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高中生物選修一知識(shí)點(diǎn)總結(jié)背誦高中生物選修一知識(shí)點(diǎn)總結(jié)背誦高中生物選修一知識(shí)點(diǎn)總結(jié)背誦高中生物選修一知識(shí)點(diǎn)總結(jié)背誦編制僅供參考審核批準(zhǔn)生效日期地址:電話:傳真:郵編:選修1基礎(chǔ)知識(shí)點(diǎn)背誦《果酒和果醋和制作》一、果酒制作1.原理:菌種 ,屬于 核生物,新陳代謝類型 ,有氧時(shí),呼吸的反應(yīng)式為: ;無(wú)氧時(shí),呼吸的反應(yīng)式為: 。2.條件:繁殖最適溫度 ,酒精發(fā)酵一般控制在 。(傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來(lái)源)3.菌種來(lái)源:現(xiàn)在工廠化生產(chǎn)果酒,為提高果酒的品質(zhì),更好地抑制其它微生物的生長(zhǎng),采取的措施是。4.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)流程圖5.根據(jù)教材P4操作提示設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟及裝置。充氣口作用;排氣口作用;出料口作用。排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是。使用該裝置制酒時(shí),應(yīng)該關(guān)閉;制醋時(shí),應(yīng)將充氣口。6.實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià):可通過(guò)嗅覺(jué)和品嘗初步鑒定,并用______________檢驗(yàn)酒精存在??捎^察到的現(xiàn)象為 二、果醋的制作:1.原理:菌種:___________,屬于___________核生物,新陳代謝類為_(kāi)________醋酸生成反應(yīng)式是___________________ _________ 。2.條件:最適合溫度為_(kāi)_________,需要充足的______________。3.菌種來(lái)源:到______________或______________購(gòu)買。4.設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)流程及操作步驟:果酒制成以后,在發(fā)酵液中加入______________或醋曲,然后將裝置轉(zhuǎn)移至______________0C條件下發(fā)酵,適時(shí)向發(fā)酵液中______________。如果沒(méi)有充氣裝置,可以將瓶蓋打開(kāi)三、操作過(guò)程應(yīng)注意的問(wèn)題(1)為防止發(fā)酵液被污染,發(fā)酵瓶要用消毒。(2)葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí),要留出大約的空間。(3)制作葡萄酒時(shí)將溫度嚴(yán)格控制在,時(shí)間控制在d左右,可通過(guò)對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測(cè)。(4)制葡萄醋的過(guò)程中,將溫度嚴(yán)格控制在,時(shí)間控制在d,并注意適時(shí)在充氣?!疽呻y點(diǎn)撥】認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗為什么應(yīng)該先沖洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染需要從發(fā)酵制作的過(guò)程進(jìn)行全面的考慮,因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌。例如:榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈;每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋、不要完全揭開(kāi)瓶蓋等。3.制葡萄酒時(shí),為什么要將溫度控制在18~25℃制葡萄醋時(shí),為什么要將溫度控制在30~答:溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件。20℃左右最適合酵母菌繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長(zhǎng)溫度為30~35℃,因此要將溫度控制在30~4.制葡萄醋時(shí),為什么要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣答:醋酸菌是好氧菌,在將酒精變?yōu)榇姿釙r(shí)需要氧的參與,因此要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣?!陡榈闹谱鳌芬?、腐乳制作的原理1.腐乳的發(fā)酵有多種微生物的協(xié)同作用,如、、、等,其中起主要作用的是。它是一種絲狀,常見(jiàn)于、、、上。新陳代謝類型是 。2. 等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的 分解成小分子的 和 ;脂肪酶可以將 水解成 和 。3.現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的 條件下,將優(yōu)良 菌種直接接種在豆腐上,這樣可以避免 ,保證 。二、腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程:讓豆腐長(zhǎng)出毛霉→ → →密封腌制。三、實(shí)驗(yàn)材料含水量70%的豆腐,粽葉,盤(pán)子,鹽,黃酒,米酒,糖,香辛料等,廣口玻璃瓶,高壓鍋。四、實(shí)驗(yàn)步驟1.將豆腐切實(shí)3cm×3cm×1cm若干塊2.豆腐塊放在鋪有干粽葉的盤(pán)內(nèi),每塊豆腐等距離排放,豆腐上再鋪干凈粽葉,再用保鮮膜包裹。3.將平盤(pán)放在溫度為 的地方,毛霉逐漸生長(zhǎng),大約5d后,豆腐表面叢生直立菌絲。4.當(dāng)毛霉生長(zhǎng)旺盛,呈淡黃色時(shí),去除保鮮膜及粽葉,散熱及水分,同時(shí)散去霉味約36h。5.豆腐涼透后,將豆腐間的菌絲拉斷,整齊排在容器內(nèi),準(zhǔn)備腌制。6.長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊(以下稱毛坯)分層擺放,分層加鹽,并隨層高而增加 ,在瓶口表面鋪鹽 ,以防止 ,約腌制8d。7.將黃酒、米酒和糖、香辛料等混合制成鹵湯。鹵湯酒精含量控制在 為宜。8.廣口玻璃瓶刷洗干凈,用高壓鍋在1000C蒸汽滅菌【疑難點(diǎn)撥】1.王致和為什么要撒許多鹽,將長(zhǎng)毛的豆腐腌起來(lái)鹽在該過(guò)程中起什么作用鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。鹽能抑制多種微生物的生長(zhǎng)。2.配制鹵湯時(shí),一般將酒精含量控制在12%左右,過(guò)高過(guò)低都不行,為什么酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時(shí)間的長(zhǎng)短有很大關(guān)系。酒精含量越高,對(duì)蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延長(zhǎng);酒精含量過(guò)低,蛋白酶的活性高,加快蛋白質(zhì)的水解,雜菌繁殖快,豆腐易腐敗,難以成塊。3.豆腐坯用食鹽腌制,其作用是什么①滲透鹽分,析出水分②給腐乳以必要的咸味③防止毛霉繼續(xù)生長(zhǎng)和污染的雜菌繁殖④浸提毛霉菌絲上的蛋白酶4.腐乳在釀造后期發(fā)酵中添加多量酒液的目的是什么①防止雜菌污染以防腐②與有機(jī)酸結(jié)合形成酯,由于酒中特別是黃酒中含有酵母茼,經(jīng)發(fā)酵可產(chǎn)生醇,并與有機(jī)酸結(jié)合形成酯,賦予腐乳風(fēng)味③利于后期發(fā)酵5.鹵湯中香辛料的作用是什么①調(diào)味②促進(jìn)發(fā)酵③殺菌防腐解釋:(香辛料如花椒、大蒜、茴香中含有花椒酰胺、蒜辣素、茴香醚及茴香醛等,有極強(qiáng)的殺菌力;又有良好的調(diào)味功能;香辛料成分參與發(fā)酵過(guò)程,合成復(fù)雜的酯類,使腐乳形成特有色、香、味。)6.你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識(shí),解釋豆腐長(zhǎng)白毛是怎么一回事答:豆腐上生長(zhǎng)的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說(shuō)是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。7.我們平常吃的豆腐,哪種適合用來(lái)做腐乳答:含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過(guò)高的豆腐制腐乳,不易成形。8.吃腐乳時(shí),你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢它對(duì)人體有害嗎它的作用是什么答:“皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長(zhǎng)的菌絲(匍匐菌絲),它能形成腐乳的“體”,使腐乳成形。“皮”對(duì)人體無(wú)害?!短接懠用赶匆路鄣南礈煨Ч芬弧⒒A(chǔ)知識(shí)3.在本課題中,我們主要探究有關(guān)加酶洗衣粉的三個(gè)問(wèn)題:一是普通洗衣粉和加酶洗衣粉對(duì)衣物污漬的效果有什么不同;二是在什么溫度下使用加酶洗衣粉最好,三是的洗衣粉,其洗劑效果有哪些區(qū)別。二、實(shí)驗(yàn)操作1.探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對(duì)衣物污漬的洗滌效果(1)實(shí)驗(yàn)遵循的原則:實(shí)驗(yàn)變量為洗滌劑,設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)遵循 原則、 原則,有效地控制其他變量,如水的用量、污染物的量、所用實(shí)驗(yàn)用布的質(zhì)地大小、兩種洗衣粉的用量,攪拌及洗滌時(shí)間。(2)實(shí)驗(yàn)過(guò)程①取兩只大燒杯并 ,用量筒分別量500mL蒸餾水放入其中,放入400②將制好的污染布和洗衣粉(一組為 和 ,另一組為 和 )分別放入兩只燒杯中。③用玻璃棒同時(shí)充分?jǐn)嚢? 時(shí)間,一段時(shí)間后攪拌可重復(fù)進(jìn)行。④過(guò)相同的時(shí)間后觀察洗滌效果,探究加酶洗衣粉使用時(shí)的最適溫度。2.不同種類的酶洗衣粉對(duì)同一污漬的洗滌效果(1)實(shí)驗(yàn)原理:不同種類的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有 ,所以對(duì)不同污漬的洗滌效果不同。(2)實(shí)驗(yàn)過(guò)程:根據(jù)表格設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟編號(hào)污漬類型洗滌效果蛋白酶脂肪酶淀粉酶復(fù)合酶普通洗衣酶1雞血2牛奶3菜油4番茄汁5墨水6染料【疑難點(diǎn)撥】1.普通洗衣粉中包含哪些化學(xué)成分提示:普通洗衣粉中通常包含有:表面活性劑、水軟化劑、堿劑、漂白劑等成分,有的洗衣粉中還含有增白劑、香精和色素,以及填充劑等。2.在本課題中你打算使用什么方法和標(biāo)準(zhǔn)判斷洗滌效果提示:可在洗滌后比較污物的殘留狀況,如:已消失、顏色變淺、面積縮小等,3.含有蛋白酶的洗衣粉的洗劑效果好,可以用絲綢作為實(shí)驗(yàn)材料嗎不能。因?yàn)榻z綢的主要成分是蛋白質(zhì),它會(huì)被加酶洗衣粉中的蛋白酶分解,損壞衣物。【典例解析】下列不屬于酶制劑的是A.蛋白酶B.脂肪酶C.淀粉酶D.麥芽糖酶解析:目前常用的酶制劑有四大類:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶。其中,應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污跡從衣物上脫落。脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶也能分別將大分子的脂肪、淀粉和纖維素水解為小分子物質(zhì),使洗衣粉具有更強(qiáng)的去污能力?!督湍讣?xì)胞的固定化》一、基礎(chǔ)知識(shí)酶:優(yōu)點(diǎn):催化效率高,低耗能、低污染,大規(guī)模地應(yīng)用于食品、化工等各個(gè)領(lǐng)域。實(shí)際問(wèn)題:對(duì)環(huán)境條件敏感,易失活;溶液中的酶很難回收,不能再次利用,提高了生產(chǎn)成本;反應(yīng)后的酶會(huì)混合在產(chǎn)物中,如不除去,會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量。設(shè)想:固定化酶:優(yōu)點(diǎn)實(shí)際問(wèn)題:一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng),而在生產(chǎn)實(shí)踐中,很多產(chǎn)物的形成都是通過(guò)一系列的酶促反應(yīng)才能得到的設(shè)想:固定化細(xì)胞:優(yōu)點(diǎn)二、固定化酶的應(yīng)用實(shí)例高果糖漿是指能將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖的酶是。使用固定化酶技術(shù),將這種酶固定在一種上,再將這些酶顆粒裝到一個(gè)反應(yīng)柱內(nèi),柱子底端裝上分布著許多小孔的。酶顆粒無(wú)法通過(guò)篩板的小孔,而反應(yīng)溶液卻可以自由出入。生產(chǎn)過(guò)程中,將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱的上端注入,使葡萄糖溶液流過(guò)反應(yīng)柱,與接觸,轉(zhuǎn)化成果糖,從反應(yīng)柱的下端流出。反應(yīng)柱能連續(xù)使用半年,大大降低了生產(chǎn)成本,提高了果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。三、固定化細(xì)胞技術(shù)固定化酶和固定化細(xì)胞是利用或方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù),包括、和法。一般來(lái)說(shuō),酶更適合采用和法固定,而細(xì)胞多采用法固定化。這是因?yàn)榧?xì)胞個(gè)大,而酶分子很小;個(gè)大的細(xì)胞難以被或,而個(gè)小的酶容易從中漏出。包埋法法固定化細(xì)胞即將微生物細(xì)胞包埋在不溶于水的中。常用的載體有、、、和等。四、實(shí)驗(yàn)操作(一)制備固定化酵母細(xì)胞制備固定化酵母細(xì)胞需要的材料是、、、、、、、、和1.酵母菌的活化活化就是處于狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。2.配制物質(zhì)的量嘗試為L(zhǎng)的CaCl2溶液3.配制海藻酸鈉溶液加熱溶化海藻酸鈉時(shí)要注意:4.海藻酸鈉溶液與酵母菌細(xì)胞混合5.固定化酵母細(xì)胞以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的溶液中,并浸泡(時(shí)間)。(二)用固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵1.將固定好的酵母細(xì)胞用沖洗2-3次。2.發(fā)酵時(shí)的溫度就為,時(shí)間。五、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)(一)觀察凝膠珠的顏色和形狀如果制作的凝膠珠顏色過(guò)淺、呈白色,說(shuō)明;如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形,則說(shuō)明,制作失敗,需要再作嘗試。(二)觀察發(fā)酵的葡萄糖溶液利用固定的酵母細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)生酒精,可以看到產(chǎn)生了很多,同時(shí)會(huì)聞到補(bǔ)充:直接使用酶、固定化酶和固定化細(xì)胞催化的優(yōu)缺點(diǎn):類型優(yōu)點(diǎn)不足直接使用酶催化效率高,低耗能、低污染等。對(duì)環(huán)境條件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很難回收,不能被再次利用,提高了生產(chǎn)成本;反應(yīng)后酶會(huì)混在產(chǎn)物中,可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。固定化酶酶既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,同時(shí),固定在載體上的酶還可以被反復(fù)利用。一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng),而在生產(chǎn)實(shí)踐中,很多產(chǎn)物的形成都通過(guò)一系列的酶促反應(yīng)才能得到的。固定化細(xì)胞成本低,操作更容易。固定后的酶或細(xì)胞與反應(yīng)物不容易接近,可能導(dǎo)致反應(yīng)效果下降等。【疑難點(diǎn)撥】1.細(xì)胞的活化。提示:在缺水的狀態(tài)下,微生物會(huì)處于休眠狀態(tài)?;罨褪亲屘幱谛菝郀顟B(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。酵母細(xì)胞所需要的活化時(shí)間較短,一般需要~1小時(shí)。2.如何檢驗(yàn)?zāi)z珠的質(zhì)量是否合格。提示:檢驗(yàn)?zāi)z珠的質(zhì)量是否合格,可以采用以下方法。一是用鑷子夾起一個(gè)凝膠珠放在實(shí)驗(yàn)桌上用手?jǐn)D壓,如果凝膠珠不破裂,沒(méi)有液體流出,就表明凝膠珠的制作成功。二是在實(shí)驗(yàn)桌上用力摔打凝膠珠,如果凝膠珠很容易彈起,也表明制備的凝膠珠是成功的。3.酶和細(xì)胞分別適應(yīng)哪種固定方法提示:一般來(lái)說(shuō),酶更適合采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定,而細(xì)胞多采用包埋法固定化。這是因?yàn)榧?xì)胞個(gè)大,而酶分子很??;個(gè)大的難以被吸附或結(jié)合,而個(gè)小的酶容易從包埋材料中漏出?!镜淅馕觥棵负图?xì)胞分別適應(yīng)哪種固定方法提示:一般來(lái)說(shuō),酶更適合采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定,而細(xì)胞多采用包埋法固定化。這是因?yàn)榧?xì)胞個(gè)大,而酶分子很??;個(gè)大的難以被吸附或結(jié)合,而個(gè)小的酶容易從包埋材料中漏出?!禗NA的粗提取與鑒定》一、提取DNA的方法提取生物大分子的基本思路是。對(duì)于DNA的粗提取而言,就是要利用、等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取DNA,去除其他成分。1)DNA的溶解性DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的中溶解度不同,利用這一特點(diǎn),選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離目的。此外,DNA不溶于溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。2)DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性蛋白酶能水解,但是對(duì)沒(méi)有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60—80oC的高溫,而DNA在以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解,但對(duì)DNA沒(méi)有影響。3)DNA的鑒定在條件下,DNA遇會(huì)被染成色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1)實(shí)驗(yàn)材料的選取凡是含有的生物材料都可以考慮,但是使用的生物組織,成功的可能性更大。在下面的生物材料中選取適合的實(shí)驗(yàn)材料:魚(yú)卵、豬肝、菜花(花椰菜)、香蕉、雞血、哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養(yǎng)基的大腸桿菌2)破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易,以雞血細(xì)胞為例,在雞血細(xì)胞液中加入一定量的,同時(shí)用攪拌,過(guò)濾后收集濾液即可。如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞,需要先用溶解細(xì)胞膜。例如,提取洋蔥的DNA時(shí),在切碎的洋蔥中加入一定的和,進(jìn)行充分的攪拌和研磨,過(guò)濾后收集研磨液。3)去除濾液中的雜質(zhì)4)DNA的析出與鑒定將處理后的溶液過(guò)濾,加入與濾液體積、冷卻的,靜置,溶液中會(huì)出現(xiàn),這就是粗提取的DNA。用玻璃棒攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分。取兩支20ml的試管,各加入物質(zhì)的量濃度為的NaCl溶液5ml,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解。然后,向兩支試管中各加入4ml的。混合均勻后,將試管置于中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是否變。三、操作提示以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí),每100ml血液中需要加入3g,防止。加入洗滌劑后,動(dòng)作要、,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟地操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí),動(dòng)作要,以免,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。二苯胺試劑要,否則會(huì)影響鑒定的效果。四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)【疑難點(diǎn)撥】1.為什么加入蒸餾水能使雞血細(xì)胞破裂答:蒸餾水對(duì)于雞血細(xì)胞來(lái)說(shuō)是一種低滲液體,水分可以大量進(jìn)入血細(xì)胞內(nèi),使血細(xì)胞脹裂,再加上攪拌的機(jī)械作用,就加速了雞血細(xì)胞的破裂(細(xì)胞膜和核膜的破裂),從而釋放出DNA。2.加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么答:洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解細(xì)胞膜,有利于DNA的釋放;食鹽的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。3.如果研磨不充分,會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響答:研磨不充分會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全,提取的DNA量變少,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍(lán)色等。4.此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細(xì)胞成分答:可能含有核蛋白、多糖和RNA等雜質(zhì)。5.為什么反復(fù)地溶解與析出DNA,能夠去除雜質(zhì)答:用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過(guò)反復(fù)溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。6.方案二與方案三的原理有什么不同答:方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開(kāi);方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同,從而使蛋白質(zhì)變性,與DNA分離。DNA的溶解度與NaCl溶液濃度的關(guān)系:當(dāng)NaCl溶液濃度低于L時(shí),隨濃度的升高,DNA的溶解度降低;當(dāng)NaCl溶液濃度高于L時(shí),隨濃度升高,DNA的溶解度升高。制備雞血細(xì)胞液時(shí),要在新鮮的雞血中加入檸檬酸鈉的原因制備雞血細(xì)胞液時(shí),要在新鮮的雞血中加入抗凝劑——檸檬酸鈉,防止血液凝固。其原理是檸檬酸鈉能與血漿中Ca2+發(fā)生反應(yīng),生成檸檬酸鈣絡(luò)合物,血漿中游離的Ca2+大大減少,血液便不會(huì)凝固,因?yàn)殡u血紅細(xì)胞,白細(xì)胞都有細(xì)胞核,DNA主要存在于細(xì)胞核中,所以在離心或靜置沉淀后,要棄出上層清液——血漿。9.提取DNA的第一步是材料的選取,其目的是一定要選取DNA含量較高的生物材料,否則會(huì)由于實(shí)驗(yàn)過(guò)程中或多或少的損失而造成檢測(cè)的困難;第二步是DNA的釋放和溶解,這一步是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵,要盡可能使細(xì)胞內(nèi)的DNA全部溶解;第三步是DNA的純化,即根據(jù)DNA的溶解特性、對(duì)酶及高溫的耐受性的不同等特性,最大限度地將DNA與雜質(zhì)分開(kāi);最后一步是對(duì)DNA進(jìn)行鑒定,這是對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果的檢測(cè)。10.在DNA的析出的步驟中用到玻璃棒攪拌時(shí),注意動(dòng)作要輕緩,以免加劇DNA分子的斷裂,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。11.盛放雞血細(xì)胞液的容器,最好是塑料容器。雞血細(xì)胞破碎以后釋放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于細(xì)胞內(nèi)DNA的含量本來(lái)就比較少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就會(huì)更少。因此,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中最好使用塑料的燒杯和試管,這樣可以減少提取過(guò)程的DNA的損失。[典例解析]本實(shí)驗(yàn)中有三次過(guò)濾:⑴過(guò)濾用蒸餾水稀釋過(guò)的雞血細(xì)胞液⑵過(guò)濾含粘稠物的LNaCl溶液⑶過(guò)濾溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液以上三次過(guò)濾分別為了獲得()A含核物質(zhì)的濾液、紗布上的粘稠物、含DNA的濾液B含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA粘稠物、含DNA的濾液C含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA粘稠物、紗布上的DNAD含較純的DNA濾液、紗布上的粘稠物、含DNA的濾液答案:A解析:用蒸餾水稀釋雞血細(xì)胞液,使血細(xì)胞的細(xì)胞膜、核膜破裂,釋放出核物質(zhì),此時(shí)過(guò)濾只能得到含DNA和其他物質(zhì)如蛋白質(zhì)的濾液,這種濾液必須經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)中其他步驟得相繼處理,方能得到較純的DNA。DNA在LNaCl溶液中溶解度最低,成絲狀粘稠物,可經(jīng)過(guò)濾留在紗布上?!堆t蛋白的提取和分離》基礎(chǔ)知識(shí)1.凝膠色譜法凝膠色譜法也稱做,是根據(jù)分離蛋白質(zhì)的有效方法。凝膠實(shí)際上是一些由構(gòu)成的多孔球體,在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道,相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子通過(guò)凝膠時(shí)速度不同,相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程,移動(dòng)速度;而相對(duì)分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在移動(dòng),路程,移動(dòng)速度。相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。2.緩沖溶液緩沖溶液的作用是。緩沖溶液通常由溶解于水中配制而成的。生物體內(nèi)進(jìn)行的各種生物化學(xué)反應(yīng)都是在一定的pH下進(jìn)行的,例如:血漿的pH是,要在實(shí)驗(yàn)條件下準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的過(guò)程,必須保持體外的pH與體內(nèi)的基本一致。3.電泳電泳是指。許多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有可解離的基團(tuán),在一定的pH下,這些基團(tuán)會(huì)帶上。在電場(chǎng)的作用下,這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷的電極移動(dòng)。電泳利用了待分離樣品中各分子以及分子本身的、的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。兩種常用的電泳方法是和,在測(cè)定蛋白質(zhì)分子量時(shí)通常使用。蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于以及等因素。4.蛋白質(zhì)的提取和分離蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步:、、和。5.樣品處理血液由和組成,其中紅細(xì)胞最多。紅細(xì)胞具有的特點(diǎn)。紅細(xì)胞中有一種非常重要的蛋白質(zhì),其作用是,血紅蛋白有個(gè)肽鏈組成,包括,其中每條肽鏈環(huán)繞一個(gè),磁基團(tuán)可攜帶。血紅蛋白因含有呈現(xiàn)紅色。紅細(xì)胞的洗滌洗滌紅細(xì)胞的目的是,采集的血樣要及時(shí)采用分離紅細(xì)胞,然后用膠頭吸管吸出上層透明的,將下層暗紅色的倒入燒杯,再加入,緩慢攪拌,低速短時(shí)間離心,如此重復(fù)洗滌三次,直至,表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。血紅蛋白的釋放在和作用下,紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。分離血紅蛋白溶液將攪拌好的混合溶液離心后,試管中的溶液分為4層。第一層為無(wú)色透明的,第2層為白色薄層固體,是,第3層是紅色透明液體,這是,第4層是其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物。將試管中的液體用濾紙過(guò)濾,除去之溶性沉淀層,于分液漏斗中靜置片刻后,分出下層的紅色透明液體。透析取1mL的血紅蛋白溶液裝入中,將透析袋放入盛有300mL的物質(zhì)的量的濃度為20mmol/L的中,透析12h。透析可以去除樣品中的雜質(zhì),或用于更換樣品的。6.凝膠色譜操作第一步要制作,第二步要,因?yàn)?,所以裝柱前需要根據(jù)色譜柱的內(nèi)體積計(jì)算所需要的凝膠量。在裝填凝膠柱時(shí),不得有存在。因?yàn)闅馀輹?huì),降低分離效果。第三步是。[疑難點(diǎn)撥]1.凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理凝膠色譜法也稱為分配色譜法,它是根據(jù)分子量的大小分離蛋白質(zhì)的方法之一。所用的凝膠實(shí)際上是一些微小的多孔球體,這些小球體大多數(shù)是由多糖類化合物構(gòu)成,小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道,當(dāng)一個(gè)含有各種分子的樣品溶液緩慢流經(jīng)時(shí),各分子在色譜柱內(nèi)進(jìn)行兩種不同的運(yùn)動(dòng),即垂直向下的運(yùn)動(dòng)和無(wú)規(guī)則的擴(kuò)散運(yùn)動(dòng),相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部,只能分布在顆粒之間,通過(guò)的路程較短,移動(dòng)速度較快;相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比較容易進(jìn)入凝膠內(nèi)的通道,通過(guò)的路程較長(zhǎng),移動(dòng)速度較慢。因此,樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出,相對(duì)分子質(zhì)量中等的分子后流出,相對(duì)分子質(zhì)量最小的分子最后流出,這種現(xiàn)象又叫分子篩現(xiàn)象。此外,凝膠本身具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),相對(duì)分子質(zhì)量大的分子通過(guò)這種網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)上的空襲時(shí)阻力大,而相對(duì)分子質(zhì)量小的分子通過(guò)時(shí)阻力小,因此不同分子量的蛋白質(zhì)分子可以獲得分離。2.與其他真核細(xì)胞相比,紅細(xì)胞的特點(diǎn)及這一特點(diǎn)對(duì)進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離的意義哺乳動(dòng)物及人的成熟的紅細(xì)胞是雙面凹圓餅狀,沒(méi)有細(xì)胞核和細(xì)胞器。其含有的血紅蛋白是有色蛋白,因此在凝膠色譜分離時(shí)可以通過(guò)觀察顏色來(lái)判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集脫液。這使血紅蛋白的分離過(guò)程非常直觀,大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。3.電泳的作用及其原理電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程。許多重要的生物大分子,如氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、核苷酸、核酸等都具有可解離基團(tuán),它們?cè)谀硞€(gè)特定的pH下會(huì)帶上正電或負(fù)電;在電場(chǎng)的作用下,這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極方向移動(dòng)。電泳技術(shù)就是在電場(chǎng)的作用下,利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小、形狀等性質(zhì)的差異,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而達(dá)到對(duì)樣品進(jìn)行分離、鑒定或提純的目的。4.你能從凝膠色譜的分離原理分析為什么凝膠的裝填要緊密、均勻嗎答:凝膠實(shí)際上是一些微小的多孔球體,小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道。相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部,只能分布在顆粒之間,通過(guò)的路程較短,移動(dòng)速度較快;相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比較容易進(jìn)入凝膠內(nèi)的通道,通過(guò)的路程較長(zhǎng),移動(dòng)速度較慢。因此,樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出,相對(duì)分子質(zhì)量中等的分子后流出,相對(duì)分子質(zhì)量最小的分子最后流出,從而使各種相對(duì)分子質(zhì)量不同的分子得以分離。如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻,就會(huì)在色譜柱內(nèi)形成無(wú)效的空隙,使本該進(jìn)入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過(guò),攪亂洗脫液的流動(dòng)次序,影響分離的效果。[典例解析]用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí),分子量大的蛋白質(zhì)(D)A路程較長(zhǎng),移動(dòng)速度較慢B路程較長(zhǎng),移動(dòng)速度較快C路程較短,移動(dòng)速度較慢D路程較短,移動(dòng)速度較快解析:在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道,當(dāng)相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí),相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長(zhǎng),移動(dòng)速度較慢;而相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動(dòng),路程較短,移動(dòng)速度較快。經(jīng)典例題剖析例題1、關(guān)于果酒制作過(guò)程中的敘述正確的是(B)A先去爛子粒和枝梗,再用清水沖洗污物B發(fā)酵的溫度維持在20℃C發(fā)酵過(guò)程中需要適時(shí)打開(kāi)瓶蓋放氣,以防發(fā)酵瓶破裂D需要不斷的充入氧氣解析:為防雜菌污染,爛子粒應(yīng)該沖洗之前去除,而去枝梗應(yīng)在沖洗之后;酵母菌酒精發(fā)酵需在無(wú)氧條件下進(jìn)行,通氣時(shí)只能擰松瓶蓋不可打開(kāi)瓶蓋;最適宜溫度為20℃例題2、關(guān)于果醋制作過(guò)程中的敘述正確的是(C)A打開(kāi)發(fā)酵瓶是因?yàn)槿^(guò)程需要通入氧氣,排出二氧化碳B醋酸菌在糖源和氧氣充足時(shí),能將葡萄糖分解成醋酸和二氧化碳C當(dāng)糖源不足時(shí),醋酸菌可將酒精分解成醋酸D要使果酒變成果醋只需通入氧氣,加入醋酸菌就可以了解析:醋酸菌和酵母菌發(fā)酵的區(qū)別在于前者需氧,不產(chǎn)生二氧化碳,而且發(fā)酵的最適溫度也不同。例題3、腐乳制作過(guò)程中影響其風(fēng)味和品質(zhì)的因素有哪些(A)①鹽的用量②酒的種類和用量③發(fā)酵溫度④發(fā)酵時(shí)間⑤辛香料的用量A①②③④⑤B①②③C①②⑤D③④解析:鹽、酒、辛香料不僅用來(lái)調(diào)味,還可抑菌,防腐乳變質(zhì)。適宜的鹽的用量和酒的濃度還影響發(fā)酵中蛋白酶的作用發(fā)揮;發(fā)酵時(shí)間和溫度都會(huì)影響腐乳的風(fēng)味。例題4、將10毫升酵母菌液放在適宜的溫度下培養(yǎng),并且于不同時(shí)間內(nèi)等量均勻取樣4次,分別測(cè)定樣品中酵母菌的數(shù)量和PH,結(jié)果如下表。請(qǐng)分析回答:樣品酵母菌的數(shù)量(個(gè)/mm3)PH1121028203121041000表中樣品取樣先后次序是②對(duì)酵母菌而言,10毫升該培養(yǎng)液的環(huán)境負(fù)荷量為個(gè)。③若第五次均勻取樣時(shí),樣品中的酵母菌數(shù)量為760(個(gè)/mm3),產(chǎn)生這一結(jié)果的原因是。解析:(1)由于酵母菌進(jìn)行有氧呼吸和無(wú)氧呼吸都產(chǎn)生二氧化碳,使發(fā)酵液的酸性增強(qiáng)。根據(jù)樣品PH大小,越早取樣PH越大,由此取樣順序?yàn)?、4、1、3。(2)經(jīng)過(guò)培養(yǎng)10mL培養(yǎng)液中有菌數(shù)1210個(gè)/mm3,環(huán)境負(fù)荷量應(yīng)為×107。(3)培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不斷被消耗,pH值減小,部分酵母菌因營(yíng)養(yǎng)缺乏不適應(yīng)而死亡并解體。答案:2、4、1、3;×107;培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不斷被消耗,pH值減小,部分酵母菌因營(yíng)養(yǎng)缺乏不適應(yīng)而死亡并解體。例題5、水果罐頭蓋上印有“如發(fā)現(xiàn)蓋子鼓起,請(qǐng)勿選購(gòu)”的字樣,引起蓋子鼓起的最可能原因是(B)A、好氧型細(xì)菌呼吸,產(chǎn)生CO2和H2OB、酵母菌呼吸,產(chǎn)生CO2和C2H5OHC、乳酸菌呼吸,產(chǎn)生CO2和C3H6O3D、酵母菌呼吸,產(chǎn)生CO2和H2O[解析]罐頭是密封、殺菌的,但不排除有微生物的孢子等存活下來(lái),只有進(jìn)行無(wú)氧呼吸的微生物可以生存;罐頭鼓脹是過(guò)期后微生物生活產(chǎn)氣的結(jié)果,乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸,無(wú)氣體產(chǎn)生;酵母菌既可以在有氧條件下生活,也可以在無(wú)氧條件下發(fā)酵產(chǎn)生酒精和二氧化碳。例題6、有人測(cè)定了A、B、C、D四種植物體內(nèi)多種酶的活性與溫度的關(guān)系,結(jié)果如下圖所示。根據(jù)圖中的信息,你認(rèn)為在25攝氏度條件下,競(jìng)爭(zhēng)能力最強(qiáng)的生物和對(duì)溫度適應(yīng)范圍最廣的生物分別是(A)AB和DBB和CCB和ADA和C催CD化100AB效率50(%)0510152025303540[解析]酶活性具有一定的溫度范圍和適宜溫度,溫度過(guò)高酶會(huì)失活,低溫對(duì)酶活性抑制;在一定溫度下,最適宜該溫度的酶活性最強(qiáng),該生物生活的也最好,競(jìng)爭(zhēng)力就強(qiáng);酶有活性的范圍最大,生物的生存溫度范圍就越廣。例題7、(05年杭州高三第一次檢測(cè))下圖是人體內(nèi)某個(gè)化學(xué)反應(yīng)的示意圖,圖中代表酶的英文字母是(A)[解析]酶是起催化作用的,它在反應(yīng)前后的性質(zhì)保持不變,據(jù)圖可以解釋A所代表的物質(zhì)是酶。所以在特定條件和一定的時(shí)間內(nèi),酶的催化作用可以一直保持。例題8、(04年北京東城區(qū)綜合檢測(cè))實(shí)驗(yàn)研究pH對(duì)酶活性的影響,準(zhǔn)備5支含有等量胃蛋白酶溶液但pH各不相同的試管,每支試管加1塊1cm3的正方體凝固蛋白塊,試管均置于25℃酶溶液的pH蛋白塊消失的時(shí)間(min)123451391145>60(1)酶活性最強(qiáng)時(shí)的pH是_________。(2)蛋白塊消失的時(shí)間與酶活性強(qiáng)弱的關(guān)系是_________。(3)請(qǐng)以2種方法改進(jìn)實(shí)驗(yàn),使實(shí)驗(yàn)在更短的時(shí)間內(nèi)完成。(4)在人體消化道中,能分泌本實(shí)驗(yàn)中酶的部位是_________。(5)為確認(rèn)蛋白塊的消失是由于酶的作用,還應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行什么設(shè)計(jì)[答案](1)2(2)酶活性越大,蛋白質(zhì)分解越快,蛋白塊消失的時(shí)間越短(3)方法Ⅰ:將題給溫度由25℃提高至大約37℃。方法Ⅱ:將原題中正方體蛋白塊處理得更小(如切成××=0.125cm(4)胃(答小腸不給分,因pH與題意不符)(5)另增加一個(gè)試管,放入等量的蛋白塊并將pH調(diào)得適當(dāng),但不加酶溶液例題9、現(xiàn)有相同容積的玻璃缸幾只,利用自然的清水、同齡且發(fā)育狀態(tài)相同的小蝌蚪60只、飼喂蝌蚪的飼料、未經(jīng)處理的具有生物活性的甲狀腺激素,并把具有生物活性的甲狀腺激素放在50℃的溫水中處理10min。根據(jù)這些現(xiàn)有的條件,請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證甲狀腺激素經(jīng)過(guò)處理以后,是否還有生物活性。實(shí)驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)第一步,取玻璃缸3只,分別標(biāo)記為甲、乙、丙;第二步,;第三步,如果甲缸每天飼喂飼料,丙缸每天飼喂用具有生物活性的甲狀腺激素相拌的飼料,則乙缸怎樣飼喂;最后經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的飼喂,觀察現(xiàn)象,得出結(jié)果和結(jié)論。結(jié)果分析①若乙、丙缸的蝌蚪發(fā)育同步,迅速變態(tài)為小青蛙,而甲缸還是蝌蚪狀態(tài),說(shuō)明;②若甲、乙缸的蝌蚪發(fā)育同步,而丙缸發(fā)育變態(tài)迅速,說(shuō)明了。③若乙缸的蝌蚪發(fā)育比甲缸快,比丙缸慢,則說(shuō)明了
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