實驗一蛋白質(zhì)的等電點測定和沉淀反應2022優(yōu)秀文檔

實驗一、蛋白質(zhì)的等電點測定和沉淀反響一、目的1.了解蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì)2.學習測定蛋白質(zhì)等電點的一種方法3.加深對蛋白質(zhì)膠體溶液穩(wěn)定要素的認識4.了解沉淀蛋白質(zhì)的幾種方法及其實意圖義二、原理蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)。在蛋白質(zhì)溶液中存在以下平衡：等電點:當溶液的pH到達一定數(shù)值時，蛋白質(zhì)顆粒上正負電荷的數(shù)目相等，在電場中，蛋白質(zhì)既不向陰極挪動，也不向陽極挪動，此時溶液的pH值稱為此種蛋白質(zhì)的等電點。四、操作步驟〔一〕酪蛋白等電點的測定

〔1〕取同樣規(guī)格的試管4支，參與各試劑，然后混勻。此時4個管的pH依次為5.9、5.5、4.7、3.5。〔2〕各加酪蛋白的醋酸鈉溶液1mL，加一管，搖勻一管。察看其混濁度。靜置10分鐘后，再察看其混濁度。最混濁的一管pH即為酪蛋白的等電點。

〔二〕蛋白質(zhì)的沉淀及變性

1、蛋白質(zhì)的鹽析蛋白質(zhì)的鹽析:無機鹽〔硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等〕的濃溶液能析出蛋白質(zhì)。鹽的濃度不同，析出的蛋白質(zhì)也不同。如球蛋白可在半飽和硫酸銨溶液中析出，而清蛋白那么在飽和硫酸銨溶液中才干析出。鹽溶:由鹽析獲得的蛋白質(zhì)沉淀，當降低其鹽類濃度時，又能再溶解，故蛋白質(zhì)的鹽析作用是可逆過程。于試管中參與蛋白質(zhì)溶液5mL，再加等量的飽和硫酸銨溶液，混勻后靜置數(shù)分鐘那么析出球蛋白的沉淀。倒出少量混濁沉淀，加少量水，察看能否溶解，為什么？將管內(nèi)容物過濾，向濾液中添加硫酸銨粉末到不再溶解為止。此時析出沉淀為清蛋白。取出部分清蛋白，加少量蒸餾水，察看沉淀的再溶解。

2、重金屬離子沉淀蛋白質(zhì)重金屬離子與蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶于水的復合物。

取1支試管，參與蛋白質(zhì)溶液2mL，再加3%硝酸銀溶液1—2滴，振蕩試管，有沉淀產(chǎn)生。放置片刻，傾去上清液，向沉淀中參與少量的水，沉淀能否溶解？為什么？

3、某些有機酸沉淀蛋白質(zhì)取1支試管，參與蛋白質(zhì)溶液2mL，再參與1ml5%三氯乙酸溶液，振蕩試管，察看沉淀的生成。放置片刻傾出清液，向沉淀中參與少量水，察看沉淀能否溶解。取1支試管，參與2mL蛋白質(zhì)溶液，再參與2mL95%乙醇。取出部分清蛋白，加少量蒸餾水，察看沉淀的再溶解?！捕车鞍踪|(zhì)的沉淀及變性

1、蛋白質(zhì)的鹽析取1支試管，參與蛋白質(zhì)溶液2mL，再參與1ml5%三氯乙酸溶液，振蕩試管，察看沉淀的生成。放置片刻，傾去上清液，向沉淀中參與少量的水，沉淀能否溶解？為什么？1、什么是蛋白質(zhì)的等電點？重金屬離子與蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶于水的復合物。1mol／L醋酸溶液中和。以表格方式總結(jié)實驗結(jié)果，包括察看到的景象，分析評價實驗結(jié)果。取出部分清蛋白，加少量蒸餾水，察看沉淀的再溶解。2、重金屬離子沉淀蛋白質(zhì)〔一〕酪蛋白等電點的測定

〔1〕取同樣規(guī)格的試管4支，參與各試劑，然后混勻?！?〕各加酪蛋白的醋酸鈉溶液1mL，加一管，搖勻一管。重金屬離子與蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶于水的復合物。了解蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì)1mol/L鹽酸溶液數(shù)滴，察看沉淀的再溶解4、有機溶劑沉淀蛋白質(zhì)取1支試管，參與2mL蛋白質(zhì)溶液，再參與2mL95%乙醇。察看沉淀的生成〔假設(shè)沉淀不明顯，加點NaCl，混勻。

5、乙醇引起的變性與沉淀取3支試管，編號。依下表順序參與試劑1.向各管內(nèi)加水4ml，在2，3管內(nèi)各加一滴甲基紅2.第二管中用0.1mol／L醋酸溶液中和。第三管用0.05mol/L碳酸鈉溶液中和，察看各管的顏色變化和沉淀生成3.每管再加0.1mol/L鹽酸溶液數(shù)滴，察看沉淀的再溶解3、某些有機酸沉淀蛋白質(zhì)〔2〕各加酪蛋白的醋酸鈉溶液1mL，加一管，搖勻一管。重金屬離子與蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶于水的復合物。取1支試管，參與蛋白質(zhì)溶液2mL，再參與1ml5%三氯乙酸溶液，振蕩試管，察看沉淀的生成。加深對蛋白質(zhì)膠體溶液穩(wěn)定要素的認識2、重金屬離子沉淀蛋白質(zhì)取出部分清蛋白，加少量蒸餾水，察看沉淀的再溶解。5、乙醇引起的變性與沉淀以表格方式總結(jié)實驗結(jié)果，包括察看到的景象，分析評價實驗結(jié)果。取出部分清蛋白，加少量蒸餾水，察看沉淀的再溶解。取出部分清蛋白，加少量蒸餾水，察看沉淀的再溶解。05mol/L碳酸鈉溶液中和，察看各管的顏色變化和沉淀生成了解蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì)1、什么是蛋白質(zhì)的等電點？倒出少量混濁沉淀，加少量水，察看能否溶解，為什么？將管內(nèi)容物過濾，向濾液中添加硫酸銨粉末到不再溶解為止。五、本卷須知

等電點測定的實驗要求各種試劑的濃度