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文檔簡介
演示文稿基因工程概念第一頁,共二十五頁。基因工程概念第二頁,共二十五頁。1、原理:2、操作水平:3、又稱:4、優(yōu)點:基因重組DNA分子水平DNA重組技術(shù)或基因拼接技術(shù)⑴定向改造生物性狀⑵克服遠緣雜交不親和的障礙⑶育種周期短第三頁,共二十五頁?;蚬こ痰膭e名操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程實質(zhì)結(jié)果基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)生物體外基因DNA分子水平人類需要的基因產(chǎn)物剪切→拼接→導(dǎo)入→表達基因重組一、基因工程的概念第四頁,共二十五頁。二、基因工程的基本工具看書,思考以下問題:1、基因工程中三種基本工具的作用分別是什么?2、工具酶的作用部位分別在哪?3、具備什么條件才能充當“分子運輸車”?第五頁,共二十五頁。解決培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟需要哪些工具?關(guān)鍵步驟一的工具:關(guān)鍵步驟二的工具:關(guān)鍵步驟三的工具:基因的剪刀——限制酶基因的針線——DNA連接酶基因的運載工具——運載體第六頁,共二十五頁。(一)“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶1、來源:主要來自原核生物2、特點:具有專一性(特異性)表現(xiàn)在兩方面:(1)識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列(2)從特定部位的兩個核苷酸之間切開3、作用:特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開4、結(jié)果:產(chǎn)生黏性末端或平末端第七頁,共二十五頁。第八頁,共二十五頁。SmaⅠ平末端平末端第九頁,共二十五頁。
EcoRⅠ黏性末端黏性末端第十頁,共二十五頁。黏性末端和平末端第十一頁,共二十五頁。限制酶所識別的序列有什么特點
限制酶所識別的序列,無論是6個堿基還是4個堿基,都可以找到一條中心軸線,中軸線兩側(cè)的雙鏈DNA上的堿基是反向?qū)ΨQ重復(fù)排列的。第十二頁,共二十五頁。(二)“分子縫合針”——DNA連接酶1、種類:⑴E·coliDNA連接酶⑵T4DNA連接酶2、作用:第十三頁,共二十五頁。
可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來,E·coliDNA連接酶或T4DNA連接酶即恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵第十四頁,共二十五頁。
DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎?T4DNA連接酶還可把平末端之間的縫隙“縫合”起來,但效率較低第十五頁,共二十五頁。DNA連接酶DNA聚合酶連接DNA鏈雙鏈單鏈連接部位在兩DNA片段之間形成磷酸二酯鍵將單個核苷酸加到已存在的核酸片段上,形成磷酸二酯鍵第十六頁,共二十五頁。
常用的運載體:質(zhì)粒、噬菌體和動、植物病毒等(三)“分子運輸車”——運載體第十七頁,共二十五頁。載體必須具備的條件如果載體對受體細胞有害將怎樣?目的基因是否進入受體細胞,沒有標記基因我們能否鑒定?假如目的基因?qū)胧荏w細胞后不能復(fù)制將怎樣?作為載體沒有切割位點將怎樣?第十八頁,共二十五頁。作為載體的必要條件1、能夠在宿主細胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存;2、具有多個限制酶切點,以便與外源基因連接;3、具有某些標記基因,便于進行篩選。(如抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因等)4、對受體細胞無害第十九頁,共二十五頁。(三)“分子運輸車”——運載體2、種類:1、需要具備的條件:(1)在受體細胞中穩(wěn)定存在,能自我復(fù)制(2)有一個或多個切割位點(3)有標記基因(4)對受體細胞無害質(zhì)粒、噬菌體、動植物病毒等第二十頁,共二十五頁。以下是兩種限制酶切割后形成的DNA片段,試分析:①GC…②AATTC…③…GC④…CTTAACG…G…
…CG…G
(1)其中①和
是由一種限制酶切割形成的
末端,(2)
和
是由另一種限制酶切割形成的
末端,反饋練習:第二十一頁,共二十五頁。在基因工程中,切割運載體和含有目的基因的DNA片段,需使用()同種限制酶B.兩種限制酶同種連接酶D.兩種連接酶基因工程常用的受體細胞有()(1)大腸桿菌(2)枯草桿菌(3)支原體(4)動植物細胞A.(3)(4)B.(1)(2)(4)C.(2)(3)(4)D.(1)(2)(3)第二十二頁,共二十五頁。不屬于質(zhì)粒被選為基因運載體的理由是
A、能復(fù)制()
B、有多個限制酶切點
C、具有標記基因
D、它是環(huán)狀DNAD第二十三頁,共二十五頁。1、下列不適合用于基因工程的運載體是()
A、質(zhì)粒B、噬菌體
C、細菌D、病毒選我C2、下列說法正確的是:()
A、限制酶的切口一定是GAATTC堿基序列
B、質(zhì)粒是基因工程中唯一的運載體
C、重組技術(shù)所用的工具酶是限制酶、連接酶、運載體
D、利用運載體在宿主細胞內(nèi)對目的基因進行大量復(fù)制的過程可稱為“克隆”選我D審題第二十四頁,共二十五頁。3、下列黏性末端屬于同種內(nèi)切酶切割而成的是()
A、①②B、①③C、①④D、②③TCGAGCTTAAAGGTTCCAAGCTTCAGAATTC
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