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文檔簡介
2023學(xué)年高考生物模擬試卷考生請注意:1.答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內(nèi),不得在試卷上作任何標(biāo)記。2.第一部分選擇題每小題選出答案后,需將答案寫在試卷指定的括號內(nèi),第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3.考生必須保證答題卡的整潔??荚嚱Y(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.果蠅體內(nèi)的一個細(xì)胞在分裂過程中,一段時期內(nèi)某種物質(zhì)或結(jié)構(gòu)的數(shù)量變化如圖。下列敘述不正確的是()A.若a代表2個染色體組,則該細(xì)胞在CD段可能含有4條X染色體B.若a代表4個核DNA分子,則該細(xì)胞正在進行減數(shù)分裂C.若a代表4條染色體,則該細(xì)胞正在進行有絲分裂D.若a代表8條染色單體,則該細(xì)胞在CD段可發(fā)生基因重組2.果蠅剛毛和截毛是由X和Y染色體同源區(qū)段上的一對等位基因(B、b)控制的,剛毛對截毛為顯性。兩個剛毛果蠅親本雜交后代出現(xiàn)了一只染色體組成為XXY的截毛果蠅。下列敘述正確的是()A.親本雌果蠅的基因型是XBXb,親本雄果蠅的基因型可能是XBYb或XbYBB.XXY截毛果蠅的出現(xiàn),會使該種群的基因庫中基因的種類和數(shù)量增多C.剛毛和截毛這對相對性狀的遺傳遵循孟德爾遺傳規(guī)律,但不表現(xiàn)伴性遺傳的特點D.親本雌果蠅減數(shù)第一次分裂過程中X染色體條數(shù)與基因b個數(shù)之比為1:13.下列關(guān)于種群和群落的敘述,錯誤的是()A.種群是生物進化的基本單位,若某種群沒有發(fā)生突變,則該種群不能進化B.退耕還林、布設(shè)人工養(yǎng)殖網(wǎng)箱都會引發(fā)群落演替C.習(xí)性相似物種的生活區(qū)域重疊越多,對資源的利用就越充分D.某些雄鳥會進行復(fù)雜的求偶炫耀,表明行為信息在種群繁衍中起重要作用4.若除酶外所有試劑均已預(yù)保溫,則在測定酶活力的試驗中,下列操作順序合理的是A.加入酶→加入底物→加入緩沖液→保溫并計時→一段時間后檢測產(chǎn)物的量B.加入底物→加入酶→計時→加入緩沖液→保溫→一段時間后檢測產(chǎn)物的量C.加入緩沖液→加入底物→加入酶→保溫并計時→一段時間后檢測產(chǎn)物的量D.加入底物→計時→加入酶→加入緩沖液→保溫并計時→一段時間后檢測產(chǎn)物的量5.下列關(guān)于生物實驗的敘述,不正確的是()A.在蘋果的組織樣液中加入斐林試劑,水浴加熱后的顏色變化為由藍(lán)變棕再變磚紅B.鑒定DNA時,應(yīng)將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中進行沸水浴,溶液變藍(lán)C.分離葉綠體中的色素時,不同色素隨層析液在濾紙上的擴散速度不同D.溴麝香草酚藍(lán)與CO2反應(yīng),顏色變化為由藍(lán)變綠再變黃6.所謂“膜流”是指細(xì)胞中各種生物膜之間的聯(lián)系和轉(zhuǎn)移。下列有關(guān)敘述錯誤的是()A.質(zhì)壁分離和復(fù)原現(xiàn)象不屬于“膜流”現(xiàn)象B.RNA在核質(zhì)之間的轉(zhuǎn)移過程發(fā)生了“膜流”現(xiàn)象C.神經(jīng)遞質(zhì)的釋放過程發(fā)生了“膜流”現(xiàn)象D.吞噬細(xì)胞吞噬細(xì)菌的過程發(fā)生了“膜流”現(xiàn)象7.下列有關(guān)抗體的敘述,正確的是()A.抗體是由漿細(xì)胞和效應(yīng)T細(xì)胞分泌的B.抗體與抗原的結(jié)合具有特異性C.抗體可以在細(xì)胞內(nèi)液中發(fā)揮免疫效應(yīng)D.抗體的分泌過程體現(xiàn)了細(xì)胞膜的選擇透過性8.(10分)細(xì)菌放在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),它會繁殖并形成菌落(如圖)。某實驗小組想檢驗兩種抗生素的殺菌作用,下列實驗方案最合適的是()A. B. C. D.二、非選擇題9.(10分)雙子葉植物甲含有抗旱基因而具有極強的抗早性,乙抗旱性低。若將該抗旱基因轉(zhuǎn)移至植物乙中,有可能提高后者的抗旱性。利用基因工程技術(shù)將甲的抗旱基因轉(zhuǎn)移至乙的體內(nèi),可提高植物乙的抗旱性?;卮鹣铝袉栴}:(1)為獲取抗早基因.可以先從植物甲中提取該基因mRNA然后經(jīng)___________________過程獲得cDNA。基因工程的核心步驟是_____________________________。(2)使用PCR技術(shù)擴增抗旱基因時,可選擇圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片段中的___________________作為引物,此過程還需要____________酶,但不需要解旋酶,而是利用____________使DNA解旋。(3)獲得了抗旱基因的植物乙,種植時一般要與傳統(tǒng)作物間隔足夠遠(yuǎn)的距離,以免___________________。(4)人們擔(dān)心這種行為會打開“潘多拉魔盒”,驅(qū)使一些科研者開展人類基因編輯研究,出現(xiàn)“基因完美的定制人”。在這些研究中,外源基因能與受體細(xì)胞DNA成功重組的原因是______________,這種重組DNA技術(shù)若用于對人類基因進行編輯,由于是隨機的,因此有非常大的風(fēng)險,甚至導(dǎo)致生命活動必需的基因遭到破壞。10.(14分)Ⅰ.轉(zhuǎn)基因草莓中有能表達乙肝病毒表面抗原的基因,由此可獲得用來預(yù)防乙肝的一種新型疫苗,其培育過程如圖所示(①至④代表過程,A至C代表結(jié)構(gòu)或細(xì)胞)。請據(jù)圖回答:(1)圖中①過程用到的酶是_____________,所形成的B叫做_____________。(2)②過程常用_____________處理農(nóng)桿菌,使之成為____________細(xì)胞,利于完成轉(zhuǎn)化過程。(3)圖中③過程需要用到的激素是_____________。Ⅱ.黃瓜花葉病毒(CMV)是能侵染多種植物的RNA病毒,可危害番茄的正常生長并造成減產(chǎn),研究人員通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)將該病毒外殼蛋白的cDNA導(dǎo)入番茄植株中,成功獲得抗CMV的番茄植株。(1)獲得CMV的RNA后,需在_____________的催化下才能合成CMV外殼蛋白的cDNA。(2)獲得cDNA后,需先通過一定方法將其插入到農(nóng)桿菌的________________片段中,然后將番茄子葉切段與該農(nóng)桿菌共同培養(yǎng),以實現(xiàn)對番茄細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。(3)將經(jīng)共同培養(yǎng)后的番茄外植體接種于含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時間,只有部分外植體生出愈傷組織。研究人員據(jù)此確定這些生出愈傷組織的外植體都已成功導(dǎo)入了cDNA,你認(rèn)為他們做出以上判斷的理由是________________________________。(4)要想確定轉(zhuǎn)基因番茄已經(jīng)成功表達出CMV外殼蛋白,需要進行_______________________實驗。(5)若要驗證轉(zhuǎn)基因番茄具有較好的抗CMV能力,請寫出實驗設(shè)計思路:_____________________。轉(zhuǎn)基因番茄自交,子代中抗性植株與敏感植株數(shù)量之比接近3:1,由此可以得出的結(jié)論是___________________(答出兩點)。11.(14分)2019年底爆發(fā)的新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是由SARS-CoV-2病毒引起的,能否快速、準(zhǔn)確地檢測出病原體成為疾病防控的關(guān)鍵。請回答:(1)下圖表示SARS-CoV-2病毒檢測的部分流程??茖W(xué)家以病毒的RNA為模板通過①____________過程合成cDNA,再對cDNA進行PCR擴增,這項技術(shù)稱為RT-PCR。(2)進行RT-PCR需要加入的酶是____________和___________。要從cDNA中擴增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關(guān)鍵在于要加入__________、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應(yīng)體系。(3)RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強度來檢測產(chǎn)物濃度,原理如下:Taqman熒光探針為一段與_____________互補的核苷酸單鏈,兩端分別連接一個熒光基團R和一個淬滅基團Q。探針結(jié)構(gòu)完整時,R發(fā)射的熒光被Q吸收;而PCR擴增時結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷,使R和Q分離,R基團發(fā)射的熒光不被淬滅,這樣通過對熒光信號強弱的監(jiān)測就可實現(xiàn)對產(chǎn)物的檢測。熒光信號達到設(shè)定的閾值時,經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少,說明含有病毒的概率越____________。(4)一次核酸檢測歷時需16小時,為快速檢測可采用抗原-抗體雜交技術(shù),這一技術(shù)的關(guān)鍵是要生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體.請寫出生產(chǎn)這種抗體的思路:__________________。12.呼吸缺陷型酵母菌是野生型酵母菌的突變菌株,其線粒體功能喪失,只能進行無氧呼吸??蒲腥藛T為獲得高產(chǎn)酒精的呼吸突變型酵母菌進行了相關(guān)研究。(1)酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生酒精首先要通入無菌空氣,目的是______________________。一段時間后密封發(fā)酵要注意控制發(fā)酵罐中的______________________條件(至少答出2個)。(2)為優(yōu)化篩選呼吸缺陷型酵母菌的條件,研究人員設(shè)計了紫外線誘變實驗,記錄結(jié)果如下表。表中A、B、C分別是__________。據(jù)表中數(shù)據(jù)分析,最佳誘變處理的條件為_______________________________。組別1組2組3組4組5組6組7組8組9組照射時間/minA1.51.52.02.02.02.52.52.5照射劑量/W1215171215B121517照射距離/cm1820222022182218C篩出率/%371351564711(3)TTC是無色物質(zhì),可以進入細(xì)胞內(nèi)與足量的還原劑[H]反應(yīng)生成紅色物質(zhì)。為篩選呼吸缺陷突變菌株可以在基本培養(yǎng)基中添加____________,該培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。如果出現(xiàn)___________的菌落則為呼吸缺陷型酵母菌,原因是____________________________。(4)科研人員為檢測該呼吸突變型酵母菌是否具備高產(chǎn)酒精的特性,做了相關(guān)實驗,結(jié)果如圖所示。由圖中數(shù)據(jù)推測該呼吸缺陷型酵母菌__________(填“適宜”或“不適宜”)作為酒精發(fā)酵菌種,依據(jù)是______________________。
2023學(xué)年模擬測試卷參考答案(含詳細(xì)解析)一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【答案解析】
根據(jù)圖示分析可知:圖中表示在果蠅細(xì)胞分裂過程(包括有絲分裂和減數(shù)分裂)中,物質(zhì)含量減半的過程;無論DNA、染色體、還是染色體組,減半發(fā)生的時期都為細(xì)胞分裂完成時,故著重分析有絲分裂末期、減數(shù)第一次分裂末期以及減數(shù)第二次分裂末期各物質(zhì)的變化特點?!绢}目詳解】A、因為果蠅體細(xì)胞中有8條染色體,若a代表2個染色體組,則CD段表示有絲分裂的后期,染色體組加倍,如果該果蠅為雌性,此時該細(xì)胞中有4條X染色體,A正確;B、因為果蠅體細(xì)胞中有8條染色體,若a代表4個核DNA分子,則該細(xì)胞正在進行減數(shù)第二次分裂末期,B正確;C、因為果蠅體細(xì)胞中有8條染色體,若a代表4條染色體,則該細(xì)胞正在進行減數(shù)第一次分裂末期或減數(shù)第二次分裂末期,C錯誤;D、因為果蠅體細(xì)胞中有8條染色體,若a代表8條染色體單體,則CD段為減數(shù)第一次分裂整個過程,基因重組發(fā)生在減數(shù)第一次分裂前期或后期,D正確。故選C。2、D【答案解析】
分析題干信息可知,控制該性狀的基因位于X和Y染色體同源區(qū)段上,因此雌果蠅有三種基因型:XBXB、XBXb、XbXb,雄果蠅有四種基因型:XBYB、XBYb、XbYB、XbYb。【題目詳解】A、根據(jù)題意可知,兩個剛毛果蠅親本雜交后代出現(xiàn)了一只染色體組成為XXY的截毛果蠅,該截毛果蠅的基因型一定為XbXbYb,Y染色體一定來自于親本中的雄果蠅,因此親本雌果蠅的基因型是XBXb,親本雄果蠅的基因型一定是XBYb,A錯誤;B、XXY截毛果蠅的出現(xiàn)不會改變基因庫中基因的種類,B錯誤;C、控制該性狀的基因位于性染色體上,因此會表現(xiàn)為伴性遺傳的特點,C錯誤;D、親本雌果蠅的基因型應(yīng)該為XBXb,減數(shù)第一次分裂過程中染色體已經(jīng)完成復(fù)制,X染色體有2條,并且b基因復(fù)制后有2個b基因,因此X染色體條數(shù)與基因b個數(shù)之比為1:1,D正確。故選D。3、C【答案解析】
1、種群指在一定時間內(nèi)占據(jù)一定空間的同種生物的所有個體,種群是生物進化和繁殖的基本單位。2、群落指生活在一定的自然區(qū)域內(nèi),相互之間具有直接或間接關(guān)系的各種生物的總和,群落中會發(fā)生演替與信息傳遞,群落的演替是指隨著時間的推移,一個群落被另一個群落代替的現(xiàn)象,包括初生演替和次生演替。3、生態(tài)系統(tǒng)信息傳遞的作用包括三個方面:(1)個體:生命活動的正常進行,離不開信息的傳遞;(2)種群:生物種群的繁衍,離不開信息的傳遞;(3)群落和生態(tài)系統(tǒng):能調(diào)節(jié)生物的種間關(guān)系,以維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定。【題目詳解】A、生物進化的實質(zhì)是種群基因頻率的改變,如果種群沒有發(fā)生突變,即沒有發(fā)生基因突變和染色體變異,則種群就不能產(chǎn)生新的等位基因,基因重組就沒有意義,因此種群的基因頻率不會發(fā)生改變,種群不能進化,A正確;B、根據(jù)以上分析的群落演替的概念可知,退耕還林、布設(shè)人工養(yǎng)殖網(wǎng)箱后都會導(dǎo)致新的群落代替原來的群落的現(xiàn)象,故發(fā)生了群落的次生演替,B正確;C、習(xí)性相近的物種的生活區(qū)域在一定范圍內(nèi)重疊的越多,對資源的利用越充分,但超過一定范圍,會影響資源的再生能力,C錯誤;D、某些雄鳥會進行復(fù)雜的求偶炫耀屬于行為信息,說明生物種群的繁衍,離不開信息的傳遞的作用,D正確。故選C。4、C【答案解析】
依題意可知,該實驗的pH為無關(guān)變量,為了排除無關(guān)變量的干擾,應(yīng)控制相同且適宜,而緩沖液能夠起到維持反應(yīng)液的pH恒定的作用,因此需最先加入;酶具有高效性,所以在控制pH恒定的條件下,應(yīng)先加底物后加酶,讓酶促反應(yīng)在適宜的溫度條件下進行,一定時間后檢測產(chǎn)物的量。根據(jù)題干信息“除酶外所有試劑均已預(yù)保溫”,所以合理的操作順序是在調(diào)整pH值后,加入酶,即加入緩沖液→加入底物→加入酶→保溫并計時→一段時間后檢測產(chǎn)物的量,故選C?!敬鸢更c睛】獲取題干信息“除酶外所有試劑均已預(yù)保溫”,根據(jù)實驗設(shè)計中無關(guān)變量要保持適宜且相同,科學(xué)設(shè)計實驗程序。5、B【答案解析】
1、斐林試劑可用于鑒定還原糖,在水浴加熱的條件下,溶液的顏色變化為磚紅色(沉淀)。斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖(如葡萄糖、麥芽糖、果糖)存在與否,而不能鑒定非還原性糖(如淀粉)。2、CO2可使澄清石灰水變渾濁,或使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃?!绢}目詳解】A、蘋果中含有還原性糖,在蘋果的組織樣液中加入斐林試劑,水浴加熱后的顏色變化為由藍(lán)變棕再變磚紅,A正確;B、鑒定DNA時,不能將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中進行沸水浴,應(yīng)將絲狀物先在2mol/L的NaCl溶液中溶解再放入二苯胺試劑檢測,B錯誤;C、分離葉綠體中的色素時,不同色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上的擴散速度不同,C正確;D、二氧化碳可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃,D正確。故選B。6、B【答案解析】
真核細(xì)胞內(nèi)存在著豐富的膜結(jié)構(gòu),他們將細(xì)胞內(nèi)部劃分成相對獨立的區(qū)室,保證多種生命活動高效有序的進行,這些膜結(jié)構(gòu)又可以相互轉(zhuǎn)化,在結(jié)構(gòu)和功能上構(gòu)成一個統(tǒng)一整體。細(xì)胞膜、核膜及多種細(xì)胞器膜,共同構(gòu)成細(xì)胞的生物膜系統(tǒng)?!绢}目詳解】A、質(zhì)壁分離和復(fù)原現(xiàn)象是失水和吸水導(dǎo)致的原生質(zhì)層與細(xì)胞壁的分離和復(fù)原,沒有膜泡運輸,沒有體現(xiàn)“膜流”現(xiàn)象,A正確;B、RNA在核質(zhì)之間的轉(zhuǎn)移是通過核孔,沒有發(fā)生“膜流”現(xiàn)象,B錯誤;C、神經(jīng)遞質(zhì)的釋放過程屬于胞吐,發(fā)生了“膜流”現(xiàn)象,C正確;D、吞噬細(xì)胞吞噬細(xì)菌的過程屬于胞吞,發(fā)生了“膜流”現(xiàn)象,D正確。故選B。7、B【答案解析】
有關(guān)抗體需要掌握的知識:
1、化學(xué)本質(zhì):免疫球蛋白;
2、產(chǎn)生部位:漿細(xì)胞;
3、產(chǎn)生場所:核糖體;
4、分布:主要分布在血清中,在組織液和外分泌液中也有少量分布?!绢}目詳解】A、抗體的化學(xué)本質(zhì)是免疫球蛋白,是由漿細(xì)胞分泌的,A錯誤;B、抗體與抗原的結(jié)合具有特異性,B正確;C、抗體是一種分泌蛋白,存在于細(xì)胞外液中,不能在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用,C錯誤;D、抗體的分泌過程屬于胞吐,這一過程體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動性,D錯誤。故選B?!敬鸢更c睛】本題考查了人體免疫的有關(guān)知識,要求考生能夠識記抗體的化學(xué)本質(zhì)、產(chǎn)生部位和產(chǎn)生場所等,掌握分泌蛋白的合成和分泌過程,能夠結(jié)合所學(xué)知識準(zhǔn)確判斷各項。8、C【答案解析】根據(jù)題意分析本實驗的目的是檢驗兩種抗生素的殺菌作用,該實驗應(yīng)遵循對照原則,即設(shè)計只有細(xì)菌的空白對照組,實驗組是含有A抗生素和含有B抗生素,然后進行對比分析,符合分析的圖示只有C,故C正確。二、非選擇題9、逆轉(zhuǎn)錄構(gòu)建基因表達載體B、C耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)高溫目的基因隨花粉傳播,與傳統(tǒng)植物發(fā)生雜交,造成基因污染兩者都有共同的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成【答案解析】
1、基因工程的操作程序:目的基因的獲??;基因表達載體的構(gòu)建;將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;目的基因的檢測與鑒定。其中基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟。2、PCR技術(shù)又叫多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是體外合成DNA的技術(shù),通常有三個基本步驟一一變性、復(fù)性和延伸。PCR過程需要的引物不是RNA,而是人工合成的DNA單鏈,其長度通常為20-30個脫氧核苷酸,通常需要兩種引物,分別與DNA分子的兩條鏈互補。PCR過程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是將模板DNA加熱至90℃以上。一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使成為單鏈,50℃時引物與DNA模板鏈之間形成氫鍵,72℃時使單鏈從引物的3’開始延伸。在這個過程中需要耐高溫的DNA聚合酶。【題目詳解】(1)cDNA文庫是通過mRNA經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得的,故為獲取抗旱基因,可以先從植物甲中提取該基因mRNA,然后經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄過程獲得cDNA?;虮磉_載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟。(2)使用PCR技術(shù)擴增抗旱基因時,根據(jù)DNA合成的方向是從5’端到3’端,且引物和模板鏈的方向是相反的,故可選擇圖中的B、C作為引物,此過程還需要耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶),但不需要解旋酶,而是利用高溫使DNA解旋。(3)基因污染是指轉(zhuǎn)基因植物的花粉與近緣物種進行雜交,從而使得近緣物種有了轉(zhuǎn)基因物種的性狀,造成不必要的麻煩。故在大田里栽培轉(zhuǎn)基因植物時,要求轉(zhuǎn)基因植物與傳統(tǒng)作物之間應(yīng)該間隔足夠遠(yuǎn)的距離,以免目的基因隨花粉傳播,與傳統(tǒng)植物發(fā)生雜交,造成基因污染。(4)外源基因能與受體細(xì)胞DNA成功重組的原因是兩者都有共同的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成。【答案點睛】熟練掌握基因工程的操作步驟以及相關(guān)的原理是解答本題的關(guān)鍵。10、DNA連接酶基因表達載體(或者重組質(zhì)粒)CaCl2溶液(或者Ca2+)感受態(tài)生長素和細(xì)胞分裂素逆轉(zhuǎn)錄酶Ti質(zhì)粒的T-DNA重組表達載體同時含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因,只有成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織抗原-抗體雜交用CMV分別感染轉(zhuǎn)基因番茄與未轉(zhuǎn)基因的番茄,一段時間后觀察結(jié)果,分析兩組番茄的抗性目的基因已經(jīng)整合到受體細(xì)胞的染色體上、獲得的轉(zhuǎn)基因親本為雜合子【答案解析】
1、分析題圖:①表示基因表達載體的構(gòu)建過程;②將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法);③④表示植物組織培養(yǎng)過程,其中③是脫分化過程、④是再分化過程.圖中A是目的基因、B是基因表達載體(由啟動子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因等部分構(gòu)成)、C是愈傷組織。2、基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!绢}目詳解】Ⅰ.(1)①表示基因表達載體的構(gòu)建過程,需用DNA連接酶將目的基因和運載體(質(zhì)粒)連接形成重組質(zhì)粒。B是基因表達載體,由啟動子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因等部分構(gòu)成。(2)將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞時,常用CaCl2(Ca2+)處理微生物細(xì)胞(農(nóng)桿菌),使之成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細(xì)胞,利于重組質(zhì)粒進入微生物細(xì)胞(農(nóng)桿菌)。(3)圖中③過程為脫分化,需要用到的激素是生長素和細(xì)胞分裂素。Ⅱ.(1)以RNA為模板合成DNA的過程稱為逆轉(zhuǎn)錄,該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。(2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理是:農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。因此獲得cDNA后,需先通過一定方法將其插入到農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA片段中,然后將番茄子葉切段與該農(nóng)桿菌共同培養(yǎng),以實現(xiàn)對番茄細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。(3)重組表達載體同時含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因,只有成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織,據(jù)此可知生出愈傷組織的外植體都已成功導(dǎo)入了cDNA。(4)檢測目的基因是否表達產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì),需要進行抗原-抗體雜交實驗。(5)若要驗證轉(zhuǎn)基因番茄具有較好的抗CMV能力,可用CMV分別感染轉(zhuǎn)基因番茄與未轉(zhuǎn)基因的番茄,一段時間后觀察結(jié)果,分析兩組番茄的抗性。轉(zhuǎn)基因番茄自交,子代中抗性植株與敏感植株數(shù)量之比接近3:1,符合基因分離定律,由此可以得出的結(jié)論是目的基因已經(jīng)整合到受體細(xì)胞的染色體上,獲得的轉(zhuǎn)基因親本為雜合子?!敬鸢更c睛】本題考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識,意在考查考生的識記能力和識圖能力;理解所學(xué)知識要點,把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力。11、逆轉(zhuǎn)錄(或:反轉(zhuǎn)錄)逆轉(zhuǎn)錄酶Taq酶(ORF1ab和核殼蛋自基因N)的特異性引物目的基因大①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒):②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞;③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從培養(yǎng)液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體【答案解析】
1.將標(biāo)記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性、低溫復(fù)性、適溫延伸的熱循環(huán),并遵守聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)規(guī)律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應(yīng)體系中,在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光,隨著循環(huán)次數(shù)的增加,被擴增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長,通過實時檢測與之對應(yīng)的隨擴增而變化熒光信號強度,求得Ct值,同時利用數(shù)個已知模板濃度的標(biāo)準(zhǔn)品作對照,即可得出待測標(biāo)本目的基因的拷貝數(shù)。2.單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原的抗體。通常采用單克隆抗體技術(shù)來制備,單克隆抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的效應(yīng)B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗體,又能無限增殖。用具備這種特性的單個雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群,可制備針對一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。【題目詳解】(1)以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄或反轉(zhuǎn)錄,故題圖中以病毒的RNA為模板合成cDNA的過程為①逆轉(zhuǎn)錄,再對cDNA進行PCR擴增,這項技術(shù)稱為RT-PCR。(2)RT-PCR是擴增DNA的過程,因為加入的模板是RNA,故需要加入的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶。要從cDNA中擴增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關(guān)鍵在于要加入(ORF1ab和核殼蛋自基因N)的特異性引物、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應(yīng)體系,從而實現(xiàn)了相關(guān)基因的擴增。(3)RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強度來檢測產(chǎn)物濃度,原理如下:Taqman熒光探針為一段與目的基因互補的核苷酸單鏈,兩端分別連接一個熒光基團R和一個淬滅基團Q。探針結(jié)構(gòu)完整時,R發(fā)射的熒光被Q吸收;而PCR擴增時結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷,使R和Q分離,R基團發(fā)射的熒光不被淬滅,這樣通過對熒光信號強弱的監(jiān)測就可實現(xiàn)對產(chǎn)物的檢測。若熒光信號達到設(shè)定的閾值時,經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少,說明擴增次數(shù)少,說明更多的熒光探針與目的基因進行了堿基互補配對,可推測獲得的核酸產(chǎn)物中含有病毒的概率越大。(4)若采用抗原-抗體雜交技術(shù)進行病毒檢測,需要制備能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體,單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高且能夠大量制備的優(yōu)勢,故設(shè)計的思路是設(shè)法獲得能產(chǎn)生該特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,步驟如下:①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒),目的是要獲得能能產(chǎn)生特異性抗體的效應(yīng)B細(xì)胞;②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞;③將雜交瘤細(xì)胞在體外條
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