第七、八章細(xì)菌感染的診斷與防治課件

細(xì)菌感染的診斷與防治11/23/20221細(xì)菌感染的診斷與防治11/22/20221第一節(jié)細(xì)菌學(xué)診斷

可以引起人類感染的病原菌有成百上千種，對于每一例患者來說，究竟是何種細(xì)菌引起的感染？是內(nèi)源性感染或是外源性感染？是醫(yī)院感染或是社會感染？是偶發(fā)感染或是大規(guī)模流行性感染？要明確這些問題都必須進(jìn)行準(zhǔn)確、快速的病原學(xué)鑒定。因此，病原學(xué)檢測與鑒定是監(jiān)測和防治傳染病的最關(guān)鍵，最重要的步驟。11/23/20222第一節(jié)細(xì)菌學(xué)診斷可以引起人類感染的病原菌收集臨床標(biāo)本提供相關(guān)臨床資料正確取材形態(tài)學(xué)檢查分離培養(yǎng)及鑒定動物試驗生化反應(yīng)藥敏試驗血清學(xué)鑒定形態(tài)學(xué)鑒定分子生物學(xué)鑒定快速檢測免疫學(xué)檢測核酸檢測

自動化檢測

病原菌的檢驗程序11/23/20223收集臨床標(biāo)本提供相關(guān)臨床資料形態(tài)學(xué)檢查分離培養(yǎng)及鑒定動物試驗一、臨床標(biāo)本采集送檢及原則盡早采集標(biāo)本不同疾病取不同材料不同病程取不同材料嚴(yán)格無菌操作，盡量避免雜菌污染即使送檢，正確運(yùn)送準(zhǔn)確作好標(biāo)識11/23/20224一、臨床標(biāo)本采集送檢及原則盡早采集標(biāo)本11/22/20224致病菌的檢驗程序藥物敏感試驗標(biāo)本直接涂片檢查分離培養(yǎng)生化試驗血清學(xué)試驗動物試驗明確診斷初步診斷分子生物學(xué)技術(shù)其他檢測技術(shù)11/23/20225致病菌的檢驗程序藥物敏感試驗標(biāo)本直接涂片檢查分離培養(yǎng)生化試驗二、形態(tài)學(xué)檢查1.涂片染色與鏡檢革蘭染色抗酸染色鍍銀染色墨汁涂片負(fù)染色2.不染色標(biāo)本檢查細(xì)菌動力3.暗視野顯微鏡檢查11/23/20226二、形態(tài)學(xué)檢查1.涂片染色與鏡檢11/22/20226

三、分離培養(yǎng)與鑒定培養(yǎng)原則1、營養(yǎng)要求不高的細(xì)菌用普通培養(yǎng)基2、營養(yǎng)要求高的用營養(yǎng)培養(yǎng)基。如血瓊脂培養(yǎng)基3、厭氧菌用厭氧培養(yǎng)基4、正常菌群部位采集的標(biāo)本，應(yīng)使用選擇性或鑒別性培養(yǎng)基11/23/20227三、分離培養(yǎng)與鑒定11/22/20227鑒定原則

1、形態(tài)學(xué)檢查2、生化試驗3、血清學(xué)試驗4、動物試驗5、分子生物學(xué)技術(shù)11/23/20228鑒定原則11/22/20228

五、細(xì)菌快速檢測法1.免疫學(xué)檢測

用已知特異性抗血清或單抗，檢測標(biāo)本中相應(yīng)的細(xì)菌性抗原，作出早期診斷。常用方法有：ELISA；直接法、間接法免疫熒光技術(shù)；直接法；間接法協(xié)同凝集試驗；血凝試驗；乳膠凝集試驗；金標(biāo)技術(shù)；11/23/20229五、細(xì)菌快速檢測法11/22/202292.核酸檢測

包括核酸探針雜交和PCR。主要用于標(biāo)本中含量少、生長極為緩慢或難于生長的細(xì)菌檢測。核酸探針檢測較為準(zhǔn)確，但操作較復(fù)雜；PCR技術(shù)快速、敏感，但常受到非特異性因素的影響。11/23/2022102.核酸檢測包括核酸探針雜交和PCR。11/22/2023.臨床細(xì)菌鑒定系統(tǒng)

主要用于對臨床分離獲得的細(xì)菌進(jìn)行種、屬鑒定和抗生素敏感試驗快速自動化的分析?？捎杉?xì)菌鑒定系統(tǒng)和藥敏試驗系統(tǒng)兩部分組成，能夠檢查出感染的病原菌及其耐藥性。對于待測菌的分析，常用數(shù)值分類法。該方法以細(xì)菌的各種特性同等重要為理論基礎(chǔ)，根據(jù)每種生化反應(yīng)特性在不同細(xì)菌中出現(xiàn)的概率進(jìn)行全面分析。通過比較待測菌與分類體系中已知菌的生化特性的相似性，判斷待測菌的歸屬。該方法適于計算機(jī)進(jìn)行大量的數(shù)據(jù)運(yùn)算，是自動化分析儀器普遍采用的方法。

11/23/2022113.臨床細(xì)菌鑒定系統(tǒng)主要用于對臨床分離獲得的細(xì)菌進(jìn)行種HX-21細(xì)菌鑒定/藥敏分析儀11/23/202212HX-21細(xì)菌鑒定/藥敏分析儀11/22/202212TypicalCultureLaboratoryBench11/23/202213TypicalCultureLaboratoryBen第二節(jié)細(xì)菌感染的特異性預(yù)防特異性預(yù)防人工主動免疫人工被動免疫接種抗原性物質(zhì)，機(jī)體自動產(chǎn)生免疫力注入免疫物質(zhì)，機(jī)體被動獲得免疫力產(chǎn)生慢維持長用于預(yù)防產(chǎn)生快維持短用于治療或緊急預(yù)防11/23/202214第二節(jié)細(xì)菌感染的特異性預(yù)防特異性預(yù)防人工主動免疫人工被一、人工主動免疫所用生物制品，稱為疫苗人工主動免疫生物制品的種類包括細(xì)菌菌苗、病毒疫苗、新型疫苗（亞單位疫苗、核酸疫苗、治療性疫苗等）、類毒素、自身疫苗等。11/23/202215一、人工主動免疫所用生物制品，稱為疫苗11/22/2022

1.死疫苗

選用免疫原性強(qiáng)的標(biāo)準(zhǔn)微生物經(jīng)大量培養(yǎng)后，用物理或化學(xué)方法將其殺死后制成。其雖失去繁殖能力，但仍保持免疫原性目前常用的死疫苗有傷寒、百日咳、鉤端螺旋體、乙腦、流腦等疫苗11/23/2022161.死疫苗11/22/202216

2．活疫苗用減毒或無毒的病原體制成。常用的有卡介苗、脊髓灰質(zhì)灸疫苗、麻疹疫苗等。此類疫苗進(jìn)入機(jī)體后有一定的增殖能力，類似自然狀態(tài)下的輕型或隱件感染，免疫系統(tǒng)受刺激的時間長，故一般只需注射一次即可獲得較好的免疫效果缺點是不易保存，有效期較短死、活疫苗的比較見表11/23/2022172．活疫苗11/22/202217活疫苗與死疫苗比較11/23/202218活疫苗與死疫苗比較11/22/2022183.類毒素細(xì)菌的外毒素經(jīng)o.3％一o.4％甲醒處理，毒性消失而保留其免疫原性，即為類毒素常用的類毒素有白喉、破傷風(fēng)類毒素11/23/2022193.類毒素11/22/2022194.新疫苗的研制

(1)亞單位疫苗

不含病原體核酸，僅含能誘發(fā)宿主產(chǎn)生中和抗體的蛋白或表面抗原如流感病毒血凝素、神經(jīng)氨酸酶亞單位疫苗、腺病毒衣殼、腦膜炎球菌、肺炎球菌莢膜多糖亞單位疫苗等(2)基因工程疫苗或DNA重組疫苗(3)核酸疫苗(4)轉(zhuǎn)基因植物疫苗11/23/2022204.新疫苗的研制11/22/202220二、人工被動免疫

生物制品：免疫血清（抗毒素、抗菌血清）、丙種球蛋白、免疫球蛋白、免疫細(xì)胞、細(xì)胞因子等1．抗毒素

主要有破傷風(fēng)抗毒素、白喉抗毒素、肉毒抗毒素及氣性壞疽多價抗毒素等。2.胎盤球蛋白和血漿丙種球蛋白

此類制劑可作為以上病原體感染的緊急預(yù)防。此外還可用于治療丙種球蛋白缺乏癥患者3.細(xì)胞因子11/23/202221二、人工被動免疫生物制品：11/22/202(1)轉(zhuǎn)移因子（TF)是從外周血、扁桃體、脾臟等部位的白細(xì)胞凍融后提取的可透析物制成的低分子物質(zhì)。能特異性地轉(zhuǎn)移細(xì)胞免疫，從而增強(qiáng)受者的細(xì)胞免疫功能，主要用于細(xì)胞免疫功能低下引的疾病的免疫治療。如皮膚念珠菌病、腫瘤等。

11/23/202222(1)轉(zhuǎn)移因子（TF)11/22/202222(2)干擾素（IFN)是由干擾素誘生劑誘導(dǎo)有關(guān)細(xì)胞產(chǎn)生的一種具有抗病毒活性及免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的糖蛋白。IFN可用于治療病毒性感染如乙型肝炎、單純皰疹性角膜炎、帶狀皰疹、呼吸道病毒感染等。因其能增強(qiáng)巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞活性．所以也用于多種腫瘤的免疫治療(3)腫瘤壞死因子（TNF)是由巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的，能引起培養(yǎng)細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞的壞死并對免疫細(xì)胞有調(diào)節(jié)、誘導(dǎo)作用?，F(xiàn)已重組成功可用于腫瘤治療，但有—定的副作用。11/23/202223(2)干擾素（IFN)是由干擾素誘生劑誘導(dǎo)有關(guān)細(xì)胞產(chǎn)生的(4)白細(xì)胞介素—2是由活化的T細(xì)胞產(chǎn)生的—種具有多種生物學(xué)效應(yīng)的淋巴因子。它能促進(jìn)T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞的增殖、分化．增強(qiáng)各種免疫效應(yīng)細(xì)胞的治療．誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生及參與免疫調(diào)節(jié)等目前已用于多種與免疫相關(guān)病的治療，如腫瘤、病毒感染、自身免疫病、艾滋病等。特別是在腫瘤的免疫治療中，顯示出較好效果.11/23/202224(4)白細(xì)胞介素—211/22/202224三、生物制品使用的注意事項

對象途徑劑量次數(shù)時間禁忌癥等11/23/202225三、生物制品使用的注意事項11/22/202225

人工主動免疫與被動免疫比較人工主動免疫人工被動一面免疫產(chǎn)生免疫的物質(zhì)抗原（微生物制劑、毒素制劑）現(xiàn)成的免疫抗體免疫力出現(xiàn)的時間慢、要經(jīng)1-4周誘導(dǎo)期快、無須誘導(dǎo)免疫力保持時間長（數(shù)月-數(shù)年）較短（2周-數(shù)月）用途主要用于預(yù)防主要用于治療及緊急預(yù)防11/23/202226人工主動免疫與被動免疫比較人工主動免疫人工謝謝大家11/23/202227謝謝大家11/22/202227細(xì)菌感染的診斷與防治11/23/202228細(xì)菌感染的診斷與防治11/22/20221第一節(jié)細(xì)菌學(xué)診斷

可以引起人類感染的病原菌有成百上千種，對于每一例患者來說，究竟是何種細(xì)菌引起的感染？是內(nèi)源性感染或是外源性感染？是醫(yī)院感染或是社會感染？是偶發(fā)感染或是大規(guī)模流行性感染？要明確這些問題都必須進(jìn)行準(zhǔn)確、快速的病原學(xué)鑒定。因此，病原學(xué)檢測與鑒定是監(jiān)測和防治傳染病的最關(guān)鍵，最重要的步驟。11/23/202229第一節(jié)細(xì)菌學(xué)診斷可以引起人類感染的病原菌收集臨床標(biāo)本提供相關(guān)臨床資料正確取材形態(tài)學(xué)檢查分離培養(yǎng)及鑒定動物試驗生化反應(yīng)藥敏試驗血清學(xué)鑒定形態(tài)學(xué)鑒定分子生物學(xué)鑒定快速檢測免疫學(xué)檢測核酸檢測

自動化檢測

病原菌的檢驗程序11/23/202230收集臨床標(biāo)本提供相關(guān)臨床資料形態(tài)學(xué)檢查分離培養(yǎng)及鑒定動物試驗一、臨床標(biāo)本采集送檢及原則盡早采集標(biāo)本不同疾病取不同材料不同病程取不同材料嚴(yán)格無菌操作，盡量避免雜菌污染即使送檢，正確運(yùn)送準(zhǔn)確作好標(biāo)識11/23/202231一、臨床標(biāo)本采集送檢及原則盡早采集標(biāo)本11/22/20224致病菌的檢驗程序藥物敏感試驗標(biāo)本直接涂片檢查分離培養(yǎng)生化試驗血清學(xué)試驗動物試驗明確診斷初步診斷分子生物學(xué)技術(shù)其他檢測技術(shù)11/23/202232致病菌的檢驗程序藥物敏感試驗標(biāo)本直接涂片檢查分離培養(yǎng)生化試驗二、形態(tài)學(xué)檢查1.涂片染色與鏡檢革蘭染色抗酸染色鍍銀染色墨汁涂片負(fù)染色2.不染色標(biāo)本檢查細(xì)菌動力3.暗視野顯微鏡檢查11/23/202233二、形態(tài)學(xué)檢查1.涂片染色與鏡檢11/22/20226

三、分離培養(yǎng)與鑒定培養(yǎng)原則1、營養(yǎng)要求不高的細(xì)菌用普通培養(yǎng)基2、營養(yǎng)要求高的用營養(yǎng)培養(yǎng)基。如血瓊脂培養(yǎng)基3、厭氧菌用厭氧培養(yǎng)基4、正常菌群部位采集的標(biāo)本，應(yīng)使用選擇性或鑒別性培養(yǎng)基11/23/202234三、分離培養(yǎng)與鑒定11/22/20227鑒定原則

1、形態(tài)學(xué)檢查2、生化試驗3、血清學(xué)試驗4、動物試驗5、分子生物學(xué)技術(shù)11/23/202235鑒定原則11/22/20228

五、細(xì)菌快速檢測法1.免疫學(xué)檢測

用已知特異性抗血清或單抗，檢測標(biāo)本中相應(yīng)的細(xì)菌性抗原，作出早期診斷。常用方法有：ELISA；直接法、間接法免疫熒光技術(shù)；直接法；間接法協(xié)同凝集試驗；血凝試驗；乳膠凝集試驗；金標(biāo)技術(shù)；11/23/202236五、細(xì)菌快速檢測法11/22/202292.核酸檢測

包括核酸探針雜交和PCR。主要用于標(biāo)本中含量少、生長極為緩慢或難于生長的細(xì)菌檢測。核酸探針檢測較為準(zhǔn)確，但操作較復(fù)雜；PCR技術(shù)快速、敏感，但常受到非特異性因素的影響。11/23/2022372.核酸檢測包括核酸探針雜交和PCR。11/22/2023.臨床細(xì)菌鑒定系統(tǒng)

主要用于對臨床分離獲得的細(xì)菌進(jìn)行種、屬鑒定和抗生素敏感試驗快速自動化的分析?？捎杉?xì)菌鑒定系統(tǒng)和藥敏試驗系統(tǒng)兩部分組成，能夠檢查出感染的病原菌及其耐藥性。對于待測菌的分析，常用數(shù)值分類法。該方法以細(xì)菌的各種特性同等重要為理論基礎(chǔ)，根據(jù)每種生化反應(yīng)特性在不同細(xì)菌中出現(xiàn)的概率進(jìn)行全面分析。通過比較待測菌與分類體系中已知菌的生化特性的相似性，判斷待測菌的歸屬。該方法適于計算機(jī)進(jìn)行大量的數(shù)據(jù)運(yùn)算，是自動化分析儀器普遍采用的方法。

11/23/2022383.臨床細(xì)菌鑒定系統(tǒng)主要用于對臨床分離獲得的細(xì)菌進(jìn)行種HX-21細(xì)菌鑒定/藥敏分析儀11/23/202239HX-21細(xì)菌鑒定/藥敏分析儀11/22/202212TypicalCultureLaboratoryBench11/23/202240TypicalCultureLaboratoryBen第二節(jié)細(xì)菌感染的特異性預(yù)防特異性預(yù)防人工主動免疫人工被動免疫接種抗原性物質(zhì)，機(jī)體自動產(chǎn)生免疫力注入免疫物質(zhì)，機(jī)體被動獲得免疫力產(chǎn)生慢維持長用于預(yù)防產(chǎn)生快維持短用于治療或緊急預(yù)防11/23/202241第二節(jié)細(xì)菌感染的特異性預(yù)防特異性預(yù)防人工主動免疫人工被一、人工主動免疫所用生物制品，稱為疫苗人工主動免疫生物制品的種類包括細(xì)菌菌苗、病毒疫苗、新型疫苗（亞單位疫苗、核酸疫苗、治療性疫苗等）、類毒素、自身疫苗等。11/23/202242一、人工主動免疫所用生物制品，稱為疫苗11/22/2022

1.死疫苗

選用免疫原性強(qiáng)的標(biāo)準(zhǔn)微生物經(jīng)大量培養(yǎng)后，用物理或化學(xué)方法將其殺死后制成。其雖失去繁殖能力，但仍保持免疫原性目前常用的死疫苗有傷寒、百日咳、鉤端螺旋體、乙腦、流腦等疫苗11/23/2022431.死疫苗11/22/202216

2．活疫苗用減毒或無毒的病原體制成。常用的有卡介苗、脊髓灰質(zhì)灸疫苗、麻疹疫苗等。此類疫苗進(jìn)入機(jī)體后有一定的增殖能力，類似自然狀態(tài)下的輕型或隱件感染，免疫系統(tǒng)受刺激的時間長，故一般只需注射一次即可獲得較好的免疫效果缺點是不易保存，有效期較短死、活疫苗的比較見表11/23/2022442．活疫苗11/22/202217活疫苗與死疫苗比較11/23/202245活疫苗與死疫苗比較11/22/2022183.類毒素細(xì)菌的外毒素經(jīng)o.3％一o.4％甲醒處理，毒性消失而保留其免疫原性，即為類毒素常用的類毒素有白喉、破傷風(fēng)類毒素11/23/2022463.類毒素11/22/2022194.新疫苗的研制

(1)亞單位疫苗

不含病原體核酸，僅含能誘發(fā)宿主產(chǎn)生中和抗體的蛋白或表面抗原如流感病毒血凝素、神經(jīng)氨酸酶亞單位疫苗、腺病毒衣殼、腦膜炎球菌、肺炎球菌莢膜多糖亞單位疫苗等(2)基因工程疫苗或DNA重組疫苗(3)核酸疫苗(4)轉(zhuǎn)基因植物疫苗11/23/2022474.新疫苗的研制11/22/202220二、人工被動免疫

生物制品：免疫血清（抗毒素、抗菌血清）、丙種球蛋白、免疫球蛋白、免疫細(xì)胞、細(xì)胞因子等1．抗毒素

主要有破傷風(fēng)抗毒素、白喉抗毒素、肉毒抗毒素及氣性壞疽多價抗毒素等。2.胎盤球蛋白和血漿丙種球蛋白

此類制劑可作為以上病原體感染的緊急預(yù)防。此外還可用于治療丙種球蛋白缺乏癥患者3.細(xì)胞因子11/23/202248二、人工被動免疫生物制品：11/22/202(1)轉(zhuǎn)移因子（TF)是從外周血、扁桃體、脾臟等部位的白細(xì)胞凍融后提取的可透析物制成的低分子物質(zhì)。能特異性地轉(zhuǎn)移細(xì)胞免疫，從而增強(qiáng)受者的細(xì)胞免疫功能，主要用于細(xì)胞免疫功能低下引的疾病的免疫治療。如皮膚念珠菌病、腫瘤等。

11/23/202249(1)轉(zhuǎn)移因子（TF)11/22/202222(2)干擾素（IFN)是由干擾素誘生劑誘導(dǎo)有關(guān)細(xì)胞產(chǎn)生的一種具有