血型與輸血學(xué)檢驗課件

血型與輸血學(xué)檢驗

第五章血型與輸血學(xué)檢驗

血型與輸血學(xué)檢驗

第五章血型與輸血學(xué)檢驗1第一節(jié)紅細(xì)胞血型第二節(jié)紅細(xì)胞血型檢測技術(shù)第三節(jié)白細(xì)胞血型第四節(jié)血小板血型第五節(jié)新生兒溶血病第六節(jié)臨床輸血第七節(jié)發(fā)展趨勢主要內(nèi)容第五章血型與輸血學(xué)檢驗主要內(nèi)容第五章血型與輸血學(xué)檢驗2血型、血型抗原與抗體

血型是人類血液的主要特征之一，表達了血液各種成分的抗原型別和遺傳性狀。血型抗原分類1.紅細(xì)胞血型抗原:ABO、Rh、MNS等2.白細(xì)胞血型抗原:HLA

、

CD等3.血小板血型抗原:HPA等4.其他血型抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗血型、血型抗原與抗體3血型主要指紅細(xì)胞血型是指紅細(xì)胞膜上特異性抗原的類型。按人體血液中紅細(xì)胞所含抗原及血漿中抗體不同而分為各種型別。第五章血型與輸血學(xué)檢驗第五章血型與輸血學(xué)檢驗4血型抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗血型抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗5血型抗原的化學(xué)本質(zhì)

種類：糖蛋白、脂蛋白、糖脂和蛋白質(zhì)四種糖蛋白：唾液中ABH抗原、Lewis、MNSs、HLA脂蛋白：Rh抗原糖脂：紅細(xì)胞上、血漿中ABH抗原、P血型抗原多糖類抗原刺激――產(chǎn)生IgM抗體蛋白類抗原刺激――產(chǎn)生IgG抗體第五章血型與輸血學(xué)檢驗血型抗原的化學(xué)本質(zhì)種類：糖蛋白、脂蛋白、糖脂和蛋白質(zhì)四種6完全抗體(completeantibody)

在血型抗原物質(zhì)刺激下形成，與紅細(xì)胞生理鹽水懸液混合后能引起紅細(xì)胞凝集的特異性抗體，主要是IgM抗體。

血型抗體不完全抗體(low-orderantibody)

只可使紅細(xì)胞致敏而不能使紅細(xì)胞凝集的抗體，主要是IgG抗體。血型抗體與紅細(xì)胞血型抗原結(jié)合后，體內(nèi)產(chǎn)生血管內(nèi)或血管外溶血。體外產(chǎn)生凝集、沉淀或溶血反應(yīng)。血型抗體(Bloodgroupantibody)在血型抗原物質(zhì)刺激下形成的免疫球蛋白。紅細(xì)胞血型抗體可分為完全抗體和不完全抗體。第五章血型與輸血學(xué)檢驗完全抗體(completeantibody)

7第一節(jié)紅細(xì)胞血型是紅細(xì)胞上的遺傳性標(biāo)志。包括ABO、Rh、MNS、P、Lutheran、Kell等。第五章血型與輸血學(xué)檢驗第一節(jié)紅細(xì)胞血型是紅細(xì)胞上的遺傳性標(biāo)志。包括ABO、Rh8一、ABO血型系統(tǒng)

1901年，Landsteiner（1930年獲諾貝爾生理和醫(yī)學(xué)獎，“血型之父”）發(fā)現(xiàn)了人類的第一個血型系統(tǒng)—ABO血型系統(tǒng)，根據(jù)人紅細(xì)胞表面含抗原成分不同分成A、B、O和AB四種血型。第五章血型與輸血學(xué)檢驗一、ABO血型系統(tǒng)1901年，Landsteine9血型分型：根據(jù)紅細(xì)胞膜上是否存在凝集原Ａ與凝集原Ｂ，血漿中是否存在對應(yīng)抗體，將血液分為四種血型。

血型

抗原

抗體AA抗BBB抗AABA、B無O無抗A、抗B第五章血型與輸血學(xué)檢驗血型分型：根據(jù)紅細(xì)胞膜上是否存在凝集原Ａ與凝集原Ｂ，血漿中是10ABO血型系統(tǒng)遺傳：“三復(fù)等位基因”學(xué)說：第九號染色體上A、B、O三復(fù)等位基因控制A、B基因：顯性基因O基因：隱性基因父母雙方各遺傳給子代一個基因，具6個基因型，4種表型。第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型系統(tǒng)遺傳：第五章血型與輸血學(xué)檢驗11第五章血型與輸血學(xué)檢驗第五章血型與輸血學(xué)檢驗12

基因型表型OOOAO,AAABO,BBBABAB第五章血型與輸血學(xué)檢驗基因型13ABO血型的遺傳父親母親

表型AB可能的基因型？？子女可能的基因型？子女可能的表型？第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型的遺傳父親14ABO抗原的生物合成基因ABO及H控制著A、B抗原的形成，O基因為無效基因.

第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO抗原的生物合成基因ABO及H控制著A、B抗原的形成，O15酶A+N-乙酰半乳糖胺A抗原H抗原酶B+D-半乳糖B抗原基因H

基因H

基因BH抗原酶A=α-N-乙酰半乳糖胺基轉(zhuǎn)移酶，酶B=D-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶基因A第五章血型與輸血學(xué)檢驗酶A+N-乙酰半乳糖胺A抗原H抗原酶B+D-半乳糖B抗原基16基因H

H抗原H物質(zhì)上既不連接N-乙酰半乳糖胺，又不連接D-半乳糖，則僅有H活性，沒有A、B抗原（為O型）第五章血型與輸血學(xué)檢驗基因HH抗原H物質(zhì)上既不連接N-乙酰半乳糖胺，又不連接D-半17Biosynthesisofantigen：

basicmaterialH酶

HantigenA酶B酶

Aantigen

Bantigen=N-乙酰半乳糖胺=D-半乳糖=N-乙酰葡萄糖胺=L-巖藻糖第五章血型與輸血學(xué)檢驗Biosynthesisofantigen：=N-乙酰半18現(xiàn)在我們知道A抗原和B抗原的合成是以H物質(zhì)為前提的,O型紅細(xì)胞也有H物質(zhì)但不能產(chǎn)生A抗原和B抗原基因酶合成抗原在ABO血型物質(zhì)合成過程中：控制控制第五章血型與輸血學(xué)檢驗現(xiàn)在我們知道A抗原和B抗原的合成是以H物質(zhì)為前提的,19首先是H基因控制的L-巖藻糖轉(zhuǎn)移酶的合成，它使1分子的巖藻糖加在血型前體物質(zhì)上，形成H物質(zhì)(H抗原)：

IB基因控制合成B型轉(zhuǎn)移酶，它將一個D-半乳糖分子加在H物質(zhì)末端糖殘基上，形成B抗原。

IA基因合成A型轉(zhuǎn)移酶，它使一個N-乙?；肴樘前芳釉贖物質(zhì)末端糖殘基上，形成A抗原。第五章血型與輸血學(xué)檢驗IB基因控制合成B型轉(zhuǎn)移酶，它將一個D-半乳糖分子加在H物質(zhì)20A、B兩種抗原的差異，只在于一個單糖殘基的不同。Io基因為無效等位基因、所以O(shè)型紅細(xì)胞只有H物質(zhì)，不能由此形成A抗原或B抗原.AB型紅細(xì)胞受IAIB基因控制，能產(chǎn)生A和B兩種抗原。第五章血型與輸血學(xué)檢驗第五章血型與輸血學(xué)檢驗21ABO血型系統(tǒng)的分子基礎(chǔ)1.O型個體只能產(chǎn)生H物質(zhì)(孟買型例外)；2.H物質(zhì)末端增加一分子的N-乙酰半乳糖胺（GalNAc)即成為A抗原；3.H物質(zhì)末端增加一分子的D-半乳糖(Gal)即成為B抗原。第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型系統(tǒng)的分子基礎(chǔ)1.O型個體只能產(chǎn)生H物質(zhì)(孟買22胎兒在5～6周已可測出，18個月完全表達。存在于多種細(xì)胞的細(xì)胞膜上和其他體液中。ABO血型發(fā)生及分布胎兒可產(chǎn)生ABH抗原出生時抗原的抗原性弱5-10歲時達高峰老年的抗原性下降第五章血型與輸血學(xué)檢驗胎兒在5～6周已可測出，18個月完全表達。存在于多種23ABO分泌型：分泌型和非分泌型受控于Sese基因ABH抗原不僅存在許多細(xì)胞上，還可分泌于許多體液中，體液中的可溶性ABH抗原又稱為“血型物質(zhì)”。凡體液中有血型物質(zhì)者為分泌型，無血型物質(zhì)者為非分泌型血型物質(zhì)第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO分泌型：分泌型和非分泌型受控于Sese基因血型物質(zhì)第五24血型物質(zhì)存在的意義：

①輔助鑒定血型②中和ABO血型系統(tǒng)中的“天然抗體”③檢查羊水，預(yù)測胎兒ABO血型等。第五章血型與輸血學(xué)檢驗血型物質(zhì)存在的意義：①輔助鑒定血型第五章血型與輸血學(xué)25ABO亞型紅細(xì)胞上的A抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO亞型紅細(xì)胞上的A抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗26亞型是指同一血型抗原的結(jié)構(gòu)和性能或抗原位點數(shù)有一定差異所引起的變化。ABO血型系統(tǒng)中以A亞型最多見，A抗原的兩個主要亞型是A1和A2

。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗亞型是指同一血型抗原的結(jié)構(gòu)和性能或抗原位點數(shù)有一定差異所引起27檢查亞型的目的防止誤定血型，避免輸血反應(yīng)①A1與A2之間輸血可能引起輸血反應(yīng)②亞型抗原性弱，易漏檢或誤定第五章血型與輸血學(xué)檢驗檢查亞型的目的防止誤定血型，避免輸血反應(yīng)第五章血型與輸血281.孟買型：基因型：hh，表型：Oh，紅細(xì)胞及體液無ABH抗原,血清中有其抗體2.B（A）型：紅細(xì)胞上同時存在B抗原和很弱的A抗原，容易誤判為AxB型。A（B）型相仿。其他特殊類型的ABO亞型

第五章血型與輸血學(xué)檢驗其他特殊類型的ABO亞型第五章血型與輸血學(xué)檢驗291952年在印度孟買發(fā)現(xiàn)一種特殊的血型．這種紅細(xì)胞既無A抗原和B抗原，也無H抗原。他們的基因型為hh，不能產(chǎn)生H物質(zhì)，即使有IA和(或)IB基因，也不能形成A抗原或(和)B抗原．但IAIB基因可向后代遺傳，這種特殊的型,稱為孟買型孟買型第五章血型與輸血學(xué)檢驗1952年在印度孟買發(fā)現(xiàn)一種特殊的血型．這種紅細(xì)胞孟買型第五30孟買型首先在孟買發(fā)現(xiàn)而得名沒有H抗原的O型基因型為hh，表現(xiàn)型為Oh紅細(xì)胞和唾液中無H、A和B抗原，但血清中含有抗A、抗B和高效價的抗H抗體除與AB型紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)外，還可與O型紅細(xì)胞凝集如輸血，只輸Oh同型血第五章血型與輸血學(xué)檢驗孟買型首先在孟買發(fā)現(xiàn)而得名沒有H抗原的O型第五章血型與輸31ABO血型系統(tǒng)抗體

1.抗A、抗B抗體2.抗A、B抗體O型人血清中不僅有抗A、抗B抗體，還含有一種抗A、B抗體。第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型系統(tǒng)抗體1.抗A、抗B抗體第五章血型與輸血學(xué)32出生后3~6個月才開始出現(xiàn)，5~10歲達高峰。產(chǎn)生抗體的功能可持續(xù)終身，效價隨年齡增高而逐漸降低。新生兒血清中可檢測出的抗體常是來自母體的IgG，偶爾也有胎兒自身產(chǎn)生的IgM。ABO血型抗體滴度變化大：O型人抗A滴度高于B型人B型人的抗A又高于A型人中的抗B第五章血型與輸血學(xué)檢驗出生后3~6個月才開始出現(xiàn)，5~10歲達高峰。第五章血型33天然抗體:是指沒有可察覺抗原刺激產(chǎn)生的“抗體”，（菌類、花粉塵埃等）多主要存在于ABO、MN、P和Lewis血型系統(tǒng)中，以IgM和IgG共同存在，A型和B型血型抗體多數(shù)以IgM為主，O型人在成年后以IgG占優(yōu)勢，特別是女性免疫抗體：指有可查抗原刺激而產(chǎn)生，常見有輸血、妊娠和注射3種方式。規(guī)則抗體；指ABO血型系統(tǒng)有規(guī)律產(chǎn)生抗A和抗B，符合Landsteiner規(guī)則是反定型的依據(jù)

第五章血型與輸血學(xué)檢驗天然抗體:是指沒有可察覺抗原刺激產(chǎn)生的“抗體”，（菌類、花34AntibodyofABOsystem天然抗體免疫性抗體IgMIgG溫度低時抗體滴度高溫度升高時抗體滴度也高容易被可溶性血型物質(zhì)中和只能部分被可溶性血型物質(zhì)中和分子量100萬分子量16萬不能通過胎盤能通過胎盤在鹽水中與相應(yīng)紅細(xì)胞發(fā)生通常在鹽水中不發(fā)生聚集，僅在酶聚集處理或白蛋白溶液中發(fā)生聚集第五章血型與輸血學(xué)檢驗AntibodyofABOsystem天然抗體35二、Rh血型系統(tǒng)概述

抗Rh抗體一般指抗-D。Rh血型抗原及抗體1.Rh抗原：含D、E、e、C、c五種，D抗原性最強。

2.Rh抗體：主要通過輸血或妊娠免疫而產(chǎn)生。Rh抗體臨床意義：引起輸血反應(yīng)或新生兒溶血病。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、Rh血型系統(tǒng)概述抗Rh抗體一般指抗-D。第五36發(fā)現(xiàn):恒河猴(Rhesusmonkey)的紅細(xì)胞→家兔→血清中產(chǎn)生抗體→人RBC:RBC凝集者，為Rh(＋)RBC不凝集者,為Rh(－)

分布:

白種人:Rh(＋)85%;Rh(－)15%

漢族及大部分少數(shù)民族:

Rh(＋)99%:Rh(－)1%

有些民族:Rh(－)可達8.7%以上

第五章血型與輸血學(xué)檢驗發(fā)現(xiàn):恒河猴(Rhesusmonkey)的紅細(xì)胞→家37(一)Rh血型的抗原與分型人類RBC膜上有C、c、D、E、e5種抗原，以D抗原的抗原性最強。分型：Rh+：有D抗原為Rh陽性(漢族99％)

Rh-：無D抗原為Rh陰性存在弱D抗原為弱D型，歸為Rh陽性(二)Rh血型抗體的特點主要是IgG,屬免疫性抗體,可通過胎盤。Rh陰性者接受Rh陽性血液后可通過體液免疫產(chǎn)生抗Rh抗體。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗(一)Rh血型的抗原與分型第五章血型與輸血學(xué)檢驗38Rh抗原及亞型

1.Rh抗原已發(fā)現(xiàn)40多種，與臨床關(guān)系密切的有5種依其抗原性強弱排列：D>E>C>c>e臨床上將含D抗原者為Rh陽性，無D抗原者為Rh陰性。第五章血型與輸血學(xué)檢驗Rh抗原及亞型1.Rh抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗39Rh抗原亞型Du

：弱D抗原，通常用抗D血清作凝集實驗時為陰性或反應(yīng)很弱。-D-（缺失型）缺少E/e或既缺E/e,又缺C/c,只表現(xiàn)D。Rhnull

缺少全部Rh抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗Rh抗原亞型Du：弱D抗原，通常用抗D血清作凝集實驗時40Rh血型抗體1．Rh抗體產(chǎn)生極少數(shù)是天然抗體，如抗E、抗CW絕大多數(shù)：免疫性抗體2．Rh抗體種類

5種，即抗D、抗E、抗C、抗c、抗e最常見的是抗D。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗Rh血型抗體1．Rh抗體產(chǎn)生第五章血型與輸血學(xué)檢驗411.Rh血型與輸血Rh+血2.Rh血型與妊娠Rh-患者抗Rh抗體再次輸入Rh+血溶血第五章血型與輸血學(xué)檢驗1.Rh血型與輸血Rh-患者抗Rh抗體再次輸入Rh+血溶血第421.Rh血型系統(tǒng)中血清不含天然抗體

例:

輸血供血者(Rh陽性)而受血者(Rh陰性)

第一次輸血……無明顯凝集反應(yīng)

第五章血型與輸血學(xué)檢驗1.Rh血型系統(tǒng)中血清不含天然抗體第五章血型與輸血432.Rh抗體主要是不完全抗體IgG，其分子小能透過胎盤例:分娩時胎兒RBC胎兒—(Rh陽性)胎盤胎兒紅細(xì)胞發(fā)生凝集和溶血(新生兒溶血)第二次懷孕：第一次懷孕：誘導(dǎo)孕婦(Rh陰性)產(chǎn)生抗D抗體胎兒—(Rh陽性)第五章血型與輸血學(xué)檢驗2.Rh抗體主要是不完全抗體IgG，其分子小能透過胎盤分娩44Rh血型引起的新生兒溶血第五章血型與輸血學(xué)檢驗Rh血型引起的新生兒溶血第五章血型與輸血學(xué)檢驗45亮谷絲蘇甘絲胺酸蘇胺酸谷胺酸亮胺酸甘胺酸第五章血型與輸血學(xué)檢驗亮谷絲蘇甘絲胺酸蘇胺酸谷胺酸亮胺酸甘胺酸第五章血型與輸血46亮谷絲蘇甘絲胺酸蘇胺酸谷胺酸亮胺酸甘胺酸第五章血型與輸血學(xué)檢驗亮谷絲蘇甘絲胺酸蘇胺酸谷胺酸亮胺酸甘胺酸第五章血型與輸血47MNSs血型系統(tǒng)M、N、MN、S、s、Ss型MN與Ss基因復(fù)合體MN系統(tǒng)抗M最常見，以IgM為主，抗N為冷凝集素抗S與抗s由紅細(xì)胞免疫產(chǎn)生，能引起溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗MNSs血型系統(tǒng)M、N、MN、S、s、Ss型第五章血型與48四、其它血型１.P血型系統(tǒng):

P抗原除存在于紅細(xì)胞，還存在于成纖維細(xì)胞和淋巴細(xì)胞上。天然抗體通常不引起新生兒溶血病和溶血性輸血反應(yīng)。２.Kell血型系統(tǒng)：

主要抗原是K和k，抗原性較強，抗K引起嚴(yán)重溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病。３.Kidd血型系統(tǒng)：抗原為Jka，Jkb，

免疫抗體能引起嚴(yán)重溶血性輸血反應(yīng)。第五章血型與輸血學(xué)檢驗四、其它血型１.P血型系統(tǒng):第五章血型與輸血學(xué)檢驗49第二節(jié)紅細(xì)胞血型檢測技術(shù)凝集反應(yīng)（agglutination）沉淀反應(yīng)（precipitation）溶血反應(yīng)（hemolysis）第五章血型與輸血學(xué)檢驗第二節(jié)紅細(xì)胞血型檢測技術(shù)凝集反應(yīng)（agglutinatio50一、凝集反應(yīng)

第五章血型與輸血學(xué)檢驗一、凝集反應(yīng)第五章血型與輸血學(xué)檢驗51二、沉淀反應(yīng)第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、沉淀反應(yīng)第五章血型與輸血學(xué)檢驗52三、溶血反應(yīng)（hemolysis）第五章血型與輸血學(xué)檢驗三、溶血反應(yīng)（hemolysis）第五章血型與輸血學(xué)檢驗53一、紅細(xì)胞血型鑒定ABO血型鑒定

Rh血型鑒定MN血型鑒定第五章血型與輸血學(xué)檢驗一、紅細(xì)胞血型鑒定ABO血型鑒定第五章血型與輸血學(xué)檢驗54ABO血型鑒定

檢測紅細(xì)胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗體，依據(jù)抗原抗體存在的情況判斷血型。

常規(guī)的方法包括正向定型與反向定型正定型：用已知抗體特異性的血清檢查紅細(xì)胞抗原反定型：用已知血型紅細(xì)胞檢查血清抗體第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型鑒定檢測紅細(xì)胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的55ABO血型鑒定1.正向定型2.反向定型第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型鑒定1.正向定型第五章血型與輸血學(xué)檢驗56ABO血型鑒定常用方法鹽水凝集法凝膠微柱法第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型鑒定常用方法鹽水凝集法第五章血型與輸血學(xué)檢驗571．鹽水凝集法ABO血型抗體一般IgM，屬完全抗體IgM抗體分子鏈較長，能克服紅細(xì)胞表面排斥力，同時分子量較大，能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合，在生理鹽水中發(fā)生肉眼可見的凝集現(xiàn)象。第五章血型與輸血學(xué)檢驗1．鹽水凝集法ABO血型抗體一般IgM，屬完全抗體第五章58簡便，不需要特殊儀器①玻片法：操作簡單，不需要離心，適于大規(guī)模血型普查反應(yīng)時間較長，易忽略較弱的凝集而導(dǎo)致定型錯誤。②試管法：需時間短適用于急診定型。可發(fā)現(xiàn)亞型或較弱抗原抗體反應(yīng)，結(jié)果判斷可靠，為常規(guī)檢查方法。第五章血型與輸血學(xué)檢驗簡便，不需要特殊儀器第五章血型與輸血學(xué)檢驗592．凝膠微柱法凝膠具有分子篩效應(yīng)和親合效應(yīng)親合效應(yīng)：紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合分子篩效應(yīng)：低速離心后，凝集紅細(xì)胞懸浮在凝膠中或表面，而未被抗體結(jié)合的紅細(xì)胞則沉于凝膠底部。結(jié)果觀察：肉眼/血型分析儀

第五章血型與輸血學(xué)檢驗2．凝膠微柱法凝膠具有分子篩效應(yīng)和親合效應(yīng)第五章血型與輸60操作標(biāo)準(zhǔn)化，結(jié)果特異、準(zhǔn)確可靠，重復(fù)性好、靈敏度高。可手工、半自動及全自動操作不足之處：需要特殊試劑和離心機成本較高。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗操作標(biāo)準(zhǔn)化，結(jié)果特異、準(zhǔn)確可靠，重復(fù)性好、靈敏度高。第五章61紅細(xì)胞的常規(guī)ABO定型正向定型

反向定型抗A抗B抗A,B

A細(xì)胞B細(xì)胞O細(xì)胞---++-O+-+-+-A-+++--B+++---AB判斷結(jié)果第五章血型與輸血學(xué)檢驗紅細(xì)胞的常規(guī)ABO定型正向定型62標(biāo)準(zhǔn)血清質(zhì)量

人ABO血型血清抗體/單克隆抗體①高度特異②高效性抗A〉1：128抗B〉1：64③高親和力④無冷凝集素/穩(wěn)定性⑤無菌⑥滅活補體第五章血型與輸血學(xué)檢驗標(biāo)準(zhǔn)血清質(zhì)量

人ABO血型血清抗體/單克隆抗體①高度特異63正定型的紅細(xì)胞問題①標(biāo)本新鮮，嚴(yán)防污染②腸道細(xì)菌感染，紅細(xì)胞出現(xiàn)類B抗原，與抗B血清凝集。③抗原位點過少/弱/消失：嬰幼兒、老年人白血病或惡性腫瘤④血漿成分：可能影響鑒定結(jié)果，要用鹽水多次洗滌紅細(xì)胞。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗正定型的紅細(xì)胞問題①標(biāo)本新鮮，嚴(yán)防污染第五章血型與輸血64反定型的血清問題①標(biāo)本新鮮，嚴(yán)防污染②嬰兒及老年人血清中ABO抗體效價較低，反定型時可出現(xiàn)不凝集或弱凝集。③冷凝集素干擾血型鑒定。④疾病影響：丙種球蛋白缺乏癥：血清中缺乏抗A、抗B而不出現(xiàn)凝集或弱凝集某些肝病和多發(fā)性骨髓瘤：血清球蛋白增高引起假凝集。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗反定型的血清問題①標(biāo)本新鮮，嚴(yán)防污染第五章血型與輸血學(xué)檢65（二）Rh血型鑒定1．原理:（1）單克隆混合試劑檢測法用Rh抗血清（IgM+IgG型）試劑通過凝集反應(yīng)對紅細(xì)胞上Rh抗原進行鑒定。（2）酶介質(zhì)檢測法酶介質(zhì)可破壞紅細(xì)胞表面的唾液酸，降低紅細(xì)胞表面負(fù)電荷，減少細(xì)胞間的靜電排斥力，使細(xì)胞間的距離縮小，有利于IgG型小分子特異性Rh血型抗體與紅細(xì)胞上的Rh抗原反應(yīng)，形成肉眼可見的凝集。第五章血型與輸血學(xué)檢驗（二）Rh血型鑒定1．原理:第五章血型與輸血學(xué)檢驗66指D抗原的變異型，有些Rh陽性細(xì)胞能被一些抗D血清凝集，但不能被其他一些抗D血清凝集，實際上有D抗原

Du意義：Du抗原是一種弱抗原，可分不同等級，高等級可在鹽水介質(zhì)立即反應(yīng)獻血者為Du型，應(yīng)歸Rh陽性

受血者為Du型，應(yīng)歸Rh陰性

D抗原和Du型

第五章血型與輸血學(xué)檢驗指D抗原的變異型，有些Rh陽性細(xì)胞能被一些抗D血清凝67（三）MN血型鑒定1．原理:用IgM類特異性抗M、抗N單克隆血清來鑒定紅細(xì)胞上有無相應(yīng)的M抗原和/或N抗原?？?M抗-N血型基因型＋－＋－＋＋MNMNMMNNMN第五章血型與輸血學(xué)檢驗（三）MN血型鑒定1．原理:抗-M抗-N血型基因型＋－MMM68二、交叉配血實驗

概念：血型配合性試驗分類

1.“主側(cè)”配血2.“次側(cè)”配血3.自身對照第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、交叉配血實驗概念：血型配合性試驗第五章血型與輸血學(xué)69獻血者受血者紅細(xì)胞紅細(xì)胞血清血清主側(cè)次側(cè)供血者紅細(xì)胞與受血者血清反應(yīng)（主側(cè)交叉配血）受血者紅細(xì)胞與供血者血清反應(yīng)（次側(cè)交叉配血）其目的是檢查受血者與供血者是否存在血型抗原與抗體不合的情況。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗獻血者受血者主70二、交叉配血實驗技術(shù)1.鹽水介質(zhì)法

2.酶介質(zhì)法

3.抗人球蛋白介質(zhì)法4.凝聚胺法5.微柱凝膠免疫技術(shù)

第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、交叉配血實驗技術(shù)1.鹽水介質(zhì)法第五章血型與輸血學(xué)檢驗71一、鹽水凝集法紅細(xì)胞和抗血清在鹽水溶液中直接反應(yīng)，凝集或溶血為陽性特點是操作簡便，設(shè)備簡單，缺點是影響因素多，靈敏度低，不能檢出IgG類不完全抗體第五章血型與輸血學(xué)檢驗一、鹽水凝集法紅細(xì)胞和抗血清在鹽水溶液中直接反應(yīng)，凝集或溶血72二、低離子強度鹽水法通過降低介質(zhì)溶液的離子強度，減少紅細(xì)胞外圍離子云的強度，促進IgG分子在兩個紅細(xì)胞間橋聯(lián)，而促進凝集特點是縮短抗原抗體反應(yīng)時間，提高反應(yīng)靈敏度第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、低離子強度鹽水法通過降低介質(zhì)溶液的離子強度，減少紅細(xì)胞外73三、酶技術(shù)利用木瓜酶或菠蘿酶破壞紅細(xì)胞表面唾液酸，使紅細(xì)胞失去電荷，縮小細(xì)胞間距離同時改變紅細(xì)胞膜表面結(jié)構(gòu)，使某些隱蔽的抗原暴露，從而增強凝集反應(yīng)主要用于一些不完全抗體的檢測，鹽水中可凝集第五章血型與輸血學(xué)檢驗三、酶技術(shù)利用木瓜酶或菠蘿酶破壞紅細(xì)胞表面唾液酸，使紅細(xì)胞失74四、抗人球蛋白檢測法—Coombs試驗在鹽水凝集法或低離子強度鹽水法的基礎(chǔ)上，加入抗人球蛋白抗體，通過其特異性橋聯(lián)作用，促進紅細(xì)胞的凝集，用于檢測不完全抗體第五章血型與輸血學(xué)檢驗四、抗人球蛋白檢測法—Coombs試驗在鹽水凝集法或低離子強75第五章血型與輸血學(xué)檢驗第五章血型與輸血學(xué)檢驗76五、凝聚胺技術(shù)原理：通過低離子介質(zhì)降低溶液的離子強度，多聚季胺鹽在介質(zhì)溶液中產(chǎn)生大量正電荷中和紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷，減少紅細(xì)胞靜電排斥，形成可逆凝集，加入解聚液僅可使非特異性聚集分散。第五章血型與輸血學(xué)檢驗五、凝聚胺技術(shù)原理：通過低離子介質(zhì)降低溶液的離子強度，多聚季77聚凝胺配血法聚凝胺法：可以檢出IgM與IgG兩種性質(zhì)的抗體，能發(fā)現(xiàn)引起溶血性輸血反應(yīng)的絕大多數(shù)抗體。第五章血型與輸血學(xué)檢驗聚凝胺配血法聚凝胺法：可以檢出IgM與IgG兩種性質(zhì)的抗體，78六、凝膠卡式檢測法是微柱凝膠技術(shù)與上述所有技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物1986年由法國人Dr.YvesLappierre發(fā)明1994年獲得美國FDA認(rèn)證，目前在許多發(fā)達國家已經(jīng)作為常規(guī)技術(shù)應(yīng)用于臨床第五章血型與輸血學(xué)檢驗六、凝膠卡式檢測法是微柱凝膠技術(shù)與上述所有技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物第79過濾介質(zhì)：顆粒直徑26-103nm的葡聚糖100凝膠，凝膠間縫隙只允許游離紅細(xì)胞通過緩沖液：LISS（加或不加抗血清）凝膠卡式檢測法的工作原理第五章血型與輸血學(xué)檢驗過濾介質(zhì)：顆粒直徑26-103nm的葡聚糖100凝膠，凝膠80凝膠卡式檢測法的工作原理將紅細(xì)胞和抗血清加在凝膠上部反應(yīng)，離心后觀察凝集的紅細(xì)胞，被阻擋在微柱中凝膠的上部或中央，證明發(fā)生凝集反應(yīng)，判斷凝集反應(yīng)陽性游離的紅細(xì)胞，擠過裝有過濾介質(zhì)的微柱到達底部，證明未發(fā)生凝集，判斷凝集反應(yīng)陰性

第五章血型與輸血學(xué)檢驗?zāi)z卡式檢測法的工作原理將紅細(xì)胞和抗血清加在凝膠上部反應(yīng)，離81交叉配血中可能出現(xiàn)的一些問題1.緡錢狀形成：常見于多發(fā)性骨髓瘤，巨球蛋白癥、霍奇金病2.試驗結(jié)果不相容：顯示有未檢明同種抗體存在3.離心力不當(dāng)：造成假陰性和假陽性4.水浴箱溫度不正確5.結(jié)果溶血，把血清滅活補體后再試驗第五章血型與輸血學(xué)檢驗交叉配血中可能出現(xiàn)的一些問題1.緡錢狀形成：常見于多發(fā)性骨82標(biāo)簽和發(fā)血

配血單上，均需寫上受血者姓名、床號、ABO及Rh血型，獻血者姓名、編號、ABO及Rh血型等，反復(fù)核對輸血申請單和血液的標(biāo)簽正確無誤，交叉配血試驗結(jié)果的判斷，發(fā)出血液的血型、名稱、數(shù)量，注明發(fā)血時間，簽名或蓋章，輸血前檢查試驗是一項具有高度科學(xué)性和責(zé)任性的工作，熟練和靈活應(yīng)用血清學(xué)試驗原理和技術(shù)，對試驗結(jié)果能給予全面、細(xì)致觀察和分析第五章血型與輸血學(xué)檢驗標(biāo)簽和發(fā)血配血單上，均需寫上受血者姓名、床號、ABO及Rh83第三節(jié)白細(xì)胞血型1.包括紅細(xì)胞血型抗原2.白細(xì)胞本身所特有的血型抗原3.人類白細(xì)胞抗原（HLA）第五章血型與輸血學(xué)檢驗第三節(jié)白細(xì)胞血型1.包括紅細(xì)胞血型抗原第五章血型與84一、HLA系統(tǒng)基因、抗原結(jié)構(gòu)HLA基因型:位于6號染色體短臂6p21.3區(qū)域。HLA抗原１.HLA-Ⅰ類分子：有核細(xì)胞２.HLA-Ⅱ類分子：抗原提呈細(xì)胞第五章血型與輸血學(xué)檢驗一、HLA系統(tǒng)基因、抗原結(jié)構(gòu)HLA基因型:位于6號染色體短85HLA抗原臨床應(yīng)用HLA多態(tài)性的研究;器官和骨髓移植前組織相容性配型;親子鑒定;HLA與某些疾病的關(guān)聯(lián);遺傳學(xué)方面。第五章血型與輸血學(xué)檢驗HLA抗原臨床應(yīng)用HLA多態(tài)性的研究;第五章血型與輸血學(xué)86二、HLA系統(tǒng)抗原的檢測方法１.HLA血清學(xué)技術(shù)(微量淋巴細(xì)胞毒試驗)分型血清中含有的抗特定HLA抗原的細(xì)胞毒抗體與待檢淋巴細(xì)胞膜表面的HLA抗原結(jié)合后，在補體的參與下?lián)p傷細(xì)胞膜，經(jīng)伊紅或臺盼藍染色后，觀察細(xì)胞是否被染色，了解細(xì)胞損傷、死亡的情況。第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、HLA系統(tǒng)抗原的檢測方法１.HLA血清學(xué)技術(shù)(微量淋巴細(xì)87２.HLA的分子生物學(xué)檢測：PCR-SSP（PCR序列特異性引物）PCR-SSO（PCR序列特異性寡核苷酸探針）PCR-RFLP（PCR限制性片段長度多態(tài)性）PCR-SBT（PCR-直接測序分型

）第五章血型與輸血學(xué)檢驗２.HLA的分子生物學(xué)檢測：第五章血型與輸血學(xué)檢驗88三、粒細(xì)胞血型分布：中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞。分類：

１.HNA-1抗原：目前發(fā)現(xiàn)的唯一具有多態(tài)性的粒細(xì)胞抗原系統(tǒng)。

２.HNA-2抗原：其中HNA-2a具有臨床意義。３.HNA-3抗原：其中HNA-３a表達于淋巴細(xì)胞、血小板、內(nèi)皮細(xì)胞、脾臟、腎臟、胎盤細(xì)胞，是粒細(xì)胞聚集因子，與輸血相關(guān)性肺損傷相關(guān)。第五章血型與輸血學(xué)檢驗三、粒細(xì)胞血型分布：第五章血型與輸血學(xué)檢驗89(一)粒細(xì)胞抗原抗體檢測方法1.血清學(xué)方法：a.粒細(xì)胞凝集試驗b.單克隆抗體特異性粒細(xì)胞抗原捕獲試驗c.粒細(xì)胞免疫熒光試驗d.流式細(xì)胞術(shù)2.DNA分型技術(shù):PCR-RFLP、PCR-SSP等。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(一)粒細(xì)胞抗原抗體檢測方法1.血清學(xué)方法：第五章血型90（二）粒細(xì)胞抗體的臨床應(yīng)用１.新生兒同種免疫粒細(xì)胞減少癥2.非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)3.輸血相關(guān)性肺損傷4.粒細(xì)胞輸注無效5.自身免疫性粒細(xì)胞減少癥第五章血型與輸血學(xué)檢驗（二）粒細(xì)胞抗體的臨床應(yīng)用１.新生兒同種免疫粒細(xì)胞減少癥第五91第四節(jié)血小板血型第五章血型與輸血學(xué)檢驗第四節(jié)血小板血型第五章血型與輸血學(xué)檢驗92HPA血小板特異性抗原：血小板獨特的遺傳多態(tài)性血小板相關(guān)抗原：組織相容性抗原和紅細(xì)胞血型相關(guān)抗原，吸附于血小板表面第五章血型與輸血學(xué)檢驗HPA血小板特異性抗原：血小板獨特的遺傳多態(tài)性第五章血型93HPA血型系統(tǒng)HPA-1HPA-2HPA-3HPA-4HPA-5其他第五章血型與輸血學(xué)檢驗HPA血型系統(tǒng)HPA-1第五章血型與輸血學(xué)檢驗94一、血小板同種抗體同種血小板抗體一般由輸血、妊娠或骨髓移植等免疫刺激而產(chǎn)生。最常見的抗體是HPA-1b和5b抗體。第五章血型與輸血學(xué)檢驗一、血小板同種抗體同種血小板抗體一般由輸血、妊娠或骨髓移植等95二、血小板血型抗原和抗體的臨床應(yīng)用1.新生兒同種免疫性血小板減少性紫癜2.輸血后紫癜3.血小板輸注無效第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、血小板血型抗原和抗體的臨床應(yīng)用1.新生兒同種免疫性血小板96第五節(jié)新生兒溶血病第五章血型與輸血學(xué)檢驗第五節(jié)新生兒溶血病第五章血型與輸血學(xué)檢驗97一.ABO新生兒溶血病ABO-HDN是由于母嬰血型不合，母體的IgG抗A(B)經(jīng)過胎盤進入胎兒血循環(huán)破壞胎兒紅細(xì)胞所引起。第五章血型與輸血學(xué)檢驗一.ABO新生兒溶血病ABO-HDN是由于母嬰血型不合，98

AB0溶血癥的發(fā)生不是由于母親或新生兒本身的血液有問題，而是因為母嬰血型不合；例：如果胎兒的血是A（B）型，O型母體IgG抗A（B）通過胎盤絨毛膜進入胎兒血液．和胎兒紅細(xì)胞上的A（B）抗原起作用，使胎兒紅細(xì)胞破壞和溶血；胎兒出生即出現(xiàn)新生兒ABO溶血癥。第五章血型與輸血學(xué)檢驗AB0溶血癥的發(fā)生不是由于母親或新生兒本身的血液有問99

ABO血型不合：母：“O”型，胎兒為“A”或“B”型常見。常發(fā)生在第一胎。大量溶血→貧血→（胎兒水腫）貧血→髓外造血→肝脾腫大溶血→未結(jié)合膽紅素大量產(chǎn)生→黃疸（膽紅素腦病）

第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型不合：母：“O”型，胎兒為“A”或“B”型常100臨床表現(xiàn)一、黃疸二、貧血三、肝脾腫大四、膽紅素腦病五、胎兒水腫第五章血型與輸血學(xué)檢驗臨床表現(xiàn)一、黃疸第五章血型與輸血學(xué)檢驗101二.Rh血型引起的新生兒溶血第五章血型與輸血學(xué)檢驗二.Rh血型引起的新生兒溶血第五章血型與輸血學(xué)檢驗102Rh抗體主要是不完全抗體IgG，其分子小能透過胎盤例:分娩時胎兒RBC胎兒—(Rh陽性)胎盤胎兒紅細(xì)胞發(fā)生凝集和溶血(新生兒溶血)第二次懷孕：第一次懷孕：誘導(dǎo)孕婦(Rh陰性)產(chǎn)生抗D抗體胎兒—(Rh陽性)第五章血型與輸血學(xué)檢驗Rh抗體主要是不完全抗體IgG，其分子小能透過胎盤分娩時胎兒103三.實驗室檢查一、溶血證據(jù)：二、母嬰血型不合三、血清特異性血型抗體檢查（確診）1．母血清抗體：間接抗人球蛋白試驗患兒紅細(xì)胞（致敏）：直接抗人球蛋白試驗（確診Rh）2．抗體釋放試驗（確診ABO）3．血清游離抗體

第五章血型與輸血學(xué)檢驗三.實驗室檢查一、溶血證據(jù)：第五章血型與輸血學(xué)檢驗104實驗室檢查直接抗人球蛋白試驗游離試驗:是檢測新生兒血清中的血型抗體。釋放試驗:與直接抗球蛋白相同，也是檢測新生兒紅細(xì)胞上是否存在免疫抗體。第五章血型與輸血學(xué)檢驗實驗室檢查直接抗人球蛋白試驗第五章血型105第六節(jié)臨床輸血一、全血輸血全血適應(yīng)證全血可用于急性大量血液丟失可能出現(xiàn)低血容量休克患者；或存在持續(xù)活動性出血，估計失血量超過自身血容量30%的患者（我國臨床輸血技術(shù)規(guī)范規(guī)定）。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗第六節(jié)臨床輸血一、全血輸血全血適應(yīng)證第五章106全血并不全血液離開血循環(huán)要與抗凝保存液混合，發(fā)生了“保存損害”保存液是針對紅細(xì)胞設(shè)計的，4℃只能保存紅細(xì)胞，對其他成分無保存作用血小板離體后需要在22±2℃振蕩條件下保存白細(xì)胞中的粒細(xì)胞是短命細(xì)胞，離體后8小時功能喪失，很難保存凝血因子Ⅷ和Ⅴ不穩(wěn)定，需要在﹣18℃以下保存第五章血型與輸血學(xué)檢驗全血并不全血液離開血循環(huán)要與抗凝保存液混合，發(fā)生了“保存損害107

全血成分保存

血液中的各種主要成分在4攝氏度條件下，在ACD或CPD保養(yǎng)液中的存活時間

紅細(xì)胞CPD中保存28天，ACD中21天

血小板12小時大部分失去活性

白細(xì)胞8小時后喪失功能

V或VIII因子1-3天喪失50%以上的活性

第五章血型與輸血學(xué)檢驗全血成分保存第五章血型與輸血學(xué)108可不輸全血的，不輸全血(1)大部分病人主要缺乏的是血液中的某種成分。(2)血液中的各種成分代償能力不同。(3)大量輸全血可使循環(huán)超負(fù)荷。全血中的血漿可擴充血容量；輸血量過大或速度過快可發(fā)生急性肺水腫；老年人、嬰幼兒及危重患者危險性更大。第五章血型與輸血學(xué)檢驗可不輸全血的，不輸全血(1)大部分病人主要缺乏的是血液中的某109（4）全血輸入越多，“保存損害”產(chǎn)物越多，患者肝腎功能代謝負(fù)擔(dān)越重。

（5）全血容易產(chǎn)生同種免疫，不良反應(yīng)多。全血中有多種復(fù)雜的血型抗原；刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)抗體（同種免疫）；全血輸入越多，不良反應(yīng)也越多。（6）全血內(nèi)所含的成分不濃、不純和不足一個治療劑量，療效差。（7）全血是寶貴的社會資源，盲目輸注全血是對血源的浪費。第五章血型與輸血學(xué)檢驗（4）全血輸入越多，“保存損害”產(chǎn)物越多，患者肝腎功能110

全血和紅細(xì)胞輸注優(yōu)缺點比較——————————————————————————————————全血紅細(xì)胞————————————————————————————————————————————————提高攜氧能力兼擴容以較小的容量提高攜氧能力必須同型輸血同型或相容含全部抗凝保存液抗凝劑隨血漿除去血漿中含較多鉀、氨、乳酸“保存損害產(chǎn)物”隨血漿除去含較多白細(xì)胞、血小板碎屑白細(xì)胞、血小板碎屑較少不能用于分離其它血液成分一血多用————————————————————————————————————————————————

第五章血型與輸血學(xué)檢驗全血和紅細(xì)胞輸注優(yōu)缺點比較第111二、成分輸血概念：將血液各種細(xì)胞、血漿、蛋白分離提純按需輸用。適應(yīng)證1．補充血容量2．提高攜氧能力3．補充凝血因子，糾正出血4．調(diào)節(jié)免疫機能，提高機體抵抗力5．維持膠體滲透壓6．有害物質(zhì)的排除（換血或血漿置換）禁忌證:無明確的輸血適應(yīng)證。第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、成分輸血概念：將血液各種細(xì)胞、血漿、蛋白分離提純按需輸用112成分輸血

成分輸血就是把血液中的各種細(xì)胞成分、血漿和血漿蛋白成分用科學(xué)的方法加以分離、提純，分別制成高純度、高濃度、低容量的制劑，根據(jù)臨床病情需要缺什么、補什么的原則輸用。三級甲等醫(yī)院成分輸血率要求大于70%。第五章血型與輸血學(xué)檢驗成分輸血成分輸血就是把血液中的各種細(xì)胞成分、血113成分輸血的優(yōu)點1．制劑容量小，純度高，治療效果好2．針對性強，不良反應(yīng)少3．減少輸血傳播性疾病的發(fā)生4．便于保存，使用方便5．一血多用，節(jié)約血液資源第五章血型與輸血學(xué)檢驗成分輸血的優(yōu)點1．制劑容量小，純度高，治療效果好第五章血114第五章血型與輸血學(xué)檢驗第五章血型與輸血學(xué)檢驗115紅細(xì)胞懸液

每單位200ml全血盡量移去血漿，加入50ml的添加劑，由于大部分抗凝劑和“保存損害產(chǎn)物”隨血漿除去，所含白細(xì)胞和血小板碎片比全血少，故不良反應(yīng)發(fā)生率也大為減少。添加劑配方有多種，主要成分是：

1．添加了紅細(xì)胞的營養(yǎng)劑（葡萄精、腺膘呤）；

2．添加了紅細(xì)胞膜的穩(wěn)定劑（甘露醇或蔗糖）。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗紅細(xì)胞懸液添加劑配方有多種，主要成分是：

116紅細(xì)胞懸液適應(yīng)證

適用于臨床各科輸血，以提高攜氧能力。失血性貧血溶血性貧血紅細(xì)胞生成障礙引起的貧血第五章血型與輸血學(xué)檢驗紅細(xì)胞懸液適應(yīng)證第五章血型與輸血學(xué)檢驗117

每單位總量為110-120ml，RBC+30ml血漿+15ml抗凝劑，該制品具有與全血同樣的攜氧能力，而容量只有全血的一半，同時抗凝劑、乳酸、鉀、氨比全血少，使之用于心、腎和肝功能不全的患者更為安全。濃縮紅細(xì)胞適應(yīng)癥同懸浮紅細(xì)胞第五章血型與輸血學(xué)檢驗每單位總量為110-120ml，RBC+30ml血118

該制品已去除80%以上的白細(xì)胞和99%的血漿，保留了至少70%的紅細(xì)胞，在洗滌中去除了K+、氨、乳酸、抗凝劑和微小凝塊等，血小板也隨血漿去除，應(yīng)用本制品可明顯減少輸血不良反應(yīng)的發(fā)生率。洗滌紅細(xì)胞

將全血或添加劑紅細(xì)胞在無菌條件下用生理鹽水洗滌3～6次（常規(guī)3次），最后加50ml生理鹽水即制成。第五章血型與輸血學(xué)檢驗該制品已去除80%以上的白細(xì)胞和99%的血漿，保留了119輸入全血或血漿后發(fā)生過敏反應(yīng)的患者自身免疫性溶血性貧血患者高鉀血癥及肝、腎功能障礙需要輸血者由于反復(fù)輸血已產(chǎn)生白細(xì)胞或血小板抗體引起的輸血發(fā)熱反應(yīng)的患者洗滌紅細(xì)胞適應(yīng)癥第五章血型與輸血學(xué)檢驗輸入全血或血漿后發(fā)生過敏反應(yīng)的患者洗滌紅細(xì)胞適應(yīng)癥第五章120血漿

1.新鮮冰凍血漿：

采出的全血于6－8小時內(nèi)將血漿分出，并迅速在－30℃條件下冰凍成塊制成。該制品幾乎含有全部凝血因子。

100ml新鮮冰凍血漿含總蛋白約6g、白蛋白約3.5g、纖維蛋白原約0.3g、其他凝血因子(Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ、ⅩⅢ)約70~100單位。保存期為一年。第五章血型與輸血學(xué)檢驗血漿

第五章血型與輸血學(xué)檢驗121單純凝血因子缺乏的補充(無相應(yīng)凝血因子濃縮劑時)，因大量輸血伴有凝血功能障礙而出血者；肝病患者伴有凝血功能障礙者口服香豆素類抗凝藥物過量引起出血者；血栓性血小板減少性紫癜；治療性血漿置換術(shù)；大面積燒傷；適應(yīng)癥第五章血型與輸血學(xué)檢驗適應(yīng)癥第五章血型與輸血學(xué)檢驗1222.普通冰凍血漿：普通冰凍血漿中缺乏不穩(wěn)定凝血因子（如Ⅴ因子、Ⅷ因子）。-200C以下可保存5年與FFP主要區(qū)別是缺少不穩(wěn)定的凝血因子Ⅴ和Ⅷ，適應(yīng)癥為用于因子Ⅴ和Ⅷ以外的凝血因子缺乏者的替代治療。第五章血型與輸血學(xué)檢驗2.普通冰凍血漿：-200C以下可保存5年第五章血型123冷沉淀

以400ml全血分離出來的血漿制備的冷沉容量為20-30ML，含有因子Ⅷ≥80IU，含纖維蛋白原200-300mg。

冷沉淀是將新鮮冰凍血漿（FFP）置4℃條件下融化，有一部分不易融解的白色沉淀物即為冷沉淀。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗冷沉淀以400ml全血分離出來的血漿制備的冷沉容量124冷沉淀中5種成分①豐富的因子Ⅷ②血管性血友病因子③纖維蛋白原④纖維結(jié)合蛋白⑤因子ⅫⅠ冷沉淀用于：兒童血友病甲,血管性血友病,先天性或獲得性纖維蛋白原缺乏癥患者,也用于手術(shù)后出血,嚴(yán)重外傷及DIC等患者的治療.冷沉淀適應(yīng)癥第五章血型與輸血學(xué)檢驗冷沉淀中5種成分①豐富的因子Ⅷ②血管性血友病因子125血小板單采血小板：每袋200ml～250ml，含血小板≥2.5×1011，RBC≤8×109，

WBC≤5×108。特制血小板保存袋22℃±2℃震蕩保存，可保存5天。

冰凍血小板：單采血小板或濃縮血小板混懸液中加入二甲基亞砜，－80℃冰凍保存一年。血小板回收率70%，急診需要又沒有單采血小板或濃縮血小板時應(yīng)用。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗血小板第五章血型與輸血學(xué)檢驗126（1）血小板減少，伴有嚴(yán)重出血者；（2）血小板功能異常，伴有嚴(yán)重出血者，如血小板無力癥、阿司匹林過量等；（3）預(yù)防性血小板輸注。占全部血小板輸用量的80%以上.目的是預(yù)防顱內(nèi)出血等嚴(yán)重出血合并癥。血小板輸注適應(yīng)癥第五章血型與輸血學(xué)檢驗（1）血小板減少，伴有嚴(yán)重出血者；血小板輸注適應(yīng)癥第五章127新一代成分輸血非替補性輸血治療性成分輸血造血干細(xì)胞移植第五章血型與輸血學(xué)檢驗新一代成分輸血非替補性輸血第五章血型與輸血學(xué)檢驗128三、自體輸血概念：采集自身血液或血液成分，經(jīng)保存處理需時回輸。優(yōu)點1.避免輸血傳播的疾病和不良反應(yīng)。2.避免同種異體輸血產(chǎn)生的同種免疫反應(yīng)。3.反復(fù)放血可刺激紅細(xì)胞再生，促進患者術(shù)后造血速度加快。4.避免異體血液對受血者免疫功能的抑制。5.緩解血源緊張的矛盾。第五章血型與輸血學(xué)檢驗三、自體輸血概念：采集自身血液或血液成分，經(jīng)保存處理需時回輸129自體輸血種類根據(jù)血液來源和保存方法主要分為：1.貯存式自體輸血2.稀釋式自體輸血3.回收式自體輸血第五章血型與輸血學(xué)檢驗自體輸血種類根據(jù)血液來源和保存方法主要分為：第五章血型與130六、輸血不良反應(yīng)１.概念：２.分類：１.按輸血反應(yīng)發(fā)生的時間，分為急性反應(yīng)和遲發(fā)性反應(yīng)。２.按輸血反應(yīng)發(fā)生的機制，分為免疫性反應(yīng)和非免疫性反應(yīng)。第五章血型與輸血學(xué)檢驗六、輸血不良反應(yīng)１.概念：第五章血型與輸血學(xué)檢驗131七、常見輸血不良反應(yīng)1.溶血反應(yīng)：（1）急性溶血性輸血反應(yīng)（AHTR），24h內(nèi)，多為血管內(nèi)溶血，（2）遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)（DHTR），2周內(nèi)，多為血管外溶血，2.非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)（FNHTR）3.過敏反應(yīng)4.輸血相關(guān)性移植物抗宿主?。═A-GVHD），輻照血液預(yù)防發(fā)生5.輸血相關(guān)性急性肺損傷（TRALI）第五章血型與輸血學(xué)檢驗七、常見輸血不良反應(yīng)1.溶血反應(yīng)：第五章血型與輸血學(xué)檢132八、輸血傳播疾病病毒性疾病:1.病毒性肝炎:乙肝、丙肝2.獲得性免疫缺陷綜合征（艾滋病）3.巨細(xì)胞病毒感染梅毒感染:寄生蟲：瘧疾、弓形體病細(xì)菌感染性疾病第五章血型與輸血學(xué)檢驗八、輸血傳播疾病病毒性疾病:第五章血型與輸血學(xué)檢驗133現(xiàn)行對策推行無償獻血嚴(yán)格篩選血液提倡科學(xué)合理用血社會保障制度根本對策血液制品病毒滅活血液制品替代品－人造血的研究第五章血型與輸血學(xué)檢驗現(xiàn)行對策推行無償獻血第五章血型與輸血學(xué)檢驗134第七節(jié)發(fā)展趨勢輸血領(lǐng)域的新觀點1.全血不全2.急性出血并不需要補充全血3.輸注保存血比新鮮血更安全4.輸血對病人并不是好處多、害處少5.去白細(xì)胞輸血合理用血和成分輸血自體輸血造血干細(xì)胞移植提高輸血安全性第五章血型與輸血學(xué)檢驗第七節(jié)發(fā)展趨勢輸血領(lǐng)域的新觀點第五章血型與輸血學(xué)檢驗135

血型與輸血學(xué)檢驗

第五章血型與輸血學(xué)檢驗

血型與輸血學(xué)檢驗

第五章血型與輸血學(xué)檢驗136第一節(jié)紅細(xì)胞血型第二節(jié)紅細(xì)胞血型檢測技術(shù)第三節(jié)白細(xì)胞血型第四節(jié)血小板血型第五節(jié)新生兒溶血病第六節(jié)臨床輸血第七節(jié)發(fā)展趨勢主要內(nèi)容第五章血型與輸血學(xué)檢驗主要內(nèi)容第五章血型與輸血學(xué)檢驗137血型、血型抗原與抗體

血型是人類血液的主要特征之一，表達了血液各種成分的抗原型別和遺傳性狀。血型抗原分類1.紅細(xì)胞血型抗原:ABO、Rh、MNS等2.白細(xì)胞血型抗原:HLA

、

CD等3.血小板血型抗原:HPA等4.其他血型抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗血型、血型抗原與抗體138血型主要指紅細(xì)胞血型是指紅細(xì)胞膜上特異性抗原的類型。按人體血液中紅細(xì)胞所含抗原及血漿中抗體不同而分為各種型別。第五章血型與輸血學(xué)檢驗第五章血型與輸血學(xué)檢驗139血型抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗血型抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗140血型抗原的化學(xué)本質(zhì)

種類：糖蛋白、脂蛋白、糖脂和蛋白質(zhì)四種糖蛋白：唾液中ABH抗原、Lewis、MNSs、HLA脂蛋白：Rh抗原糖脂：紅細(xì)胞上、血漿中ABH抗原、P血型抗原多糖類抗原刺激――產(chǎn)生IgM抗體蛋白類抗原刺激――產(chǎn)生IgG抗體第五章血型與輸血學(xué)檢驗血型抗原的化學(xué)本質(zhì)種類：糖蛋白、脂蛋白、糖脂和蛋白質(zhì)四種141完全抗體(completeantibody)

在血型抗原物質(zhì)刺激下形成，與紅細(xì)胞生理鹽水懸液混合后能引起紅細(xì)胞凝集的特異性抗體，主要是IgM抗體。

血型抗體不完全抗體(low-orderantibody)

只可使紅細(xì)胞致敏而不能使紅細(xì)胞凝集的抗體，主要是IgG抗體。血型抗體與紅細(xì)胞血型抗原結(jié)合后，體內(nèi)產(chǎn)生血管內(nèi)或血管外溶血。體外產(chǎn)生凝集、沉淀或溶血反應(yīng)。血型抗體(Bloodgroupantibody)在血型抗原物質(zhì)刺激下形成的免疫球蛋白。紅細(xì)胞血型抗體可分為完全抗體和不完全抗體。第五章血型與輸血學(xué)檢驗完全抗體(completeantibody)

142第一節(jié)紅細(xì)胞血型是紅細(xì)胞上的遺傳性標(biāo)志。包括ABO、Rh、MNS、P、Lutheran、Kell等。第五章血型與輸血學(xué)檢驗第一節(jié)紅細(xì)胞血型是紅細(xì)胞上的遺傳性標(biāo)志。包括ABO、Rh143一、ABO血型系統(tǒng)

1901年，Landsteiner（1930年獲諾貝爾生理和醫(yī)學(xué)獎，“血型之父”）發(fā)現(xiàn)了人類的第一個血型系統(tǒng)—ABO血型系統(tǒng)，根據(jù)人紅細(xì)胞表面含抗原成分不同分成A、B、O和AB四種血型。第五章血型與輸血學(xué)檢驗一、ABO血型系統(tǒng)1901年，Landsteine144血型分型：根據(jù)紅細(xì)胞膜上是否存在凝集原Ａ與凝集原Ｂ，血漿中是否存在對應(yīng)抗體，將血液分為四種血型。

血型

抗原

抗體AA抗BBB抗AABA、B無O無抗A、抗B第五章血型與輸血學(xué)檢驗血型分型：根據(jù)紅細(xì)胞膜上是否存在凝集原Ａ與凝集原Ｂ，血漿中是145ABO血型系統(tǒng)遺傳：“三復(fù)等位基因”學(xué)說：第九號染色體上A、B、O三復(fù)等位基因控制A、B基因：顯性基因O基因：隱性基因父母雙方各遺傳給子代一個基因，具6個基因型，4種表型。第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型系統(tǒng)遺傳：第五章血型與輸血學(xué)檢驗146第五章血型與輸血學(xué)檢驗第五章血型與輸血學(xué)檢驗147

基因型表型OOOAO,AAABO,BBBABAB第五章血型與輸血學(xué)檢驗基因型148ABO血型的遺傳父親母親

表型AB可能的基因型？？子女可能的基因型？子女可能的表型？第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型的遺傳父親149ABO抗原的生物合成基因ABO及H控制著A、B抗原的形成，O基因為無效基因.

第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO抗原的生物合成基因ABO及H控制著A、B抗原的形成，O150酶A+N-乙酰半乳糖胺A抗原H抗原酶B+D-半乳糖B抗原基因H

基因H

基因BH抗原酶A=α-N-乙酰半乳糖胺基轉(zhuǎn)移酶，酶B=D-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶基因A第五章血型與輸血學(xué)檢驗酶A+N-乙酰半乳糖胺A抗原H抗原酶B+D-半乳糖B抗原基151基因H

H抗原H物質(zhì)上既不連接N-乙酰半乳糖胺，又不連接D-半乳糖，則僅有H活性，沒有A、B抗原（為O型）第五章血型與輸血學(xué)檢驗基因HH抗原H物質(zhì)上既不連接N-乙酰半乳糖胺，又不連接D-半152Biosynthesisofantigen：

basicmaterialH酶

HantigenA酶B酶

Aantigen

Bantigen=N-乙酰半乳糖胺=D-半乳糖=N-乙酰葡萄糖胺=L-巖藻糖第五章血型與輸血學(xué)檢驗Biosynthesisofantigen：=N-乙酰半153現(xiàn)在我們知道A抗原和B抗原的合成是以H物質(zhì)為前提的,O型紅細(xì)胞也有H物質(zhì)但不能產(chǎn)生A抗原和B抗原基因酶合成抗原在ABO血型物質(zhì)合成過程中：控制控制第五章血型與輸血學(xué)檢驗現(xiàn)在我們知道A抗原和B抗原的合成是以H物質(zhì)為前提的,154首先是H基因控制的L-巖藻糖轉(zhuǎn)移酶的合成，它使1分子的巖藻糖加在血型前體物質(zhì)上，形成H物質(zhì)(H抗原)：

IB基因控制合成B型轉(zhuǎn)移酶，它將一個D-半乳糖分子加在H物質(zhì)末端糖殘基上，形成B抗原。

IA基因合成A型轉(zhuǎn)移酶，它使一個N-乙?；肴樘前芳釉贖物質(zhì)末端糖殘基上，形成A抗原。第五章血型與輸血學(xué)檢驗IB基因控制合成B型轉(zhuǎn)移酶，它將一個D-半乳糖分子加在H物質(zhì)155A、B兩種抗原的差異，只在于一個單糖殘基的不同。Io基因為無效等位基因、所以O(shè)型紅細(xì)胞只有H物質(zhì)，不能由此形成A抗原或B抗原.AB型紅細(xì)胞受IAIB基因控制，能產(chǎn)生A和B兩種抗原。第五章血型與輸血學(xué)檢驗第五章血型與輸血學(xué)檢驗156ABO血型系統(tǒng)的分子基礎(chǔ)1.O型個體只能產(chǎn)生H物質(zhì)(孟買型例外)；2.H物質(zhì)末端增加一分子的N-乙酰半乳糖胺（GalNAc)即成為A抗原；3.H物質(zhì)末端增加一分子的D-半乳糖(Gal)即成為B抗原。第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型系統(tǒng)的分子基礎(chǔ)1.O型個體只能產(chǎn)生H物質(zhì)(孟買157胎兒在5～6周已可測出，18個月完全表達。存在于多種細(xì)胞的細(xì)胞膜上和其他體液中。ABO血型發(fā)生及分布胎兒可產(chǎn)生ABH抗原出生時抗原的抗原性弱5-10歲時達高峰老年的抗原性下降第五章血型與輸血學(xué)檢驗胎兒在5～6周已可測出，18個月完全表達。存在于多種158ABO分泌型：分泌型和非分泌型受控于Sese基因ABH抗原不僅存在許多細(xì)胞上，還可分泌于許多體液中，體液中的可溶性ABH抗原又稱為“血型物質(zhì)”。凡體液中有血型物質(zhì)者為分泌型，無血型物質(zhì)者為非分泌型血型物質(zhì)第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO分泌型：分泌型和非分泌型受控于Sese基因血型物質(zhì)第五159血型物質(zhì)存在的意義：

①輔助鑒定血型②中和ABO血型系統(tǒng)中的“天然抗體”③檢查羊水，預(yù)測胎兒ABO血型等。第五章血型與輸血學(xué)檢驗血型物質(zhì)存在的意義：①輔助鑒定血型第五章血型與輸血學(xué)160ABO亞型紅細(xì)胞上的A抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO亞型紅細(xì)胞上的A抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗161亞型是指同一血型抗原的結(jié)構(gòu)和性能或抗原位點數(shù)有一定差異所引起的變化。ABO血型系統(tǒng)中以A亞型最多見，A抗原的兩個主要亞型是A1和A2

。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗亞型是指同一血型抗原的結(jié)構(gòu)和性能或抗原位點數(shù)有一定差異所引起162檢查亞型的目的防止誤定血型，避免輸血反應(yīng)①A1與A2之間輸血可能引起輸血反應(yīng)②亞型抗原性弱，易漏檢或誤定第五章血型與輸血學(xué)檢驗檢查亞型的目的防止誤定血型，避免輸血反應(yīng)第五章血型與輸血1631.孟買型：基因型：hh，表型：Oh，紅細(xì)胞及體液無ABH抗原,血清中有其抗體2.B（A）型：紅細(xì)胞上同時存在B抗原和很弱的A抗原，容易誤判為AxB型。A（B）型相仿。其他特殊類型的ABO亞型

第五章血型與輸血學(xué)檢驗其他特殊類型的ABO亞型第五章血型與輸血學(xué)檢驗1641952年在印度孟買發(fā)現(xiàn)一種特殊的血型．這種紅細(xì)胞既無A抗原和B抗原，也無H抗原。他們的基因型為hh，不能產(chǎn)生H物質(zhì)，即使有IA和(或)IB基因，也不能形成A抗原或(和)B抗原．但IAIB基因可向后代遺傳，這種特殊的型,稱為孟買型孟買型第五章血型與輸血學(xué)檢驗1952年在印度孟買發(fā)現(xiàn)一種特殊的血型．這種紅細(xì)胞孟買型第五165孟買型首先在孟買發(fā)現(xiàn)而得名沒有H抗原的O型基因型為hh，表現(xiàn)型為Oh紅細(xì)胞和唾液中無H、A和B抗原，但血清中含有抗A、抗B和高效價的抗H抗體除與AB型紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)外，還可與O型紅細(xì)胞凝集如輸血，只輸Oh同型血第五章血型與輸血學(xué)檢驗孟買型首先在孟買發(fā)現(xiàn)而得名沒有H抗原的O型第五章血型與輸166ABO血型系統(tǒng)抗體

1.抗A、抗B抗體2.抗A、B抗體O型人血清中不僅有抗A、抗B抗體，還含有一種抗A、B抗體。第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型系統(tǒng)抗體1.抗A、抗B抗體第五章血型與輸血學(xué)167出生后3~6個月才開始出現(xiàn)，5~10歲達高峰。產(chǎn)生抗體的功能可持續(xù)終身，效價隨年齡增高而逐漸降低。新生兒血清中可檢測出的抗體常是來自母體的IgG，偶爾也有胎兒自身產(chǎn)生的IgM。ABO血型抗體滴度變化大：O型人抗A滴度高于B型人B型人的抗A又高于A型人中的抗B第五章血型與輸血學(xué)檢驗出生后3~6個月才開始出現(xiàn)，5~10歲達高峰。第五章血型168天然抗體:是指沒有可察覺抗原刺激產(chǎn)生的“抗體”，（菌類、花粉塵埃等）多主要存在于ABO、MN、P和Lewis血型系統(tǒng)中，以IgM和IgG共同存在，A型和B型血型抗體多數(shù)以IgM為主，O型人在成年后以IgG占優(yōu)勢，特別是女性免疫抗體：指有可查抗原刺激而產(chǎn)生，常見有輸血、妊娠和注射3種方式。規(guī)則抗體；指ABO血型系統(tǒng)有規(guī)律產(chǎn)生抗A和抗B，符合Landsteiner規(guī)則是反定型的依據(jù)

第五章