含有部分背景知識和修正答案分子生物學(xué)

：1、反義RNA：指與mRNA互補(bǔ)的RNA分子，也包括與其它RNA互補(bǔ)的RNA分子。根據(jù)反義RNA的作用機(jī)制可將其分為3類反義RNA直接作用于靶mRNASDmRNARNA，從而易被RNA酶Ⅲ降解；Ⅱ類反義RNAmRNA的非編碼區(qū)結(jié)合，引起mRNARNAmRNA2、生物：生物，又稱DNA或，它們是DNA雜交探針技術(shù)上后與帶熒光標(biāo)記的DNA樣品分子進(jìn)行雜交，通過檢測每個(gè)探針分子的雜交3、SD序列：mRNA起始子AUG上游8～13個(gè)堿基處存在的一段特定的核苷酸序列，該序列稱為SD序列，是mRNA的起始子之所以能與小亞基定位結(jié)合的關(guān)鍵。SD序列與小亞基中16SrRNA3’端的序列互補(bǔ)，當(dāng)mRNA與小亞基結(jié)合時(shí)，SD序列與16SrRNA3’端的互補(bǔ)序列配對結(jié)合，使起始子定位于DNA背景增強(qiáng)子(er)指增加同它連鎖的轉(zhuǎn)錄頻率的A序列增強(qiáng)子是通過啟動子來增加轉(zhuǎn)錄的。有效的增強(qiáng)子可以位于的端，也可位于的端，有的還可位于的內(nèi)含子中。強(qiáng)子的效應(yīng)很明顯一般能使轉(zhuǎn)錄頻率增加～0倍有的甚至可以高達(dá)上千倍增強(qiáng)子能:[的變動;[]6DNARNA件而調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄活性的蛋白質(zhì)因子。在結(jié)構(gòu)上含有與DNA結(jié)合的結(jié)構(gòu)域參與表達(dá)調(diào)控的因子,它們與特異的靶的順式元件結(jié)合起作用。編碼反式作用因子的與作用因子可被誘導(dǎo)合成,其活性也受多種因素的調(diào)節(jié)。 組DNA的大區(qū)段而 背景：用正常的質(zhì)粒與噬菌體λ的cos位點(diǎn)構(gòu)成。其上的cos位點(diǎn)可識別噬菌體外殼蛋白。凡具有cos位點(diǎn)的任何DNA分子只要在長度上相當(dāng)于噬菌體的組，就可以同外殼蛋白結(jié)合而被包裝成類似噬菌體λ的顆粒。因此，質(zhì)粒載體的外源DNA片段的長度可大于40kb，從而大大增加了載體的攜帶能力。10、 動物：應(yīng)用 技術(shù)培育的攜帶外 并能穩(wěn)定遺傳的動物中特定的，從而使特定的在細(xì)胞內(nèi)或生物體內(nèi)失活的過程14、克?。和ㄟ^無性繁殖過程所產(chǎn)生的與親代完全相同的子代群體。15、組：細(xì)胞或生物體中，一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和18、RNA：是指由短雙鏈RNA誘導(dǎo)的同源mRNA的降解過程，可使表達(dá)1920、生物信息學(xué)：是物信息，處理，，，分析和解釋等各方面的一門學(xué)科，它通過綜合利用生物學(xué)，計(jì)算機(jī)科學(xué)和而揭示大poly(A)加尾信號。22、端粒：以線性形式存在的真核組DNA末端都有一種特殊的結(jié)構(gòu)叫端粒。該結(jié)構(gòu)是一段DNA序列和蛋白質(zhì)形成的一種復(fù)合體，僅在真核細(xì)胞染色體末端存在。端粒DNA由重復(fù)序列組成，人類端粒一端是TTAGGG另一端AATCCC.23、RFLP（限制性片段長度多態(tài)性）之間DNA的核苷酸序列存在差異，稱為DNA多態(tài)性。由于堿基組成的變化而改變了限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，從RFLP。25RNADNADNA、30：利用分子生物學(xué)技術(shù)方法，直接檢測體內(nèi)DNA或RNA的結(jié)構(gòu)或水 、31、治療的概念：治療是指通過一定方式將目的或有治療作用的DN段導(dǎo)入的靶細(xì)胞，使其發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，從而達(dá)到治療疾病目的33、PCR(PolymeraseChainReactionDNA體外合成放大技術(shù)，是指在DNA聚合酶催化下，以母鏈DNA為模板，以特定DNA互補(bǔ)的子鏈DNA的過程，可用于已知序列或部分已知序列的檢測；或擴(kuò)34、G蛋白：G蛋白是細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)途徑中起著重要作用的GTP結(jié)合蛋白，由α，β，γ35、核酶（ribozyme）是具有催化功能的RNA分子，是生物催化劑，可降解特異mRNARNA、RNA1、簡述治療的基本程序。 ①目的的選擇和②的轉(zhuǎn)③選擇治療用靶細(xì)胞④治療性的導(dǎo)入⑤外源的篩檢導(dǎo)入體內(nèi)2、簡述Rb產(chǎn)物的抑癌機(jī)制；RbE2F（G1/SSRbE2FRb（c-myc，c-（4）磷酸化程度與細(xì)胞周期密切相關(guān)：在G0、G1期，低磷酸化型的Rb白與轉(zhuǎn)錄激活因子E-2F合，使后者失活SRb白被磷酸化與E-2F離，細(xì)胞立即進(jìn)入增殖階）3cAMPcAMP－PKAG（GTP，α與βγ解離）③G蛋白磷酸化，調(diào)節(jié)代謝酶的活性或調(diào)節(jié)的表達(dá)cAMP－PKA→G（GTPGDPαβγ→AC4PCR依據(jù)DNA半保留的機(jī)理；體外DNA分子于不同溫度下可變性和復(fù)性的性質(zhì)。作為引物的一對寡核苷酸與模板DNA同源序列按照堿基互補(bǔ)配對原則形成局部TaqDNADNA25-30退火和延伸的循環(huán)，獲得特異性的DN段擴(kuò)增產(chǎn)物。PCR的原理是根據(jù)待測DN段兩端的核苷酸序列，設(shè)計(jì)并人工合成兩個(gè)分別與DN段兩dNTP板（待擴(kuò)增片段的DNA分子）的反應(yīng)體系中，經(jīng)過高溫變性（使DNA鏈解開、低溫退火（使引物與模板結(jié)合）和適溫延伸（新合成的DN段）三個(gè)階段的循環(huán)周期，對DNA分子進(jìn)行5、真核生物和原核生物組的特點(diǎn)原核生物組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)細(xì)菌等原核生物的組是一條雙鏈閉環(huán)的DNA分具有子結(jié)原核組中只有1個(gè)起結(jié)構(gòu)無現(xiàn)編碼區(qū)在組中所占的比例遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于真核組，但又遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于具有編碼同工酶的細(xì)菌組中存在著可移動的DNA序列，包括序列和轉(zhuǎn)座在DNA分子中具有多種功能的識別區(qū)域，如起始區(qū)、終止區(qū)、轉(zhuǎn)錄真核生物組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)真核組遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于原核生物的組真核具有許多起點(diǎn)，每個(gè)子大小不一。每一種真核生物都有一定mRNA真核生物組中重復(fù)順序真核生物組內(nèi)非編碼的順序（NCS）占90%以上。編碼序列占5%，真核產(chǎn)斷列，即編碼序列被非編碼序列分隔開來與內(nèi)非編DNA，內(nèi)非編碼序列為內(nèi)含子，被內(nèi)含子隔開的編碼序列則為，相距很遠(yuǎn)，但即使串聯(lián)在一起成族的也是分別轉(zhuǎn)錄的。真核生物組中也存在一些可移動的遺傳因素這些DNA順序并無明顯生物DNA1、DNA結(jié)合域有不同的結(jié)構(gòu)模式：①鋅指結(jié)構(gòu)借助半胱氨酸和組氨酸與鋅離子結(jié)合；②同源結(jié)構(gòu)域具有螺旋－回折－螺旋結(jié)構(gòu)：許多反式作用因子結(jié)合DNA60螺旋結(jié)構(gòu)的區(qū)域，稱為同源結(jié)構(gòu)域（hommain,HD）,簡稱同源域。③亮氨酸DNA聚體⑤堿性α-螺旋含較多的堿性氨基酸。2、轉(zhuǎn)錄活化結(jié)構(gòu)域是反式作用因子ααDNA合結(jié)構(gòu)域相連。①一般具有三個(gè)功能域：DNA③對的表達(dá)有正性或負(fù)性調(diào)控作用，激活和阻遏的表達(dá)7、 聚合酶的功能一、DNA（DNAKornbergpolymerase聚合酶活性；5’3’外切酶活性；3’5’外切酶活性。cDNADNA3’Sanger[2]3'→5'外切酶活性——校對作用:3'→5'DNA生長鏈末端的核苷酸。[4]焦磷酸解作用:DNApol3'DNADNA生長鏈，可以DNADNADNA的存在。[5]焦磷酸交換作用:催化dNTPPPi8、以乳糖子例，說明細(xì)菌表達(dá)的調(diào)控原理1、乳糖子（lacoperon）的組成：大腸桿菌乳糖子含Z、Y、A三個(gè)結(jié)元件O，一個(gè)啟動子P和一個(gè)調(diào)節(jié)I（是調(diào)節(jié)，編碼產(chǎn)生阻遏蛋白。2、阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)：沒有乳糖存在時(shí)，I編碼的阻遏蛋白結(jié)合于3CA（降解物活化蛋白的正性調(diào)節(jié)lac啟動子是弱啟動子在啟動子上CAP環(huán)境時(shí)cAMP濃度升高與CAP結(jié)合使CAP發(fā)生變構(gòu)CAP結(jié)合于乳糖啟動序列附近的CAP結(jié)合位點(diǎn)激活RNA聚合酶活性促進(jìn)結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合于子后促進(jìn)結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)錄對乳糖子實(shí)行正調(diào)控加速合成分解乳糖的三種酶。4、協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)：乳糖子中的I編碼的阻遏蛋白的負(fù)調(diào)控與CAP的正調(diào)9、DNA1DNADNADNADNA2DNA.OHDNA糖的變化：脫氧核糖分解，最后可引起DNA鏈斷裂。③可導(dǎo)致DNA斷裂：使脫氧核糖破壞或磷酸二酯鍵斷開。④引起DNA鏈交聯(lián)：包括DNA-DNA鏈間鏈內(nèi)交聯(lián)和3DNADNADNA45、其他因素：丫啶類化合物引起堿基和堿基缺失；氧自由基6、DNA也會產(chǎn)生自發(fā)性損傷：①DNA時(shí)產(chǎn)生堿基錯(cuò)配；②DNA修復(fù)使產(chǎn)生基錯(cuò)配；③堿基自發(fā)改變導(dǎo)致DNA損傷：互變異構(gòu)位導(dǎo)致DNA突變；脫氨基作用DNADNA101、必須有自身的子2、載體分子上必須有限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn),即多克隆位點(diǎn),以供外源DNA；3、載體應(yīng)具有可供選擇的遺傳標(biāo)志,以區(qū)別陽性重組子和重組子45DNA11、何謂工程？試述其產(chǎn)生的背景與研究內(nèi)容、工程(geneticengineering)：有目的地通過分子克隆技術(shù)，利用克隆表達(dá)特定的蛋白或多肽產(chǎn)物，或定向改造結(jié)構(gòu)所用的方法及相關(guān)的工作統(tǒng)稱為工程。、目的的獲?。簭纳镉袡C(jī)體的組中分離帶有目的的DN段重組在體外將帶有目的的DN段連接到能自我并具有選擇標(biāo)志的將重組分子導(dǎo)入受體細(xì)胞（細(xì)菌）:K-12DNA分析和表達(dá)將選出的細(xì)胞克隆的目的進(jìn)行進(jìn)一步分析并實(shí)現(xiàn)功能蛋白的12DNA，P53P53：位于17p13.1，約20kb，含11個(gè)外顯子，產(chǎn)物為p53，半衰期10P53蛋白的三個(gè)結(jié)構(gòu)域：氨基端結(jié)構(gòu)域具有促進(jìn)轉(zhuǎn)錄的作用；120-290區(qū)域DNACDK點(diǎn)等。DNAp53p53p531p21G1P21抑制cyclin-CDK活性，RB磷酸化少結(jié)合E2F，E2F不能作用于靶表DNA合成酶，細(xì)胞從G1期進(jìn)入S cyclin-CDK細(xì)胞周期蛋白依賴性激（Rb，RbE2F，E2F2GADD45DNA3Bax、IGF-BP3、Fas13DNAP53DNADNAChk2P53P53，P53p21cyclin-Cdk1G1、G2（2）14-3-3，Cdc25C，G2背景：p53是與人類腫瘤相關(guān)性最高 。野生型p53是抑 ，被稱：衛(wèi)士。定位于17p13，編碼核內(nèi)磷酸化蛋白P53。該蛋白由393基酸殘基構(gòu)成，以四聚體形式存在，半衰期20～30分鐘，分為區(qū)、酸性區(qū)、堿性區(qū)。野生型P53蛋白若修復(fù)失敗，啟動凋亡。p53突變后轉(zhuǎn)變成癌。：14、原癌活化的機(jī)制(1)點(diǎn)突變；(2)擴(kuò)增 重排 易位 啟動子及增強(qiáng)子 ；(6) 的協(xié)同作用15 治療的策略和技術(shù)方（一 治療的主要策 correction： 添加（geneaugmentation）或稱 （1）（2） （二 干預(yù)的幾種方RNA，RNAmRNAmRNA2RNA,(RNA),interference，RNAi的降解過程，可使特定表達(dá)受到抑制原理：雙鏈RNA激活Dicer，識別異常的雙鏈RNA并將其切割成短雙鏈23bp，合形成RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物（RISC，雙鏈RNA經(jīng)解旋酶作用，成為單鏈RNA，RNA4、技術(shù)：又稱為前體藥物酶轉(zhuǎn)化，可將無毒的前體藥物代謝為細(xì)胞毒性藥物，使導(dǎo)入的細(xì)胞“。常見的有HSV-tk/GCV系統(tǒng)、CD/5-FC系統(tǒng)。細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)錄時(shí)，常產(chǎn)生一些dsRNA（雙鏈RNA）。宿主細(xì)胞對這些dsRNA迅即產(chǎn)生反DicerdsRNA（大約21～23bp），即siRNA。siRNA在細(xì)胞內(nèi)RNA解旋酶的作用下解鏈成正義鏈和反義鏈，繼之由反義siRNA再與體內(nèi)一些酶（包括內(nèi)切酶、外切酶、解旋酶等）結(jié)合形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物（RNA-inducedsilencingcomplex，RISC)。RISC與外源性表達(dá)的mRNA的同源區(qū)進(jìn)行特異性結(jié)合，RISC具有核酸酶的功能，在結(jié)合部位切割mRNA，切割mRNA的降解反應(yīng)。siRNARISCmRNA，而RNARNA聚合酶(RNA-dependentRNApolymerase，RdRP）作用下合成新的dsRNA，新合成的dsRNA再由Dicer切割產(chǎn)生大量的次級siRNA，從RNAimRNA完全降解。16、目前方法有哪些（一）SouthernblotNorthernblotDNA技（二）PCR（三）單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析SSCP（四）DNA在人群中，間DNA序列存在著差異，稱為DNA多態(tài)性。其中一些切割組DNA，就會產(chǎn)生長度不同的片段，稱為限制性片段長度多態(tài)（restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP（VNTR（SNPAluI（五）（六）DNA17、IP3、DG由PIP2水解產(chǎn)生的IP3是水溶性的小分子物質(zhì)，離開細(xì)胞膜后能在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)很IP3Ca2+-通道結(jié)合后，就能使內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔里的Ca2+釋放到細(xì)胞質(zhì)而且釋放的Ca2+具有正反饋效應(yīng)即釋出的Ca2+結(jié)合到Ca2+Ca2+釋放。DGC(proteinkinaseC,PKC)，PKCCa2IP3Ca2+PKCCa2+DG胞膜磷脂成分中的磷脂酰絲氨酸的共同作用下激活PKC。哺乳動物中腦細(xì)胞的PKCPKC因子磷酸化并激活，從而調(diào)控相關(guān)的表達(dá)。背景知識：G蛋白偶聯(lián)受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的一種途徑，在磷脂酰肌醇信號通4，5-二磷酸磷脂酰肌醇（PIP2）1，4，5-三磷酸肌醇（IP3）和二?；视停ǎ﹥蓚€(gè)第二信使，胞外信號轉(zhuǎn)換為胞內(nèi)信號（2），這一信號系統(tǒng)又稱為信使系統(tǒng)（leMesserSystm）。IP3與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的IP3配體門鈣通道結(jié)合，開啟鈣通道，使胞內(nèi)Ca2+濃度升高。激活以非活性形式分布于細(xì)胞溶質(zhì)中，當(dāng)細(xì)胞接受刺激，產(chǎn)生IP3，使Ca2+濃度升高，PKC便酯（phorboles