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文檔簡介

【一、基因工程】一、DNA重組所需的三種工具:1、限制性內(nèi)切酶——“手術刀”作用:切割磷酸二酯鍵

①EcoRⅠ→產(chǎn)生粘性末端

②SmaⅠ→產(chǎn)生平末端2、DNA連接酶——“分子縫合針”作用:鏈接磷酸二酯鍵

①E˙coliDNA連接酶→連接粘性末端②T4DNA連接酶→連接平末端或粘性末端3、載體——“分子運輸車”條件:①有一個或者多個限制酶切割位點

②能自我復制

③有特殊的標記基因(常用質粒作為載體)【一、基因工程】一、DNA重組所需的三種工具:1

二、基因工程的基本操作程序目的基因的獲取基因表達載體的構建將目的基因導入受體細胞目的基因的檢測與鑒定二、基因工程的基本操作程序目的基因的獲取基因表達載體的構建21、目的基因的獲?。?)從基因文庫獲取種類:基因組文庫:部分基因文庫:(如cDNA文庫)含有一種生物的全部基因含有一種生物的部分基因(2)利用PCR技術擴增目的基因(3)人工合成1、目的基因的獲取種類:基因組文庫:部分基因文庫:(如cDN3比較項目DNA復制PCR技術區(qū)別解旋方式解旋酶催化DNA在高溫下變性解旋場所細胞內(nèi)(主要在細胞核內(nèi))細胞外(主要在PCR擴增儀中)酶解旋酶、DNA聚合酶耐熱的DNA聚合酶溫度細胞內(nèi)溫和條件控制溫度,需90℃~95℃高溫結果合成DNA分子合成DNA片段或基因聯(lián)系(1)模板:均需要脫氧核苷酸雙鏈作為模板(2)原料:均為四種脫氧核苷酸(3)酶:均需DNA聚合酶(4)引物:都需要引物,使DNA聚合酶從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸PCR技術與DNA復制的比較比較項目DNA復制PCR技術區(qū)別解旋方式解旋酶催化DNA在高4質粒DNA分子限制酶處理一個切口兩個黏性末端兩個切口獲得目的基因DNA連接酶重組DNA分子(重組質粒)——核心同一種2、基因表達載體的構建①過程::②組成:必須有啟動子、目的基因、終止子以及標記基因等。質粒DNA分子限制酶處理一個切口兩個切口DNA連接酶重組DN5方法導入植物細胞導入動物細胞導入微生物細胞農(nóng)桿菌轉化法基因槍法(單子葉)花粉管通道法——顯微注射法——

感受態(tài)細胞吸收DNA分子(

Ca2+法)3、將目的基因導入受體細胞方法導入植物細胞導入動物細胞導入微生物細胞農(nóng)桿菌轉化法基因槍64、目的基因的檢測與鑒定——檢查是否成功檢測—鑒定—①檢測轉基因生物染色體的DNA

上是否插入了目的基因②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質個體生物學水平的鑒定,如抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等方法——方法——方法——DNA分子雜交分子雜交抗原-抗體雜交4、目的基因的檢測與鑒定——檢查是否成功檢測—鑒定—①檢測轉7三、基因工程的應用(1)植物方面1、抗蟲轉基因植物2、抗病轉基因植物3、抗逆轉基因植物4、改良植物品質(2)動物方面1、提高動物生長速度2、改善畜產(chǎn)品的品質3、用轉基因動物生產(chǎn)藥物4、用轉基因動物作器官移植的供體(3)基因治療:將外源基因通過基因轉移技術將其插入病人的適當?shù)氖荏w細胞中,使外源基因制造的產(chǎn)物能治療某種疾病。(只是改變體細胞的基因,生殖細胞未改變,后代可能還會患病。)三、基因工程的應用(1)植物方面81、在基因工程中,把選出的目的基因(共1000個脫氧核苷酸對,其中腺嘌嶺脫氧核苷酸是460個)放入DNA擴增儀中擴增4代,那么,在擴增儀中應放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個數(shù)是()個A.540

B.8100

C.17280

D.75602、在判斷抗蟲基因是否成功轉入棉花基因組的方法中,不屬于分子檢測的是(

)。A.通過觀察害蟲吃棉葉是否死亡B.檢測目的基因片段與DNA探針能否形成雜交帶C.檢測目的基因轉錄形成的mRNA與DNA探針能否形成雜交帶D.檢測目的基因表達產(chǎn)物蛋白質能否與特定抗體形成雜交帶1、在基因工程中,把選出的目的基因(共1000個脫氧核苷酸93、哪項不是基因表達載體的組成部分()

A.啟動子B.終止密碼

C.標記基因D.目的基因4、(2008,全國高考)已知某種限制酶在一線性DNA分子上有3個酶切位點。如果該線性DNA分子在3個酶切位點上都被該酶切斷,則會產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長度的DNA片段?,F(xiàn)有多個上述線性DNA分子,若在每個DNA分子上至少有1個酶切位點被該酶切斷,則從理論上講,經(jīng)該酶酶切后,這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長度不同的DNA片段種數(shù)是

()A.3B.4 C.9

D.12

a

b

c

d3、哪項不是基因表達載體的組成部分()A.310【二、蛋白質工程】1、蛋白質工程的實質:定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質。2、結果:可以生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質3、操作對象:基因結構4、過程:先反中心法則,后順中心法則。預期的蛋白質功能→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列(基因)【二、蛋白質工程】1、蛋白質工程的實質:定向改造或生產(chǎn)人類所11【三、細胞工程】一、植物細胞工程(一)植物的組織培養(yǎng)1、細胞全能性:已經(jīng)分化的細胞仍具有發(fā)育成完整個體的潛能。原因:生物的每一個細胞都含有該物種所特有的全套遺傳物質。2、全能性大?。菏芫眩旧臣毎倔w細胞植物細胞>動物細胞分化程度低>分化程度高細胞分裂能力強>細胞分裂能力弱幼嫩的細胞>衰老的細胞

【三、細胞工程】一、植物細胞工程1、細胞全能性:已經(jīng)分化的細123、植物組織培養(yǎng)(1)培養(yǎng)基:

①水

無機鹽

③有機小分子:糖、氨基酸等

④激素:生長素,細胞分裂素⑤瓊脂:起支持作用還需提供適宜的條件(如無菌環(huán)境和適宜溫度)3、植物組織培養(yǎng)(1)培養(yǎng)基:13(2)過程:離體細胞、組織、器官脫分化(無光)再分化(有光)愈傷組織胚狀體或叢芽試管苗愈傷組織特點:細胞排列疏松、高度液泡化、細胞壁薄、呈無定形狀態(tài)注意:取材須取形成層,生長素和細胞分裂素的比例。(2)過程:離體細胞、組織、器官脫分化(無光)再分化(有光14(二)植物體細胞雜交(二)植物體細胞雜交15意義:克服遠緣雜交不親和的障礙、培育新品種胚狀體→胚薄膜→種皮培養(yǎng)基→胚乳應用:(1)微型繁殖(2)作物脫毒(3)人工種子(4)單倍體育種(5)細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)意義:克服遠緣雜交不親和的障礙、培育新品種胚狀體→胚16二、動物細胞工程動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細胞懸浮液胰蛋白酶(分解彈性纖維)10代細胞原代培養(yǎng)50代細胞細胞株無限傳代細胞系遺傳物質未改變遺傳物質改變,無限增殖傳代培養(yǎng)原代細胞二、動物細胞工程動物胚胎或幼齡動物171、動物細胞培養(yǎng)的條件(1)無菌無毒的環(huán)境(2)營養(yǎng)(3)溫度和pH(4)氣體環(huán)境1、動物細胞培養(yǎng)的條件(1)無菌無毒的環(huán)境182、植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較項目原理培養(yǎng)基結果培養(yǎng)目的植物

動物細胞全能性細胞增殖固體蔗糖植物激素液體葡萄糖動物血清培養(yǎng)成植株培養(yǎng)成細胞株細胞系快速繁殖培養(yǎng)無病毒植株獲得細胞產(chǎn)品、細胞2、植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較項目原理培養(yǎng)基結果培養(yǎng)目19多莉羊的培育過程卵細胞C母綿羊子宮A母綿羊B母綿羊乳腺細胞細胞質細胞核細胞核移植胚胎移植早期胚胎多莉羊分娩卵裂融合后的卵細胞細胞拆合技術妊娠3、多莉羊的培育過程卵細胞C母綿羊子宮A母綿羊B母綿羊乳腺細胞細204、克隆技術1、概念:是指從一個共同的祖先,通過無性繁殖的方法產(chǎn)生出來的一群遺傳特性相同的DNA分子、細胞或個體,是一種人工誘導的無性繁殖方式。①分子水平克?。篜CR技術②細胞水平克隆:動物細胞培養(yǎng)(單克隆抗體)③個體水平克?。嚎寺⊙蚨嗬?、哺乳動物核移植:胚胎細胞移植、體細胞移植4、克隆技術1、概念:是指從一個共同的祖先,通過無性繁殖的方21

5、動物細胞融合細胞A細胞B雜種細胞滅活的病毒物理法(電擊)化學法(聚乙二醇)仙臺病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒過程:5、動物細胞融合細胞A細胞B雜種細胞滅活的病毒物理法(電擊226、單克隆抗體(1)概念:由單個B淋巴細胞經(jīng)過無性繁殖(克?。?,形成基因型相同的細胞群,這一細胞群所產(chǎn)生的化學性質單一、特異性強的抗體稱為單克隆抗體。

(2)特點:

特異性強、靈敏度高,可大量制備

6、單克隆抗體(1)概念:由單個B淋巴細胞經(jīng)過無性繁殖(克隆23

(3)單克隆抗體制備過程

注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞細胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體(3)單克隆抗體制備過程注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞245、植物體細胞雜交與動物細胞工程中所用技術與原理不相符的是

A.纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理——酶的專一性

B.植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)——細胞的全能性

C.原生質體融合和動物細胞融合——生物膜的流動性

D.紫草細胞培養(yǎng)和雜交瘤細胞的培養(yǎng)——細胞分裂6、下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是(

)A.培養(yǎng)中的人效應T細胞能產(chǎn)生單克隆抗體

B.培養(yǎng)中的人B細胞能夠無限地增殖C.人的成熟紅細胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成細胞株

D.用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個肝細胞5、植物體細胞雜交與動物細胞工程中所用技術與原理不相符的是257、(多選)下列關于單克隆抗體的制備和應用的敘述中,正確的是

)A.B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合,一般不需要滅活的仙臺病毒或聚乙二醇誘導B.融合后形成的雜交瘤細胞既能無限增殖,又能產(chǎn)生單克隆抗體C.體外培養(yǎng)時,一個效應B淋巴細胞可以產(chǎn)生抗體,但不能無限增殖D.單克隆抗體與常規(guī)抗體相比,特異性強,靈敏度高,優(yōu)越性明顯7、(多選)下列關于單克隆抗體的制備和應用的敘述中,正確的是26精原細胞有絲分裂初級精母細胞次級精母細胞精子細胞精子MⅠ第一階段第二階段第三階段MⅡ1.精子發(fā)生的過程多個精原細胞染色體復制變形!精原細胞經(jīng)過有絲分裂產(chǎn)生多個初級精母細胞。初級精母細胞經(jīng)減數(shù)分裂形成含有單倍染色體的精子細胞。細胞核---高爾基體---中心體---線粒體---其他物質---頭部頂體尾原生質滴線粒體鞘(能量)初情期精原細胞有絲分裂初級精母細胞次級精母細胞精子細胞精子MⅠ第一27卵原細胞有絲分裂多個卵原細胞染色體復制初級卵母細胞MⅠ第一極體次級卵母細胞兩個第二極體第二極體卵子退化消失MⅡ排卵前后完成!在受精過程完成!被卵泡細胞包圍,形成卵泡2、卵子的形成過程:性別分化后卵原細胞有絲分裂多個卵原細胞染色體復制初級卵母細胞MⅠ第一極28過程受精前的準備階段受精階段準備階段1精子獲能準備階段2卵子的準備即精子必須在雌性動物生殖道內(nèi)發(fā)生相應生理變化后,才能獲得受精能力的現(xiàn)象。即卵子在輸卵管內(nèi)達到減數(shù)第二分裂中期(MⅡ)時,才具備受精能力。包括精子穿越放射冠和透明帶,進入卵黃膜,原核形成和配子結合。3、受精過程受精前的準備階段受精階段準備階段1準備階段2即精子必須在294、受精過程的要點:1.精子在受精前必須獲能。精子獲能的地點是_____________________。

2.在受精過程中,精子連續(xù)突破放射冠和透明帶兩道障礙都是依靠精子的哪些部分?___________.3.防止多個精子進入卵中受精的兩道屏障分別是____________和_________________.(排他性!)4.卵子是在什么時候才徹底完成第二次減數(shù)分裂的?_________.透明帶反應卵黃膜的封閉作用頂體等雌性動物的生殖道里受精時5.受精作用完成的標志是_________________________________.透明帶和卵黃膜之間出現(xiàn)兩個極體.這兩個極體分別是___________________第一、第二極體各一個4、受精過程的要點:1.精子在受精前必須獲能。精子獲能的地點30受精卵:最初發(fā)育在輸卵管進行有絲分裂。卵裂期:在透明帶內(nèi)進行有絲分裂,細胞數(shù)量不斷增加,但胚胎總體積并不增加,或略有減少。桑椹胚:由具有全能性細胞構成,細胞數(shù)在32個左右,排列緊密,形似桑椹。囊胚(內(nèi)含囊胚腔):開始分化。

內(nèi)細胞團:發(fā)育成胎兒各組織;

滋養(yǎng)層細胞:發(fā)育成胎膜和胎盤原腸胚(內(nèi)含原腸腔)5、胚胎發(fā)育受精卵:最初發(fā)育在輸卵管進行有絲分裂。卵裂期:在透明帶內(nèi)進行318、精子與卵子結合過程中穿越的兩道屏障是()①頂體反應②透明帶反應③卵黃膜封閉作用④精子穿越放射冠

A.①②B.②③

C.③④D.②④9、在受精過程中()①精子必須發(fā)生頂體反應,釋放頂體酶②頂體酶可使精子穿過放射冠、透明帶、卵細胞膜③卵細胞恢復并很快完成了第一次成熟分裂④精子和卵細胞的細胞核分別形成雄原核和雌原核⑤透明帶反應防止了多精入卵和多精受精的發(fā)生

A.①②⑤B.①④⑤

C.②③④D.②④⑤8、精子與卵子結合過程中穿越的兩道屏障是()326、體外受精(1)卵子的收集和培養(yǎng)沖卵法:用促性腺激素處理母畜,促使其超數(shù)排卵,并從其輸卵管里沖取卵子,直接和獲能精子在體外受精采集法:從已被屠宰的母畜的卵巢里采集卵母細胞,經(jīng)體外人工培養(yǎng)后,再與獲能精子體外受精(2)精子的采集和獲能:

采集:假陰道法,手握法和電刺激等。獲能:培養(yǎng)法、化學誘導法6、體外受精(1)卵子的收集和培養(yǎng)沖卵法:用促性腺激素處理母33(3)受精:在獲能溶液或專用的受精溶液中完成受精過程。7、胚胎的早期培養(yǎng):(1)培養(yǎng)液的成分應包括:水、無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動物血清等。①試管牛的哪些階段是在試管中完成的?______________________________________.②培育試管牛要利用哪些重要的生物技術?______________________________________.

體外受精,早期胚胎發(fā)育(如卵裂)體外受精,動物細胞培養(yǎng),胚胎移植(3)受精:在獲能溶液或專用的受精溶液中完成受精過程。7、胚348、胚胎工程的應用前景(一)胚胎工程技術包括哪些?1.體外受精

2.胚胎移植

3.胚胎分割

4體外生產(chǎn)胚胎技術

5.胚胎干細胞培養(yǎng)(二)目前應用較多的是哪些?

胚胎移植、胚胎分割、體外生產(chǎn)胚胎技術。8、胚胎工程的應用前景(一)胚胎工程技術包括哪些?35(1)胚胎移植

①概念:將雌性動物體內(nèi)的早期胚胎(或者通過其他方式得到的胚胎),移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi),使之發(fā)育為新個體的技術。②胚胎移植的基本程序:(1)供體、受體的選擇和處理(2)配種或進行人工受精(3)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存(4)胚胎移植(手術法、非手術法)(5)移植后的檢查(1)胚胎移植②胚胎移植的基本程序:36選擇供體母牛(良種!)受體母?!就诎l(fā)情處理】-超數(shù)排卵(!)供體公牛(良種)配種沖卵(收集胚胎)質量檢查、培養(yǎng)胚胎移植妊娠檢查分娩(胚胎移植的犢牛)②胚胎移植的基本程序(以牛為例):選擇供體母牛(良種!)受體母?!就诎l(fā)情處理】-超數(shù)排卵(!371)加速育種工作和品種改良;2)可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力,縮短繁殖周期,增加其一生中繁殖的后代數(shù)量。3)大量節(jié)省購買種畜的費用;4)一胎多產(chǎn);5)保存品種資源和瀕危物種;③胚胎移植的現(xiàn)狀和意義:1)加速育種工作和品種改良;③胚胎移植的現(xiàn)狀和意義:38(2)胚胎分割(無性繁殖、克?。俑拍?采用顯微手術(機械方法)的方法將早期胚胎分割成2分胚,4分胚或8分胚,經(jīng)體內(nèi)或體外培養(yǎng)后植入受體,以得到同卵雙胎或同卵多胎的技術。②理論基礎:

動物胚胎細胞的全能性。所以胚胎分割的時期為:囊胚或桑椹胚。③注意:內(nèi)細胞團要均等分割。(2)胚胎分割(無性繁殖、克?。诶碚摶A:39(3)干細胞①概念:是一種未充分分化,尚不成熟的細胞,具有分裂、分化為各種組織、器官和人體的潛在功能。②分類:全能干細胞:受精卵(具全能性)

萬能干細胞:胚胎干細胞(具全能性)多能干細胞:(骨髓中的造血干細胞、神經(jīng)干細胞、皮膚干細胞等,不能發(fā)育成個體。)

專能干細胞:(只能產(chǎn)生一種細胞,如腸上皮細胞)(3)干細胞②分類:40③胚胎干細胞:簡稱ES或EK細胞,是由早期胚胎(卵裂、桑椹胚、囊胚期)或原始性腺中分離出來的一類細胞,能分裂、分化成各種組織器官。用途:1)治療人類的某些頑癥。利用ES細胞可以誘導分化形成新的組織細胞的特性,移植ES細胞可使壞死或退化的部位得以修復并恢復正常功能。2)培育出人造組織器官,用于器官移植。3)ES細胞也是研究體外細胞分化的理想材料。③胚胎干細胞:簡稱ES或EK細胞,是由早期胚胎(卵裂、桑椹胚4110、下列有關動物胚胎移植的敘述中,錯誤的是()A.受孕母畜體內(nèi)的受精卵或胚胎均能移植B.受體母畜必須處于與供體母畜同步發(fā)情的狀態(tài)C.超數(shù)排卵技術要使用一定的激素D.試管嬰兒只是受精及早期卵裂過程在試管中進行10、下列有關動物胚胎移植的敘述中,錯誤的是(4211、下列對于優(yōu)良種畜的胚胎移植的說法不正確的是()A.供體母牛必須是同一物種的良種B.受體母牛必須是同一物種的良種C.供體公牛必須是同一物種的良種D.受體母??梢允峭晃锓N的一般健康牛11、下列對于優(yōu)良種畜的胚胎移植的說法不正確的是(4312、利用胚胎干細胞治療肝衰竭,實現(xiàn)此過程的重要原因是()A.細胞分裂

B.細胞特化C.細胞分化

D.細胞增殖13、下列能正確表示高等動物胚胎發(fā)育順序的是

)A、受精卵→卵裂→原腸胚→囊胚→組織器官的分化

B、卵→卵裂→原腸胚→組織器官分化C、受精卵→囊胚→原腸胚→幼體D、受精卵→桑椹胚→囊胚→原腸胚→組織器官的分化12、利用胚胎干細胞治療肝衰竭,實現(xiàn)此過程的重要原因是(44(三)生物技術的安全性和倫理問題1、轉基因生物的安全性(1)轉基因技術的安全性問題①

安全:滯后效應、過敏原、營養(yǎng)成分改變。②

安全:對生物多樣性的影響。③

安全:對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響。食物環(huán)境生物(2)轉基因生物存在安全性的原因①目前對基因的結構基因間的

、基因的調控機制等都了解得相當有限。②目的基因往往是

的基因。③外源基因插入宿主基因組的部位是

的。相互作用異種生物隨機(三)生物技術的安全性和倫理問題食物環(huán)境生物(2)轉基因生物452、生物技術中的倫理問題(1)克隆人:兩種不同觀點,多數(shù)人持否定態(tài)度。①否定的理由:克隆人嚴重違反了人類倫理道德,是克隆技術的濫用;克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻、家庭和兩性關系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念;克隆人是在人為地制造在心理上和社會地位上都不健全的人等。②肯定的理由:技術性問題可以通過胚胎分級、基因診斷和染色體檢查等方法解決;不成熟的技術也只有通過實踐才能成熟。③中國政府的態(tài)度:禁止生殖性克隆,不反對治療性克隆。四不原則:不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實驗。2、生物技術中的倫理問題46(2)設計試管嬰兒:兩種不同觀點,多數(shù)人認可。①否定的理由:把試管嬰兒當作人體零配件工廠,是對生命的不尊重;早期生命也有活下去的權利,拋棄或殺死多余胚胎,無異于“謀殺”。②肯定的理由:解決了不育問題;提供造血干細胞是救治患者最好、最快捷的方法;提供臍帶血并不會對試管嬰兒造成損傷。(3)基因身份證①否定的理由:引起基因歧視,勢必造成遺傳性失業(yè)大軍、造成個人婚姻困難、人際關系疏遠等嚴重后果。②肯定的理由:通過基因檢測可以及早采取預防措施,適時進行治療,達到挽救患者生命的目的;對于基因歧視對象,通過正確的科學知識傳播、倫理道德教育和立法得以解決。(2)設計試管嬰兒:兩種不同觀點,多數(shù)人認可。(3)基因身份473、禁止生物武器(1)生物武器的特點:①致病力強,傳染性大。②有潛伏期。(潛伏期的癥狀不明顯,難以及時發(fā)現(xiàn)。)③污染面積大,危害時間長。④傳染途徑(生物武器可通過多種途徑使人感染發(fā)病。)種類例證病菌炭疽桿菌、傷寒桿菌、霍亂弧菌病毒天花病毒、動物痘病毒生化毒劑肉毒桿菌毒素經(jīng)基因重組的致病菌通過轉基因技術改造的蠟狀桿菌、重組流感病毒(2)生物武器的種類:3、禁止生物武器種類例證病菌炭疽桿菌、傷寒桿菌、霍亂弧菌病毒48《禁止生物武器公約》《禁止生物武器公約》4914、(2012·浙江五校聯(lián)考)下列關于轉基因生物與環(huán)境安全的敘述錯誤的是

(

)A.重組的微生物在降解污染物的過程中可能產(chǎn)生二次污染。B.種植抗蟲棉可以減少農(nóng)藥的使用量,對環(huán)境沒有任何負面影響。C.如果轉基因花粉中有毒蛋白或過敏蛋白,可能會通過食物鏈傳遞到人體內(nèi)。D.轉基因生物所帶來的環(huán)境安全問題是可以解決的。15、設計試管嬰兒未利用下列哪項技術手段(

)A.體外受精技術B.胚胎移植技術C.植入前胚胎遺傳學診斷技術D.轉基因技術14、(2012·浙江五校聯(lián)考)下列關于轉基因生物與環(huán)境安全5016、下列關于轉基因生物安全性的敘述中,錯誤的是()A.我國已經(jīng)對轉基因食品和轉基因農(nóng)產(chǎn)品強制實施了產(chǎn)品標識制度B.國際上大多數(shù)國家都在轉基因食品標簽上警示性注明可能的危害C.開展風險評估、預警跟蹤和風險管理是保障轉基因生物安全的前提D.目前對轉基因生物安全性的爭論主要集中在食用安全性和環(huán)境安全性上16、下列關于轉基因生物安全性的敘述中,錯誤的是(5117、據(jù)統(tǒng)計,從20世紀90年代至今,全世界包括基因制藥在內(nèi)的生物技術藥物的銷售額以年均30%的速度增長,生物制藥已成為21世紀的朝陽產(chǎn)業(yè)。下列有關說法不正確的是

()

A.我們可以利用轉基因工程技術使哺乳動物本身變成“批量生產(chǎn)藥物的工廠”B.對于基因制藥,我們應該科學地認識和評估,保障公眾的知情權C.利用轉基因技術還可以進行基因治療,現(xiàn)在技術已經(jīng)完全成熟D.由于轉基因生物的安全問題,國家應建立相應的評估及預警機制17、據(jù)統(tǒng)計,從20世紀90年代至今,全世界包括基因制藥在內(nèi)52【一、基因工程】一、DNA重組所需的三種工具:1、限制性內(nèi)切酶——“手術刀”作用:切割磷酸二酯鍵

①EcoRⅠ→產(chǎn)生粘性末端

②SmaⅠ→產(chǎn)生平末端2、DNA連接酶——“分子縫合針”作用:鏈接磷酸二酯鍵

①E˙coliDNA連接酶→連接粘性末端②T4DNA連接酶→連接平末端或粘性末端3、載體——“分子運輸車”條件:①有一個或者多個限制酶切割位點

②能自我復制

③有特殊的標記基因(常用質粒作為載體)【一、基因工程】一、DNA重組所需的三種工具:53

二、基因工程的基本操作程序目的基因的獲取基因表達載體的構建將目的基因導入受體細胞目的基因的檢測與鑒定二、基因工程的基本操作程序目的基因的獲取基因表達載體的構建541、目的基因的獲?。?)從基因文庫獲取種類:基因組文庫:部分基因文庫:(如cDNA文庫)含有一種生物的全部基因含有一種生物的部分基因(2)利用PCR技術擴增目的基因(3)人工合成1、目的基因的獲取種類:基因組文庫:部分基因文庫:(如cDN55比較項目DNA復制PCR技術區(qū)別解旋方式解旋酶催化DNA在高溫下變性解旋場所細胞內(nèi)(主要在細胞核內(nèi))細胞外(主要在PCR擴增儀中)酶解旋酶、DNA聚合酶耐熱的DNA聚合酶溫度細胞內(nèi)溫和條件控制溫度,需90℃~95℃高溫結果合成DNA分子合成DNA片段或基因聯(lián)系(1)模板:均需要脫氧核苷酸雙鏈作為模板(2)原料:均為四種脫氧核苷酸(3)酶:均需DNA聚合酶(4)引物:都需要引物,使DNA聚合酶從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸PCR技術與DNA復制的比較比較項目DNA復制PCR技術區(qū)別解旋方式解旋酶催化DNA在高56質粒DNA分子限制酶處理一個切口兩個黏性末端兩個切口獲得目的基因DNA連接酶重組DNA分子(重組質粒)——核心同一種2、基因表達載體的構建①過程::②組成:必須有啟動子、目的基因、終止子以及標記基因等。質粒DNA分子限制酶處理一個切口兩個切口DNA連接酶重組DN57方法導入植物細胞導入動物細胞導入微生物細胞農(nóng)桿菌轉化法基因槍法(單子葉)花粉管通道法——顯微注射法——

感受態(tài)細胞吸收DNA分子(

Ca2+法)3、將目的基因導入受體細胞方法導入植物細胞導入動物細胞導入微生物細胞農(nóng)桿菌轉化法基因槍584、目的基因的檢測與鑒定——檢查是否成功檢測—鑒定—①檢測轉基因生物染色體的DNA

上是否插入了目的基因②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質個體生物學水平的鑒定,如抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等方法——方法——方法——DNA分子雜交分子雜交抗原-抗體雜交4、目的基因的檢測與鑒定——檢查是否成功檢測—鑒定—①檢測轉59三、基因工程的應用(1)植物方面1、抗蟲轉基因植物2、抗病轉基因植物3、抗逆轉基因植物4、改良植物品質(2)動物方面1、提高動物生長速度2、改善畜產(chǎn)品的品質3、用轉基因動物生產(chǎn)藥物4、用轉基因動物作器官移植的供體(3)基因治療:將外源基因通過基因轉移技術將其插入病人的適當?shù)氖荏w細胞中,使外源基因制造的產(chǎn)物能治療某種疾病。(只是改變體細胞的基因,生殖細胞未改變,后代可能還會患病。)三、基因工程的應用(1)植物方面601、在基因工程中,把選出的目的基因(共1000個脫氧核苷酸對,其中腺嘌嶺脫氧核苷酸是460個)放入DNA擴增儀中擴增4代,那么,在擴增儀中應放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個數(shù)是()個A.540

B.8100

C.17280

D.75602、在判斷抗蟲基因是否成功轉入棉花基因組的方法中,不屬于分子檢測的是(

)。A.通過觀察害蟲吃棉葉是否死亡B.檢測目的基因片段與DNA探針能否形成雜交帶C.檢測目的基因轉錄形成的mRNA與DNA探針能否形成雜交帶D.檢測目的基因表達產(chǎn)物蛋白質能否與特定抗體形成雜交帶1、在基因工程中,把選出的目的基因(共1000個脫氧核苷酸613、哪項不是基因表達載體的組成部分()

A.啟動子B.終止密碼

C.標記基因D.目的基因4、(2008,全國高考)已知某種限制酶在一線性DNA分子上有3個酶切位點。如果該線性DNA分子在3個酶切位點上都被該酶切斷,則會產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長度的DNA片段?,F(xiàn)有多個上述線性DNA分子,若在每個DNA分子上至少有1個酶切位點被該酶切斷,則從理論上講,經(jīng)該酶酶切后,這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長度不同的DNA片段種數(shù)是

()A.3B.4 C.9

D.12

a

b

c

d3、哪項不是基因表達載體的組成部分()A.362【二、蛋白質工程】1、蛋白質工程的實質:定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質。2、結果:可以生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質3、操作對象:基因結構4、過程:先反中心法則,后順中心法則。預期的蛋白質功能→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列(基因)【二、蛋白質工程】1、蛋白質工程的實質:定向改造或生產(chǎn)人類所63【三、細胞工程】一、植物細胞工程(一)植物的組織培養(yǎng)1、細胞全能性:已經(jīng)分化的細胞仍具有發(fā)育成完整個體的潛能。原因:生物的每一個細胞都含有該物種所特有的全套遺傳物質。2、全能性大小:受精卵>生殖細胞>體細胞植物細胞>動物細胞分化程度低>分化程度高細胞分裂能力強>細胞分裂能力弱幼嫩的細胞>衰老的細胞

【三、細胞工程】一、植物細胞工程1、細胞全能性:已經(jīng)分化的細643、植物組織培養(yǎng)(1)培養(yǎng)基:

①水

無機鹽

③有機小分子:糖、氨基酸等

④激素:生長素,細胞分裂素⑤瓊脂:起支持作用還需提供適宜的條件(如無菌環(huán)境和適宜溫度)3、植物組織培養(yǎng)(1)培養(yǎng)基:65(2)過程:離體細胞、組織、器官脫分化(無光)再分化(有光)愈傷組織胚狀體或叢芽試管苗愈傷組織特點:細胞排列疏松、高度液泡化、細胞壁薄、呈無定形狀態(tài)注意:取材須取形成層,生長素和細胞分裂素的比例。(2)過程:離體細胞、組織、器官脫分化(無光)再分化(有光66(二)植物體細胞雜交(二)植物體細胞雜交67意義:克服遠緣雜交不親和的障礙、培育新品種胚狀體→胚薄膜→種皮培養(yǎng)基→胚乳應用:(1)微型繁殖(2)作物脫毒(3)人工種子(4)單倍體育種(5)細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)意義:克服遠緣雜交不親和的障礙、培育新品種胚狀體→胚68二、動物細胞工程動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細胞懸浮液胰蛋白酶(分解彈性纖維)10代細胞原代培養(yǎng)50代細胞細胞株無限傳代細胞系遺傳物質未改變遺傳物質改變,無限增殖傳代培養(yǎng)原代細胞二、動物細胞工程動物胚胎或幼齡動物691、動物細胞培養(yǎng)的條件(1)無菌無毒的環(huán)境(2)營養(yǎng)(3)溫度和pH(4)氣體環(huán)境1、動物細胞培養(yǎng)的條件(1)無菌無毒的環(huán)境702、植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較項目原理培養(yǎng)基結果培養(yǎng)目的植物

動物細胞全能性細胞增殖固體蔗糖植物激素液體葡萄糖動物血清培養(yǎng)成植株培養(yǎng)成細胞株細胞系快速繁殖培養(yǎng)無病毒植株獲得細胞產(chǎn)品、細胞2、植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較項目原理培養(yǎng)基結果培養(yǎng)目71多莉羊的培育過程卵細胞C母綿羊子宮A母綿羊B母綿羊乳腺細胞細胞質細胞核細胞核移植胚胎移植早期胚胎多莉羊分娩卵裂融合后的卵細胞細胞拆合技術妊娠3、多莉羊的培育過程卵細胞C母綿羊子宮A母綿羊B母綿羊乳腺細胞細724、克隆技術1、概念:是指從一個共同的祖先,通過無性繁殖的方法產(chǎn)生出來的一群遺傳特性相同的DNA分子、細胞或個體,是一種人工誘導的無性繁殖方式。①分子水平克?。篜CR技術②細胞水平克?。簞游锛毎囵B(yǎng)(單克隆抗體)③個體水平克?。嚎寺⊙蚨嗬?、哺乳動物核移植:胚胎細胞移植、體細胞移植4、克隆技術1、概念:是指從一個共同的祖先,通過無性繁殖的方73

5、動物細胞融合細胞A細胞B雜種細胞滅活的病毒物理法(電擊)化學法(聚乙二醇)仙臺病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒過程:5、動物細胞融合細胞A細胞B雜種細胞滅活的病毒物理法(電擊746、單克隆抗體(1)概念:由單個B淋巴細胞經(jīng)過無性繁殖(克?。纬苫蛐拖嗤募毎?,這一細胞群所產(chǎn)生的化學性質單一、特異性強的抗體稱為單克隆抗體。

(2)特點:

特異性強、靈敏度高,可大量制備

6、單克隆抗體(1)概念:由單個B淋巴細胞經(jīng)過無性繁殖(克隆75

(3)單克隆抗體制備過程

注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞細胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體(3)單克隆抗體制備過程注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞765、植物體細胞雜交與動物細胞工程中所用技術與原理不相符的是

A.纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理——酶的專一性

B.植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)——細胞的全能性

C.原生質體融合和動物細胞融合——生物膜的流動性

D.紫草細胞培養(yǎng)和雜交瘤細胞的培養(yǎng)——細胞分裂6、下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是(

)A.培養(yǎng)中的人效應T細胞能產(chǎn)生單克隆抗體

B.培養(yǎng)中的人B細胞能夠無限地增殖C.人的成熟紅細胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成細胞株

D.用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個肝細胞5、植物體細胞雜交與動物細胞工程中所用技術與原理不相符的是777、(多選)下列關于單克隆抗體的制備和應用的敘述中,正確的是

)A.B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合,一般不需要滅活的仙臺病毒或聚乙二醇誘導B.融合后形成的雜交瘤細胞既能無限增殖,又能產(chǎn)生單克隆抗體C.體外培養(yǎng)時,一個效應B淋巴細胞可以產(chǎn)生抗體,但不能無限增殖D.單克隆抗體與常規(guī)抗體相比,特異性強,靈敏度高,優(yōu)越性明顯7、(多選)下列關于單克隆抗體的制備和應用的敘述中,正確的是78精原細胞有絲分裂初級精母細胞次級精母細胞精子細胞精子MⅠ第一階段第二階段第三階段MⅡ1.精子發(fā)生的過程多個精原細胞染色體復制變形!精原細胞經(jīng)過有絲分裂產(chǎn)生多個初級精母細胞。初級精母細胞經(jīng)減數(shù)分裂形成含有單倍染色體的精子細胞。細胞核---高爾基體---中心體---線粒體---其他物質---頭部頂體尾原生質滴線粒體鞘(能量)初情期精原細胞有絲分裂初級精母細胞次級精母細胞精子細胞精子MⅠ第一79卵原細胞有絲分裂多個卵原細胞染色體復制初級卵母細胞MⅠ第一極體次級卵母細胞兩個第二極體第二極體卵子退化消失MⅡ排卵前后完成!在受精過程完成!被卵泡細胞包圍,形成卵泡2、卵子的形成過程:性別分化后卵原細胞有絲分裂多個卵原細胞染色體復制初級卵母細胞MⅠ第一極80過程受精前的準備階段受精階段準備階段1精子獲能準備階段2卵子的準備即精子必須在雌性動物生殖道內(nèi)發(fā)生相應生理變化后,才能獲得受精能力的現(xiàn)象。即卵子在輸卵管內(nèi)達到減數(shù)第二分裂中期(MⅡ)時,才具備受精能力。包括精子穿越放射冠和透明帶,進入卵黃膜,原核形成和配子結合。3、受精過程受精前的準備階段受精階段準備階段1準備階段2即精子必須在814、受精過程的要點:1.精子在受精前必須獲能。精子獲能的地點是_____________________。

2.在受精過程中,精子連續(xù)突破放射冠和透明帶兩道障礙都是依靠精子的哪些部分?___________.3.防止多個精子進入卵中受精的兩道屏障分別是____________和_________________.(排他性!)4.卵子是在什么時候才徹底完成第二次減數(shù)分裂的?_________.透明帶反應卵黃膜的封閉作用頂體等雌性動物的生殖道里受精時5.受精作用完成的標志是_________________________________.透明帶和卵黃膜之間出現(xiàn)兩個極體.這兩個極體分別是___________________第一、第二極體各一個4、受精過程的要點:1.精子在受精前必須獲能。精子獲能的地點82受精卵:最初發(fā)育在輸卵管進行有絲分裂。卵裂期:在透明帶內(nèi)進行有絲分裂,細胞數(shù)量不斷增加,但胚胎總體積并不增加,或略有減少。桑椹胚:由具有全能性細胞構成,細胞數(shù)在32個左右,排列緊密,形似桑椹。囊胚(內(nèi)含囊胚腔):開始分化。

內(nèi)細胞團:發(fā)育成胎兒各組織;

滋養(yǎng)層細胞:發(fā)育成胎膜和胎盤原腸胚(內(nèi)含原腸腔)5、胚胎發(fā)育受精卵:最初發(fā)育在輸卵管進行有絲分裂。卵裂期:在透明帶內(nèi)進行838、精子與卵子結合過程中穿越的兩道屏障是()①頂體反應②透明帶反應③卵黃膜封閉作用④精子穿越放射冠

A.①②B.②③

C.③④D.②④9、在受精過程中()①精子必須發(fā)生頂體反應,釋放頂體酶②頂體酶可使精子穿過放射冠、透明帶、卵細胞膜③卵細胞恢復并很快完成了第一次成熟分裂④精子和卵細胞的細胞核分別形成雄原核和雌原核⑤透明帶反應防止了多精入卵和多精受精的發(fā)生

A.①②⑤B.①④⑤

C.②③④D.②④⑤8、精子與卵子結合過程中穿越的兩道屏障是()846、體外受精(1)卵子的收集和培養(yǎng)沖卵法:用促性腺激素處理母畜,促使其超數(shù)排卵,并從其輸卵管里沖取卵子,直接和獲能精子在體外受精采集法:從已被屠宰的母畜的卵巢里采集卵母細胞,經(jīng)體外人工培養(yǎng)后,再與獲能精子體外受精(2)精子的采集和獲能:

采集:假陰道法,手握法和電刺激等。獲能:培養(yǎng)法、化學誘導法6、體外受精(1)卵子的收集和培養(yǎng)沖卵法:用促性腺激素處理母85(3)受精:在獲能溶液或專用的受精溶液中完成受精過程。7、胚胎的早期培養(yǎng):(1)培養(yǎng)液的成分應包括:水、無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動物血清等。①試管牛的哪些階段是在試管中完成的?______________________________________.②培育試管牛要利用哪些重要的生物技術?______________________________________.

體外受精,早期胚胎發(fā)育(如卵裂)體外受精,動物細胞培養(yǎng),胚胎移植(3)受精:在獲能溶液或專用的受精溶液中完成受精過程。7、胚868、胚胎工程的應用前景(一)胚胎工程技術包括哪些?1.體外受精

2.胚胎移植

3.胚胎分割

4體外生產(chǎn)胚胎技術

5.胚胎干細胞培養(yǎng)(二)目前應用較多的是哪些?

胚胎移植、胚胎分割、體外生產(chǎn)胚胎技術。8、胚胎工程的應用前景(一)胚胎工程技術包括哪些?87(1)胚胎移植

①概念:將雌性動物體內(nèi)的早期胚胎(或者通過其他方式得到的胚胎),移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi),使之發(fā)育為新個體的技術。②胚胎移植的基本程序:(1)供體、受體的選擇和處理(2)配種或進行人工受精(3)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存(4)胚胎移植(手術法、非手術法)(5)移植后的檢查(1)胚胎移植②胚胎移植的基本程序:88選擇供體母牛(良種!)受體母牛【同期發(fā)情處理】-超數(shù)排卵(!)供體公牛(良種)配種沖卵(收集胚胎)質量檢查、培養(yǎng)胚胎移植妊娠檢查分娩(胚胎移植的犢牛)②胚胎移植的基本程序(以牛為例):選擇供體母牛(良種!)受體母?!就诎l(fā)情處理】-超數(shù)排卵(!891)加速育種工作和品種改良;2)可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力,縮短繁殖周期,增加其一生中繁殖的后代數(shù)量。3)大量節(jié)省購買種畜的費用;4)一胎多產(chǎn);5)保存品種資源和瀕危物種;③胚胎移植的現(xiàn)狀和意義:1)加速育種工作和品種改良;③胚胎移植的現(xiàn)狀和意義:90(2)胚胎分割(無性繁殖、克?。俑拍?采用顯微手術(機械方法)的方法將早期胚胎分割成2分胚,4分胚或8分胚,經(jīng)體內(nèi)或體外培養(yǎng)后植入受體,以得到同卵雙胎或同卵多胎的技術。②理論基礎:

動物胚胎細胞的全能性。所以胚胎分割的時期為:囊胚或桑椹胚。③注意:內(nèi)細胞團要均等分割。(2)胚胎分割(無性繁殖、克?。诶碚摶A:91(3)干細胞①概念:是一種未充分分化,尚不成熟的細胞,具有分裂、分化為各種組織、器官和人體的潛在功能。②分類:全能干細胞:受精卵(具全能性)

萬能干細胞:胚胎干細胞(具全能性)多能干細胞:(骨髓中的造血干細胞、神經(jīng)干細胞、皮膚干細胞等,不能發(fā)育成個體。)

專能干細胞:(只能產(chǎn)生一種細胞,如腸上皮細胞)(3)干細胞②分類:92③胚胎干細胞:簡稱ES或EK細胞,是由早期胚胎(卵裂、桑椹胚、囊胚期)或原始性腺中分離出來的一類細胞,能分裂、分化成各種組織器官。用途:1)治療人類的某些頑癥。利用ES細胞可以誘導分化形成新的組織細胞的特性,移植ES細胞可使壞死或退化的部位得以修復并恢復正常功能。2)培育出人造組織器官,用于器官移植。3)ES細胞也是研究體外細胞分化的理想材料。③胚胎干細胞:簡稱ES或EK細胞,是由早期胚胎(卵裂、桑椹胚9310、下列有關動物胚胎移植的敘述中,錯誤的是()A.受孕母畜體內(nèi)的受精卵或胚胎均能移植B.受體母畜必須處于與供體母畜同步發(fā)情的狀態(tài)C.超數(shù)排卵技術要使用一定的激素D.試管嬰兒只是受精及早期卵裂過程在試管中進行10、下列有關動物胚胎移植的敘述中,錯誤的是(9411、下列對于優(yōu)良種畜的胚胎移植的說法不正確的是()A.供體母牛必須是同一物種的良種B.受體母牛必須是同一物種的良種C.供體公牛必須是同一物種的良種D.受體母??梢允峭晃锓N的一般健康牛11、下列對于優(yōu)良種畜的胚胎移植的說法不正確的是(9512、利用胚胎干細胞治療肝衰竭,實現(xiàn)此過程的重要原因是()A.細胞分裂

B.細胞特化

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