基因工程的基本操作程序15課件

南通市教育科學(xué)研究中心劉義友基因工程的基本操作程序南通市教育科學(xué)研究中心劉義友基因工程的基本操作程序1有同學(xué)知道這三種標(biāo)志嗎?非轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品認(rèn)證綠色食品質(zhì)量安全有同學(xué)知道這三種標(biāo)志嗎?非轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品認(rèn)證綠色食品質(zhì)量安全21．簡(jiǎn)述基因工程基本操作的四個(gè)步驟;2．簡(jiǎn)述目的基因的獲得、運(yùn)載體的構(gòu)建、目的基因的導(dǎo)入與檢測(cè)等常用的方法及其基本原理.考點(diǎn)列舉1．簡(jiǎn)述基因工程基本操作的四個(gè)步驟;考點(diǎn)列舉3基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4、目的基因的檢測(cè)與鑒定基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取4活動(dòng)1結(jié)合基因操作的四個(gè)基本過(guò)程,你能說(shuō)出下列歷史事件，為什么對(duì)基因工程的誕生起到了決定性的作用？

年份重大事件1944Avery等證明DNA是遺傳物質(zhì)。1952AlfredHershy和MarshaChase證明T2噬菌體的遺傳物質(zhì)是DNA。1953JamesD.Watson和FrancisH.C.Crick揭示了DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)和半保留復(fù)制機(jī)制（1962年Nobel生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)）。1957Crick又提出了遺傳信息傳遞的“中心法則”（1968年Nobel生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)）。1970H.O.Smith等分離出第一種限制性核酸內(nèi)切酶（1978年Nobel生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)）1972PaulBerg小組完成了首次體外重組實(shí)驗(yàn)（1980年Nobel化學(xué)獎(jiǎng)）。1973斯坦福大學(xué)的S.Cohen小組將含有卡那霉素抗性基因的大腸桿菌R6-5質(zhì)粒與含有四環(huán)素抗性基因的另一種大腸桿菌質(zhì)粒pSC101連接成重組質(zhì)粒，具有雙重抗藥性。1975F.Sanger、A.Maxam和W.Gilbert發(fā)明了DNA快速測(cè)序技術(shù)（1986Nobel生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)）。1980科學(xué)家首次培育出世界第一個(gè)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物轉(zhuǎn)基因小鼠。1983科學(xué)家首次培育出世界第一個(gè)轉(zhuǎn)基因植物轉(zhuǎn)基因煙草。1983PCR技術(shù)問(wèn)世（1988年發(fā)現(xiàn)TaqDNA聚合酶）（1993年Nobel化學(xué)獎(jiǎng)）。理論基礎(chǔ)技術(shù)支持活動(dòng)1結(jié)合基因操作的四個(gè)基本過(guò)程,你能說(shuō)出下列歷史事件，5合成基因組織、器官、細(xì)胞基因組DNAcDNA文庫(kù)基因文庫(kù)目的基因的克隆基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取如何建立?合成基因組織、器官、細(xì)胞基因組DNAcDNA文庫(kù)基因文庫(kù)目的6活動(dòng)2體驗(yàn)基因文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程分析基因文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程的圖解，思考問(wèn)題：什么意思？怎么做？溫和噬菌體：感染宿主細(xì)菌后不引起細(xì)菌裂解而與宿主細(xì)胞建立共生關(guān)系并隨細(xì)菌繁殖傳給細(xì)菌后代。T2噬菌體?活動(dòng)2體驗(yàn)基因文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程分析基因文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程的圖解7解讀cDNA文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程(1)提取某種生物發(fā)育某一時(shí)期的mRNA;(2)mRNA反轉(zhuǎn)錄形成DNA片段;(3)DNA片段與載體連接后,儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌的群體中。解讀cDNA文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程(1)提取某種生物發(fā)育某一時(shí)期的m8活動(dòng)2體驗(yàn)基因文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程分析基因文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程的圖解，思考問(wèn)題：就是基因表達(dá)載體？活動(dòng)2體驗(yàn)基因文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程分析基因文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程的圖解9（08年江蘇高考）將動(dòng)物致病菌的抗原基因?qū)腭R鈴薯制成植物疫苗，飼喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯可使動(dòng)物獲得免疫力。以下是與植物疫苗制備過(guò)程相關(guān)的圖和表。注意基因克隆載體與基因表達(dá)載體的區(qū)別（08年江蘇高考）將動(dòng)物致病菌的抗原基因?qū)腭R鈴薯制成10載體(vector）：用于承載、克隆、轉(zhuǎn)移目的基因(DNA片段)，能自我復(fù)制的DNA分子。（1）在基因克隆時(shí)：將目的片段轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制克隆——克隆載體；（2）在基因?qū)胧荏w時(shí)：將目的片段轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中使目的片段穩(wěn)定存在并表達(dá)——表達(dá)載體。目的基因啟動(dòng)子和終止子復(fù)制原點(diǎn)標(biāo)記基因多種單一限制酶切點(diǎn)合適大小DNA片段復(fù)制原點(diǎn)標(biāo)記基因多種單一限制酶切點(diǎn)合適大小載體(vector）：（1）在基因克隆時(shí)：將目的片段轉(zhuǎn)移到宿11目的基因轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)化或感染合成基因組織、器官、細(xì)胞基因組DNAcDNA文庫(kù)基因文庫(kù)目的基因的克隆基因工程的基本操作程序第二步：基因表達(dá)載體構(gòu)建目的基因轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)化或感染合成基因組織、器官、12活動(dòng)3體驗(yàn)基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程下圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制性內(nèi)切酶作用位點(diǎn)），思考回答：√×√√×√√√活動(dòng)3體驗(yàn)基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程下圖是天然土壤農(nóng)13你知道雙酶切法嗎？（10年江蘇高考）下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。與只使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止___________________?！痢獭獭棠阒离p酶切法嗎？（10年江蘇高考）下表中列出了幾種限制酶識(shí)14原核細(xì)胞表達(dá)真核細(xì)胞表達(dá)植物中表達(dá)動(dòng)物中表達(dá)人體表達(dá)發(fā)酵工程轉(zhuǎn)基因植物動(dòng)物器官發(fā)生器轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因治療目的基因轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)化或感染合成基因組織、器官、細(xì)胞基因組DNAcDNA文庫(kù)基因文庫(kù)目的基因的克隆基因工程的基本操作程序第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞第四步：目的基因的檢測(cè)與鑒定原核細(xì)胞表達(dá)真核細(xì)胞表達(dá)植物中表達(dá)動(dòng)物中表達(dá)人體表達(dá)發(fā)酵工程15你會(huì)優(yōu)先選擇轉(zhuǎn)基因食品嗎？簡(jiǎn)要說(shuō)明你的理由。暢想基因產(chǎn)品的明天你會(huì)優(yōu)先選擇轉(zhuǎn)基因食品嗎？簡(jiǎn)要說(shuō)明你的理由。暢想16謝謝你的參與謝謝你的參與17

1、許多人企求著生活的完美結(jié)局，殊不知美根本不在結(jié)局，而在于追求的過(guò)程。

2、慢慢的才知道：堅(jiān)持未必就是勝利，放棄未必就是認(rèn)輸，。給自己一個(gè)迂回的空間，學(xué)會(huì)思索，學(xué)會(huì)等待，學(xué)會(huì)調(diào)整。人生沒(méi)有假設(shè)，當(dāng)下即是全部。背不動(dòng)的，放下了；傷不起的，看淡了；想不通的，不想了；恨不過(guò)的，撫平了。

3、在比夜更深的地方，一定有比夜更黑的眼睛。

4、一切偉大的行動(dòng)和思想，都有一個(gè)微不足道的開(kāi)始。

5、從來(lái)不跌倒不算光彩，每次跌倒后能再站起來(lái)，才是最大的榮耀。

6、這個(gè)世界到處充滿著不公平，我們能做的不僅僅是接受，還要試著做一些反抗。

7、一個(gè)最困苦、最卑賤、最為命運(yùn)所屈辱的人，只要還抱有希望，便無(wú)所怨懼。

8、有些人，因?yàn)榕隳阕叩臅r(shí)間長(zhǎng)了，你便淡然了，其實(shí)是他們給你撐起了生命的天空；有些人，分開(kāi)了，就忘了吧，殘缺是一種大美。

9、照自己的意思去理解自己，不要小看自己，被別人的意見(jiàn)引入歧途。

10、沒(méi)人能讓我輸，除非我不想贏！

11、花開(kāi)不是為了花落，而是為了開(kāi)的更加燦爛。

12、隨隨便便浪費(fèi)的時(shí)間，再也不能贏回來(lái)。

13、不管從什么時(shí)候開(kāi)始，重要的是開(kāi)始以后不要停止；不管在什么時(shí)候結(jié)束，重要的是結(jié)束以后不要后悔。

14、當(dāng)你決定堅(jiān)持一件事情，全世界都會(huì)為你讓路。

15、只有在開(kāi)水里，茶葉才能展開(kāi)生命濃郁的香氣。

16、別想一下造出大海，必須先由小河川開(kāi)始。

17、不要讓未來(lái)的你，討厭現(xiàn)在的自己，困惑誰(shuí)都有，但成功只配得上勇敢的行動(dòng)派。

18、人生最大的喜悅是每個(gè)人都說(shuō)你做不到，你卻完成它了！

19、如果你真的愿意為自己的夢(mèng)想去努力，最差的結(jié)果，不過(guò)是大器晚成。

20、不忘初心，方得始終。1、許多人企求著生活的完美結(jié)局，殊不知美根本不在結(jié)局，而18南通市教育科學(xué)研究中心劉義友基因工程的基本操作程序南通市教育科學(xué)研究中心劉義友基因工程的基本操作程序19有同學(xué)知道這三種標(biāo)志嗎?非轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品認(rèn)證綠色食品質(zhì)量安全有同學(xué)知道這三種標(biāo)志嗎?非轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品認(rèn)證綠色食品質(zhì)量安全201．簡(jiǎn)述基因工程基本操作的四個(gè)步驟;2．簡(jiǎn)述目的基因的獲得、運(yùn)載體的構(gòu)建、目的基因的導(dǎo)入與檢測(cè)等常用的方法及其基本原理.考點(diǎn)列舉1．簡(jiǎn)述基因工程基本操作的四個(gè)步驟;考點(diǎn)列舉21基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4、目的基因的檢測(cè)與鑒定基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取22活動(dòng)1結(jié)合基因操作的四個(gè)基本過(guò)程,你能說(shuō)出下列歷史事件，為什么對(duì)基因工程的誕生起到了決定性的作用？

年份重大事件1944Avery等證明DNA是遺傳物質(zhì)。1952AlfredHershy和MarshaChase證明T2噬菌體的遺傳物質(zhì)是DNA。1953JamesD.Watson和FrancisH.C.Crick揭示了DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)和半保留復(fù)制機(jī)制（1962年Nobel生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)）。1957Crick又提出了遺傳信息傳遞的“中心法則”（1968年Nobel生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)）。1970H.O.Smith等分離出第一種限制性核酸內(nèi)切酶（1978年Nobel生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)）1972PaulBerg小組完成了首次體外重組實(shí)驗(yàn)（1980年Nobel化學(xué)獎(jiǎng)）。1973斯坦福大學(xué)的S.Cohen小組將含有卡那霉素抗性基因的大腸桿菌R6-5質(zhì)粒與含有四環(huán)素抗性基因的另一種大腸桿菌質(zhì)粒pSC101連接成重組質(zhì)粒，具有雙重抗藥性。1975F.Sanger、A.Maxam和W.Gilbert發(fā)明了DNA快速測(cè)序技術(shù)（1986Nobel生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)）。1980科學(xué)家首次培育出世界第一個(gè)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物轉(zhuǎn)基因小鼠。1983科學(xué)家首次培育出世界第一個(gè)轉(zhuǎn)基因植物轉(zhuǎn)基因煙草。1983PCR技術(shù)問(wèn)世（1988年發(fā)現(xiàn)TaqDNA聚合酶）（1993年Nobel化學(xué)獎(jiǎng)）。理論基礎(chǔ)技術(shù)支持活動(dòng)1結(jié)合基因操作的四個(gè)基本過(guò)程,你能說(shuō)出下列歷史事件，23合成基因組織、器官、細(xì)胞基因組DNAcDNA文庫(kù)基因文庫(kù)目的基因的克隆基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取如何建立?合成基因組織、器官、細(xì)胞基因組DNAcDNA文庫(kù)基因文庫(kù)目的24活動(dòng)2體驗(yàn)基因文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程分析基因文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程的圖解，思考問(wèn)題：什么意思？怎么做？溫和噬菌體：感染宿主細(xì)菌后不引起細(xì)菌裂解而與宿主細(xì)胞建立共生關(guān)系并隨細(xì)菌繁殖傳給細(xì)菌后代。T2噬菌體?活動(dòng)2體驗(yàn)基因文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程分析基因文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程的圖解25解讀cDNA文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程(1)提取某種生物發(fā)育某一時(shí)期的mRNA;(2)mRNA反轉(zhuǎn)錄形成DNA片段;(3)DNA片段與載體連接后,儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌的群體中。解讀cDNA文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程(1)提取某種生物發(fā)育某一時(shí)期的m26活動(dòng)2體驗(yàn)基因文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程分析基因文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程的圖解，思考問(wèn)題：就是基因表達(dá)載體？活動(dòng)2體驗(yàn)基因文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程分析基因文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程的圖解27（08年江蘇高考）將動(dòng)物致病菌的抗原基因?qū)腭R鈴薯制成植物疫苗，飼喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯可使動(dòng)物獲得免疫力。以下是與植物疫苗制備過(guò)程相關(guān)的圖和表。注意基因克隆載體與基因表達(dá)載體的區(qū)別（08年江蘇高考）將動(dòng)物致病菌的抗原基因?qū)腭R鈴薯制成28載體(vector）：用于承載、克隆、轉(zhuǎn)移目的基因(DNA片段)，能自我復(fù)制的DNA分子。（1）在基因克隆時(shí)：將目的片段轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制克隆——克隆載體；（2）在基因?qū)胧荏w時(shí)：將目的片段轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中使目的片段穩(wěn)定存在并表達(dá)——表達(dá)載體。目的基因啟動(dòng)子和終止子復(fù)制原點(diǎn)標(biāo)記基因多種單一限制酶切點(diǎn)合適大小DNA片段復(fù)制原點(diǎn)標(biāo)記基因多種單一限制酶切點(diǎn)合適大小載體(vector）：（1）在基因克隆時(shí)：將目的片段轉(zhuǎn)移到宿29目的基因轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)化或感染合成基因組織、器官、細(xì)胞基因組DNAcDNA文庫(kù)基因文庫(kù)目的基因的克隆基因工程的基本操作程序第二步：基因表達(dá)載體構(gòu)建目的基因轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)化或感染合成基因組織、器官、30活動(dòng)3體驗(yàn)基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程下圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制性內(nèi)切酶作用位點(diǎn)），思考回答：√×√√×√√√活動(dòng)3體驗(yàn)基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程下圖是天然土壤農(nóng)31你知道雙酶切法嗎？（10年江蘇高考）下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。與只使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止___________________?！痢獭獭棠阒离p酶切法嗎？（10年江蘇高考）下表中列出了幾種限制酶識(shí)32原核細(xì)胞表達(dá)真核細(xì)胞表達(dá)植物中表達(dá)動(dòng)物中表達(dá)人體表達(dá)發(fā)酵工程轉(zhuǎn)基因植物動(dòng)物器官發(fā)生器轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因治療目的基因轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)化或感染合成基因組織、器官、細(xì)胞基因組DNAcDNA文庫(kù)基因文庫(kù)目的基因的克隆基因工程的基本操作程序第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞第四步：目的基因的檢測(cè)與鑒定原核細(xì)胞表達(dá)真核細(xì)胞表達(dá)植物中表達(dá)動(dòng)物中表達(dá)人體表達(dá)發(fā)酵工程33你會(huì)優(yōu)先選擇轉(zhuǎn)基因食品嗎？簡(jiǎn)要說(shuō)明你的理由。暢想基因產(chǎn)品的明天你會(huì)優(yōu)先選擇轉(zhuǎn)基因食品嗎？簡(jiǎn)要說(shuō)明你的理由。暢想34謝謝你的參與謝謝你的參與35

1、許多人企求著生活的完美結(jié)局，殊不知美根本不在結(jié)局，而在于追求的過(guò)程。

2、慢慢的才知道：堅(jiān)持未必就是勝利，放棄未必就是認(rèn)輸，。給自己一個(gè)迂回的空間，學(xué)會(huì)思索，學(xué)會(huì)等待，學(xué)會(huì)調(diào)整。人生沒(méi)有假設(shè)，當(dāng)下即是全部。背不動(dòng)的，放下了；傷不起的，看淡了；想不通的，不想了；恨不過(guò)的，撫平