細菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)及觀察

關(guān)于細菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)及觀察第1頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五

一、細菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)二、細菌的觀察方法三、顯微鏡的使用方法第2頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五第一節(jié)細菌的大小與形態(tài)1.大小：個體微小，通常以微米（μm）為測量單位

2.基本形態(tài)：有三種:球狀、桿狀、螺旋狀，分別稱為球菌、桿菌和螺形菌第3頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五球菌螺型菌桿菌第4頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五第5頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五細胞壁（cellwall）:細胞壁是位于細菌細胞膜外的一層堅韌而有彈性的膜狀結(jié)構(gòu)。功能（1）維持細菌固有外形，保護細菌不受外界低滲環(huán)境的破壞；

（2）與細胞膜共同完成胞內(nèi)外的物質(zhì)交換；

（3）決定細菌的抗原性。

(4)某些成分與致病性有關(guān)

第6頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五菌毛鞭毛核質(zhì)DNA莢膜細胞壁細胞膜核糖體胞質(zhì)顆粒細胞質(zhì)中介體細菌的結(jié)構(gòu)第7頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五細菌細胞壁所特有成分

由多糖骨架、四肽側(cè)鏈和交聯(lián)橋3部分組成第8頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五磷壁酸（techoicacid）

革蘭陽性菌特有成分,是由核糖醇或甘油殘基經(jīng)磷酸二酯鍵相互連接而成的多聚物。作用：(1)調(diào)節(jié)離子通過粘肽層，有保存和輸送鎂離子的作用；(2)為噬菌體的特異性受體；(3)與細菌的致病性有關(guān)；(4)具有抗原性可用于細菌的分型。第9頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五第10頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五外膜G-細菌在肽聚糖層外面還有三層結(jié)構(gòu)

脂蛋白：由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)構(gòu)成外膜脂質(zhì)雙層類脂A

內(nèi)毒素的毒性部分,無特異性脂多糖核心多糖有屬或組的特異性寡糖重復(fù)單位由3-5個單糖組成，有種或型的特異性脂質(zhì)雙層是G-菌細胞壁的主要結(jié)構(gòu)，占細胞壁干重的80%，結(jié)構(gòu)類似細胞膜，為液態(tài)的脂質(zhì)雙層，又稱外膜

第11頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五第12頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五革蘭陽性菌及革蘭陰性菌細胞壁結(jié)構(gòu)及意義的比較

細胞壁結(jié)構(gòu)革蘭陽性菌革蘭陰性菌細胞壁強度較堅硬較疏松肽聚糖層數(shù)可達50層1～2層肽聚糖含量50～80%5～20%磷壁酸有無外膜無有五肽交聯(lián)橋有（三維結(jié)構(gòu)）無（二維結(jié)構(gòu)）革蘭染色陽性（紫色）陰性（紅色）青霉素和溶菌酶敏感不敏感

第13頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五2細胞膜(cellmembrane)

細胞壁與細胞質(zhì)之間半滲透性的生物膜脂類雙層，鑲有蛋白質(zhì)功能：滲透和運輸、生物合成（肽聚糖、磷壁酸、脂多糖等）、呼吸作用、參與細菌分裂。另外，細胞膜是鞭毛基體的著生部位和鞭毛旋轉(zhuǎn)的供能部位。第14頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五3細胞質(zhì)是細菌進行新陳代謝的主要場所。含有以下顆粒：⑴核糖體(ribosome)：合成蛋白質(zhì)的場所⑵胞漿顆粒(cytoplasmicgranules):儲藏營養(yǎng)。異染顆粒：染成與細菌其他部分不同的顏色，如：白喉桿菌--鑒別⑶質(zhì)粒(plasmid)：第15頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五質(zhì)粒：染色體外的遺傳物質(zhì)雙股環(huán)狀DNA

攜帶某些遺傳信息，控制某些遺傳性狀

R質(zhì)粒（resistanceplasmid):

耐藥性質(zhì)粒

F質(zhì)粒（fertilityplasmid)：致育性質(zhì)粒

Vi質(zhì)粒(virulenceplasmid):

毒力質(zhì)粒第16頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五第17頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五㈡細菌的特殊結(jié)構(gòu)

莢膜、芽胞、鞭毛、菌毛

1.莢膜(capsule)定義：某些細菌胞壁外圍繞一層較厚的粘液性物質(zhì)，稱為莢膜。形成條件：動物體內(nèi)、營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基內(nèi)化學(xué)成分：多糖分類：莢膜、微莢膜、粘液層----糖被功能：鑒別細菌、分型依據(jù)（因有抗原性）致病性有關(guān)（抵抗吞噬、消化等）第18頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五2.鞭毛（flagellum）

定義：為附著在某些菌體上的細長而呈波狀彎曲的絲狀物種類：單毛菌：如霍亂弧菌雙毛菌：如空腸彎曲菌叢毛菌：如銅綠假單胞菌周毛菌：如傷寒沙門菌化學(xué)成分：蛋白質(zhì)性質(zhì)：是運動器官

功能：與致病性有關(guān)：粘附性

第19頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五第20頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五第21頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五3.菌毛(fimbriaorpili)定義：某些細菌表面遍布著比鞭毛纖細、短而直的絲狀物。只有在電鏡下才能觀察?；瘜W(xué)成分：主要是蛋白質(zhì)菌毛的種類與作用：①普通菌毛：數(shù)量多，粘附于受體上---致病性②性菌毛：少，雄性菌（F+)，雌性菌（F-)---接合；噬菌體吸附受體第22頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五第23頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五4.芽胞(endosporeorspore)：定義:細菌在一定環(huán)境條件下，胞漿脫水濃縮，在菌體內(nèi)形成的多層膜狀結(jié)構(gòu)的圓形或卵圓形小體。形成條件：缺乏營養(yǎng)物質(zhì)，有害代謝產(chǎn)物堆積性質(zhì)：是休眠狀態(tài)，不是繁殖方式功能對細菌起保護作用：多層膜包繞，通透性降低芽孢死亡作為滅菌是否徹底的指標(biāo)第24頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五第25頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五一細菌的染色方法二顯微鏡的使用方法第26頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五三、細菌染色法:第27頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五

1.簡單染色2.革蘭氏染色3.鞭毛染色4.芽孢染色細菌的染色方法第28頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五

用于生物簡單染色的染料主要有堿性、酸性和中性染料三大類簡單染色法是只用一種染料使細菌著色以顯示其形態(tài)（簡單染色不能辨別細菌細胞的構(gòu)造）簡單染色第29頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五主要步驟:（1）涂片：直接在載玻片上制薄的涂面（2）晾干：讓涂片自然晾干（3）固定：菌膜朝上，通過火焰2-3次固定（4）染色：將固定過的涂片放在廢液缸上的擱架上，加復(fù)紅染色1-2min。（5）水洗：用水洗去涂片上的染色液（6）干燥：將涂片放在空氣中晾干（7）鏡檢：在涂片上加香柏油一滴，將油鏡頭浸入油滴中仔細調(diào)焦觀察細菌的形態(tài)。第30頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五桿菌第31頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五革蘭氏染色

革蘭氏染色是采用二種染料對細菌細胞進行染色，初染采用的是結(jié)晶紫，復(fù)染采用的是番紅。G＋菌：細胞壁較厚，肽聚糖含量較高，基本不含類脂，肽聚糖分子交聯(lián)度較緊密，故經(jīng)乙醇處理后，肽聚糖網(wǎng)孔因脫水而明顯收縮，使壁的通透性降低保留著結(jié)晶紫－碘復(fù)合物，所以復(fù)染液番紅不能進入,細胞顯紫色。G-菌：細胞壁薄，肽聚糖含量低，類脂含量高，肽聚糖分子交松散，故經(jīng)乙醇處理后，壁會出現(xiàn)較大的縫隙，細胞透性增大，結(jié)晶紫－碘復(fù)合物易被洗脫出來，再經(jīng)番紅復(fù)染后使細胞顯紅色。第32頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五步驟：結(jié)果:

陽性菌——紫色

陰性菌——紅色結(jié)晶紫初染碘液媒染乙醇脫色番紅復(fù)染涂片固定由丹麥醫(yī)生HansChristianGram于1884年創(chuàng)立。革蘭氏染色法（GramStain）第33頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五Figure1-AGramstainofGram+Staphylococcuscells.Figure2-GramstainofGram-E.colicellsFigure第34頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五

鞭毛染色

鞭毛是細菌的運動“器官”，一般細菌的鞭毛都非常纖細，其直徑為0．01—0．02μm。鞭毛染色是借媒染劑和染色劑的沉淀作用，使染料堆積在鞭毛上，以加粗鞭毛的直徑，同時使鞭毛著色。第35頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五(1)選菌（用新培養(yǎng)的菌種為宜）(2)制片(3)染色(4)鏡檢主要步驟：第36頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五

芽孢染色法是利用細菌的芽孢和菌體對染料的親合力不同的原理，用不同染料進行著色，使芽孢和菌體呈不同的顏色而便于區(qū)別。

芽孢染色第37頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五主要步驟：制片(按常規(guī)涂片，干燥，固定)加熱染色脫色復(fù)染水洗鏡檢第38頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五細菌芽胞染色技術(shù)芽孢染色法染色結(jié)果：位于紅色細胞內(nèi)綠色的為芽胞第39頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五1.觀察工具（tools）普通光學(xué)顯微鏡暗視野顯微鏡相差顯微鏡熒光顯微鏡電子顯微鏡觀察細菌的方法第40頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五二、顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)及油鏡的工作原理1、普通光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)

普通光學(xué)顯微鏡分兩部分：1）機械裝置：鏡座、鏡筒、鏡臂、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、標(biāo)本移動螺旋、粗調(diào)螺旋和細調(diào)螺旋等部件組成。2）光學(xué)系統(tǒng)：目鏡、物鏡、聚光器、虹彩光圈、光源等組成

第41頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五普通光學(xué)顯微鏡基本構(gòu)造第42頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五放大倍數(shù)=物鏡放大倍數(shù)×目鏡放大倍數(shù)第43頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五低倍鏡的操作1.置顯微鏡于固定的桌上。2.旋動轉(zhuǎn)換器，將低倍鏡移到鏡筒下方與之對直。3.轉(zhuǎn)動反光鏡向著光源處，同時用眼對準(zhǔn)目鏡，仔細觀察，視野亮度均勻。4.將標(biāo)本放在載物臺上，使觀察的目的物置于圓孔的正中央。5.將粗調(diào)節(jié)器向下旋轉(zhuǎn)，眼睛注視物鏡，以防物鏡和載玻片相碰，當(dāng)物鏡的尖端距載玻片約0.5cm處時停止旋轉(zhuǎn)。6.左眼向目鏡觀察，調(diào)節(jié)粗、細調(diào)節(jié)器直至目的物清晰為止。第44頁，共47頁，2022年，5月20日，23點43分，星期五油鏡的操作如果用高倍鏡未能看清目的物，則可用油鏡。應(yīng)先用低倍鏡和高倍鏡檢查標(biāo)本片，將目的物移到視野正中。2.下降載物臺在載玻片上滴一滴香柏油，將油鏡移至正中央，使油鏡