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血細胞自動分析與臨床Automatedanalysisofbloodcellsandclinic王佳血細胞自動分析與臨床Automatedanalysiso1傳統(tǒng)的血細胞檢查完全采用手工方法,不僅操作繁瑣費時,而且由于多種原因,計數(shù)結(jié)果的準確性和精密度難以保證.20世紀50年代末,庫爾特采用電阻率變化與電子技術(shù)相結(jié)合的方法,發(fā)明了性能比較穩(wěn)定的電阻抗法血細胞計數(shù)儀,開創(chuàng)了血細胞分析的新紀元.傳統(tǒng)的血細胞檢查完全采用手工方法,不僅操作繁瑣費時,而且由于2公司創(chuàng)辦人貝克曼儀器公司
始創(chuàng)于1935年
Dr.ArnoldO.Beckman庫爾特電子公司始創(chuàng)于1958年WallaceH.&JosephR.Coulter公司創(chuàng)辦人貝克曼儀器公司
始創(chuàng)于1935年
Dr.3庫爾特先生(1913-1998)“ScienceServingHumanity”(科學服務(wù)人類)庫爾特原理發(fā)明者,早期單克隆抗體研究者直至1998年,曾獲6項美國科學榮譽,及多項發(fā)明專利庫爾特先生(1913-1998)“ScienceSe4主要服務(wù)對象
生物研究診斷醫(yī)療大學研究所生物技術(shù)生化制藥醫(yī)院臨床實驗室私人實驗室醫(yī)療所主要服務(wù)對象生物研究診斷醫(yī)療大學生物5血細胞分析儀的發(fā)展史
從庫爾特公司的發(fā)展史開始…1947年,華萊士.庫爾特先生發(fā)明庫爾特原理;
“當一個不良導體顆粒,例如血細胞,通過兩個電極之間時,導致電路的電阻抗發(fā)生變化?!?華萊士.庫爾特,
1947血細胞分析儀的發(fā)展史
從庫爾特公司的發(fā)展史開始…1947年,61953年庫爾特家族研制出全世界第一臺血細胞計數(shù)儀:ModelA;現(xiàn)在,95%的血細胞分析儀采用庫爾特原理;1953年庫爾特家族研制出全世界第一臺血細胞計數(shù)儀:Mode7
庫爾特原理三要素:小孔、負壓、電極
檢測:細胞大小和數(shù)量
負壓血細胞懸液外電極內(nèi)電極小孔小孔管小孔電流樣品杯小孔近觀在等滲電解質(zhì)溶液(稀釋液)中,有一個用于細胞計數(shù)的小孔管,其內(nèi)側(cè)充滿了稀釋液,并有一個內(nèi)電極,其外側(cè)細胞懸液中有個外電極,小孔兩側(cè)的電極之間有穩(wěn)定的電流。細胞為相對不良導體,其導電性質(zhì)比稀釋液低,當有個細胞通過小孔,于瞬間引起了電壓變化而出現(xiàn)脈沖信號,脈沖的數(shù)量與細胞的數(shù)量成正比,高度與細胞體積成正比。脈沖信號經(jīng)放大,閾值調(diào)節(jié),甄別,整形后,送入計數(shù)系統(tǒng)進行處理,得出被測細胞的數(shù)量和體積分布直方圖。
庫爾特原理三要素:小孔、負壓、電極
檢測:細胞大小和8檢測區(qū)域紅細胞紅細胞通過小孔庫爾特原理Oscilloscope示波鏡檢測區(qū)域紅細胞紅細胞通過小孔庫爾特原理Oscilloscop9檢測區(qū)域白細胞白細胞通過小孔庫爾特原理示波鏡檢測區(qū)域白細胞白細胞通過小孔庫爾特原理示波鏡10庫爾特技術(shù)庫爾特技術(shù)11高頻度分析-直方圖直方圖-X軸:體積(fL)-Y軸:相對數(shù)量通道劃分RBC直方圖:36-360fLPLT直方圖:2-20fLWBC直方圖:35-450fL高頻度分析-直方圖直方圖通道劃分12脈沖編輯(專利技術(shù))作用:刪除不規(guī)則脈沖對體積測量的影響。脈沖編輯(專利技術(shù))作用:刪除不規(guī)則脈沖對體積測量的影響。13重疊校正(專利技術(shù))
小孔近觀
作用:糾正因重疊而導致的對顆粒計數(shù)和體積測量的影響。重疊校正(專利技術(shù))小孔近觀作用14三次計數(shù)/延長計數(shù)血小板計數(shù)以三次擬合的均值為依據(jù);對血小板濃度小于67X109/L的標本,儀器自動延長1-2個三次計數(shù)。三次計數(shù):統(tǒng)計補償;監(jiān)控計數(shù)過程的穩(wěn)定性。延長計數(shù):針對低濃度的標本。三次計數(shù)/延長計數(shù)血小板計數(shù)以三次擬合的均值為依據(jù);15掃流技術(shù)(專利技術(shù))測試區(qū)域紅細胞回流示波鏡紅細胞血小板+-掃流技術(shù)(專利技術(shù))測試區(qū)域紅細胞回流示波鏡紅細胞血小板+-16測試區(qū)域紅細胞被掃流液沖走示波鏡RBCPLT+-掃流液掃流技術(shù)(專利技術(shù))測試區(qū)域紅細胞被掃流液沖走示波鏡RBCPLT+-掃流液掃流技17掃流技術(shù)(專利技術(shù))作用:防止紅細胞回流對血小板計數(shù)的干擾;防止細胞再度進入感應區(qū)被兩次計數(shù)。掃流技術(shù)(專利技術(shù))作用:防止紅細胞回流對血小板計數(shù)的干擾;18擬合曲線(專利技術(shù))在血小板的直方圖上可見兩條曲線:一條是2fl-20fl的原始數(shù)據(jù)曲線;另一條是0fl-70fl的擬合曲線.由最小平方回歸法定義出一條對數(shù)正態(tài)曲線,即擬合曲線;擬合曲線(專利技術(shù))在血小板的直方圖上可見兩條曲線:19擬合曲線血小板計數(shù)的干擾主要來自:2fl以下:噪音;細菌的干擾20fl以上:裂紅細胞;小紅細胞;白細胞的干擾擬合曲線血小板計數(shù)的干擾主要來自:20擬合曲線的作用對曲線下的面積進行積分計算;將該面積值校準到參考的PLT計數(shù);獲得與參考方法最具相關(guān)性的血小板數(shù)值.在0-70fL范圍的非血小板脈沖被擬合曲線排除于血小板計數(shù)之外;大大增加了血小板的線性范圍(0-1,500,000)擬合曲線的作用對曲線下的面積進行積分計算;21燃燒電路(專利技術(shù))作用:預防蛋白堆積于計數(shù)孔;取消小孔的日常保養(yǎng)程序。
燃燒電路(專利技術(shù))作用:預防蛋白堆積于計數(shù)孔;22酶清潔劑(專利配方)操作:每24小時浸泡0.5小時。作用:令儀器的流式通道、計數(shù)池、分血片、和血紅蛋白檢測室保持潔凈性。圖示:計數(shù)孔在用CLENZ清潔劑浸泡前后的潔凈度比較。
酶清潔劑(專利配方)操作:每24小時浸泡0.5小時。圖示:計23自我清潔的分血片庫爾特另一個免日常保養(yǎng)的關(guān)鍵部件是專利的、是具自我清潔功能的分血片。自我清潔的分血片庫爾特另一個免日常保養(yǎng)的關(guān)鍵部件是專利的、是24庫爾特CBC分析技術(shù)計數(shù)和體積分析的技術(shù)脈沖編輯重疊校正三次計數(shù)/延長計數(shù)高頻度分析血小板分析的技術(shù)掃流技術(shù)擬合曲線三次計數(shù)/延長計數(shù)免日常保養(yǎng)的技術(shù)燃燒電路酶清潔劑自我清潔的分血片其他技術(shù)庫爾特CBC分析技術(shù)計數(shù)和體積分析的技術(shù)免日常保養(yǎng)的技術(shù)25白細胞分類原理三分類原理:庫爾特直方圖分類五分類原理:VCS三維分析原理白細胞分類原理三分類原理:庫爾特直方圖分類26從三分類到五分類三分類:淋巴細胞單核細胞粒細胞中性粒細胞嗜酸細胞嗜堿細胞五分類:淋巴細胞單核細胞中性粒細胞嗜酸細胞嗜堿細胞從三分類到五分類三分類:五分類:27在進行白細胞分析時,,由于白細胞計數(shù)池中除加入一定量的稀釋液外還加入了溶血劑,此溶血劑一方面使紅細胞溶解,另一方面使白細胞質(zhì)經(jīng)胞膜滲出,胞膜緊裹在細胞核或存在的顆粒周圍,使白細胞成為”膜包核”.儀器將體積在35-450fl的這種顆粒認定為白細胞,并根據(jù)其體積大小在直方圖上從左至右初步確認其相應的三個細胞群.在進行白細胞分析時,,由于白細胞計數(shù)池中除加入一定量的稀釋液28在正常白細胞直方圖上,小細胞群是位于左側(cè)又高又陡的峰,分布在35-90fl,以成熟淋巴細胞為主要特征細胞,大細胞群是位于右側(cè)較低且分布寬的峰,跨越160-450fl,以中性粒細胞為主要特征細胞,位于大、小細胞群之間的較平坦的區(qū)域,分布在90-160fl,是單個核細胞,也稱為中間細胞,以單核細胞為主要特征細胞。淋巴細胞單核細胞粒細胞在正常白細胞直方圖上,小細胞群是位于左側(cè)又高又陡的峰,分布在29儀器根據(jù)各細胞群占總體的比例計算出相應的百分比,從而得到白細胞三分類結(jié)果,如果再與該標本的白細胞總數(shù)相乘,即得到各類細胞的絕對值。電阻抗法的白細胞分類只是根據(jù)加溶血劑后白細胞體積的大小獲得,由于多種因素可影響白細胞分類的真實性,因此,準確的白細胞分類還不能完全脫離手工顯微鏡檢查。儀器根據(jù)各細胞群占總體的比例計算出相應的百分比,從而得到白細30白細胞五項分類:VCS技術(shù)分析外周血液中的淋巴細胞單核細胞嗜中性粒細胞嗜酸性粒細胞嗜堿性粒細胞運用VCS技術(shù),對白細胞進行多參量分析大小、核形、顆粒特性白細胞五項分類:VCS技術(shù)分析外周血液中的31嗜酸細胞淋巴細胞單核細胞中性粒細胞血小板
嗜堿細胞紅細胞嗜酸細胞淋巴細胞單核細胞中性粒細胞血小板嗜堿細胞紅細胞32淋巴嗜堿單核嗜酸中性粒細胞淋巴嗜堿單核嗜酸中性粒細胞33V.C.S.三維分析原理運用V、C、S三種探針,在流式通道的某一位點,對通過的單列白細胞,進行逐個的、同時的、三重的檢測,以及三維分析,以確定其亞群性質(zhì)。V-低頻波,分析細胞體積;C-高頻波,分析細胞核型;S-激光,分析細胞的顆粒特性。V.C.S.三維分析原理運用V、C、S三種探針,在流式通道的34VCS檢測八千多個白細胞逐個、直接、同時地接受VCS三重檢測,得到各自的三維座標值VCSVCS檢測八千多個白細胞逐個、直接、同時地接受VCS三重檢測35增強型流式通道VCS增強型流式通道運用三種獨立的能量探針來分析細胞增強型流式通道VCS增強型流式通道運用三種獨立的能量探針來分36更好的大小測量方法
0-3
(相對大小)V是以參考的直流電阻方法檢測整個細胞的體積普通流式方法根據(jù)激光的前向散射估計細胞的相對大小激光VCS
-DC更好的大小測量方法0-3V是以參考的直流電阻方37更好的內(nèi)部結(jié)構(gòu)測量方法
7-10(復雜性)RF運用類似于超聲波的高頻波測量細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)普通流式方法根據(jù)激光的低角度散射估計細胞的復雜性激光VCS-RF更好的內(nèi)部結(jié)構(gòu)測量方法7-10RF運用類似于超聲波的38射頻(RF)信號的問題細胞越大,它發(fā)出射頻信號所需要的時間就越長;因此,細胞大小對射頻信號具有影響;這種影響可以減弱對LY、MO、和GR的分辨效果。VolumeRF射頻(RF)信號的問題細胞越大,它發(fā)出射頻信號所需要的時間就39將射頻轉(zhuǎn)換為阻光性已知細胞體積,可對射頻信號作體積補償;使信號的變化只受細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的影響;阻光性測量核的密度和分葉性,使更好地區(qū)分細胞。VolumeOpacity將射頻轉(zhuǎn)換為阻光性已知細胞體積,可對射頻信號作體積補償;Vo40高頻傳導信號大的細胞嗜中性、嗜酸性、嗜堿性粒細胞高頻傳導信號小的細胞淋巴、單核細胞高頻傳導(阻光性)高頻傳導信號大的細胞高頻傳導信號小的細胞高頻傳導(阻光性)419Odeg.激光VCS-LaserS是運用一個寬角度的散射范圍(10-70)來測量細胞的顆粒特性普通流式方法運用單角度/側(cè)向激光散射測量細胞的顆粒特性更好的顆粒特性測量方法9Odeg.激光VCS-LaserS是運用一個寬角度的42激光散射信號大的細胞嗜中性粒細胞、嗜酸性粒細胞激光散射信號小的細胞淋巴細胞、單核細胞、嗜堿性粒細胞激光散射激光散射信號大的細胞激光散射信號小的細胞激光散射43三維分析技術(shù)將檢測過的8,192個細胞分布到一個以V、C、S為三維坐標的空間內(nèi),顯示出細胞群特征。高智能的計算機軟件分析分析細胞群的位置、相對密度、輪廓、和大小。三維坐標的數(shù)據(jù)分析位點多過16×106個。三維分析技術(shù)將檢測過的8,192個細胞分布到一個以V、C、S44三維空間的立體表示三維空間的立體表示45VCS三維分析的技術(shù)特點接近原態(tài)的白細胞分析一個分類試劑包ScatterPak雙試劑系統(tǒng)的作用去紅細胞:紅細胞溶解劑通過滲透壓差溶解紅細胞;保持白細胞原態(tài):溶解終止液令白細胞恢復到“接近原態(tài)”大小。VCS三維分析的技術(shù)特點接近原態(tài)的白細胞分析46接近原態(tài)的WBC分析接近原態(tài)的白細胞進入流式通道接近原態(tài)的WBC分析接近原態(tài)的白細胞進入流式通道47VCS三維分析的技術(shù)特點1流體動力聚焦的流式通道單細胞流在鞘液的包裹下呈最適排列通過流式通道;將重疊限制到最低限度。VCS三維分析的技術(shù)特點1流體動力聚焦的流式通道48正常壓力差:標本壓力小于鞘流壓力正常壓力差:標本壓力小于鞘流壓力49異常壓力差:標本與鞘流壓力差過小異常壓力差:標本與鞘流壓力差過小50異常壓力差:標本壓力與鞘流壓力相等異常壓力差:標本壓力與鞘流壓力相等512增強型流式通道,VCS直接、同時、三重檢測分析細胞的視角與手工相似VCS,匯集最全面的物理檢測工具3三維分析的高分辨率(256256256)五分類10種異常細胞2增強型流式通道,VCS直接、同時、三重檢測52十種異常細胞的報警提示十種異常細胞的報警提示53紅細胞檢測原理根據(jù)各參數(shù)的檢測原理不同,大致分為三個部分1紅細胞計數(shù)和血細胞比容測定原理與白細胞檢測相同,當紅細胞通過小孔時,形成相應大小的脈沖,脈沖的多少代表RBC的數(shù)量,脈沖的高度代表單個細胞的體積。脈沖高度疊加,經(jīng)換算即可得血細胞比積(HCT)。紅細胞檢測原理根據(jù)各參數(shù)的檢測原理不同,大致分為三個部分542血紅蛋白檢測原理在稀釋的血液中加入溶血劑后,紅細胞被溶解,釋放出血紅蛋白(Hb),后者與溶血濟中有關(guān)成分結(jié)合形成Hb衍生物,進入Hb測試系統(tǒng),在特定波長(一般在530-550nm)下比色,吸光度的變化與液體中Hb含量成正比,儀器便可顯示其濃度。2血紅蛋白檢測原理在稀釋的血液中加入溶血劑后,紅細胞被溶解,55HGB測量庫爾特的HGB測量方法:改良的氰化高鐵血紅蛋白試劑;溶血劑令紅細胞破碎溶解,并將血紅蛋白轉(zhuǎn)換為氰化血紅蛋白一個具寬光譜的鎢燈光源;一個紅外濾光器過濾熱吸收;一個以525nm為中心的寬幅通帶濾光器;沒有來自磺基血紅蛋白的干擾;多重試劑空白。HGB測量庫爾特的HGB測量方法:56窄幅通帶濾光器光吸收波長窄幅通帶濾光器光波長57寬幅通帶濾光器波長光吸收寬幅通帶濾光器波長光58吸收峰偏移如果吸收峰頻率發(fā)生偏移,窄幅通帶濾光器可能會漏掉曲線的大部分;寬幅通帶濾光器對吸收峰偏移現(xiàn)象會有所補償。光吸收光吸收波長吸收峰偏移如果吸收峰頻率發(fā)生偏移,窄幅通帶濾光器可能會漏掉曲593血小板檢測原理隨紅細胞一起在一個系統(tǒng)中進行檢測,根據(jù)不同的域值,計算機分別給出血小板與紅細胞的數(shù)目。3血小板檢測原理隨紅細胞一起在一個系統(tǒng)中進行檢測,根據(jù)不同60血細胞分析儀
檢測參數(shù)的臨床意義白細胞計數(shù)的臨床意義
1生理性增多主要見于初生兒,妊娠期與分娩時,運動,疼痛和情緒變化,體力勞動,冷熱水浴,日光或紫外線照射等以及日間變化。血細胞分析儀
檢測參數(shù)的臨床意義白細胞計數(shù)的臨床意義61病理性增多
急性感染(化膿性感染)嚴重組織損傷或大量血細胞破壞(大手術(shù))急性大出血(脾破裂,宮外孕輸卵管破裂)急性中毒(安眠藥,敵敵畏)腫瘤性增多(白血?。?/p>
病理性增多62數(shù)量減少革蘭陰性桿菌或病毒感染某些血液?。ㄔ僬希┞岳怼⒒瘬p傷(電離輻射,長期服用氯霉素)自身免疫性疾?。⊿LE)因各種原因所致的脾功能亢進(肝硬化門脈高壓癥)數(shù)量減少63紅細胞計數(shù)與Hb測定的臨床意義1增多(1)相對性增多劇烈嘔吐,嚴重腹瀉,大面積燒傷,大量出汗,多尿和水的攝入量顯著不足的患者。(2)絕對性增多常見于繼發(fā)性增多:慢性肺源性心臟病,發(fā)紺性先天性心臟病,慢性一氧化碳中毒,登山病等。(3)真性紅細胞增多癥面色磚紅,肝脾腫大為特征,紅細胞可達(7-10)×1012/L紅細胞計數(shù)與Hb測定的臨床意義1增多642紅細胞減少(1)生理性貧血妊娠期婦女,3個月嬰兒至15歲的兒童,老年人。(2)病理性減少再障,MDS,缺鐵貧等
2紅細胞減少65血小板計數(shù)的臨床意義1血小板的減少(1)生成減少造血功能受到損害如再障、急性白血病。(2)破壞亢進原發(fā)性血小板減少性紫癜、脾功能亢進癥。(3)消耗過多彌散性血管內(nèi)凝血,血栓性血小板減少性紫癜等。血小板計數(shù)的臨床意義1血小板的減少662血小板增多(1)一過性增多常見于急性大出血及溶血之后。(2)持續(xù)性增多見于真紅,出血性血小板增多癥。(3)慢粒,多發(fā)性骨髓瘤及許多惡性腫瘤的早期??梢娪谘“逶龆?。2血小板增多67檢驗報告中報警提示一覽表檢驗報告中報警提示一覽表68THANKYOU?。裕龋粒危耍伲希?!69血細胞自動分析與臨床Automatedanalysisofbloodcellsandclinic王佳血細胞自動分析與臨床Automatedanalysiso70傳統(tǒng)的血細胞檢查完全采用手工方法,不僅操作繁瑣費時,而且由于多種原因,計數(shù)結(jié)果的準確性和精密度難以保證.20世紀50年代末,庫爾特采用電阻率變化與電子技術(shù)相結(jié)合的方法,發(fā)明了性能比較穩(wěn)定的電阻抗法血細胞計數(shù)儀,開創(chuàng)了血細胞分析的新紀元.傳統(tǒng)的血細胞檢查完全采用手工方法,不僅操作繁瑣費時,而且由于71公司創(chuàng)辦人貝克曼儀器公司
始創(chuàng)于1935年
Dr.ArnoldO.Beckman庫爾特電子公司始創(chuàng)于1958年WallaceH.&JosephR.Coulter公司創(chuàng)辦人貝克曼儀器公司
始創(chuàng)于1935年
Dr.72庫爾特先生(1913-1998)“ScienceServingHumanity”(科學服務(wù)人類)庫爾特原理發(fā)明者,早期單克隆抗體研究者直至1998年,曾獲6項美國科學榮譽,及多項發(fā)明專利庫爾特先生(1913-1998)“ScienceSe73主要服務(wù)對象
生物研究診斷醫(yī)療大學研究所生物技術(shù)生化制藥醫(yī)院臨床實驗室私人實驗室醫(yī)療所主要服務(wù)對象生物研究診斷醫(yī)療大學生物74血細胞分析儀的發(fā)展史
從庫爾特公司的發(fā)展史開始…1947年,華萊士.庫爾特先生發(fā)明庫爾特原理;
“當一個不良導體顆粒,例如血細胞,通過兩個電極之間時,導致電路的電阻抗發(fā)生變化?!?華萊士.庫爾特,
1947血細胞分析儀的發(fā)展史
從庫爾特公司的發(fā)展史開始…1947年,751953年庫爾特家族研制出全世界第一臺血細胞計數(shù)儀:ModelA;現(xiàn)在,95%的血細胞分析儀采用庫爾特原理;1953年庫爾特家族研制出全世界第一臺血細胞計數(shù)儀:Mode76
庫爾特原理三要素:小孔、負壓、電極
檢測:細胞大小和數(shù)量
負壓血細胞懸液外電極內(nèi)電極小孔小孔管小孔電流樣品杯小孔近觀在等滲電解質(zhì)溶液(稀釋液)中,有一個用于細胞計數(shù)的小孔管,其內(nèi)側(cè)充滿了稀釋液,并有一個內(nèi)電極,其外側(cè)細胞懸液中有個外電極,小孔兩側(cè)的電極之間有穩(wěn)定的電流。細胞為相對不良導體,其導電性質(zhì)比稀釋液低,當有個細胞通過小孔,于瞬間引起了電壓變化而出現(xiàn)脈沖信號,脈沖的數(shù)量與細胞的數(shù)量成正比,高度與細胞體積成正比。脈沖信號經(jīng)放大,閾值調(diào)節(jié),甄別,整形后,送入計數(shù)系統(tǒng)進行處理,得出被測細胞的數(shù)量和體積分布直方圖。
庫爾特原理三要素:小孔、負壓、電極
檢測:細胞大小和77檢測區(qū)域紅細胞紅細胞通過小孔庫爾特原理Oscilloscope示波鏡檢測區(qū)域紅細胞紅細胞通過小孔庫爾特原理Oscilloscop78檢測區(qū)域白細胞白細胞通過小孔庫爾特原理示波鏡檢測區(qū)域白細胞白細胞通過小孔庫爾特原理示波鏡79庫爾特技術(shù)庫爾特技術(shù)80高頻度分析-直方圖直方圖-X軸:體積(fL)-Y軸:相對數(shù)量通道劃分RBC直方圖:36-360fLPLT直方圖:2-20fLWBC直方圖:35-450fL高頻度分析-直方圖直方圖通道劃分81脈沖編輯(專利技術(shù))作用:刪除不規(guī)則脈沖對體積測量的影響。脈沖編輯(專利技術(shù))作用:刪除不規(guī)則脈沖對體積測量的影響。82重疊校正(專利技術(shù))
小孔近觀
作用:糾正因重疊而導致的對顆粒計數(shù)和體積測量的影響。重疊校正(專利技術(shù))小孔近觀作用83三次計數(shù)/延長計數(shù)血小板計數(shù)以三次擬合的均值為依據(jù);對血小板濃度小于67X109/L的標本,儀器自動延長1-2個三次計數(shù)。三次計數(shù):統(tǒng)計補償;監(jiān)控計數(shù)過程的穩(wěn)定性。延長計數(shù):針對低濃度的標本。三次計數(shù)/延長計數(shù)血小板計數(shù)以三次擬合的均值為依據(jù);84掃流技術(shù)(專利技術(shù))測試區(qū)域紅細胞回流示波鏡紅細胞血小板+-掃流技術(shù)(專利技術(shù))測試區(qū)域紅細胞回流示波鏡紅細胞血小板+-85測試區(qū)域紅細胞被掃流液沖走示波鏡RBCPLT+-掃流液掃流技術(shù)(專利技術(shù))測試區(qū)域紅細胞被掃流液沖走示波鏡RBCPLT+-掃流液掃流技86掃流技術(shù)(專利技術(shù))作用:防止紅細胞回流對血小板計數(shù)的干擾;防止細胞再度進入感應區(qū)被兩次計數(shù)。掃流技術(shù)(專利技術(shù))作用:防止紅細胞回流對血小板計數(shù)的干擾;87擬合曲線(專利技術(shù))在血小板的直方圖上可見兩條曲線:一條是2fl-20fl的原始數(shù)據(jù)曲線;另一條是0fl-70fl的擬合曲線.由最小平方回歸法定義出一條對數(shù)正態(tài)曲線,即擬合曲線;擬合曲線(專利技術(shù))在血小板的直方圖上可見兩條曲線:88擬合曲線血小板計數(shù)的干擾主要來自:2fl以下:噪音;細菌的干擾20fl以上:裂紅細胞;小紅細胞;白細胞的干擾擬合曲線血小板計數(shù)的干擾主要來自:89擬合曲線的作用對曲線下的面積進行積分計算;將該面積值校準到參考的PLT計數(shù);獲得與參考方法最具相關(guān)性的血小板數(shù)值.在0-70fL范圍的非血小板脈沖被擬合曲線排除于血小板計數(shù)之外;大大增加了血小板的線性范圍(0-1,500,000)擬合曲線的作用對曲線下的面積進行積分計算;90燃燒電路(專利技術(shù))作用:預防蛋白堆積于計數(shù)孔;取消小孔的日常保養(yǎng)程序。
燃燒電路(專利技術(shù))作用:預防蛋白堆積于計數(shù)孔;91酶清潔劑(專利配方)操作:每24小時浸泡0.5小時。作用:令儀器的流式通道、計數(shù)池、分血片、和血紅蛋白檢測室保持潔凈性。圖示:計數(shù)孔在用CLENZ清潔劑浸泡前后的潔凈度比較。
酶清潔劑(專利配方)操作:每24小時浸泡0.5小時。圖示:計92自我清潔的分血片庫爾特另一個免日常保養(yǎng)的關(guān)鍵部件是專利的、是具自我清潔功能的分血片。自我清潔的分血片庫爾特另一個免日常保養(yǎng)的關(guān)鍵部件是專利的、是93庫爾特CBC分析技術(shù)計數(shù)和體積分析的技術(shù)脈沖編輯重疊校正三次計數(shù)/延長計數(shù)高頻度分析血小板分析的技術(shù)掃流技術(shù)擬合曲線三次計數(shù)/延長計數(shù)免日常保養(yǎng)的技術(shù)燃燒電路酶清潔劑自我清潔的分血片其他技術(shù)庫爾特CBC分析技術(shù)計數(shù)和體積分析的技術(shù)免日常保養(yǎng)的技術(shù)94白細胞分類原理三分類原理:庫爾特直方圖分類五分類原理:VCS三維分析原理白細胞分類原理三分類原理:庫爾特直方圖分類95從三分類到五分類三分類:淋巴細胞單核細胞粒細胞中性粒細胞嗜酸細胞嗜堿細胞五分類:淋巴細胞單核細胞中性粒細胞嗜酸細胞嗜堿細胞從三分類到五分類三分類:五分類:96在進行白細胞分析時,,由于白細胞計數(shù)池中除加入一定量的稀釋液外還加入了溶血劑,此溶血劑一方面使紅細胞溶解,另一方面使白細胞質(zhì)經(jīng)胞膜滲出,胞膜緊裹在細胞核或存在的顆粒周圍,使白細胞成為”膜包核”.儀器將體積在35-450fl的這種顆粒認定為白細胞,并根據(jù)其體積大小在直方圖上從左至右初步確認其相應的三個細胞群.在進行白細胞分析時,,由于白細胞計數(shù)池中除加入一定量的稀釋液97在正常白細胞直方圖上,小細胞群是位于左側(cè)又高又陡的峰,分布在35-90fl,以成熟淋巴細胞為主要特征細胞,大細胞群是位于右側(cè)較低且分布寬的峰,跨越160-450fl,以中性粒細胞為主要特征細胞,位于大、小細胞群之間的較平坦的區(qū)域,分布在90-160fl,是單個核細胞,也稱為中間細胞,以單核細胞為主要特征細胞。淋巴細胞單核細胞粒細胞在正常白細胞直方圖上,小細胞群是位于左側(cè)又高又陡的峰,分布在98儀器根據(jù)各細胞群占總體的比例計算出相應的百分比,從而得到白細胞三分類結(jié)果,如果再與該標本的白細胞總數(shù)相乘,即得到各類細胞的絕對值。電阻抗法的白細胞分類只是根據(jù)加溶血劑后白細胞體積的大小獲得,由于多種因素可影響白細胞分類的真實性,因此,準確的白細胞分類還不能完全脫離手工顯微鏡檢查。儀器根據(jù)各細胞群占總體的比例計算出相應的百分比,從而得到白細99白細胞五項分類:VCS技術(shù)分析外周血液中的淋巴細胞單核細胞嗜中性粒細胞嗜酸性粒細胞嗜堿性粒細胞運用VCS技術(shù),對白細胞進行多參量分析大小、核形、顆粒特性白細胞五項分類:VCS技術(shù)分析外周血液中的100嗜酸細胞淋巴細胞單核細胞中性粒細胞血小板
嗜堿細胞紅細胞嗜酸細胞淋巴細胞單核細胞中性粒細胞血小板嗜堿細胞紅細胞101淋巴嗜堿單核嗜酸中性粒細胞淋巴嗜堿單核嗜酸中性粒細胞102V.C.S.三維分析原理運用V、C、S三種探針,在流式通道的某一位點,對通過的單列白細胞,進行逐個的、同時的、三重的檢測,以及三維分析,以確定其亞群性質(zhì)。V-低頻波,分析細胞體積;C-高頻波,分析細胞核型;S-激光,分析細胞的顆粒特性。V.C.S.三維分析原理運用V、C、S三種探針,在流式通道的103VCS檢測八千多個白細胞逐個、直接、同時地接受VCS三重檢測,得到各自的三維座標值VCSVCS檢測八千多個白細胞逐個、直接、同時地接受VCS三重檢測104增強型流式通道VCS增強型流式通道運用三種獨立的能量探針來分析細胞增強型流式通道VCS增強型流式通道運用三種獨立的能量探針來分105更好的大小測量方法
0-3
(相對大小)V是以參考的直流電阻方法檢測整個細胞的體積普通流式方法根據(jù)激光的前向散射估計細胞的相對大小激光VCS
-DC更好的大小測量方法0-3V是以參考的直流電阻方106更好的內(nèi)部結(jié)構(gòu)測量方法
7-10(復雜性)RF運用類似于超聲波的高頻波測量細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)普通流式方法根據(jù)激光的低角度散射估計細胞的復雜性激光VCS-RF更好的內(nèi)部結(jié)構(gòu)測量方法7-10RF運用類似于超聲波的107射頻(RF)信號的問題細胞越大,它發(fā)出射頻信號所需要的時間就越長;因此,細胞大小對射頻信號具有影響;這種影響可以減弱對LY、MO、和GR的分辨效果。VolumeRF射頻(RF)信號的問題細胞越大,它發(fā)出射頻信號所需要的時間就108將射頻轉(zhuǎn)換為阻光性已知細胞體積,可對射頻信號作體積補償;使信號的變化只受細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的影響;阻光性測量核的密度和分葉性,使更好地區(qū)分細胞。VolumeOpacity將射頻轉(zhuǎn)換為阻光性已知細胞體積,可對射頻信號作體積補償;Vo109高頻傳導信號大的細胞嗜中性、嗜酸性、嗜堿性粒細胞高頻傳導信號小的細胞淋巴、單核細胞高頻傳導(阻光性)高頻傳導信號大的細胞高頻傳導信號小的細胞高頻傳導(阻光性)1109Odeg.激光VCS-LaserS是運用一個寬角度的散射范圍(10-70)來測量細胞的顆粒特性普通流式方法運用單角度/側(cè)向激光散射測量細胞的顆粒特性更好的顆粒特性測量方法9Odeg.激光VCS-LaserS是運用一個寬角度的111激光散射信號大的細胞嗜中性粒細胞、嗜酸性粒細胞激光散射信號小的細胞淋巴細胞、單核細胞、嗜堿性粒細胞激光散射激光散射信號大的細胞激光散射信號小的細胞激光散射112三維分析技術(shù)將檢測過的8,192個細胞分布到一個以V、C、S為三維坐標的空間內(nèi),顯示出細胞群特征。高智能的計算機軟件分析分析細胞群的位置、相對密度、輪廓、和大小。三維坐標的數(shù)據(jù)分析位點多過16×106個。三維分析技術(shù)將檢測過的8,192個細胞分布到一個以V、C、S113三維空間的立體表示三維空間的立體表示114VCS三維分析的技術(shù)特點接近原態(tài)的白細胞分析一個分類試劑包ScatterPak雙試劑系統(tǒng)的作用去紅細胞:紅細胞溶解劑通過滲透壓差溶解紅細胞;保持白細胞原態(tài):溶解終止液令白細胞恢復到“接近原態(tài)”大小。VCS三維分析的技術(shù)特點接近原態(tài)的白細胞分析115接近原態(tài)的WBC分析接近原態(tài)的白細胞進入流式通道接近原態(tài)的WBC分析接近原態(tài)的白細胞進入流式通道116VCS三維分析的技術(shù)特點1流體動力聚焦的流式通道單細胞流在鞘液的包裹下呈最適排列通過流式通道;將重疊限制到最低限度。VCS三維分析的技術(shù)特點1流體動力聚焦的流式通道117正常壓力差:標本壓力小于鞘流壓力正常壓力差:標本壓力小于鞘流壓力118異常壓力差:標本與鞘流壓力差過小異常壓力差:標本與鞘流壓力差過小119異常壓力差:標本壓力與鞘流壓力相等異常壓力差:標本壓力與鞘流壓力相等1202增強型流式通道,VCS直接、同時、三重檢測分析細胞的視角與手工相似VCS,匯集最全面的物理檢測工具3三維分析的高分辨率(256256256)五分類10種異常細胞2增強型流式通道,VCS直接、同時、三重檢測121十種異常細胞的報警提示十種異常細胞的報警提示122紅細胞檢測原理根據(jù)各參數(shù)的檢測原理不同,大致分為三個部分1紅細胞計數(shù)和血細胞比容測定原理與白細胞檢測相同,當紅細胞通過小孔時,形成相應大小的脈沖,脈沖的多少代表RBC的數(shù)量,脈沖的高度代表單個細胞的體積。脈沖高度疊加,經(jīng)換算即可得血細胞比積(HCT)。紅細胞檢測原理根據(jù)各參數(shù)的檢測原理不同,大致分為三個部分1232血紅蛋白檢測原理在稀釋的血液中加入溶血劑后,紅細胞被溶解,釋放出血紅蛋白(Hb),后者與溶血濟中有關(guān)成分結(jié)合形成Hb衍生物,進入Hb測試系統(tǒng),在特定波長(一般在530-550nm)下比色,吸光度的變化與液體中Hb含量成正比,
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