免疫組化法用于腫瘤患者病理診斷的效果以及與常規(guī)技術(shù)的對比論文（共2篇）

免疫組化法用于腫瘤患者病理診斷的效果以及與常規(guī)技術(shù)的對比論文〔共2篇〕第一篇：免疫組化法用于腫瘤患者病理診斷的效果評價腫瘤是臨床常見疾病，近年來的發(fā)病率逐步增高。無論是良性腫瘤還是惡性腫瘤，早期臨床癥狀均不典型，尤其是惡性腫瘤患者往往在中晚期能力確診，此時已經(jīng)錯過了最佳治療機(jī)會，影響了患者的預(yù)后[1]。因而，對于早期腫瘤的診斷是當(dāng)前臨床所關(guān)注的一大重點(diǎn)。當(dāng)前早期腫瘤尚缺乏理想的診斷方案，慣例方案包含CT、超聲彈性成像、MRI等影像學(xué)檢查，但此類方案的漏診、誤診率較高[2]。病理診斷作為腫瘤診斷的主要檢測標(biāo)準(zhǔn)，固然具有精確度高的特點(diǎn)，但具有一定損傷性，患者體驗(yàn)較差，除此之外，對于病理診斷中的不同技術(shù)應(yīng)用價值尚存在爭議。一般的病理檢驗(yàn)多以活檢穿刺診斷為主，該方案固然能夠確定疾病類型及分期，但患者體驗(yàn)較差[3]。隨著醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步，免疫組化技術(shù)融入了抗原修復(fù)、敏感檢測及自動免疫染色系統(tǒng)，不只提升了診斷精確率，更改善了檢查體驗(yàn)。本文就免疫組化法用于腫瘤患者病理診斷的臨床效果進(jìn)行了研究分析，現(xiàn)報告如下。1資料與方法1.1一般資料研究對象選取2014年1月～2015年4月本院收治的112例腫瘤患者，男61例，女51例，年齡25～70歲，平均年齡〔43.9±11.4〕歲；肺癌22例，肝癌37例，轉(zhuǎn)移性腫瘤51例，血管瘤2例。根據(jù)病理診斷方案不同將患者分為觀察組和對照組，各56例。1.2方法1.2.1對照組采取穿刺活檢法進(jìn)行診斷，根據(jù)影像學(xué)顯示的病灶部位進(jìn)行穿刺，超聲下取出組織進(jìn)行活檢，與標(biāo)準(zhǔn)組織進(jìn)行比照。1.2.2觀察組采取免疫組化法進(jìn)行診斷，重要試劑包含脫水劑、固定劑、蒸餾水、透明液、浸蠟液、樹膠等。取患者0.2cm×1.0cm×2.0cm的1塊組織置于甲醛溶液中充足浸泡2h，置于透明液1h，之后用脫水劑脫水1h，置于浸蠟液1h，埋于石蠟中慣例切片，層厚2μm，將組織切片進(jìn)行免疫組化染色，在37℃下置于3%過氧化氫溶液中孵育10min，蒸餾水沖刷3min，高壓修復(fù)2min，PBS洗滌5min，常溫孵育2h，PBS洗滌5min，參加UltrasenSitiveSP試劑，孵育后DBA顯色，樹膠封固。1.3觀察指標(biāo)及評定標(biāo)準(zhǔn)比照兩組檢測結(jié)果，包含甲胎蛋白、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3等，染色呈棕黃色為陽性，否則為陰性。采取問卷調(diào)查形式了解患者的診斷體驗(yàn)，重要包含心理顧慮、生理問題、信任感3個維度，每個維度10個條目，每個條目根據(jù)患者回答情況賦分0～10分，分值越高這說明患者對該檢驗(yàn)方案的體驗(yàn)度越好，總分≥200分為滿意。1.4統(tǒng)計學(xué)方法采取SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差〔x-±s〕表示，采取t檢驗(yàn)；計數(shù)資料以率〔%〕表示，采取χ2檢驗(yàn)。P0.05表示差別具有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1陽性率比照觀察組染色后細(xì)胞構(gòu)造為變異型，甲胎蛋白及磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3異常表達(dá)48例，陽性率85.7%、滿意度82.1%，對照組的陽性率50.0%、滿意度57.1%，兩組比照差別具有統(tǒng)計學(xué)意義〔P0.05〕。見表1。2.2患者體驗(yàn)比照診斷體驗(yàn)調(diào)查結(jié)果顯示，觀察組患者的心理顧慮、生理問題、信任感評分均顯著高于對照組，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義〔P0.05〕。見表2。3討論隨著醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步，免疫組化技術(shù)被越來越廣泛的應(yīng)用于腫瘤患者的診斷，并獲得了理想的效果。免疫組化技術(shù)診斷的精確率必需以可靠的免疫組化切片為基礎(chǔ)，因而在診斷中要加強(qiáng)醫(yī)生和技術(shù)人員之間的協(xié)調(diào)性，確保免疫組化切片順利完成，但由于技術(shù)仍不夠成熟，當(dāng)前免疫組化技術(shù)也不能排除假陽性和假陰性的幾率[4]。為了提升診斷精確率，免疫組化法的使用經(jīng)過中要遵守下面幾點(diǎn)：①固定，在對組織進(jìn)行固定時要采取10%的甲醛固定液，能夠更好、更長時間的固定組織，能夠確保目的組織3個月內(nèi)具有穩(wěn)定的陽性率[5]；②烤片，在烤片經(jīng)過中要留意溫度的把握，通常在65℃左右的恒溫箱中進(jìn)行加熱烤片，但要避免溫度過高；③修復(fù)，對目的組織進(jìn)行抗原修復(fù)的時間應(yīng)該控制在8min，然后讓切片天然冷卻并染色；④染色，既要對組織進(jìn)行反復(fù)染色，又要避免染色過深影響觀察。而免疫組化法的基本機(jī)制依靠于酶促反應(yīng)，重要是通過酶聯(lián)反應(yīng)來使過氧化物酶構(gòu)成有顏色的復(fù)合物，但是由于腫瘤類型較多，不同組織標(biāo)本也存在抗原含量的差別，因而顯色時間不同[6]，要充足顯色能力便于精確觀察。本次研究結(jié)果顯示，觀察組染色后細(xì)胞構(gòu)造為變異型，甲胎蛋白及磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3異常表達(dá)48例，陽性率85.7%、滿意度82.1%，顯著優(yōu)于對照組的陽性率50.0%、滿意度57.1%〔P0.05〕。免疫組化法與活檢穿刺法相比具有明顯的優(yōu)勢，在診斷經(jīng)過中能清楚明晰的觀察抗原在組織中的分布情況，并對抗原進(jìn)行定性和定量研究，并對抗原、抗體的特異性結(jié)合物進(jìn)行標(biāo)記來確定細(xì)胞內(nèi)的抗原[7]。當(dāng)前應(yīng)用較多的標(biāo)本包含細(xì)胞標(biāo)本和組織標(biāo)本，并采取石蠟切片觀察，石蠟切片能夠便于長時間保存，在經(jīng)過中使用甲醛固定能夠進(jìn)行修復(fù)，確保了診斷的精確性，而且免疫組化法的檢驗(yàn)經(jīng)過不會對患者造成傷害，有效消除了患者的負(fù)面情緒，提升了患者的配合度，從本次研究數(shù)據(jù)來看，觀察組患者的心理顧慮、生理問題、信任感評分均顯著高于對照組〔P0.05〕，說明免疫組化法的診斷體驗(yàn)更好。綜上所述，免疫組化法應(yīng)用于腫瘤患者的病理診斷臨床應(yīng)用價值更高層次，患者體驗(yàn)度更好，值得在臨床上推廣和應(yīng)用。中國實(shí)用醫(yī)藥2016年11期秦維香張曉艷馬媛媛第二篇：免疫組化技術(shù)和慣例技術(shù)在腫瘤病理診斷中的效果比照腫瘤是臨床上常見的疾病，這種疾病發(fā)病率較高，且隨著人們生活節(jié)拍的加快，其發(fā)病率出現(xiàn)上升趨勢，患者發(fā)病后臨床癥狀不顯著，患者一旦確診已經(jīng)是中、晚期，進(jìn)而錯過了最佳治療機(jī)會[1]。當(dāng)前，臨床上對于腫瘤尚缺乏理想的診斷方法，慣例方法更多的是以CT、磁共振成像等診斷方法為主，這種方法固然能夠確診，但是誤診率或漏診率較高。近年來，病理診斷在腫瘤診斷中應(yīng)用廣泛，且效果理想，但是臨床上對于病理診斷中不同技術(shù)尚存在較大的爭議[2]。慣例技術(shù)重要以活檢穿刺診斷為主，這種方法固然能夠確定病灶類型、分期等，但是患者痛苦較大。當(dāng)下，免疫組化技術(shù)在病例診斷中開始使用，且該技術(shù)已經(jīng)融合了抗原修復(fù)技術(shù)、自動免疫染色系統(tǒng)以及敏感檢測系統(tǒng)等[3]。為了討論免疫組化技術(shù)和慣例技術(shù)在病理診斷中的臨床診斷效果，對2013年4月～2014年4月我院收治的56例腫瘤患者的資料進(jìn)行分析。1資料與方法1.1一般資料對我院收治的56例腫瘤患者的資料進(jìn)行分析，其中15例為肝癌，35例為轉(zhuǎn)移性腫瘤，4例為內(nèi)膽管癌，2例為血管瘤。根據(jù)不同病理診斷方法將患者分為對照組和實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組28例，男11例，女17例，年齡24.5～71.3歲，平均〔45.6±2.4〕歲，患者從發(fā)病到入院診斷時間為1.1～7.9個月，平均〔4.2±1.1〕個月；對照組28例，其中男25例，女3例，年齡25.3～74.7歲，平均〔47.4±0.9〕歲，患者從發(fā)病到入院診斷時間為1.2～7.8個月，平均〔4.4±1.6〕個月。兩組患者年齡、病程等比較差別無統(tǒng)計學(xué)意義〔P0.05〕，具有可比性。患者對診斷方案、護(hù)理辦法等均知情同意。1.2方法1.2.1對照組對照組采取活檢穿刺法診斷，根據(jù)病灶類型、病灶位置等進(jìn)行針對性的穿刺活檢，活檢經(jīng)過在超聲下進(jìn)行，取出組織與標(biāo)準(zhǔn)組織進(jìn)行比較[4]。1.2.2實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)組采取免疫組化技術(shù)診斷，所用試劑重要包含：甲醛固定液、透明液、脫水液、蒸餾水、浸蠟液、樹膠及UltrasenSitiveTMSP試劑[5]。詳細(xì)診斷操作為：取一塊患者組織，組織大小為1cm×2cm×0.2cm。將其充足浸泡在甲醛溶液中，浸泡時間控制在2h，然后采取透明液透明1h，脫水液脫水1h，浸蠟液浸泡1h，將組織埋在石蠟內(nèi)，慣例切片，厚度控制在2μm；將切片好的組織進(jìn)行免疫組化染色，采取3%過氧化氫溶液在37℃孵育10min，采取蒸餾水沖刷3min，采取高壓鍋修復(fù)2min〔溫度控制在110℃〕，采取PBS洗滌5min，常溫下孵育2h，使用PBS洗滌，參加UltrasenSitiveTMSP試劑，孵育后DBA顯色，最后使用樹膠進(jìn)行封固[6-7]。1.3觀察指標(biāo)對檢測結(jié)果進(jìn)行判定，包含甲胎蛋白〔AFP〕、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3〔glypican-3〕等，組織免疫組化技術(shù)染色呈棕黃色為陽性，反之則為陰性[8]。采取我院自擬問卷調(diào)查表對患者診斷后相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行評分，包含心理顧慮、生理問題、信任感等，評分越高，表示檢查方法對患者產(chǎn)生的影響越小，檢查依從性越高。1.4統(tǒng)計學(xué)方法采取統(tǒng)計軟件SPSS16.0對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差〔x±s〕表示，采取t檢驗(yàn)。計數(shù)資料以率表示，采取χ2檢驗(yàn)。以P0.05為差別有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1兩組診斷陽性率及滿意度的比較實(shí)驗(yàn)組免疫組化染色后，患者細(xì)胞構(gòu)造為變異型，AFP及glypican-3表達(dá)異常者為24例，陽性率為85.7%，顯著高于對照組〔14例，50.0%〕；實(shí)驗(yàn)組滿意率為82.1%，顯著高于對照組〔57.1%〕，差別均有統(tǒng)計學(xué)意義〔P0.05〕〔表1〕。表1兩組診斷陽性率及滿意度的比較[n〔%〕]2.2兩組診斷后相關(guān)評分的比較實(shí)驗(yàn)組診斷后心理顧慮、生理問題、信任感評分均顯著高于對照組〔P0.05〕〔表2〕。表2兩組診斷后相關(guān)評分的比較〔分，x±s〕3討論近年來，免疫組化技術(shù)被廣泛應(yīng)用于腫瘤患者病理診斷中，且效果理想[9-10]。本研究顯示，實(shí)驗(yàn)組免疫組化染色后，患者細(xì)胞構(gòu)造為變異型，AFP及glypican-3表達(dá)異常者為24例，陽性率為85.7%，顯著高于對照組〔14例，50.0%〕〔P0.05〕；實(shí)驗(yàn)組滿意率為82.1%，顯著高于對照組〔57.1%〕。免疫組化技術(shù)和慣例技術(shù)相比優(yōu)勢較多，該方法在診斷經(jīng)過通過觀察組織切片中抗原的數(shù)量級在組織中的分布情況，對抗原進(jìn)行定位、定性以及定量的研究，由于抗原和抗體特異性結(jié)合，因而，臨床上通過免疫組化來標(biāo)記抗體使其顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)的抗原[11]。IHC所用標(biāo)本重要為兩大類：組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本，其中制造組織標(biāo)本中最常用、最基本的方法就是石蠟切片。石蠟切片對于組織形態(tài)保存好，愈加有利于各種染色的對照觀察，有利于切片組織長時間保存；同時，石蠟切片經(jīng)過中使用的甲醛固定劑對組織內(nèi)的抗原暴露能夠產(chǎn)生一定的影響，能夠?qū)η衅M織進(jìn)行修復(fù)[12]。而且，免疫組化診斷技術(shù)的使用并不會對患者產(chǎn)生傷害，能夠消除患者內(nèi)心診斷前的負(fù)面心理，提升患者診斷配合率。為了有效提升診斷正確率，降低假陽性率的發(fā)生，免疫組化技術(shù)使用經(jīng)過中必需嚴(yán)格遵守下面步驟操作。①組織固定：對收集組織固定時重要使用10%中性緩沖甲醛固定液，這種固定液和其他固定液相比具有固定好、固定時間久長等優(yōu)點(diǎn)，而且組織3個月內(nèi)陽性率比較穩(wěn)定。②烤片：對組織進(jìn)行烤片時應(yīng)該放置在適宜的溫度，通常放在60～68℃的恒溫箱中進(jìn)行加熱，加熱時要避免溫度過高[13]。③抗原修復(fù)：對組織進(jìn)行抗原修復(fù)時應(yīng)該控制修復(fù)時間在8min，然后斷開，讓切片天然冷卻，然后開始染色。④染色：免疫組化技術(shù)進(jìn)行染色時應(yīng)該對蘇木精進(jìn)行反復(fù)染色，避免染色顏色過深，影響診斷結(jié)果。同時，免疫組化技術(shù)顯色屬于是一種化學(xué)反應(yīng)——酶促反應(yīng)，該反應(yīng)能夠和抗原-抗體復(fù)合物中的堿性磷酸酶以及過氧化物酶等發(fā)生反應(yīng)，進(jìn)而構(gòu)成有顏色的復(fù)合物，并在組織和細(xì)胞抗原時間進(jìn)行沉淀。但是，由于腫瘤類型相對較多，不同組織標(biāo)原來源不同，其抗原的含量也不同，顯色反應(yīng)時間上會存在差別[14]。因而，免疫組化技術(shù)在進(jìn)行染色時應(yīng)該留意下面幾個方面：①染色經(jīng)過中必需堅持切片處于潮濕狀況；②孵育時應(yīng)該嚴(yán)格控制孵育盒中蒸餾水量；③孵育時應(yīng)該保證孵育盒整體的平整，保證抗體液體均勻，避免抗體液體流入組織內(nèi)，降低假陰性的發(fā)生率[15]。同時，臨床上采取免疫組化技術(shù)診斷時能夠消除患者內(nèi)心的恐懼、害怕心理，降低患者病理診斷時的風(fēng)險，提升患者診斷依從性[16]。本次研究中，實(shí)驗(yàn)組診斷后心理顧慮、生理問題、信任感評分均顯著高于對照組〔P0.05〕。筆者以為，免疫染