臨床血液學(xué)檢驗講義

貧血及其細(xì)胞學(xué)檢1：、、尿毒正常后4：紅細(xì)胞生成減少骨髓造血功能如再障造血原料缺乏或失利用如缺鐵性貧血巨幼細(xì)胞貧血、鐵粒幼細(xì)胞性貧血。紅細(xì)胞破壞過多如溶血性再生性貧血，純紅再障，骨髓增再生性貧血，純紅再障，骨髓增生異常綜合征骨髓病性貧血（白血病、骨髓瘤、癌轉(zhuǎn)移、骨髓纖維化繼發(fā)性貧血（腎病、肝病、性疾病、內(nèi)疾病等B12紅細(xì)胞膜異遺傳性球形、橢圓形、口形紅細(xì)胞增多癥，陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿紅蛋白異珠蛋白生成性貧血，異常血紅蛋白病，不穩(wěn)定血紅蛋紅細(xì)胞外在免疫溶血因自身免疫性，藥物誘發(fā)，新生兒同種免疫性，血型不合輸理化等因其脾功能亢貧血的實驗方法與步男女血紅蛋白＜110（孕婦血細(xì)胞比容紅細(xì)胞計數(shù)小兒標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)世界衛(wèi)生組織資料和1986年兒童的建議為：出生10d內(nèi)新生兒Hb14歲者Hb小于120g/L，可貧血。6：鐵的來源與吸收：每天的膳食，只有約10%的鐵（即1mg）腸和空腸上段腸黏膜吸收。鐵的及排泄：鐵以鐵蛋白及含鐵血黃素的形式。孕婦和兒童的排泄量高出成人數(shù)倍7：（1）鐵測原理：鐵以Fe3＋形式與轉(zhuǎn)鐵蛋白（Tf）結(jié)合存在，降低介質(zhì)pH及加入還原劑（如抗壞血酸、（如菲咯嗪和2，2’-聯(lián)吡啶等）反應(yīng)，生成有色絡(luò)合物，同時作標(biāo)準(zhǔn)對照，計算清鐵的含量參考值：成年11.6～31.3μmol/L，女性臨床意義鐵降低見于缺鐵性貧血失血營養(yǎng)缺乏和慢增高見于肝臟疾病造血不良、無效性增生、慢性溶血、反復(fù)輸血和鐵負(fù)荷過重。（2）鐵蛋白測125I蛋白與固相上結(jié)合的鐵蛋白相結(jié)合，除去未結(jié)合的過多的放免標(biāo)記物，洗脫結(jié)合放免標(biāo)記的鐵蛋白，用計數(shù)器與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，計算出鐵蛋白值。參考值：成人15～200μg/L，女性12～150μg/L，小兒低于成人；至中年，高于、急染和。（3）總鐵結(jié)合力測原理總鐵結(jié)合（TIBC通常情況下僅有1/3的運(yùn)鐵蛋白與鐵結(jié)合在中加入已知過量的鐵標(biāo)準(zhǔn)液使中全部的f與鐵結(jié)合達(dá)到飽和狀態(tài)再用吸附（輕質(zhì)碳酸鎂除去多余的鐵按上法測定鐵含量，其結(jié)果為總鐵結(jié)合力，如再減去先測的鐵，則為未飽和鐵結(jié)合力（UIBCTIBC：50～77μmol/L，女性54～77μmol/L臨床意義增高見于缺鐵性貧血紅細(xì)胞增多癥降低或正常見于肝臟疾病性血、血色病和溶血性貧血，顯著降低者見于腎病綜合征。轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度參考值：20%～50%（均值34%，女性33%）臨床意義降低見于缺鐵性貧（TS小于15%炎癥等增高見于鐵利用如鐵粒幼細(xì)胞貧血、再障；鐵負(fù)荷過重，如血色病早期，鐵增加不顯著，但鐵已增加，TS大于70%，這是的可靠指標(biāo)。臨床意義：增高見于缺鐵性貧血、妊娠；降低見于腎病綜合征、肝硬化、、炎癥8：缺鐵原因鐵攝入不1.膳食不足營養(yǎng)不良，偏2.需要量增加生長較快嬰幼兒，婦女，婦女妊娠期、哺乳3.吸收胃炎及胃酸缺乏，胃大部切除，慢性腹瀉，化學(xué)藥物影鐵丟失過1.過多，妊娠失4.各種性疾病分期：臨床缺鐵分為三個階段①缺鐵期：鐵下降，早期出現(xiàn)鐵蛋白下降②缺鐵性紅細(xì)胞生成期：鐵更進(jìn)一步減少，鐵蛋白減少，鐵和轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度下降，總鐵合力增高和游離原卟啉升高，出現(xiàn)一般癥狀；1：缺鐵性貧血外周紅細(xì)胞形鐵染色與鐵代謝的檢查特骨髓鐵減少：骨髓鐵染色示鐵，鐵粒幼細(xì)胞少于15%2）鐵蛋白（SF）小于14μg/L，轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度小于15%，鐵小于8.95μmol/L，總鐵結(jié)合力大于64.44μmol/L，紅細(xì)胞游離原卟啉大于0.9μmol/L（全血）。缺鐵性貧血的鑒別珠蛋白生成性貧血：常有史，自幼貧血，脾臟腫大。血涂片可見較多靶形紅細(xì)胞，RDW多在正常水平。骨髓鐵染色細(xì)胞外鐵和細(xì)胞內(nèi)鐵都增加，鐵和運(yùn)鐵蛋白飽和度增加。慢性系統(tǒng)性疾病貧血：患者多為正細(xì)胞素性或小細(xì)胞素貧血。骨髓鐵染色細(xì)胞外鐵增加、內(nèi)鐵增加或偏少；鐵蛋白正常或增加；鐵、運(yùn)鐵蛋白飽和度降低；總鐵結(jié)合力正?；蚪档?。13：鐵粒幼細(xì)胞貧血的實驗檢查及鑒別血象：貧血可輕可重，為正細(xì)胞低色素性貧血，血片上細(xì)胞大小正常或偏大，部分為素性，即呈兩種紅細(xì)胞并存的“雙形性”，這是本病的特征之一?？沙霈F(xiàn)紅細(xì)胞大小不均、異形、碎片、靶形紅細(xì)胞或有核紅細(xì)胞等。點彩紅細(xì)胞可增多（特別是繼發(fā)于鉛者）。網(wǎng)織紅細(xì)胞正?；蜉p度增高。白細(xì)胞和血小板正常或減低。獲得性性者可出現(xiàn)中性粒細(xì)胞顆粒減少、Pelger樣核常和少量幼稚粒細(xì)胞。5（4），（1/3稱此為環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞此種細(xì)胞常占幼紅細(xì)胞15%以上為本病特征和重要依據(jù)在熟紅細(xì)胞中也常見鐵粒（鐵粒紅細(xì)胞）。亦有少數(shù)降低；總鐵結(jié)合力正?；驕p低，故運(yùn)鐵蛋白飽和度明顯增高，甚至達(dá)到完全飽和。鑒別：本病需與缺鐵性貧血和珠蛋白生成性貧血進(jìn)行鑒別三、DNA性貧血14：維生B12的代人類維生素B12要2～5μg，而體內(nèi)貯量約為4～5mg，可供3～5年使用，故一般情況下是不會缺乏的。B12R二指腸后在胰蛋白酶的參與下與胃底黏膜壁細(xì)胞的內(nèi)因子結(jié)合形成維生素B12-內(nèi)因子復(fù)合體該合體可抵抗腸道消化酶和腸道細(xì)菌、對維生素B12的破壞和攝取。維生B12-內(nèi)因子復(fù)合體在Ca2＋、Mg2＋pH5條件下，與回腸末端腸黏膜絨毛上的特殊受體結(jié)合，被運(yùn)到組織中，其中一半于肝細(xì)胞內(nèi)。維生素B12的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)還有一個肝腸循環(huán)，即每天有鈷胺隨膽90IFB12吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)的因素有：胃腸疾病導(dǎo)致的胃酸、胃蛋白酶減少全胃切除和一些疾病如惡性貧血的內(nèi)因子完全缺乏時影響最大，因為膽汁中的維生素B12再吸收；胰腺胰蛋白酶缺乏等維生素B12參與體內(nèi)多種生化反應(yīng)除參與DNA的外與關(guān)系密切的還有腺苷鈷胺參與促使甲基丙二酰輔酶A轉(zhuǎn)變?yōu)殓牾］o酶AB12A大量堆積而形成非生理性的單鏈脂肪酸，影響神經(jīng)鞘磷脂形成，造成神經(jīng)的脫髓鞘改變，出現(xiàn)各種神經(jīng)系統(tǒng)的癥狀。這是維生素B12缺乏所致的巨幼細(xì)胞貧血的突出特點另外鈷胺還參與體內(nèi)化物的代謝使某些含化合物的食物、煙草的化物變?yōu)闊o毒物質(zhì)。維生素B12每天經(jīng)尿液、糞便排出，唾液、淚液及中也有少量排出。15：物臟器（尤其是肝）、酵母和香菇中亦葉酸。但葉酸不耐熱，可被過度烹煮而破壞。本身不能葉酸，必須靠食物供給。食物中的葉酸為多聚谷氨酸葉酸，溶解度低，須在小腸葉酸結(jié)合蛋（FB對葉酸的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)和具有重要意義目前已知FBP分為可溶葉酸結(jié)合白（sFBP和膜葉酸結(jié)合蛋白兩大類，sFBP在于、、腦脊液、尿液和唾液中。對FEP的來源及生理功能還不十分清楚。正常人每天需要葉酸200μg，孕婦和哺乳者為300～400μg。內(nèi)葉酸量約5～20mg，可供人體50～100d口炎性腹瀉。維生素C有促進(jìn)四氫葉酸的作用，當(dāng)其缺乏時可加重葉酸缺乏。劑如比妥、撲癇酮等可抑制葉酸代謝，抗癌藥如氨甲蝶呤可抑制葉酸還原為TFH，都可巨幼細(xì)胞貧血。葉酸除主要參與DNA外，還在組氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)楣劝彼岬姆磻?yīng)中需要TFH參加。當(dāng)葉酸缺乏時，其中16：巨幼細(xì)胞貧血原因葉酸缺（綠葉蔬菜缺乏或過分烹煮），需要量增加妊娠及哺乳，嬰幼兒生長及青少年發(fā)育期，甲亢，溶血性疾病，，脫落吸收利空腸術(shù)，慢性腸炎，熱帶口炎性腹瀉，麥膠腸病及乳糜瀉，藥物干擾（葉酸拮抗劑抗驚厥藥物抗瘧藥抗結(jié)核藥性酶缺（缺乏51-甲?；鶜淙~酸還原酶等）（素食者、肉類食品缺乏吸收利用胃酸缺乏（萎縮性胃炎和胃切除后），內(nèi)因子缺乏（全胃切除、存在內(nèi)因子抗DNA嘌呤抑制藥甲氨蝶呤、巰嘌呤、硫鳥嘌呤嘧啶抑制藥甲氨蝶呤、6-氮雜尿苷胸腺嘧啶抑制藥甲氧蝶呤、氟尿嘧啶4.DNA抑制藥羥基脲、阿糖胞苷5.（B12轉(zhuǎn)運(yùn)及細(xì)胞內(nèi)利用）Lesch-NyhanB6B1反應(yīng)性的巨幼細(xì)胞貧血巨幼細(xì)胞貧血臨床特征：在我國北方地區(qū)以缺乏葉酸所致的巨幼細(xì)胞貧血多見，而維生素B12缺乏維生素B12缺乏時，使血中丙酰輔酶A堆積而生成非生理性單鏈脂肪酸，影響神經(jīng)髓鞘磷脂的形成，造穩(wěn)、行走；小兒及老年患者常表現(xiàn)為腦神經(jīng)受損的精神異常，如抑郁、嗜睡和精神錯亂；葉酸缺乏患如口腔、胃腸道和的黏膜上皮細(xì)胞影響較明顯，臨也出現(xiàn)相應(yīng)癥狀。巨幼細(xì)胞性貧血的實驗襝查及鑒別血象呈大細(xì)胞素性貧血紅細(xì)呈卵圓形白細(xì)胞計數(shù)正?；蚱土＜?xì)胞出現(xiàn)巨形桿狀和核分葉過多，5葉者大于5%或6葉者大于1%。法）：227nmol／L。葉酸缺乏癥：葉酸檢測（放免法）小于6.91nmol／L（小于3ng／ml）；紅細(xì)胞葉酸檢測（放免法）227nmol／L（50～100ng／ml）。鑒別病進(jìn)行鑒別，骨髓象檢查可有明顯區(qū)別。急性紅白血病（紅血病期）：骨髓中紅系極度增生，常大于50，并有明顯的造血（如類巨幼樣變等B12骨髓增生異常綜合征（MDS）：部分MDS病例可有紅系細(xì)胞的顯著增生，多為中晚幼階段，有明顯的造血（如類巨幼樣變等）粒系細(xì)胞和巨核細(xì)胞也有造血。骨髓鐵染色異常（環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞常＞15%）過碘酸-雪反應(yīng)幼紅細(xì)胞可陽性。葉酸和維生素B12治療能治愈。另外還可通過檢及骨髓活檢鑒別。MDS四、造血功能性貧血再生性貧血概念：是由多種原因致造血干細(xì)胞減少和（或）功能異常，從而引起紅細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、血小板減少的一種獲得性疾病。臨床表現(xiàn)為貧血、和。其發(fā)病原因，分為性再障（FanconiFA）和獲性再障兩種，通常所說的再障是指后者。獲得性再生性貧血，分為原因未明的性再障和繼發(fā)性再障兩類，約各占一半。其特征是造血干細(xì)胞和（或）造血微環(huán)境功能，造血紅髓被脂肪替代，導(dǎo)致全血細(xì)胞減少，進(jìn)性貧血、和，而肝、脾、淋不腫大?；颊咔鄩涯昃佣?，多于女性。本病的病因和發(fā)病機(jī)制復(fù)雜。繼發(fā)性再障的病因主要有①藥物和化學(xué)因素如氯霉素、治療腫瘤的細(xì)胞物苯、殺蟲劑等②因素：如肝炎、EB等③電離輻射：如X線、放射性同位素等④內(nèi)因素：如腺腦垂體功能減退癥及其他因素如妊娠并發(fā)AA2：增殖分化。②造血微環(huán)境缺陷，包括基質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)體液調(diào)節(jié)因子等的缺陷，影響了造血干細(xì)胞的增殖分化調(diào)控因子水平增高（如干擾素、白介素-2）有密切關(guān)系，可抑制自身或正常人的骨髓造血細(xì)胞增殖。④遺傳傾向，AA雖型遺傳性疾病，但有一定的遺傳傾向，患者對致病因素的易感性可能與遺傳因臨床特征：臨根據(jù)其病程及表現(xiàn)將再障分為急性AA和慢性AA兩型急性AA：起病急，進(jìn)展迅速，病程短。貧血呈進(jìn)行性，常伴有嚴(yán)重，部位廣泛并常有內(nèi)臟血；半數(shù)以上病例起病時即有，嚴(yán)重者可發(fā)生敗血癥。此型又稱重型再障-型。主，和較輕，此型又稱輕型再障。如病情，轉(zhuǎn)為重型AA，稱為重型再障-Ⅱ型。再生性貧血的實驗檢查及鑒血象特點：呈正細(xì)胞素性貧血，可有小細(xì)胞增多。網(wǎng)織紅細(xì)胞極低，血小板計數(shù)早期減少2×109/L全片不見或僅有數(shù)個。骨髓病理組織學(xué)檢驗：骨髓增生減退，造血組織與脂肪組織容積比降低（小于0.34）。造血細(xì)胞減少（特別是巨核細(xì)胞減少），非造血細(xì)胞比例增加，并可見間質(zhì)水腫、甚至液性脂肪壞死。骨活檢對再障的具有重要價值。AA的標(biāo)準(zhǔn)如下①全血細(xì)胞減少，網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對值減少②一般無肝脾腫大③骨髓至少1個部位增生減低或重度減低（如增生活躍，須有巨核細(xì)胞明顯減少）細(xì)胞增多（有條件者應(yīng)做骨髓活檢等檢查）。治性貧血、急性造血功能停滯、骨髓纖維化、急性白血病、惡性組織細(xì)胞病等。⑤一般抗貧血藥物治療無效急性與慢性再生性貧血的鑒別急慢＞1↑不顯顯陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥（PNH）：AA與PNH不發(fā)作型鑒別較，但本病及均較輕，骨髓增生異常綜合征（MDS）：AA與MDS中的難治性貧血（RA）鑒別也較。但RA以造血再生危象：是由于多種原因所致的骨髓造血功能急性停滯，本病亦可稱為急性造血功能停滯血中紅細(xì)胞及網(wǎng)織紅細(xì)胞減少或全血細(xì)胞減少。此病可在短期內(nèi)恢復(fù)。等疾病都可有外周血的三系減少，但患者有脾腫大、淋腫大、骨壓痛；外周血有幼稚紅細(xì)胞和幼稚白細(xì)胞；骨髓象特征都與AA明顯不同。降。MCV、MCHC多在正常范圍內(nèi)。白細(xì)胞和血小板形態(tài)正常?！菊_答案】鐵蛋白是鐵【正確答案】A.【正確答案】B.C.過D.【正確答案】A.鐵蛋B.C.轉(zhuǎn)鐵飽和【正確答案】A.鐵蛋B.C.轉(zhuǎn)鐵飽和【正確答案】E.胞漿偏【正確答案】【正確答案】鐵粒幼細(xì)胞貧血重要依據(jù)【正確答案】維生素B12在體內(nèi)量4～5mg，可供機(jī)體使A.1～2B.2～3C.3～5D.5～7【正確答案】C.【正確答案】B12-內(nèi)因子復(fù)合體的吸收部位主要在C.【正確答案】【正確答案】A.【正確答案】吸收后的葉酸D.淋【正確答案】內(nèi)的葉酸約5～20mg，可供使【正確答案】促進(jìn)四氫葉酸的物質(zhì)【正確答案】D.腸道病【正確答案】抑制葉酸還原為TFH，從而巨細(xì)胞貧血的物質(zhì)【正確答案】D.行走【正確答案】【正確答案】5再生性貧血不會出C.E.【正確答案】繼發(fā)性再障貧血因素中最常見的A.肝炎B.流感C.腺D.鼻E.腸道【正確答案】B.較E.治療【正確答案】【正確答案】再生性貧血外周血象不會出A.正細(xì)胞素性貧【正確答案】關(guān)于急性再障貧血和慢性再障貧血的鑒別，錯誤的E.HbF【正確答案】不屬于再生性貧血骨髓特點的【正確答案】A.再生性貧【正確答案】【正確答案】24：要點25：溶血性貧血的分紅細(xì)胞內(nèi)在缺陷所致的溶貧（遺傳性/性膜缺遺傳性球形細(xì)胞增多酶缺葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺血紅蛋白珠蛋白生成性貧紅細(xì)胞外來因素所致的溶貧（獲得性免疫因自身免疫性溶血性貧膜缺陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白化學(xué)因砷化物、、苯肼、蛇毒要點26：血管內(nèi)溶血和血管外溶血的鑒特血管內(nèi)溶血管外溶貧血、黃常常肝、脾腫少常紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)改少常Hb常Hb尿含鐵血黃慢性可一要點27：溶血存在的實驗檢↑↑↑↑↑↑，間期細(xì)胞增多，可見核染色質(zhì)小體及卡波間接膽紅血管內(nèi)溶血結(jié)合珠↓高鐵血紅素白蛋—＋Hb—＋Rous試—＋↑紅細(xì) （51CrT縮要點28：不同類型溶血性貧血實驗選高滲血試Coombs膜蛋白分CoombsCoombs（半抗原、自身免疫型CoombsCoombsRousHamRousCoombs（奎尼丁型CoombsCoombs止血與血栓29：顯示溶血的檢新生態(tài)氧，使聯(lián)苯胺氧化成為藍(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺，可測漿游離血紅蛋白的量。臨床意義血管內(nèi)溶血時顯著升高珠蛋白生成性貧血自身免疫性溶貧時輕度增高血管溶血、紅細(xì)胞膜缺陷性溶貧時不增高。（2）結(jié)合珠蛋白（Hp）測原理：在待測中加入一定量的血紅蛋白液，使之與待測中的結(jié)合珠蛋白（HP）形成Hp-Hb復(fù)合物。通過電泳法將結(jié)合的Hp-Hb復(fù)合物與未結(jié)合的Hb分開，測定Hp-Hb復(fù)合物的量，從而得到中參考值臨床意義增高見于妊娠慢染等但不能排除溶血減低見于各種溶血肝病或無結(jié)合珠蛋白血癥、巨幼細(xì)胞貧血等。血漿高鐵血紅素白蛋白測558nm結(jié)果：臨床意義：血管內(nèi)溶血時陽血紅蛋白尿測結(jié)果：尿隱血試驗臨床意義：血型不合的輸血、大面積燒傷、惡性瘧疾、某些傳染病、溶血性癥等，明顯增多遺傳性或繼發(fā)性溶血性貧血，如蠶豆病、陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿癥、行軍性血紅蛋白尿癥及陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥等。尿含鐵血黃素Rous胞，并隨尿液排出。尿中含鐵血黃素是不穩(wěn)定的鐵蛋白聚合體，其中的高鐵離子與亞鐵化鉀作用，在性環(huán)境下產(chǎn)生普魯士藍(lán)色的亞鐵化鐵沉淀。尿沉渣腎小管細(xì)胞內(nèi)外可見直徑13μm的藍(lán)顆粒。結(jié)果：紅細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)與40%50%10%。膜的主要蛋白有主 受體、EPO受體和鐵蛋白受體等。紅細(xì)胞滲透脆性①原理：檢測紅細(xì)胞對不同濃度低滲鹽溶液的抵抗力。紅細(xì)胞在低滲鹽溶液中，當(dāng)水滲透其達(dá)定程度時，紅細(xì)胞發(fā)生膨裂。根據(jù)不同濃度的低滲鹽溶液中，紅細(xì)胞溶血的情況，通過紅細(xì)胞表面力增大。白生成性貧血、缺鐵性貧血等。ATPATP0.8糖糾正；自身免疫性溶貧溶血度輕度增加，加葡萄糖無預(yù)示價值；PNH①原理：當(dāng)甘油存在于低滲溶液氯化鈉磷酸緩沖液時，可其中的水快速進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)，使溶血過50%的時間（AGLT50）明顯縮短。AGLT50蔗糖溶血試驗：為PNH簡易重要的篩查①原理：根據(jù)PNH胞膜結(jié)合加強(qiáng)，蔗糖溶液進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)，導(dǎo)致滲透性溶血而設(shè)計的。②參考值：定性試驗：正常為；定量試驗：正常溶血率＜5%PNHPNH骨髓硬化時可出現(xiàn)假陽性。酸化溶血試驗①原理：PNH患者體內(nèi)存在對補(bǔ)體敏感的紅細(xì)胞。酸化溶血試驗，也稱Ham試驗，即紅細(xì)胞在酸性（pH6.4～6.5）的正常中孵育，補(bǔ)體被激活PNH紅細(xì)胞破壞而產(chǎn)生溶血。而正常紅細(xì)胞不被溶解無溶血現(xiàn)象。正常結(jié)果為。②臨床意義：是PNH的確診試驗。陽性主要見于PNH性。三、遺傳性紅細(xì)胞膜缺陷性貧血的實驗紅細(xì)胞呈球形，直徑變小（6.2～7.0μm），大小一致，數(shù)量占10%～70%，硬度增加，中心淡染區(qū)，簡易紅細(xì)胞滾動試驗呈陽性。遺傳性球形細(xì)胞①血象：紅細(xì)胞呈球形，直徑小于6μm，大小一致，數(shù)量占10%～70%，硬度增加，中心淡染區(qū)簡易紅細(xì)胞滾動試驗呈陽性。孵育后脆性更高，ATP或葡萄糖能夠糾正篩選試驗，紅細(xì)胞期縮短。自溶試驗：溶血大于5%，加ATP①血象：紅細(xì)胞呈橢圓形、球形，大小一致，數(shù)量占10%～70%，硬度增加，中心淡染區(qū)獲得性紅細(xì)胞膜缺陷性貧血：陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥①血象：貧血為大細(xì)胞素性或低色素性，網(wǎng)織紅細(xì)胞增高，少數(shù)病例減少。紅細(xì)胞按對補(bǔ)體敏性分為接近正常紅細(xì)胞（Ⅰ型）、中等敏感（Ⅱ型）、高度敏感（Ⅲ型）少。白細(xì)胞計數(shù)半數(shù)病例減少，中性粒細(xì)胞減少，淋巴細(xì)胞增多，血小板多數(shù)低于正常。③溶血試驗：酸化溶血試驗（Hamtest）、蔗糖溶血試驗、蛇毒溶血試驗、尿潛血（尿含鐵血黃素）試驗等，其中兩頊陽性或一項陽性，但對照，結(jié)果才可靠；排除其他需鑒別的溶血性疾病。33：①與糖代謝有關(guān)的酶：酸激酶（PK）、葡萄糖6-磷酸脫氫酶（G6PD）等34：紅細(xì)胞酶缺陷多系遺傳性，因其結(jié)構(gòu)突變引起酶的活性減低、增加或正常。酶缺乏者常有程度不G6PDPK見。化戊糖旁路使N（氧化型輔酶Ⅱ）變成NH（還原型輔酶Ⅱ），其脫的氫通過亞甲藍(lán)試劑的遞氫作用合子或純合子）30G6PDG6PD缺乏癥常高于45%G6PD75%84%，H病和化學(xué)質(zhì)時也增高。①原理：在G6PD和N ＋存在下，G6PD能使N ＋還原成N NH的吸收峰在波長340mn處，可通過單位時間生成的NH的量來測定G6PD活性。酸激酶測定：包括熒光斑點試驗和PK活性檢測①原理：在二磷酸腺苷（）存在的條件下酸激酶（PK）催化磷酸烯醇酸（PEP）轉(zhuǎn)化成丙酮酸，在輔酶Ⅰ還原型（NADH）存在情況下，酸被LDH轉(zhuǎn)化為乳酸，若標(biāo)記熒光于NADH上，此時有熒NADHNAD。②參考值：正常熒光在20min內(nèi)（15.0±1.99）U/gHb（37℃）（ICSHBlume法）③臨床意義：PK嚴(yán)重缺乏者熒光60min不；PK中間缺乏值熒光25～60min。純合子PK值在2525%～50%。紅細(xì)胞G6PD缺陷癥：本病分5型：蠶豆病、藥物致溶貧、誘發(fā)溶血、新生兒高膽紅素血癥和①篩檢試驗：高鐵血紅蛋白還原試驗：G6PD活性雜合子中等缺乏者74%～31%，臍血77%～41%；純合子或半合子G6PD嚴(yán)重缺乏者大于30%，臍血小于40%。G6PD熒光斑點法：G6PD活性中等缺乏者10～30min出30min②確診試驗：G6PD紅細(xì)胞酸激酶缺陷60min熒光不25%以下。珠蛋白異常的檢驗及其應(yīng)用37：血紅素：血紅素是Hb、肌紅蛋白、多種酶（如過氧化氫酶）和多種細(xì)胞色素的輔基，其的場所血紅素不全，并可能產(chǎn)生卟啉病。血紅蛋白的功能：02和C02。38：4，1成人血HbA（α2β2）出生后逐漸增多，占95%～97%，HbA2（α2β2）出生后占1.2%～3.5①原理：根據(jù)不同的血紅蛋有不同的電荷，等電點不同，在一定的pH緩沖液中，緩沖液的pH大②參考值：pH8.6TEB正常血紅蛋白電泳區(qū)帶：HbA＞95%、HbF＜2%、HbA2為1.0%～3.1%。pH8.6TEBHbA、HbA2、HbS、HbC，HbF易HbA開，HbHHbBarts不能分開和顯示，應(yīng)再選擇其他緩沖液進(jìn)行電泳分離。pH6.5TEBHbH③臨床意義：通過與正常人的血紅蛋白電泳圖譜進(jìn)行比較，可發(fā)現(xiàn)異常血紅蛋白區(qū)帶，如HbH、HbE、HbBarts，HbS、HbD和HbC等異常血紅蛋白異常。HbA2增多，見于β珠蛋白性貧血，為雜合子的重要指標(biāo)。HbE病時也在HbA2區(qū)帶位置處增加，但含量很大（在10%以上）。HbA2輕度增加亦可見①原理又稱堿變性試驗。血紅蛋（Hb具抗堿和抗酸作用其堿作用比HbA更強(qiáng)將待NaOH1minHbFHbA540nmHbFHbFHbBartsHbH過電泳鑒別。②參考值：新生兒＜40%，2歲以后至于2.5%③臨床意義珠蛋白生成性貧血HbF增續(xù)性血紅蛋白癥HbF高至100%某些疾病時HbF非惡性疾病有再生性貧血、純紅細(xì)胞再障、PNH、未治療惡性貧血、卟啉病等。①原理：不穩(wěn)定血紅蛋白較正常血紅蛋白更容易裂解，在異丙醇這種能降低血紅蛋白分子的氫鍵蛋白進(jìn)行篩檢，結(jié)果顯示正常人血紅蛋白液為（30min內(nèi)不沉淀）。②臨床意義：不穩(wěn)定血紅蛋白（包括HbH）于5min時出現(xiàn)沉淀，20min內(nèi)沉淀逐漸增加，甚至成絮狀或粗顆粒狀。血液中含有較HbF、HbH、HbE也可出現(xiàn)陽性結(jié)果。①原理：將煌焦油藍(lán)液與新鮮血液一起孵育，不穩(wěn)定血紅蛋白易變性沉淀形成包涵體。結(jié)果為HbA240：血紅蛋白病是一組由于生成血紅蛋白的珠蛋白肽鏈（α、β、γ、δ）的結(jié)構(gòu)異?；螂逆溗俾矢淖?，而引起血紅蛋白功能異常所致的疾病。血紅蛋白病多為遺傳性，如：因控制遺傳的珠蛋白 發(fā)突變所致的結(jié)構(gòu)性血紅蛋白??；因指導(dǎo)珠蛋白速率的遺傳缺陷所致的珠蛋白生成性貧血或海洋性貧血。另外，也可見獲得性血紅蛋白病，通常是由接觸或誤服化學(xué)藥物所致。HbS生成性貧血為α或β珠蛋白生成性貧血也有多種異常導(dǎo)致的血紅蛋白病如HbEHbConstantSpring，HbLepore①α-珠蛋白生成性貧血：缺失一個α（-α/αα或α-/αα）者稱為α＋珠蛋白生成性失三個α（α＋/α0即α-/-或-α/-）雙重雜合子稱為HbH病，缺失四個α者純合子稱為HbBart。血紅蛋白H（HbH）有輕度至中度貧血，靶形紅細(xì)胞增多，MCVMCHHbHbHBart。帶分別高達(dá)5%30和5%18%包涵體試驗熱不穩(wěn)定試驗和異丙醇試驗均可呈陽性紅細(xì)胞期短。HbBartb90%，HbHHbPortland，②β珠蛋白生成性貧血，靶形紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞增多，可見嗜堿性點彩。Hb電泳，HbA2明顯增高是其特點，HbF正?；蜉p度增加。重型血象靶形細(xì)胞多達(dá)10%～35%，網(wǎng)織紅細(xì)胞增生，HbF增高大于30%。骨髓紅系增生過度，細(xì)胞內(nèi)外鐵增多，脆性試驗顯著降低。中間型檢驗與重型類似。41：要點42：免疫性溶血性貧血的通常為溫抗體，IgG自身免疫性溶血性貧血的檢抗人球蛋白試驗（Coombs試驗（IgG直接抗人