菌體粗,呈梭狀可以被用來生物技術(shù),外毒素致毒四破傷風(fēng)梭菌大量存在于人和動物的腸道26一)生物學(xué)性狀染色,培養(yǎng)生化對我們實(shí)驗(yàn)診斷來說最重要一)生物學(xué)性狀27破傷風(fēng)梭菌菌體細(xì)長,長4~8um,寬0.3~0.5um,周身鞭毛,芽胞呈圓形,位于菌體頂端,直徑比菌體寬大,似鼓槌狀,是本菌形態(tài)上的特征。繁殖體為革蘭氏陽性,帶上芽胞的菌體易轉(zhuǎn)為革蘭氏陰性。破傷風(fēng)梭菌為專性厭氧菌,最適生長溫度為37℃pH7.0~7.5,破傷風(fēng)梭菌菌體細(xì)長,長4~8um,寬0.3~0.5um28營養(yǎng)要求不高,在普通瓊脂平板上培養(yǎng)24~48小時后,可形成直徑1mm以上不規(guī)則的菌落,中心緊密,周邊疏松,似羽毛狀菌落,易在培養(yǎng)基表面遷徒擴(kuò)散。在血液瓊脂平板上有明顯溶血環(huán),在皰肉培養(yǎng)基中培養(yǎng),肉湯渾濁,肉渣部分被消化,微變黑,產(chǎn)生氣體,生成甲基硫醇(有腐敗臭味)及硫化氫。營養(yǎng)要求不高,在普通瓊脂平板上培養(yǎng)24~48小時后,可形成直29病原性真菌檢驗(yàn)臨床微生物學(xué)課件30一般不發(fā)酵糖類,能液化明膠,產(chǎn)生硫化氫,形成吲哚,不能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽。對蛋白質(zhì)有微弱消化作用。本菌繁殖體抵抗力與其他細(xì)菌相似,但芽胞抵抗力強(qiáng)大。在土壤中可存活數(shù)十年,能耐煮沸40~50分鐘。對青霉素敏感,磺胺類有抑菌作用。一般不發(fā)酵糖類,能液化明膠,產(chǎn)生硫化氫,形成吲哚,不能還原硝31二)致病性與免疫性破傷風(fēng)梭菌芽胞廣泛分布于自然界中可由傷口侵入人體,發(fā)芽繁殖而致病,但破傷風(fēng)梭菌是厭氧菌,在一般傷口中不能生長,傷口的厭氧環(huán)境是破傷風(fēng)梭菌感染的重要條件。窄而深的傷口(如剌傷),有泥土或異物污染,或大面積創(chuàng)傷、燒傷、壞死組織多,局部組織缺血或同時有需氧菌或兼性厭氧菌混合感染,均易造成厭氧環(huán)境,局部氧化還原電勢降低。有利于破傷風(fēng)桿菌生長二)致病性與免疫性破傷風(fēng)梭菌芽胞廣泛分布于自然界中可由傷口侵32破傷風(fēng)梭菌能產(chǎn)生強(qiáng)烈的外毒素,即破傷風(fēng)痙攣毒素(Tetanospasmin)或稱神經(jīng)毒素(Neurotoxin)。破傷風(fēng)毒痙攣毒素是一種神經(jīng)毒素,為蛋白質(zhì),由十余種氨基酸組成不耐熱,可被腸道蛋白酶破壞,故口服毒素不起作用。在菌體內(nèi)的痙攣毒素是單一和一條多肽鏈,分子量15萬。破傷風(fēng)毒素的毒性非常強(qiáng)烈,僅次于肉毒毒素。破傷風(fēng)梭菌沒有侵襲力破傷風(fēng)梭菌能產(chǎn)生強(qiáng)烈的外毒素,即破傷風(fēng)痙攣毒素(Tetano33三)微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集檢驗(yàn)程序檢驗(yàn)方法和鑒定三)微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集34五氣性壞疽病原菌以組織壞死,水腫,產(chǎn)氣及全身中毒的嚴(yán)重的急性外傷感染包括很多-----重點(diǎn)產(chǎn)氣夾膜梭菌五氣性壞疽病原菌以組織壞死,水腫,產(chǎn)氣及全身中毒的嚴(yán)重的急35產(chǎn)氣夾膜梭菌生物學(xué)性狀形態(tài)和染色培養(yǎng)特性生化反應(yīng)致病性產(chǎn)氣夾膜梭菌生物學(xué)性狀36為革蘭氏陽性粗大梭菌,3~4×1~1.5um。單獨(dú)或成雙排列,有時也可成短鏈排列。芽胞呈卵圓形,芽胞寬度不比菌體大,位于中央或末次端。培養(yǎng)時芽胞少見,須在無糖培養(yǎng)基中才能生成芽胞。在膿汁、壞死組織或感染動物臟器的涂片上,可見有明顯的莢膜,無鞭毛,不能運(yùn)動。為革蘭氏陽性粗大梭菌,3~4×1~1.5um。單獨(dú)或成雙排列37厭氧程度不如破傷風(fēng)梭菌要求高。在血液瓊脂平板上菌落較大、灰白色、不透明,邊緣呈鋸齒狀,多數(shù)菌株有雙層溶血環(huán),內(nèi)環(huán)是θ毒素的作用,而外環(huán)不完全溶血是a毒素所致。不能消化已凝固的蛋白質(zhì)和血清。厭氧程度不如破傷風(fēng)梭菌要求高。在血液瓊脂平板上菌落較大、灰白38在皰肉培養(yǎng)基中肉渣不被消化,有時呈肉紅色。在牛乳培養(yǎng)基中能分解乳糖產(chǎn)酸,使酪蛋白凝固,同時生成大量氣體,將凝固的酪蛋白沖成海棉狀碎塊。管內(nèi)氣體常將覆蓋在液體上的凡士林層向上推擠,這種現(xiàn)象稱為“洶涌發(fā)酵”,是本菌的特點(diǎn)之一。在皰肉培養(yǎng)基中肉渣不被消化,有時呈肉紅色。在牛乳培養(yǎng)基中能分39病原性真菌檢驗(yàn)臨床微生物學(xué)課件40能分解多種糖類,如葡萄糖、麥芽糖、蔗糖和乳糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不發(fā)酵甘露糖或水楊苷,能液化明膠,產(chǎn)生硫化氫,能分解多種糖類,如葡萄糖、麥芽糖、蔗糖和乳糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不發(fā)41致病條件與破傷風(fēng)梭菌相似。產(chǎn)氣莢膜梭菌既能產(chǎn)生強(qiáng)烈的外毒素,又有多種侵襲性酶,并有莢膜,構(gòu)成其強(qiáng)大的侵襲力,引起感染致病。致病條件與破傷風(fēng)梭菌相似。產(chǎn)氣莢膜梭菌既能產(chǎn)生強(qiáng)烈的外毒素,421.氣性壞疽2.食物中毒3.急性壞死性腸炎1.氣性壞疽431.直接涂片鏡檢從傷口深部取材涂片,革蘭氏染色鏡檢,可見革蘭氏陽性大桿菌,并有莢膜,常伴有其他雜菌,白細(xì)胞甚少,形態(tài)不規(guī)則,這是氣性壞疽標(biāo)本涂片的特點(diǎn)。1.直接涂片鏡檢從傷口深部取材涂片,革蘭氏染色鏡檢,可見革442.分離培養(yǎng)與鑒定取壞死組織制成懸液,接種于血球脂平板上或皰肉培養(yǎng)基中,厭氧培養(yǎng),觀察生長情況。取細(xì)菌培養(yǎng)物涂片鏡檢,并進(jìn)一步用生化反應(yīng)鑒定。2.分離培養(yǎng)與鑒定取壞死組織制成懸液,接種于血球脂平板上或453.動物實(shí)驗(yàn)取培養(yǎng)液0.5~1ml給小鼠或家兔靜脈內(nèi)注射,10分鐘后殺死動物,置37℃5~8小時。如動物軀體膨脹,即行解剖,可見臟器和肌肉內(nèi)有大量氣泡,尤以肝臟最為明顯,稱“泡沫肝”。取內(nèi)臟或心血涂片鏡檢或分離培養(yǎng),可發(fā)現(xiàn)有革蘭氏陽性大桿菌,并有明顯莢膜。3.動物實(shí)驗(yàn)取培養(yǎng)液0.5~1ml給小鼠或家兔靜脈內(nèi)注射,46無芽孢的厭氧菌 革蘭氏陰性的桿菌革蘭氏陽性的桿菌革蘭氏陰性的球菌革蘭氏陽性的球菌無芽孢的厭氧菌 革蘭氏陰性的桿菌47革蘭氏陰性的桿菌
------正常菌群的組成部分
類桿菌屬革蘭氏陰性的桿菌
------正常菌群的組成部分類桿48樹立質(zhì)量法制觀念、提高全員質(zhì)量意識。11月-2211月-22Saturday,November5,2022人生得意須盡歡,莫使金樽空對月。00:22:0400:22:0400:2211/5/202212:22:04AM安全象只弓,不拉它就松,要想保安全,常把弓弦繃。11月-2200:22:0400:22Nov-2205-Nov-22加強(qiáng)交通建設(shè)管理,確保工程建設(shè)質(zhì)量。00:22:0400:22:0400:22Saturday,November5,2022安全在于心細(xì),事故出在麻痹。11月-2211月-2200:22:0400:22:04November5,2022踏實(shí)肯干,努力奮斗。2022年11月5日12:22上午11月-2211月-22追求至善憑技術(shù)開拓市場,憑管理增創(chuàng)效益,憑服務(wù)樹立形象。05十一月202212:22:04上午00:22:0411月-22嚴(yán)格把控質(zhì)量關(guān),讓生產(chǎn)更加有保障。十一月2212:22上午11月-2200:22November5,2022作業(yè)標(biāo)準(zhǔn)記得牢,駕輕就熟除煩惱。2022/11/50:22:0400:22:0405November2022好的事情馬上就會到來,一切都是最好的安排。12:22:04上午12:22上午00:22:0411月-22一馬當(dāng)先,全員舉績,梅開二度,業(yè)績保底。11月-2211月-2200:2200:22:0400:22:04Nov-22牢記安全之責(zé),善謀安全之策,力務(wù)安全之實(shí)。2022/11/50:22:04Saturday,November5,2022相信相信得力量。11月-222022/11/50:22:0411月-22謝謝大家!樹立質(zhì)量法制觀念、提高全員質(zhì)量意識。11月-2211月-2249厭氧性細(xì)菌及檢驗(yàn)
臨床微生物教研室
袁小澎厭氧性細(xì)菌及檢驗(yàn)
臨床微生物教研室50一定義有氧條件下不能生長,無氧條件(不是絕對)下才可以生長的一類細(xì)菌1836年P(guān)asteur提出臨床上日益受到重視,60%臨床標(biāo)本存在厭氧菌感染---------------------需要重視一定義有氧條件下不能生長,無氧條件(不是絕對)下才可以生長的51病原性真菌檢驗(yàn)臨床微生物學(xué)課件52二分類
1有芽孢厭氧性細(xì)菌一個梭菌屬包括83個種2無芽孢厭氧性細(xì)菌40多個菌屬,300多個菌種和亞種二分類1有芽孢厭氧性細(xì)菌53三感染分布原因臨床癥狀三感染分布54厭氧菌在正常人體內(nèi)的分布厭氧菌皮膚上呼吸道口腔腸道尿道陰道一芽孢菌G+桿菌梭狀芽孢桿菌屬二無芽孢菌(一)G+的桿菌雙歧桿菌(二)G-的桿菌類桿菌屬(三)G+的球菌消化球菌屬(四)G-的球菌韋榮氏菌屬000+000+++±++++++++++++++++±0+±±±±++++厭氧菌在正常人體內(nèi)的分布厭氧菌皮膚上呼吸道口腔腸道尿道陰道一55致病的原因1組織缺氧或氧化還原電勢降低穿刺傷等封閉性傷口,血管壓迫,腫瘤壓迫等等2機(jī)體免疫力低下致病的原因1組織缺氧或氧化還原電勢降低56臨床的癥狀1感染部位產(chǎn)生大量氣體,組織膿腫和壞死,皮下有捻發(fā)音,是產(chǎn)氣夾膜梭菌感染的特征2分泌物有惡臭,或?yàn)榘导t色,分泌物涂片經(jīng)革蘭氏染色,發(fā)現(xiàn)細(xì)菌,而培養(yǎng)陰性的3其它等等臨床的癥狀1感染部位產(chǎn)生大量氣體,組織膿腫和壞57厭氧菌標(biāo)本的采集和送檢標(biāo)本的采集和送檢------------1標(biāo)本決不能被正常菌群污染;2應(yīng)盡量避免空氣厭氧菌標(biāo)本的采集和送檢標(biāo)本的采集和送檢-----------58標(biāo)本的采集標(biāo)本來源收集的方法封閉性膿腫婦女生殖道下呼吸道分泌物胸腔竇道,子宮腔,深部創(chuàng)傷組織尿道針管抽取后穹隆穿刺抽取肺穿刺術(shù)胸腔穿刺術(shù)靜脈注射的塑料導(dǎo)管穿入無菌外科切開上陰部膀胱穿刺標(biāo)本的采集標(biāo)本來源收集的方法封閉性膿腫針管抽取59標(biāo)本的送運(yùn)與處理針筒送運(yùn)法無菌小瓶送運(yùn)法棉拭送運(yùn)法大量標(biāo)本送運(yùn)法組織塊送運(yùn)法厭氧袋送運(yùn)法標(biāo)本的送運(yùn)與處理針筒送運(yùn)法60分離和鑒定
分離和鑒定
61病原性真菌檢驗(yàn)臨床微生物學(xué)課件62檢驗(yàn)的方法1直接鏡檢一些特殊的特點(diǎn),臨床工作中的總結(jié)可對初步判斷及臨床應(yīng)用做早一步的指導(dǎo)作用檢驗(yàn)的方法1直接鏡檢632分離培養(yǎng)
1初步培養(yǎng)1)培養(yǎng)基的選擇強(qiáng)化血瓊脂平板卡那萬古霉素凍溶血瓊脂平板七葉苷膽汁平板等等2分離培養(yǎng)
1初步培養(yǎng)642)標(biāo)本的接種每份標(biāo)本應(yīng)接種3個培養(yǎng)平板,分別放置于有氧,無氧和含5%~10%的CO2的容器中,有時需要專用的培養(yǎng)基2)標(biāo)本的接種65
3)厭氧培養(yǎng)法a厭氧罐培養(yǎng)法b氣袋法c氣體噴射法d厭氧手套箱法e其它等等
3)厭氧培養(yǎng)法662次代培養(yǎng)和厭氧菌的確定2次代培養(yǎng)和厭氧菌的確定673分離培養(yǎng)中可能失敗的原因1)培養(yǎng)前為做標(biāo)本的直接涂片和染色鏡檢2)標(biāo)本在空氣中放置太久或接種時時間過長3)未用新鮮配制的培養(yǎng)基3分離培養(yǎng)中可能失敗的原因684)未用選擇性培養(yǎng)基5)無合適的厭氧罐或裝備出現(xiàn)問題6)培養(yǎng)時間不足7)…..4)未用選擇性培養(yǎng)基69鑒定實(shí)驗(yàn)1形態(tài)和染色重要的是為下一步的鑒定提供參考,時間
破傷風(fēng)梭菌革蘭氏染色改變拉絲實(shí)驗(yàn)加KOH30g/l一滴,能拉絲為陰性不能為陽性鑒定實(shí)驗(yàn)1形態(tài)和染色70PH
痤瘡丙酸桿菌7.0時陰性及多型性6.0及以下革蘭氏陽性桿菌
PH712菌落性狀1)色素產(chǎn)黑色素類桿菌2~10天可產(chǎn)生黑色素;溶齒放線菌培養(yǎng)3~4天產(chǎn)生粉紅色色素2)溶血產(chǎn)氣夾膜梭菌在新鮮的血瓊脂平板上可產(chǎn)生雙溶血環(huán)3)熒光2菌落性狀723抗生素敏感實(shí)驗(yàn)4一些特殊的敏感實(shí)驗(yàn)——聚茴香腦磺酸鈉敏感實(shí)驗(yàn)5生化特性6氣液相色撲7PCR等等3抗生素敏感實(shí)驗(yàn)73有芽孢的厭氧菌簡介梭菌屬G+陳舊性培養(yǎng)基G-有芽孢的厭氧菌簡介74四破傷風(fēng)梭菌大量存在于人和動物的腸道糞便污染傷口被污染導(dǎo)致----------注意消毒清潔芽孢為于頂部,呈鼓槌壯,直徑比菌體粗,呈梭狀可以被用來生物技術(shù),外毒素致毒四破傷風(fēng)梭菌大量存在于人和動物的腸道75一)生物學(xué)性狀染色,培養(yǎng)生化對我們實(shí)驗(yàn)診斷來說最重要一)生物學(xué)性狀76破傷風(fēng)梭菌菌體細(xì)長,長4~8um,寬0.3~0.5um,周身鞭毛,芽胞呈圓形,位于菌體頂端,直徑比菌體寬大,似鼓槌狀,是本菌形態(tài)上的特征。繁殖體為革蘭氏陽性,帶上芽胞的菌體易轉(zhuǎn)為革蘭氏陰性。破傷風(fēng)梭菌為專性厭氧菌,最適生長溫度為37℃pH7.0~7.5,破傷風(fēng)梭菌菌體細(xì)長,長4~8um,寬0.3~0.5um77營養(yǎng)要求不高,在普通瓊脂平板上培養(yǎng)24~48小時后,可形成直徑1mm以上不規(guī)則的菌落,中心緊密,周邊疏松,似羽毛狀菌落,易在培養(yǎng)基表面遷徒擴(kuò)散。在血液瓊脂平板上有明顯溶血環(huán),在皰肉培養(yǎng)基中培養(yǎng),肉湯渾濁,肉渣部分被消化,微變黑,產(chǎn)生氣體,生成甲基硫醇(有腐敗臭味)及硫化氫。營養(yǎng)要求不高,在普通瓊脂平板上培養(yǎng)24~48小時后,可形成直78病原性真菌檢驗(yàn)臨床微生物學(xué)課件79一般不發(fā)酵糖類,能液化明膠,產(chǎn)生硫化氫,形成吲哚,不能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽。對蛋白質(zhì)有微弱消化作用。本菌繁殖體抵抗力與其他細(xì)菌相似,但芽胞抵抗力強(qiáng)大。在土壤中可存活數(shù)十年,能耐煮沸40~50分鐘。對青霉素敏感,磺胺類有抑菌作用。一般不發(fā)酵糖類,能液化明膠,產(chǎn)生硫化氫,形成吲哚,不能還原硝80二)致病性與免疫性破傷風(fēng)梭菌芽胞廣泛分布于自然界中可由傷口侵入人體,發(fā)芽繁殖而致病,但破傷風(fēng)梭菌是厭氧菌,在一般傷口中不能生長,傷口的厭氧環(huán)境是破傷風(fēng)梭菌感染的重要條件。窄而深的傷口(如剌傷),有泥土或異物污染,或大面積創(chuàng)傷、燒傷、壞死組織多,局部組織缺血或同時有需氧菌或兼性厭氧菌混合感染,均易造成厭氧環(huán)境,局部氧化還原電勢降低。有利于破傷風(fēng)桿菌生長二)致病性與免疫性破傷風(fēng)梭菌芽胞廣泛分布于自然界中可由傷口侵81破傷風(fēng)梭菌能產(chǎn)生強(qiáng)烈的外毒素,即破傷風(fēng)痙攣毒素(Tetanospasmin)或稱神經(jīng)毒素(Neurotoxin)。破傷風(fēng)毒痙攣毒素是一種神經(jīng)毒素,為蛋白質(zhì),由十余種氨基酸組成不耐熱,可被腸道蛋白酶破壞,故口服毒素不起作用。在菌體內(nèi)的痙攣毒素是單一和一條多肽鏈,分子量15萬。破傷風(fēng)毒素的毒性非常強(qiáng)烈,僅次于肉毒毒素。破傷風(fēng)梭菌沒有侵襲力破傷風(fēng)梭菌能產(chǎn)生強(qiáng)烈的外毒素,即破傷風(fēng)痙攣毒素(Tetano82三)微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集檢驗(yàn)程序檢驗(yàn)方法和鑒定三)微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集83五氣性壞疽病原菌以組織壞死,水腫,產(chǎn)氣及全身中毒的嚴(yán)重的急性外傷感染包括很多-----重點(diǎn)產(chǎn)氣夾膜梭菌五氣性壞疽病原菌以組織壞死,水腫,產(chǎn)氣及全身中毒的嚴(yán)重的急84產(chǎn)氣夾膜梭菌生物學(xué)性狀形態(tài)和染色培養(yǎng)特性生化反應(yīng)致病性產(chǎn)氣夾膜梭菌生物學(xué)性狀85為革蘭氏陽性粗大梭菌,3~4×1~1.5um。單獨(dú)或成雙排列,有時也可成短鏈排列。芽胞呈卵圓形,芽胞寬度不比菌體大,位于中央或末次端。培養(yǎng)時芽胞少見,須在無糖培養(yǎng)基中才能生成芽胞。在膿汁、壞死組織或感染動物臟器的涂片上,可見有明顯的莢膜,無鞭毛,不能運(yùn)動。為革蘭氏陽性粗大梭菌,3~4×1~1.5um。單獨(dú)或成雙排列86厭氧程度不如破傷風(fēng)梭菌要求高。在血液瓊脂平板上菌落較大、灰白色、不透明,邊緣呈鋸齒狀,多數(shù)菌株有雙層溶血環(huán),內(nèi)環(huán)是θ毒素的作用,而外環(huán)不完全溶血是a毒素所致。不能消化已凝固的蛋白質(zhì)和血清。厭氧程度不如破傷風(fēng)梭菌要求高。在血液瓊脂平板上菌落較大、灰白87在皰肉培養(yǎng)基中肉渣不被消化,有時呈肉紅色。在牛乳培養(yǎng)基中能分解乳糖產(chǎn)酸,使酪蛋白凝固,同時生成大量氣體,將凝固的酪蛋白沖成海棉狀碎塊。管內(nèi)氣體常將覆蓋在液體上的凡士林層向上推擠,這種現(xiàn)象稱為“洶涌發(fā)酵”,是本菌的特點(diǎn)之一。在皰肉培養(yǎng)基中肉渣不被消化,有時呈肉紅色。在牛乳培養(yǎng)基中能分88病原性真菌檢驗(yàn)臨床微生物學(xué)課件89能分解多種糖類,如葡萄糖、麥芽糖、蔗糖和乳糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不發(fā)酵甘露糖或水楊苷,能液化明膠,產(chǎn)生硫化氫,能分解多種糖類,如葡萄糖、麥芽糖、蔗糖和乳糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不發(fā)90致病條件與破傷風(fēng)梭菌相似。產(chǎn)氣莢膜梭菌既能產(chǎn)生強(qiáng)烈的外毒素,又有多種侵襲性酶,并有莢膜,構(gòu)成其強(qiáng)大的侵襲力,引起感染致病。致病條件與破傷風(fēng)梭菌相似。產(chǎn)氣莢膜梭菌既能產(chǎn)生強(qiáng)烈的外毒素,911.氣性壞疽2.食物中毒3.急性壞死性腸炎1.氣性壞疽921.直接涂片鏡檢從傷口深部取材涂片,革蘭氏染色鏡檢,可見革蘭氏陽性大桿菌,并有莢膜,常伴有其他雜菌,白細(xì)胞甚少,形態(tài)不規(guī)則,這是氣性壞疽標(biāo)本涂片的特點(diǎn)。1.直接涂片鏡檢從傷口深部取材涂片,革蘭氏染色鏡檢,可見革932.分離培養(yǎng)與鑒定取壞死組織制成懸液,接種于血球脂平板上或皰肉培養(yǎng)基中,厭氧培養(yǎng),觀察生長情況。取細(xì)菌培養(yǎng)物涂片鏡檢,并進(jìn)一步用生化反應(yīng)鑒定。2.分離培養(yǎng)與鑒定取壞死組織制成懸液,接種于血球脂平板上或943.動物實(shí)驗(yàn)取培養(yǎng)液0.5~1ml給小鼠或家兔靜脈內(nèi)
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