
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
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實(shí)驗(yàn)室本收集運(yùn)送序及實(shí)室診斷方法目前,國(guó)際推廣的麻疹早期快速診斷方法為酶聯(lián)免疫吸附方(ELISA)檢測(cè)血清中的IgM抗體查到麻疹I(lǐng)gM抗體而患者在過(guò)去1個(gè)月內(nèi)沒(méi)有麻疹疫苗免疫史,即可確診為麻疹感染。感染麻疹病毒后-15,機(jī)體產(chǎn)生的IgM抗體應(yīng)答即可被查到,而麻疹的潛伏期多數(shù)為10-11,因此,多數(shù)病人在出現(xiàn)癥狀時(shí)即可在血液中查到麻疹I(lǐng)gM抗體,血標(biāo)本可在出疹后求醫(yī)時(shí)采集。但為避免一些個(gè)體在出疹時(shí)尚未有足夠的IgM體應(yīng)答于發(fā)病后7-14天再采血檢查一次。取鼻咽分泌物或鼻咽拭子,分離麻疹病毒或用PCR(多聚酶基因擴(kuò)增法)在標(biāo)本中查到麻疹病毒的基因也是實(shí)驗(yàn)室確診的方法同時(shí)有助于追蹤傳染源但技術(shù)與設(shè)備要求較高,只建議在一類省級(jí)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展。1.標(biāo)本收集1.1血清標(biāo)本
無(wú)菌術(shù)取全血(或用毛細(xì)血管法取耳垂、手指尖血0.3ml室溫下凝固,分離血清。存放和運(yùn)送血清的試管應(yīng)保持無(wú)菌。有條件地區(qū)可用分鐘離心機(jī)分離血清。采血時(shí),尤其是毛細(xì)血管法取耳垂、手指尖血時(shí)應(yīng)避免擠壓而溶血。血清標(biāo)本運(yùn)送前應(yīng)在0-8℃保存,血清可以冷凍保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。不能冷凍全血。取時(shí)填寫標(biāo)本送檢表。
1.2鼻咽拭子/鼻咽分泌物
宜取出疹當(dāng)日拭子標(biāo)本好為出疹前的標(biāo)托兒所尚未出疹病例使用的棉拭子和試管等應(yīng)滅菌。棉拭子深入咽部,應(yīng)輕擦咽部或柯氏斑處數(shù)次。將棉拭子剪去用手握過(guò)的(竹后放入無(wú)菌試管中試管內(nèi)可放%牛血清的MEM維持液(PH7.0即4℃或冰凍保存。2.標(biāo)本運(yùn)送2.1血清標(biāo)本
標(biāo)本采集后應(yīng)盡早送實(shí)驗(yàn)室,不要等其它標(biāo)本。放標(biāo)本的試管應(yīng)有塞、不漏,并有標(biāo)簽,放進(jìn)塑料袋中密封。將塑料袋放入冷藏包或冰壺。在0-4℃環(huán)境下運(yùn)送。送標(biāo)本時(shí)附帶標(biāo)本送檢表。
如遇節(jié)假日應(yīng)事先通知實(shí)驗(yàn)室,說(shuō)明標(biāo)本送達(dá)時(shí)間。2.2鼻咽拭子/鼻咽分泌物
標(biāo)本采集后立即用冰壺或冷凍保存,二天內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。嚴(yán)防標(biāo)本污染或容器滲漏。避免日光照射。其它同血清標(biāo)本。3.捕捉法ELISA檢測(cè)IgM抗體參見(jiàn)國(guó)標(biāo)麻疹診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則(-1995)附錄C4。4.病毒分離方法
細(xì)胞一般用細(xì)胞分離麻疹病毒亦可用Vero細(xì)胞人胚細(xì)胞等。接種標(biāo)本方法:用靜置法培養(yǎng)于-37℃中觀察10天。出現(xiàn)細(xì)胞病變后(尤其是融核細(xì)胞后用標(biāo)準(zhǔn)血清(或單克隆抗體)中和鑒定。不出現(xiàn)病變的標(biāo)本必須盲傳代,陰性者才定為陰性。方法學(xué)同一般病毒分離、鑒定方法。5.質(zhì)量控制
血清IgM檢測(cè)應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行。開(kāi)展檢測(cè)前,工作人員要經(jīng)過(guò)培訓(xùn)合格后上崗。對(duì)暴發(fā)檢測(cè)為陰性的血清,必須盡早送?。▏?guó)家)實(shí)驗(yàn)室復(fù)核。省(國(guó)家)實(shí)驗(yàn)室每年對(duì)地區(qū)實(shí)驗(yàn)室抽檢部分血清。病毒分離必須在省級(jí)實(shí)
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