齊魯醫(yī)學(xué)流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用

流式細(xì)胞術(shù)

及其科研應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁(yè)!流式細(xì)胞儀的原理流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁(yè)!流式細(xì)胞術(shù)的基本概念流式細(xì)胞術(shù)（FlowCytometry,簡(jiǎn)稱FCM）是一種可以快速、準(zhǔn)確、客觀，并且同時(shí)檢測(cè)單個(gè)微粒（通常是細(xì)胞）的多項(xiàng)特性，并加以定量的技術(shù)，同時(shí)可以對(duì)特定群體加以分選研究對(duì)象為生物顆粒，如各種細(xì)胞、微生物及人工合成微球等研究的微粒特性包括多種物理及生物學(xué)特征，并加以定量流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁(yè)!流式細(xì)胞儀的檢測(cè)范圍細(xì)胞結(jié)構(gòu)細(xì)胞大小細(xì)胞粒度細(xì)胞表面面積核漿比例DNA含量與細(xì)胞周期RNA含量蛋白質(zhì)含量細(xì)胞功能細(xì)胞表面/胞漿/核的特異性抗原細(xì)胞活性細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子酶活性激素結(jié)合位點(diǎn)細(xì)胞受體流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁(yè)!散射光信號(hào)RightAngleLightDetector

CellComplexitySSCForwardLightDetector

CellSurfaceArea

FSCIncidentLightSource前向角散射光（FSC,ForwardScatter）

細(xì)胞相對(duì)大小及其表面積

側(cè)向角散射光（SSC,SideScatter）

細(xì)胞粒度及細(xì)胞內(nèi)相對(duì)復(fù)雜性LaserFALSSensor流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁(yè)!流式細(xì)胞儀的檢測(cè)信號(hào)熒光信號(hào)使用熒光標(biāo)記的單克隆抗體染色，做多色分析熒光信號(hào)的強(qiáng)弱，反映了細(xì)胞抗原的表達(dá)含量流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁(yè)!數(shù)據(jù)分析直方圖分析流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁(yè)!數(shù)據(jù)分析等高圖和密度圖分析流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁(yè)!流式細(xì)胞儀的應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁(yè)!流式細(xì)胞儀的臨床應(yīng)用(免疫)淋巴細(xì)胞免疫分型淋巴細(xì)胞亞群分析CD4絕對(duì)計(jì)數(shù)HIV的診斷與研究淋巴細(xì)胞CD4/CD8分析CD4絕對(duì)計(jì)數(shù)T細(xì)胞活化細(xì)胞移植的交叉配型和免疫狀態(tài)監(jiān)測(cè)免疫功能和免疫調(diào)控的研究淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的活化檢測(cè)細(xì)胞因子的檢測(cè)HLA-B27檢測(cè)流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁(yè)!流式細(xì)胞儀的臨床應(yīng)用(腫瘤)細(xì)胞周期分析DNA非整倍體的出現(xiàn)可能是癌前病變發(fā)生早期癌變的一個(gè)重要標(biāo)志在L&L病理形態(tài)學(xué)不能做出診斷前可提供確切診斷信息DNA非整倍體的交界瘤應(yīng)按惡性對(duì)待形態(tài)學(xué)表現(xiàn)良性的腫瘤出現(xiàn)非整倍體提示惡變可能DNA指數(shù)可作為判斷間葉組織腫瘤良惡性的輔助指標(biāo)多藥耐藥基因的檢測(cè)流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁(yè)!淋巴細(xì)胞亞群分析根據(jù)功能，淋巴細(xì)胞主要分為B淋巴細(xì)胞（CD19+），與體液免疫有關(guān)T淋巴細(xì)胞（CD3+），與細(xì)胞免疫有關(guān)總T和總B可以用來(lái)判斷某些免疫缺陷和自身免疫性疾病

NK細(xì)胞（CD3-CD16+56+），行使免疫監(jiān)控功能，

能夠介導(dǎo)對(duì)某些腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁(yè)!常見疾病的T淋巴細(xì)胞的變化：疾病

CD4+CD8+CD4+/CD8+

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎

（活動(dòng)期）

系統(tǒng)性紅斑狼瘡-或

（活動(dòng)期）

多發(fā)性硬化癥

重癥肌無(wú)力

膜型腎小球腎炎

胰島素依賴性糖尿病

乙型肝炎

自身溶血性貧血

上呼吸道感染

流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁(yè)!淋巴細(xì)胞亞群雙色分析12%76%49%26%11%流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁(yè)!先天性無(wú)r球蛋白血癥5-18%流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁(yè)!T淋巴細(xì)胞活化細(xì)胞數(shù)目增殖細(xì)胞表面表達(dá)活化標(biāo)記分泌細(xì)胞因子流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁(yè)!活化的淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁(yè)!BDFastImmuneActivationSystem

快速免疫活化檢測(cè)系統(tǒng)lymphocyte

Activation4hStain15minLyse/Fix15minAcqusitionerythrocytestimulus流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁(yè)!應(yīng)用實(shí)例：HIV病例T細(xì)胞活化檢測(cè)流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁(yè)!優(yōu)點(diǎn)快速一天內(nèi)完成，實(shí)驗(yàn)流程需6-8小時(shí)簡(jiǎn)便全血分析（肝素鈉抗凝血）無(wú)需分離PBMCs無(wú)需組織培養(yǎng)高效可在同一個(gè)細(xì)胞內(nèi)同時(shí)檢測(cè)兩種或更多種細(xì)胞因子也可根據(jù)細(xì)胞免疫表型區(qū)分分泌細(xì)胞因子的細(xì)胞亞型，進(jìn)行多參數(shù)相關(guān)分析接近生物體自身分析條件應(yīng)用全血保留了細(xì)胞與生化微環(huán)境更能代表體內(nèi)狀態(tài)注意

質(zhì)控：用CD69做刺激和破膜效果的判定BDFastImmuneCytokineSystem

快速免疫細(xì)胞因子檢測(cè)系統(tǒng)流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁(yè)!CytometricBeadsArray(CBA)

流式液相多重蛋白

定量技術(shù)流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁(yè)!CBA技術(shù)簡(jiǎn)介CBA是一系列帶有不同強(qiáng)度紅色熒光、包被有捕獲抗體的微球，類似ELISA的捕獲孔板，可以捕獲液相樣本（血清、血漿或者細(xì)胞培養(yǎng)上清液等）中相應(yīng)的抗原，再結(jié)合PE標(biāo)記檢測(cè)抗體，形成雙抗體夾心結(jié)構(gòu)，通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行熒光檢測(cè)，便可同時(shí)對(duì)樣本中的多種可溶性蛋白成分進(jìn)行定量++AnalyteofinterestFluorescentdetectionAb

captureBead

captureAbBead流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁(yè)!HumanTh1/Th2LymphokineCBA流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁(yè)!HumanTh1/Th2LymphokineCBA流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁(yè)!

Chemokine-ICBAAssayStandard0pg/mlCBAAssayStandard流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁(yè)!20pg/mlCBAAssayStandardcont.Chemokine-ICBAAssayStandard流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁(yè)!80pg/mlCBAAssayStandardcont.Chemokine-ICBAAssayStandard流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁(yè)!312pg/mlCBAAssayStandardcont.Chemokine-ICBAAssayStandard流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁(yè)!1250pg/mlCBAAssayStandardcont.Chemokine-ICBAAssayStandard流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第29頁(yè)!HumanTh1/Th2LymphokineCBA

–標(biāo)準(zhǔn)曲線5000pg/ml2500pg/ml1250pg/ml625pg/ml312pg/ml80pg/ml20pg/mlIL-2IL-4IL-5IL-10TNF-IFN-IL-2IL-4IL-5IL-10TNF-IFN-流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第30頁(yè)!CBA分析軟件HomeScreenToolbarCalibrationentryscreen流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第31頁(yè)!HumanAllergyMediatorKit流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第32頁(yè)!CBA新產(chǎn)品系列－CBAFlexSet基本原理與CBAKit相似，略有不同檢測(cè)原理：FlexSet微球帶有近紅外和紅色兩種熒光，分別在流式細(xì)胞儀的FL3（近紅外熒光）和FL4（紅色熒光）通道檢測(cè)，通過這個(gè)二維矩陣（對(duì)應(yīng)于微球上的特定序號(hào)）識(shí)別捕獲微球，從而鑒定目的蛋白，PE標(biāo)記的檢測(cè)抗體在FL2通道來(lái)對(duì)目的蛋白定量new流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第33頁(yè)!CBAKit與CBAFlexSetCBAKit同時(shí)檢測(cè)5、6或者7個(gè)全部試劑CBAAnalysisSoftware檢測(cè)指標(biāo)組合固定CBAFlexSet最多達(dá)75個(gè)需另購(gòu)BufferkitFCAPArraySoftware檢測(cè)指標(biāo)可自由組合流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第34頁(yè)!現(xiàn)有CBAKit產(chǎn)品HumanAllergyMediatorKitIL-3,IL-4,IL-5,IL-7,IL-10,GM-CSFHumanAllergyMediatorKitIIIL-3,IL-4,GM-CSF,G-CSF,EotaxinHumanAnaphylatoxinKitC4a,C3a,C5aHumanAngiogenesisKitIL-8,bFGF,Angiogenin,VEGF,TNFHumanChemokineKitIL-8,RANTES,MIG,MCP-1,IP-10HumanChemokineKitIIIL-8,RANTES,MIP-1a,MIP-1b,MCP-1HumanInflammationKitIL-8,IL-1b,IL-6,IL-10,TNF,IL-12p70HumanTh1/Th2CytokineKitIL-2,IL-4,IL-5,IL-10,TNF,IFN-gHumanTh1/Th2CytokineIIKitIL-2,IL-4,IL-6,IL-10,TNF,IFN-gMouseInflammationKitIL-6,IL-10,MCP-1,IFN-g,TNF,IL-12p70MouseTh1/Th2CytokineKitIL-2,IL-4,IL-5,IFN-g,TNFNon-humanPrimateTh1/Th2CytokineKitIL-2,IL-4,IL-5,IL-6,TNF,IFN-gHumanApoptosisKitCleavedPARP,Bcl-2,ActiveCaspase-3MouseImmunoglobulinIsotypingKitHeavyandlightchainisotypesofmouseIgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3,IgA,IgM,IgEHumanInflammationLyophilizedStandardsIL-8,IL-1b,IL-6,IL-10,TNF,IL-12p70HumanTh1/Th2CytokineLyophilizedStandardsIL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-10,TNF,IFN-gMouseInflammationLyophilizedStandardsIL-6,IL-10,MCP-1,TNF,IFN-g,IL-12p70MouseTh1/Th2CytokineLyophilizedStandardsIL-2,IL-4,IL-5,IFN-g,TNF流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第35頁(yè)!樹突狀細(xì)胞

（DendriticCell，DC）流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第36頁(yè)!AreviewofJacquesBanchereau流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第37頁(yè)!DC的表面標(biāo)志人DC的主要特征性表面標(biāo)志為CD1a和CD83，CD83還是DC充分成熟的標(biāo)志。成熟DC高表達(dá)CD80（B7-1），CD86，CD40和CD54等共刺激分子，而未成熟DC不表達(dá)或低表達(dá)這些分子未成熟DC具有強(qiáng)大的內(nèi)吞作用，并高表達(dá)大多數(shù)趨化因子受體所有DC共同的突出特點(diǎn)是能高水平表達(dá)MHC-II類分子如HLA-DR，DC成熟過程突出的標(biāo)志是MHC-II類分子的重分布，從主要在細(xì)胞漿內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)橹饕诩?xì)胞膜表面。流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第38頁(yè)!DC體外誘導(dǎo)分化流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第39頁(yè)!小鼠DC小鼠DC的標(biāo)志是CD11c，成熟DC也有MHC-Ⅱ和CD80，CD86的表達(dá)小鼠DC前體主要分為兩類：功能上等同于人MDC和PDC小鼠DC制備：小鼠骨髓BD?IMagMouseDendriticCellEnrichmentSet大鼠DC：常用標(biāo)志OX62，OX6（MHC-Ⅱ），CD80，CD86等流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第40頁(yè)!細(xì)胞凋亡的分析細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死是兩個(gè)不同的過程細(xì)胞凋亡的主要檢查手段形態(tài)學(xué)檢查DNALadders實(shí)驗(yàn)流式細(xì)胞儀檢查與凋亡相關(guān)的病理過程HIV自身免疫性疾病腫瘤流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第41頁(yè)!細(xì)胞凋亡——PI分析PI-Fluorescence#Events凋亡細(xì)胞正常G0/G1期細(xì)胞流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第42頁(yè)!細(xì)胞凋亡——Caspases-3流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第43頁(yè)!細(xì)胞凋亡——AnnexinⅤ流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第44頁(yè)!凋亡檢測(cè)（BrdU法）

流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第45頁(yè)!流式分選與分子生物學(xué)研究流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第46頁(yè)!流式與分子生物學(xué)-FISH以流式細(xì)胞儀分選目的細(xì)胞分選后的細(xì)胞進(jìn)行FISH右圖顯示未分選前混合細(xì)胞較小的PBMCs顯示有兩個(gè)紅色斑點(diǎn)(X探針)，較大的Daudi細(xì)胞顯示有一個(gè)紅色斑點(diǎn)及一個(gè)綠色斑點(diǎn)。流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第47頁(yè)!分選后細(xì)胞進(jìn)行PCR分析流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第48頁(yè)!為什么要研究干細(xì)胞干細(xì)胞替代治療治療血液疾病的骨髓移植、臍帶血移植比較成熟應(yīng)用骨髓干細(xì)胞移植治療心肌梗死和血管性疾病骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞等對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病、糖尿病的治療作用已在動(dòng)物模型中取得一定進(jìn)展藥物篩選利用干細(xì)胞的分化潛能體外構(gòu)建各種組織模型，通過基因修飾等手段研究藥物作用靶點(diǎn)，毒理、藥理等發(fā)育生物學(xué)基礎(chǔ)理論研究通過gain-of-function和loss-of-function研究基因在分化、發(fā)育中的功能借助體細(xì)胞核轉(zhuǎn)移技術(shù)建立各種疾病的干細(xì)胞模型研究疾病成因及治療途徑流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第49頁(yè)!Hoechst染色的C57Bl/6小鼠的全骨髓細(xì)胞Hoechst單染Hoechst/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第50頁(yè)!Hoechst33342染色的小鼠骨髓中

SP表型和HSCs表面抗原表達(dá)的關(guān)系右圖顯示的是KLS(c-Kit＋Lin－Sca-1＋)細(xì)胞，可見KLS細(xì)胞在SP區(qū)域內(nèi)高度富集——摘自FlowCytometryProtocols（第二版）流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第51頁(yè)!酶活力的測(cè)定

流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第52頁(yè)!流式網(wǎng)絡(luò)資源關(guān)鍵詞搜索：FCM，F(xiàn)ACS，流式.（中文）流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第53頁(yè)!流式細(xì)胞術(shù)的特點(diǎn)極短時(shí)間內(nèi)可分析大量細(xì)胞，只要標(biāo)本中的細(xì)胞數(shù)量足夠，流式細(xì)胞儀（Flowcytometer）可以每秒鐘數(shù)十、數(shù)百、數(shù)千個(gè)細(xì)胞的速率進(jìn)行測(cè)量，測(cè)量的細(xì)胞總數(shù)可達(dá)數(shù)千、數(shù)萬(wàn)乃至數(shù)百萬(wàn)個(gè)?？赏瑫r(shí)分析單個(gè)細(xì)胞的多種特征，當(dāng)同時(shí)用多種分子探針，如用不同熒光素標(biāo)記的不同單克隆抗體進(jìn)行多色熒光染色，通過流式細(xì)胞分析，即可獲得單細(xì)胞的多種信息，使細(xì)胞亞群的識(shí)別、計(jì)數(shù)更為準(zhǔn)確。定性或定量分析細(xì)胞：通過熒光染色對(duì)單細(xì)胞的某些成分如DNA含量、抗原或受體表達(dá)量、Ca2+濃度、酶活性以及細(xì)胞的功能等均可進(jìn)行單細(xì)胞水平的定性與定量分析

強(qiáng)大的分選功能，在分析的同時(shí)可以對(duì)特定群體加以分選流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第54頁(yè)!當(dāng)前流式細(xì)胞分析發(fā)展趨勢(shì)從相對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)到絕對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)從相對(duì)定量到絕對(duì)定量分析從單色到多色熒光分析從細(xì)胞膜成分到細(xì)胞內(nèi)成分分析從細(xì)胞分析到可溶性成分的流式細(xì)胞分析流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第55頁(yè)!外周全血細(xì)胞散射光雙參數(shù)點(diǎn)圖

（紅細(xì)胞溶解后）流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第56頁(yè)!熒光信號(hào)雙色直接染色流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第57頁(yè)!數(shù)據(jù)分析點(diǎn)圖分析流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第58頁(yè)!數(shù)據(jù)分析三維圖分析流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第59頁(yè)!臨床研究:

血液、腫瘤、藥理、免疫….生物學(xué)研究：遺傳、生殖、微生物、細(xì)胞生物、毒理、分子生物、….環(huán)境研究：海洋生態(tài)研究….制藥工業(yè)食品工業(yè)農(nóng)業(yè)畜牧業(yè)流式細(xì)胞儀的應(yīng)用領(lǐng)域流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第60頁(yè)!流式細(xì)胞儀的臨床應(yīng)用(血液)白血病和淋巴瘤免疫分型殘留白血病造血干細(xì)胞計(jì)數(shù)PNH診斷網(wǎng)織紅細(xì)胞分析血小板分析血小板膜糖蛋白分子的表達(dá)血小板活化網(wǎng)織血小板分析流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第61頁(yè)!流式細(xì)胞儀的科研應(yīng)用樹突細(xì)胞研究干細(xì)胞研究細(xì)胞凋亡細(xì)胞動(dòng)力學(xué)功能研究環(huán)境微生物分析流式細(xì)胞術(shù)與分子生物學(xué)研究流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第62頁(yè)!淋巴細(xì)胞亞群分析根據(jù)CD4、CD8表達(dá)，T淋巴細(xì)胞又分為T輔助/誘導(dǎo)細(xì)胞（CD3+CD4+）T抑制/細(xì)胞毒性細(xì)胞（CD3+CD8+）Th/Ts評(píng)價(jià)那些自身免疫失調(diào)或被懷疑是免疫失調(diào)或已知患有免疫缺陷的病人的免疫狀態(tài)，此外，這一比值還可用來(lái)監(jiān)測(cè)骨髓移植病人以免受到急性GVHD的攻擊

Th/Ts升高：自身免疫性疾?。愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、SLE）Th/Ts降低：病毒感染、惡性腫瘤、再生障礙性貧血流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第63頁(yè)!常見疾病的T淋巴細(xì)胞的變化

CD3+

CD4+CD8+CD4+/CD8+腫瘤

再障及粒細(xì)胞減少癥

巨細(xì)胞病毒感染

血小板減少

活動(dòng)性特應(yīng)性皮炎

過敏性皮炎

流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第64頁(yè)!AIDS病人T亞群分析27-51%15-44%50-84%流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第65頁(yè)!淋巴細(xì)胞

活化功能研究流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第66頁(yè)!T細(xì)胞激活抗原表達(dá)的動(dòng)力學(xué)曲線流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第67頁(yè)!

FastImmuneAssaySystem

快速全面檢測(cè)淋巴細(xì)胞功能流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第68頁(yè)!優(yōu)點(diǎn)快速全程<5h簡(jiǎn)便全血分析（肝素鈉抗凝血）無(wú)需分離PBMCs無(wú)需組織培養(yǎng)免洗試劑，無(wú)需洗滌離心高效多參數(shù)分析加速研究進(jìn)程功能活性檢測(cè)同時(shí)報(bào)告單個(gè)細(xì)胞亞型可外延T細(xì)胞分析可進(jìn)行亞群分析可外延于B、NK、單核細(xì)胞接近生物體自身分析條件應(yīng)用全血保留了細(xì)胞與生化微環(huán)境更能代表體內(nèi)狀態(tài)BDFastImmuneActivationSystem

快速免疫活化檢測(cè)系統(tǒng)流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第69頁(yè)!BDFastImmuneCytokineSystem

快速免疫細(xì)胞因子檢測(cè)系統(tǒng)

Anti–IFN–gCD69

Activation37℃IncubationIntracellularStainLyse/FixAcqusitionPermeabilizelymphocyteerythrocytestimulusSurfaceStainWashcytokineWashWashproteinblocking基于細(xì)胞水平的研究胞內(nèi)因子胞外因子流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第70頁(yè)!應(yīng)用實(shí)例：分析1型與2型免疫反應(yīng)流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第71頁(yè)!導(dǎo)言常規(guī)的蛋白分析方法：ELISA：一次反應(yīng)只能檢測(cè)一個(gè)指標(biāo)Westernblot：不能對(duì)蛋白精確定量不足之處：檢測(cè)多個(gè)指標(biāo)需耗費(fèi)大量樣本分批操作導(dǎo)致組間差異大操作繁瑣，耗時(shí)耗力如何能夠從單個(gè)微量樣本中一次檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)蛋白，并加以定量，獲得高精確度的數(shù)據(jù)呢？針對(duì)于此，BD-Pharmingen成功研發(fā)了基于流式細(xì)胞儀檢測(cè)平臺(tái)的液相多重蛋白定量技術(shù)——BDCytometricBeadArray，簡(jiǎn)稱CBA

流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第72頁(yè)!BDCytometricBeadArray123不同強(qiáng)度紅色熒光的捕獲微球，在FCMFL3檢測(cè)不同的目標(biāo)蛋白PE標(biāo)記的檢測(cè)抗體，在FCMFL2檢測(cè)。PE的熒光強(qiáng)度即反映靶蛋白的含量456流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第73頁(yè)!HumanTh1/Th2LymphokineCBATh1/Th2panel:IL2,IL4,IL5,IL10,TNF,IFN用

FL3熒光的強(qiáng)度不同區(qū)別種不同的微球（beads）DirectsandwichimmunoassayFL2(PE)detectorreagent樣本處理6cytokinesfroma50Lsample

Threepipettingsteps 3hourtotalincubation QuantitativeresultsandpletereportgenerationSoftwareassistedquantitativeanalysis,withcurvefittingalgorithmResultreportingincludedinsoftware流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第74頁(yè)!HumanTh1/Th2CytokineCBAKitNosampleaddedinDetectorantibodiesonly流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第75頁(yè)!10pg/mlCBAAssayStandardcont.Chemokine-ICBAAssayStandard流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第76頁(yè)!40pg/mlCBAAssayStandardcont.Chemokine-ICBAAssayStandard流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第77頁(yè)!156pg/mlCBAAssayStandardcont.Chemokine-ICBAAssayStandard流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第78頁(yè)!625pg/mlCBAAssayStandardcont.Chemokine-ICBAAssayStandard流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第79頁(yè)!2500pg/mlCBAAssayStandardcont.Chemokine-ICBAAssayStandard流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第80頁(yè)!操作步驟檢測(cè)物與捕獲微球共孵育。洗滌。標(biāo)記熒光探測(cè)試劑（FITC或PE標(biāo)記）。洗滌。流式細(xì)胞儀上機(jī)檢測(cè)。CBA分析軟件批量數(shù)據(jù)分析。流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第81頁(yè)!與傳統(tǒng)的ELISAs檢測(cè)相比能夠同時(shí)對(duì)單一樣本進(jìn)行多種目的蛋白檢測(cè)較傳統(tǒng)檢測(cè)節(jié)省樣本量（50μl）與ELISAs相比靈敏度高（2.8pg/ml）、重復(fù)性好檢測(cè)的線性范圍寬（0-5000pg/ml）所有分析只需一組標(biāo)準(zhǔn)曲線避免酶聯(lián)反應(yīng)所致人工假象強(qiáng)大的CBA分析軟件節(jié)省操作時(shí)間、檢測(cè)時(shí)間和分析時(shí)間流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第82頁(yè)!使用Prostate-specificantigen（PSA-3）及其突變體PSA-3A對(duì)前列腺癌患者T細(xì)胞免疫，通過HumanTh1/Th2CytokineCBAKit檢測(cè)免疫T細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌水平A，B，C為稀釋標(biāo)準(zhǔn)，D為無(wú)處理對(duì)照組，E為PSA-3A處理組，F(xiàn)為PSA-3處理組摘自TerasawaH,etal.ClinicalCancerResearch.Vol.8,41-53,January2002上述研究發(fā)現(xiàn)PSA-3A比PSA-3能更有效的殺傷前列腺腫瘤，與PSA-3A能刺激T細(xì)胞分泌更高水平的IL-2、IL-4、IL-5和IFN-γ有關(guān)，為后續(xù)藥物開發(fā)打下基礎(chǔ)流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第83頁(yè)!CBAFlexSet的分析軟件

－FCAPArraySoftware流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第84頁(yè)!CBA/CBAFlexset的應(yīng)用領(lǐng)域血清、血漿、眼淚、房水、唾液、體腔灌洗液、細(xì)胞培養(yǎng)液上清、細(xì)胞裂解物等各種液相樣本中可溶性細(xì)胞因子、炎癥因子、趨化因子、酶等的濃度檢測(cè)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)中磷酸化蛋白、凋亡相關(guān)蛋白定量分析

免疫疾病或傳染疾?。ㄈ缪鄄考膊?、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、新生兒溶血癥及膿血癥、病毒性感染等）的輔助診斷和監(jiān)控腫瘤研究藥效評(píng)價(jià)，藥物研發(fā)、疫苗研究總體免疫功能分析流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第85頁(yè)!信號(hào)傳導(dǎo)類細(xì)胞因子類磷酸化蛋白人小鼠大鼠ERK(T202/Y204)JNK(T183/Y185)p38/MAPK(T180/Y182)PLC-gamma(Y783)ZAP70(Y319)Syk(Y352)Stat1(Y701)Btk(Y551)RSK(T573)Itk(Y511)eNos(S1177)ZAP70（Y319）TotalSykTotalStat1IFN-γIL-2IL-4IL-5IL-6IL-8IL-10IL-1βIP-10IL-12p70LT-αMIGMCP-1MIP-1βTNFIFN-γIL-2IL-4TNFIL-10IL-6IL-5IL-12p70IFN-γIL-4TNFIL-10IL-6

現(xiàn)有CBAFlexSet產(chǎn)品流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第86頁(yè)!DC的分化和成熟DC可分為前體DC，未成熟DC，成熟DCDC起源于骨髓CD34+多能細(xì)胞，在GM-CSF作用下，進(jìn)一步分化為DC前體細(xì)胞，包括髓系前體和淋巴系前體，并離開骨髓進(jìn)入外周血。在外周血中至少有兩種DC前體被鑒定出來(lái)：PlasmacytoidDC——PDC——漿細(xì)胞樣的樹突細(xì)胞MyeloidDC——MDC——髓樣的樹突細(xì)胞血液中的前體DC隨血液遷移到皮膚、胃腸道、心、肝、肺等非淋巴器官發(fā)育為未成熟DC未成熟DC攝取外來(lái)抗原后，可自發(fā)成熟，由外周向次級(jí)淋巴器官歸巢在成熟過程中，DC攝取和加工處理外來(lái)抗原的能力逐漸減弱，而遞呈抗原的功能逐漸增強(qiáng)流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第87頁(yè)!樹突狀細(xì)胞的可塑性DC在不同細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子的作用下可以向著不同的方向分化DC分化過程中的不同刺激引導(dǎo)它們向多種組織和器官移動(dòng)，在這些組織中擔(dān)當(dāng)起對(duì)抗入侵感染因素的哨兵流式細(xì)胞術(shù)及其科研應(yīng)用共104頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第88頁(yè)!人外周血DC亞群的鑒定PDC：linnegCD11cnegCD123high；MDC：linn