蛋白酶活性測(cè)定方法_第1頁(yè)
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蛋白酶活性的測(cè)定方法(GB/T23527-原儀器和設(shè)恒溫水浴:精度pH0.01pH試劑和溶乳酸緩沖液(pH=3.0)甲液:稱取乳酸(80%-90%)10.6g,1000ml。乙液:稱取乳酸鈉(70%)16g,1000ml.8ml,1ml,0.05mol/L磷酸緩沖液的(pH=7.5)適用于中性蛋白0.5g,硼酸緩沖液(pH=10.5)4.0g,500ml,400ml,1L0.4mol/L42.4g,0.4mol/L65.40.5mol/L2gNaOH10.00mg/ml1.000g,0.001g,0.5mol/L2-380ml,100ml100μg/ml60ml100ml,1.00mg/ml1.00mg/ml10.00ml,0.1mol/L100ml,100.0μg/mlL1.000g1ml100ml100分析步0120123456789012345678998765432100取100μg/ml(ml蒸餾水(ml(μ1.00ml(0.4mol/L溶液5.00ml試劑使用溶液1.00ml,置于40+0.2℃水浴中顯色20min,680nm,0OD1(μg),即為吸光常數(shù)KK95~10040±0.2℃41ml1ml40℃10min,4.3.5各取1ml濾液,分別加0.4mol/L的Na2CO35ml、試劑1ml。40℃20min。680nmOD30℃±0.2℃計(jì)酶活定1g體酶粉(或1ml體酶),在40℃(酸性pH=3.0、中性pH=7.5、堿性pH=10.5)條件下,1min水解酪素產(chǎn)生1μg酪氨酸為一個(gè)酶單蛋白酶的=A×K

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