佰通生物生命4.0系統(tǒng)名師優(yōu)質(zhì)課賽課一等獎市公開課獲獎?wù)n件

生命4.0個性化健康管理系統(tǒng)

劉小青

博士同濟(jì)大學(xué)醫(yī)學(xué)院教授佰通生物科技首席科學(xué)家生命泉控股集團(tuán)/美國中緬因州醫(yī)養(yǎng)中心PI第1頁第2頁1997-：中科院生物物理所分子生物學(xué)博士-：美國哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士后及講師-：美國西南醫(yī)學(xué)中心助理教授

美國西南視網(wǎng)膜基金會Harrington試驗(yàn)室主任／PI-：葛蘭素史克（GSK）干細(xì)胞研發(fā)部副總監(jiān)-至今：同濟(jì)大學(xué)教授／國家973干細(xì)胞研究重大專題課題組長-至今：蘇州佰通生物科技有限企業(yè)首席科學(xué)家

蘇州市姑蘇領(lǐng)軍人才及吳中區(qū)領(lǐng)軍人才

2015-至今：富利鑫控股集團(tuán)造血干細(xì)胞首席科學(xué)家-至今：生命泉控股集團(tuán)/美國中緬因州醫(yī)養(yǎng)中心PINatureGenetics

(36):178-182引用422次PNAS(101):13903-13908引用170次PNAS(104):4413-4418引用83次AmJPathol(168):519-528引用127次在NatureGenetics、

PNAS等一系列國際權(quán)威期刊上發(fā)表了近40篇高引用率文章，引用累計屢次；申請國內(nèi)外專利26件，14件授權(quán)。PLoSGenetics

(6):e1000955引用65次

HumMolGenet(18):2099-引用119次

GeneTherapy(17):117-131引用89次

HumGeneTherapy(21):993-1004引用99次代表結(jié)果劉小青第3頁1）

劉小青，一個干細(xì)胞培養(yǎng)基及其應(yīng)用，.CN100146165.5（已授權(quán)）。

2）

應(yīng)明

、劉小青，一個用于治療糖尿病及其適應(yīng)癥藥品組合，.CN1086727.9（已授權(quán)）。

3)劉小青，一個免疫細(xì)胞培養(yǎng)基、培養(yǎng)方法及應(yīng)用，1032444.5.4）

林劍、劉小青、洪岸、李校堃、陳小佳、李志英，成纖維細(xì)胞生長因子-2結(jié)構(gòu)類似物，其生產(chǎn)方法及應(yīng)用，，ZL00117394.4（已授權(quán)）。5）LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis.US7255856(已授權(quán))。

6）LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis.US7255857(已授權(quán))。

7）LiT，LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis.US7674458(已授權(quán))。

8)LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis.US8173121(已授權(quán))。

9)LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis.US8404231(已授權(quán))。

10）LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis.EP1706139(已授權(quán))。11）

劉小青、黃俊，一個多ShRNA高效協(xié)同緘默基因方法及載體,.CN10588013.7（已授權(quán)）。

12）

劉小青、應(yīng)明、蹇麗華,

藥品篩選方法、用于促進(jìn)胞外基質(zhì)交聯(lián)藥品及其應(yīng)用,.CN10413386.x，PCT/CN/087854（已授權(quán)）。

13）

劉小青、應(yīng)明、陳光風(fēng)、鄭龍坡，一個干細(xì)胞培養(yǎng)基及其應(yīng)用和干細(xì)胞培養(yǎng)方法，.CN10557941.6，PCT/CN//071173（已授權(quán)）。

14）LiuX,YingMandJianL,Adrugscreeningmethod,drugspromotingextracellularmatrixcross-linkingandtheapplicationsthereof..USPatentApplicationNo.#13884272.15）LiuX,YingM,ChenGandZhengL,Astemcellculturemediumanditsapplicationsaswellasastemcellculturemethod..USPatentApplicationNo.#13885000.

16）劉小青,

一個中藥應(yīng)用及其篩選方法和抗衰老藥品,.CN1086734.9.

17）劉小青，一個造血干細(xì)胞培養(yǎng)基及其應(yīng)用和干細(xì)胞培養(yǎng)方法，CN10283776.3.18）劉小青，一個造血干細(xì)胞培養(yǎng)基及其應(yīng)用和干細(xì)胞培養(yǎng)方法（香港15107918.7）19）劉小青，一個雙室選擇性細(xì)胞培養(yǎng)裝置及其應(yīng)用，CN10281271.3.20）劉小青，一個雙室選擇性細(xì)胞培養(yǎng)裝置及其應(yīng)用，CN20354728.4.21）劉小青，一個雙室選擇性細(xì)胞培養(yǎng)裝置及其應(yīng)用（香港15107920.3）22）LiuX.Adualchamberselectivelypermeabledeviceforcellcultureandtheapplicationsthereof..(USpatent,#14829865)。23）LiuX.Adualchamberselectivelypermeabledeviceforcellcultureandtheapplicationsthereof..(Europeanpatent，#15181334.2)。24)LiuX.Aculturemediumforhematoeiticstemcellsandtheapplicationsthereofaswellasthestemcellsculturemethod.(USpatent,#14829718)。25)LiuX.Aculturemediumforhematoeiticstemcellsandtheapplicationsthereofaswellasthestemcellsculturemethod.(Europeanpatent,#15181335.9)。專利情況第4頁干細(xì)胞特征可自我更新可變成其它功效性細(xì)胞

——可廣泛于抗衰老、重大疾病治療低豐度：萬分之一分類：胚胎干細(xì)胞與成體（組織）干細(xì)胞

第5頁干細(xì)胞潛在臨床應(yīng)用禿頂眼盲耳聾中風(fēng)側(cè)索硬化心肌梗死糖尿病肌萎縮腫瘤克羅恩病腦損傷記憶缺點(diǎn)早老性癡呆癥帕金森癥缺牙傷口愈合骨髓移植脊髓損傷關(guān)節(jié)炎第6頁胚囊(64-200個細(xì)胞時期)滋養(yǎng)層內(nèi)細(xì)胞團(tuán)多潛能胚胎干細(xì)胞分化血液細(xì)胞心肌細(xì)胞肝臟細(xì)胞神經(jīng)細(xì)胞腸道細(xì)胞胰島細(xì)胞胚胎干細(xì)胞優(yōu)勢：全能性缺點(diǎn)：成瘤性第7頁成體(組織)干細(xì)胞分離技術(shù)判定技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)分化技術(shù)優(yōu)勢：低致瘤性、低免疫原性缺點(diǎn)：含量很低（1/10000）第8頁當(dāng)前國內(nèi)外干細(xì)胞治療現(xiàn)實(shí)狀況美國：

允許診所做自體干細(xì)胞治療或美容。中國：

干細(xì)胞培養(yǎng)條件不規(guī)范，事故頻繁。第9頁干細(xì)胞技術(shù)概況

干細(xì)胞技術(shù)在健康產(chǎn)業(yè)方面有很大前景，是當(dāng)前個性化治療方向，所以干細(xì)胞分離富集、擴(kuò)增以及分化技術(shù)是干細(xì)胞治療技術(shù)研發(fā)及產(chǎn)業(yè)化關(guān)鍵技術(shù)。預(yù)測，5年之內(nèi)國際上干細(xì)胞領(lǐng)域?qū)⑿纬蓴?shù)5000億美元市場需求。市場需求與應(yīng)用：干細(xì)胞基礎(chǔ)研究（科研機(jī)構(gòu)市場）干細(xì)胞胞抗衰老及臨床治療（醫(yī)療市場）第10頁自主知識產(chǎn)權(quán)低血清培養(yǎng)技術(shù)或無血清培養(yǎng)技術(shù)：高重現(xiàn)性，規(guī)?；a(chǎn)；培養(yǎng)干細(xì)胞擴(kuò)增時間加緊3-5倍；傳代次數(shù)在5-10代以上，高于傳統(tǒng)3代傳代次數(shù)；細(xì)胞存活率提升30%以上；GMP條件下生產(chǎn)制劑，無病原體，無內(nèi)毒素。干細(xì)胞擴(kuò)增技術(shù)是干細(xì)胞產(chǎn)業(yè)化關(guān)鍵技術(shù)第11頁人干細(xì)胞特異性高表示或低表示基因ChenGetal.,LiuX*.Adiposestemcell-mediatedtreatmentforacuteliverfailure.StemCellResearchTherapy.(6)：40.ChenGetal.,LiuX*.VEGF-mediatedproliferationofadiposetissue-derivedstemcell.pLosOne（8）：e73673.第12頁P(yáng)<0.05Control0.5ngcocktail/ml添加物與干細(xì)胞增殖速度線性關(guān)系Cocktail

(ng/ml)第13頁

AdvCell

AninternationalBrand

HBMSC(p2)HUMSC(p2)HADMSC(p2)

AdvCell干細(xì)胞培養(yǎng)基第14頁AdvCell：細(xì)胞增殖速度比進(jìn)口品牌快3-5倍第15頁

HBMSC(p10，100×)

AdvCell:全能性及表面標(biāo)志物完全保持AdipocyteformationCellsortingbysurfacemarkerschondrogeniccellformation第16頁干細(xì)胞對疾病治療效果干細(xì)胞對糖尿病治療效果：降低血糖，促進(jìn)組織愈合干細(xì)胞對肝衰竭治療效果第17頁科技查新及咨詢匯報綜合技術(shù)水平到達(dá)了“國內(nèi)領(lǐng)先、國際先進(jìn)水平”查新匯報科技咨詢匯報主要論文第18頁注射前2星期后干細(xì)胞美容5星期后第19頁治療前治療后第20頁治療前治療后第21頁間充質(zhì)干細(xì)胞對糖尿病治療效果第22頁對男性性功效改進(jìn)第23頁AdvCell免疫細(xì)胞培養(yǎng)基適用細(xì)胞：T、NK、DC／CIK2.無血清培養(yǎng)基系列：優(yōu)于Takara系列

不帶因子：300元／500ml3.優(yōu)化培養(yǎng)基系列:1)優(yōu)于Takara系列、AIMV、Exvivo2)等同Cellgenix.

不帶因子：800元／500ml

第24頁50-200mL外周血非單核細(xì)胞丟棄血漿保留免疫細(xì)胞（天然或修飾）單核細(xì)胞富集（專用儀器）懸浮／貼壁培養(yǎng)1-3周≈109-10細(xì)胞回輸AdvCell免疫細(xì)胞培養(yǎng)基AdvCell免疫細(xì)胞技術(shù)第25頁免疫強(qiáng)化抗腫瘤技術(shù)1.NK細(xì)胞技術(shù)2.Car－T細(xì)胞技術(shù)：

－－靶向治療靶標(biāo)基因：cd19、cd20、cd30、cd33、cd138、cMet、egfrvIII、erbb、fap、gd-2、her2、Mesothelin、psma、wt1、ny-eso-1、cea、mart-13.PD1抗體－免疫激活技術(shù)

－－免疫抑制解除4.“雞尾酒”療法

－－免疫細(xì)胞／PD1抗體聯(lián)合免疫激活技術(shù)－－雙室細(xì)胞放大培養(yǎng)技術(shù)第26頁免疫細(xì)胞擴(kuò)增速度比較第27頁擴(kuò)增后免疫細(xì)胞對腫瘤抑制作用CAR-T細(xì)胞治療組NK細(xì)胞治療組DC細(xì)胞治療組CIK細(xì)胞治療組第28頁AdvCell含酚紅培養(yǎng)基系列

DMEM高糖基本培養(yǎng)基間充質(zhì)干細(xì)胞血清培養(yǎng)基脂肪干細(xì)胞血清培養(yǎng)基臍帶干細(xì)胞血清培養(yǎng)基骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞血清培養(yǎng)基哺乳細(xì)胞快速擴(kuò)增培養(yǎng)基間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基脂肪干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基臍帶干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基哺乳細(xì)胞快速擴(kuò)增無血清培養(yǎng)基免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基免疫細(xì)胞優(yōu)化培養(yǎng)基造血干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基

第29頁造血干細(xì)胞無血清完全培養(yǎng)基

CIK細(xì)胞無血清培養(yǎng)基

CIK細(xì)胞優(yōu)化培養(yǎng)基

DC細(xì)胞無血清培養(yǎng)基

DC細(xì)胞優(yōu)化培養(yǎng)基NK細(xì)胞無血清培養(yǎng)基

NK細(xì)胞優(yōu)化培養(yǎng)基

T細(xì)胞無血清培養(yǎng)基

T細(xì)胞優(yōu)化培養(yǎng)基第30頁無酚紅培養(yǎng)基系列

DMEM

高糖無酚紅基本培養(yǎng)基間充質(zhì)干細(xì)胞無酚紅培養(yǎng)基哺乳細(xì)胞快速擴(kuò)增無酚紅培養(yǎng)基骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞無酚紅培養(yǎng)基臍帶血干細(xì)胞無酚紅培養(yǎng)基脂肪干細(xì)胞無酚紅培養(yǎng)基間充質(zhì)干細(xì)胞無酚紅無血清培養(yǎng)基造血干細(xì)胞無酚紅無血清培養(yǎng)基

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞無酚紅無血清培養(yǎng)基臍帶干細(xì)胞無酚紅無血清培養(yǎng)基脂肪干細(xì)胞無酚紅無血清培養(yǎng)基

第31頁造血干細(xì)胞無酚紅無血清完全培養(yǎng)基哺乳細(xì)胞快速擴(kuò)增無酚紅無血清培養(yǎng)基免疫細(xì)胞無酚紅無血清培養(yǎng)基免疫細(xì)胞無酚紅優(yōu)化培養(yǎng)基CIK細(xì)胞無酚紅無血清培養(yǎng)基CIK細(xì)胞無酚紅優(yōu)化培養(yǎng)基DC細(xì)胞無酚紅無血清培養(yǎng)基DC細(xì)胞無酚紅優(yōu)化培養(yǎng)基

NK細(xì)胞無酚紅無血清培養(yǎng)基

NK細(xì)胞無酚紅優(yōu)化培養(yǎng)基T細(xì)胞無酚紅無血清培養(yǎng)基T細(xì)胞無酚紅優(yōu)化培養(yǎng)基第32頁分化培養(yǎng)基成骨分化培養(yǎng)基

成脂分化培養(yǎng)基

成軟骨分化培養(yǎng)基第33頁組織細(xì)胞分離培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品細(xì)胞培養(yǎng)優(yōu)化添加物

細(xì)胞無血清凍存液

組織細(xì)胞分離消化液

組織淋洗液

胰蛋白酶-EDTA溶液

青霉素/鏈霉素溶液第34頁

相關(guān)SCI研究論文BrunnerD,FrankJ,ApplH,SchofflH,Pfaller,GstraunthalerG,Theserum-freemediainteractiveonlinedatabase.Altex27,1-10.vanderValk,BrunnerD,,SmetK,SvenningsenF,HoneggerP,KnudsenL,LindlT,NorabergJ,PriceA,ScarinoML,GstraunthalerG.Optimizationofchemicallydefinedcellculturemedia–Replacingfetalbovineseruminmammalianinvitromethods.ToxicologyInvitro.(24):1053-1063.ChenG,JinY,ShiX,QiuY,ZhangY,ZhangY,ChengM,WangX,ChenC,WuY,JiangF,ZhouH,FuQ,LiuX*.Adiposestemcell-basedtreatmentforacuteliverfailure.StemCellResearch&Therapy(InPress).ChenG,ShiX,SunC,LiM,ZhouQ,ZhangC,HuangJ,QiuY,WenX,ZhangY,ZhangY,YangS,LuL,ZhangJ,YuanQ,LuJ,XuG,JinZ,JiangC,YingM,LiuX.VEGF-mediatedproliferationofadiposetissue-derivedstemcell.pLosOne

（8）：e73673.YuanMetal.Transplantationofneuralstemcellsoverexpressingglialcellline-derivedneurotrophicfactorenhancesAktandErk1/2signalingandneurogenesisinratsafterstroke.ChinMedJ.;126(7):1302-9.LiuY,LiS,YuanF,XiaJ,YuX,LiuX,YuG.InfrapatellarfatpadmaybebewithtendonrepairingabilityandcloselyrelatedwiththedeveloppingprocessofpatellaBaja.MedicalHypotheses(77):620-3.YangC,ZhouL,GaoX,ChenB,TuJ,SunH,LiuX,HeJ，LiuJ，YuanQ.Neuroprotectiveeffectsofbonemarrowmesenchymalstemcellsover-expressingGDNFonratswithintracerebralhemorrhageandneuronsexposedtohypoxia/reoxygenation.Neurosurgery(68):691-704.第35頁企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)第36頁相關(guān)自我知識產(chǎn)權(quán)第37頁第38頁2.造血干細(xì)胞技術(shù)

造血干細(xì)胞是一類多功效成體干細(xì)胞，主要存在于骨髓，數(shù)量極其稀少，通常以CD34陽性為細(xì)胞標(biāo)志。1.產(chǎn)生血液細(xì)胞:調(diào)整血液細(xì)胞和免疫細(xì)胞再生及修復(fù)。2.橫向分化形成心肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、肝細(xì)胞、腎細(xì)胞、皮膚細(xì)胞及成纖維細(xì)胞等等各種功效細(xì)胞潛能。3.流向各個器官，參加疾病損傷和衰老器官再生和修復(fù)過程。第39頁

干細(xì)胞抗衰老保健

自體造血干細(xì)胞抗衰老保健，來重新激活自體細(xì)胞（CD34+），令體細(xì)胞逆向分化而產(chǎn)生大量造血干細(xì)胞，用來修復(fù)細(xì)胞、改進(jìn)細(xì)胞代謝、激活衰老細(xì)胞功效、增加正常細(xì)胞數(shù)量、提升細(xì)胞活性、恢復(fù)細(xì)胞正常生理功效、改進(jìn)細(xì)胞質(zhì)量、預(yù)防和延緩細(xì)胞病變，從而到達(dá)康復(fù)疾病、反抗衰老目標(biāo)。第40頁造血干細(xì)胞形成機(jī)理開啟CD34基因關(guān)閉狀態(tài)開啟狀態(tài)

CD34基因造血干細(xì)胞基因表示活性高CD34造血干細(xì)胞擴(kuò)增技術(shù)第41頁動員劑50-200mL外周血CD34-細(xì)胞丟棄血漿保留造血干細(xì)胞造血干細(xì)胞富集（CD34+磁珠/專用儀器）4-7天懸浮培養(yǎng)1-3周≈109－10細(xì)胞回輸AdvCell造血干細(xì)胞培養(yǎng)基AdvCell造血干細(xì)胞技術(shù)第42頁造血干細(xì)胞培養(yǎng)及應(yīng)用第43頁壽命延長造血干細(xì)胞技術(shù)理論基礎(chǔ)

（NobelPrize）：壽命與細(xì)胞染色體端粒長度成正比.方法：1）小分子（TA65）

提升端粒酶劑量2）基因劑量：

（1）瞬時過表示端粒酶

（2）永久性過表示端粒酶

第44頁雙室細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)第45頁相關(guān)專利1）劉小青，一個造血干細(xì)胞培養(yǎng)基及其應(yīng)用和干細(xì)胞培養(yǎng)方法，CN10283776.3.2）劉小青，一個造血干細(xì)胞培養(yǎng)基及其應(yīng)用和干細(xì)胞培養(yǎng)方法（香港15107918.7）3）劉小青，一個雙室選擇性細(xì)胞培養(yǎng)裝置及其應(yīng)用，CN10281271.3.4）劉小青，一個雙室選擇性細(xì)胞培養(yǎng)裝置及其應(yīng)用，CN20354728.4.5）劉小青，一個雙室選擇性細(xì)胞培養(yǎng)裝置及其應(yīng)用（香港15107920.3）6）LiuX.Adualchamberselectivelypermeabledeviceforcellcultureandtheapplicationsthereof..(USpatent,#14829865)。7）LiuX.Adualchamberselectivelypermeabledeviceforcellcultureandtheapplicationsthereof..(Europeanpatent，#15181334.2)。8)LiuX.Aculturemediumforhematoeiticstemcellsandtheapplicationsthereofaswellasthestemcellsculturemethod.(USpatent,#14829718)。9)LiuX.Aculturemediumforhematoeiticstemcellsandtheapplicationsthereofaswellasthestemcellsculturemethod.(Europeanpatent,#15181335.9)。第46頁

第47頁第48頁第49頁當(dāng)前干細(xì)胞技術(shù)產(chǎn)業(yè)化方向1.干細(xì)胞培養(yǎng)基規(guī)模化2.個性化細(xì)胞美容與養(yǎng)生3.聯(lián)合醫(yī)院及科研單位進(jìn)行細(xì)胞治療4.個性化細(xì)胞文庫5.網(wǎng)絡(luò)抗衰老技術(shù)普及第50頁年輕基因與干細(xì)胞活化技術(shù)

－－國際獨(dú)創(chuàng)網(wǎng)絡(luò)抗衰老技術(shù)

－－賴酰氨氧化酶1（LOXL1）

在抗衰老中應(yīng)用

第51頁1.改進(jìn)胞外基質(zhì)維護(hù)是抗衰老焦點(diǎn)之一第52頁Liuetal,Nat.Genet.(36):178-182Liuetal.,AmJ.Pathol.(168):519-528YuGetal.,IOVS(49):2599-2605.Cenizoetal,Exp.Dermatology(15):574–581陰道松弛+/+-/-+/+–/–2.我們在本事域貢獻(xiàn)

1）LOXL1缺點(diǎn)小鼠病理改變視網(wǎng)膜膜黃斑病變肺氣腫心血管異常皮膚松弛盆腔脫垂尿失禁/尿駐留WTLOXL1-/-WTLOXL1-/-WTLOXL1-/-WTLOXL1-/-WTLOXL1-/-陰莖脫垂／直腸脫垂第53頁2）LOXL1水平伴隨年紀(jì)增加逐步降低Liuetal.,Am.J.Path.(168):519-528Cenizoetal,Exp.Dermatology(15):574–581第54頁大眾媒體報道第55頁第56頁第57頁第58頁3）提升體內(nèi)LOXL1水平藥品篩選感染

人細(xì)胞刺激之后細(xì)胞BiochemBiophysResCommun.Apr18;446(4):1022-8.第59頁4）提升體內(nèi)LOXL1水平明星成份第60頁5）形成自我知識產(chǎn)權(quán)已授權(quán)專利

LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis..US7255856.

LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis..US7255857.LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis..EP1706139.LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis..US7674458.LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis..US8173121.LiT,LiuX.Lysyloxidase-like1(LOXL1)andelastogenesis..US8404231.第61頁第62頁已授權(quán)或受理相關(guān)專利劉小青、應(yīng)明、蹇麗華,

藥品篩選方法、用于促進(jìn)胞外基質(zhì)交聯(lián)藥品及