生化檢驗(yàn)中的定標(biāo)

精心整理定標(biāo)的意義：定標(biāo)就是要找出一個(gè)參考點(diǎn)，就一個(gè)值或F值它是由儀器與試劑共確定下來。當(dāng)我們測(cè)定一個(gè)標(biāo)本時(shí)，無論是手工或全自動(dòng)生化析儀，測(cè)出來的值只是一，這個(gè)吸光度對(duì)我們沒有什意義，我們要把這個(gè)吸光度轉(zhuǎn)化成一個(gè)濃度或酶的活性，那就要乘上一個(gè)值計(jì)算出來的結(jié)對(duì)我們就有意義了K值就是我們通過定標(biāo)找出來的。一來說測(cè)定K值的要求是用標(biāo)準(zhǔn)品和試劑空白來測(cè)定，經(jīng)過儀器測(cè)定出這兩個(gè)吸光度，即標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度試劑空白的吸光度。K=準(zhǔn)濃度/標(biāo)－A試)PSA吸光度標(biāo)準(zhǔn)液的濃度我們是知道的，這個(gè)吸光度可以由儀器測(cè)出，這樣就得出一個(gè)值任何標(biāo)本用其吸光度乘以值到了其濃度值。因此K值具非決性意，以標(biāo)本的準(zhǔn)確性。K值定因素：我們看看K值到什影響呢？第一，標(biāo)準(zhǔn)液的濃度一定要準(zhǔn)確標(biāo)準(zhǔn)液最好與標(biāo)本一樣是以血清為基質(zhì)的）。第二，標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度與試劑空的吸光度一定要準(zhǔn)確。吸光度受儀器、試劑的影響，如果儀器定，試劑也穩(wěn)定，那K值定。器和試劑是影響K主要因素。如何確定K值確的一般我們用質(zhì)控血清來檢查，最是兩種水平的質(zhì)控來檢查，如果質(zhì)控結(jié)果很好，可以說K值的，用這個(gè)值出來病人的結(jié)果也是準(zhǔn)的，所以K值常關(guān)。K值面目：K值上代表了斜率，截代表試劑空試劑空白每天都在變化，所以K的穩(wěn)定性由儀器試劑決定，如果儀器與試劑都十分穩(wěn)定，那K也很穩(wěn)定。多長(zhǎng)時(shí)間定一次標(biāo)合適？這要看您試劑的穩(wěn)定性，質(zhì)控結(jié)不好，有些項(xiàng)目做試劑空白可以解決，有些項(xiàng)目要做兩點(diǎn)定標(biāo)酶的項(xiàng)目如何確定K值一是計(jì)算出來的理論K值K=(TV×1000)/(SV×L×ε)

）精心整理）二是用有酶項(xiàng)目定得出K（K=濃度(A標(biāo)A試空白目公司可以提供項(xiàng)目的定標(biāo)液，不僅有底物類的項(xiàng)目，也有類的項(xiàng)目。生化檢中各種空概時(shí)間:2009-5-89:54:09,點(diǎn)擊?61對(duì)所謂試劑白"本空白""水空白"杯空"等"空白"詞有同行可能感到困惑特此匯集了一下種言論包括本論壇高們發(fā)表的些意見)結(jié)合自己理解總結(jié)如,希大家指正和補(bǔ)充:點(diǎn)**空白含*含**的吸光度1試空：???由生化測(cè)測(cè)量的吸光度為相對(duì)吸度，所以理論上說所有終點(diǎn)法的測(cè)試都需要把試劑本身的吸光度除，試劑本身的光度就是劑空白。量方法是按照正常測(cè)試的試劑和樣量，把樣換成蒸餾來測(cè)量。???在統(tǒng)手工法中,每次測(cè)定都做至少三管:測(cè)定管、準(zhǔn)管白管。其空白管是劑加蒸餾，測(cè)出來也就是試劑空。因?yàn)椴侪h(huán)境、儀狀態(tài)、試劑穩(wěn)定性等變異，所以要每次都要定試劑空，稱為實(shí)試劑空白。???在自動(dòng)分儀上大體上模擬手工操但多全自動(dòng)析儀為追求速度在設(shè)計(jì)采用一些折方法來測(cè)試劑空白。日立全系生化儀為。該系列分析儀是做不了實(shí)時(shí)試劑白，因?yàn)閭內(nèi)窍热霕颖竞笤噭?，為了折中，只在定?biāo)時(shí)一個(gè)試劑白，保存起來，需要扣除試劑空白再減這個(gè)先保存的。這種做，對(duì)于比較穩(wěn)定的試來講，對(duì)果影響不。????俗的講日立的儀工作流程首先是將標(biāo)本加入到比色杯中，然依次加入R1試劑、試劑，以試劑空白在每個(gè)測(cè)項(xiàng)目曲線是無法看的是7170從CALIBRATION中是以看到的就是代表劑空白吸光度，在CALIBRATION畫面里的下找到（反應(yīng)察其中STD(1)就是代表試劑空反應(yīng)曲線.為了減誤差，日立器會(huì)連續(xù)兩次測(cè)定所以你看到FIRST和SECOND條計(jì)算時(shí)是取他們平均值做試空白目的之一就是觀察劑是否穩(wěn)，積極采措施糾正。對(duì)于日立的這種試劑空測(cè)定很多器都采用種方法，叫做試劑空白校準(zhǔn)。???總說來，動(dòng)生化儀上的試劑空白般表現(xiàn)為點(diǎn)吸光度該吸光度是通過校準(zhǔn)確立的。2樣空：???由溶血、血、黃疸等情況，會(huì)導(dǎo)樣本本身吸光度對(duì)試結(jié)果造成影響。所以對(duì)樣本本身吸光度的測(cè)，即樣本空白，以去除這面的影響測(cè)量方法是按照正常測(cè)試的試劑和本量，把劑換成蒸水或生理水來進(jìn)行測(cè)量。自動(dòng)化儀上，難界定樣空白。消除樣本空白有關(guān)的大約有下幾點(diǎn):???a).在雙劑測(cè)定時(shí)加入試劑1和品后的吸光度可一定程度上扣除樣空白，所有單試劑能扣除樣本空白的說法。???b).現(xiàn)在質(zhì)的試劑抗干擾能都比較強(qiáng)，比如有些雙試劑R1加入后先樣本孵育段時(shí)間，血紅蛋白、脂肪、膽紅素反應(yīng)掉，加入R2開始測(cè)定應(yīng)。在定范圍內(nèi)可以消除樣本空白。

精心整理???c).現(xiàn)代自動(dòng)生化大多采用波長(zhǎng)測(cè)定.波長(zhǎng)測(cè)的原則是據(jù)干擾組分和待測(cè)物質(zhì)吸收光譜的形特征擇兩個(gè)波長(zhǎng)，使干擾分在這兩波長(zhǎng)處的吸光系數(shù)相等，而使待測(cè)質(zhì)在兩波處的吸光數(shù)有顯著別。以兩波長(zhǎng)分別測(cè)分析溶液吸光度，兩個(gè)吸光度值之差△A)計(jì)。這也可以除一部分本空白.???d).有些器例如日系列有門的“血清信息”功能的設(shè)置。做都是單獨(dú)用一個(gè)空通