液相色譜基本原理與應用課件

液相色譜基本原理與應用主講人：張偉主要內容1、液相色譜定義；2、儀器結構與原理；3、主要應用領域介紹；4、生產液相色譜儀器的廠家。一、液相色譜定義高效液相色譜是在經典液相色譜基礎上，引入了氣相色譜的理論，在技術上采用了高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢測器，因而具備速度快、效率高、靈敏度高、操作自動化的特點。二、儀器結構與原理高效液相色譜儀一般可分為4個主要部分：高壓輸液系統(tǒng)進樣系統(tǒng)分離系統(tǒng)檢測系統(tǒng)1.高壓輸液系統(tǒng)色譜泵恒壓泵恒流泵氣動放大泵注射泵單柱塞泵雙柱塞泵隔膜泵并聯(lián)泵串聯(lián)泵3.分離系統(tǒng)色譜柱

柱溫箱三、HPLC在各領域的主要應用環(huán)境：常見多環(huán)芳烴、多氯聯(lián)苯、硝基化合物、酚類化合物、鄰苯二甲酸脂、有機農藥等。農業(yè)：土壤礦物成分、肥料、飼料添加劑、茶葉等農產品中無機和有機成分等。食品：有機酸、氨基酸、糖、維生素、脂肪酸、香料、甜味劑、防腐劑、人工色素、病原微生物、霉菌毒素、多核芳烴等。1.環(huán)境保護HPLC已在環(huán)境監(jiān)測中得到廣泛應用,特別適用于分子量大、揮發(fā)性低、熱穩(wěn)定性差的有機污染物的分離和分析。例如多環(huán)芳烴（PAHs）、鄰苯二甲酸酯類（PAEs）、酚類、多環(huán)聯(lián)苯、聯(lián)苯胺類、陰離子表面活性劑、有機農藥、除草劑等。多環(huán)芳烴（PAHs）目前世界上公認的多環(huán)芳烴類物質為萘、蒽、菲、苯并a芘等16項，特別是苯并a芘是強致癌物質，其廣泛存在于大氣飄塵、水、土壤、生物等環(huán)境中，嚴重影響身體健康?？赡芎卸喹h(huán)芳香烴的材料：電線，插頭，塑料手柄，塑料包裝箱，橡膠手柄，有異味塑料，橡膠產品。在電子電器制造業(yè)中，PAHs通常是作為塑料添加劑進入生產環(huán)節(jié)中，如塑料粒子在擠塑的時候，和模具之間存在黏著，此時要加入脫膜劑，而脫膜劑中可能含有PAHs。多環(huán)芳烴標準品色譜圖鄰苯二甲酸酯類化合物（PAEs）鄰苯二甲酸酯類化合物的測定在全球主要工業(yè)國的生態(tài)環(huán)境中已達到了普遍檢出的程度。它在環(huán)境中殘留期較長,生物對鄰苯二甲酸酯有較強的富集作用。一旦進入自然生態(tài)系統(tǒng)中,對其健康帶來的危害是無法估計的。歐盟將鄰苯二甲酸丁基芐基酯(BBP)、鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二異辛酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、鄰苯二甲酸二異壬酯(DINP)、鄰苯二甲酸二異葵酯(DIDP)6種PAEs列為優(yōu)先控制的有毒污染物。主要存在于：玩具、食品包裝材料、醫(yī)用血袋和膠管、聚乙烯地板和壁紙、清潔劑、潤滑油、個人護理用品（如指甲油、頭發(fā)噴霧劑、香皂和洗發(fā)液）等數(shù)百種產品中。鄰苯16P標準色譜圖多溴聯(lián)苯醚是一種添加型高效阻燃劑，由于其含溴量高，熱穩(wěn)定性好，添加量少，因而被廣泛用于高分子塑料的阻燃。十溴聯(lián)苯醚的熱穩(wěn)定性非常好，適用于要求加工溫度高的聚合物。可用作聚乙烯，聚丙烯，ABS樹脂，聚苯醚，聚碳酸酯，聚氨酯，聚氯乙烯，環(huán)氧樹脂，PBT，PET，硅橡膠和三元乙丙橡膠等的阻燃劑，被廣泛用于橡膠運輸帶，石油加工，工業(yè)橡膠制品的阻燃添加劑。農藥和除草劑隨著農業(yè)生產的發(fā)展和科學技術的進步，人們?yōu)榱双@得農業(yè)豐收，化肥、農藥、除草劑等的使用量也日益增加，甚至在高爾夫球場、足球場等也使用殺蟲劑、滅菌劑等。這些都給環(huán)境帶來污染。在不揮發(fā)性和受熱易分解的以及極性農藥組分監(jiān)測中HPLC比GC更為合適,而且在這類農藥及其降解產物、代謝產物的分析中，HPLC得到廣泛的應用，除紫外、示差折光檢測器外，電化學、熒光、二極管陣列等檢測器均有應用。甲醛甲醛是一種重要的有機原料，主要用于人工合成黏結劑，如：制酚醛樹脂、合成纖維(如合成維尼綸—聚乙烯醇縮甲醛)、皮革工業(yè)、醫(yī)藥、染料等。還殺菌和防腐能力，可浸制生物標本，其稀溶液(0.1—0.5％)農業(yè)上可用來浸種，給種子消毒。甲醛標準品色譜圖富馬酸二甲酯（DMF）

富馬酸二甲酯簡稱為DMF。它具有低毒、高效、廣譜抗菌、安全、化學穩(wěn)定性好、作用時間長、適用的PH值范圍寬等特點。廣泛應用于食品、飲料、飼料、中藥材、化妝品、魚、肉、蔬菜、水果等防霉、防腐、防蟲、保鮮。富馬酸二甲酯標準品色譜圖食品營養(yǎng)成分分析

食品營養(yǎng)成分有：蛋白質、氨基酸、糖類、維生素、香料、有機酸（檸檬酸、蘋果酸等）、有機胺、礦物質等氨基酸標樣色譜圖

啤酒中有機酸分析食品添加劑分析

食品添加劑指為改善食品品質和色、香、味以及為防腐、保鮮和加工工藝的需要而加入的人工合成或者天然物質，主要分為甜味劑、防腐劑、著色劑（合成色素如檸檬黃、莧菜紅、靛藍、胭脂紅、日落黃、亮藍等）、抗氧化劑等。天然食品添加劑一般對人體無害，但目前所使用的絕大多數(shù)是化學合成添加劑，有的具有一定的毒性，如不加以限制使用，對人體健康會產生危害。因此，測定食品中添加劑的含量以控制其使用量，對保證食品質量，保障人民健康具有十分重要的意義。防腐劑防腐劑可以抑制食品中微生物的繁殖或殺滅之，防止食物腐敗，保持食品的鮮度和良好品質。常用的防腐劑有苯甲酸及其鈉鹽，山梨酸及其鈉鹽等。在我國，目前食品生產中使用的防腐劑絕大多數(shù)都是人工合成的，使用不當會有一定的副作用；有些防腐劑甚至含有微量毒素，長期過量攝入會對人體健康造成一定的損害，而且隨著人們對綠色食品的要求不斷提高，食品中防腐劑含量的測定就顯得尤其重要。甜味劑天然甜味劑有蔗糖、葡萄糖、甘草酸鈉鹽等人工甜味劑有糖精及其鈉鹽、環(huán)已基氨基磺酸鈉等。而糖精鈉價格低廉，添加方便，故使用面很廣。但如不嚴格控制添加量，過量會對人體造成危害。因此必須對市售食品中添加劑糖精鈉的情況進行監(jiān)測。苯甲酸、山梨酸和糖精鈉色譜圖三聚氰胺標準品色譜圖食用色素為了改善食品的感官性狀，允許在食品中添加一定限量的食用色素。食用色素可分為食用天然色素和合成色素，天然色素來源于植物色素和動物色素，一般較為安全。但合成色素大都有慢性毒性或致癌性，必須嚴格控制使用種類及含量。合成食用色素：是以從煤焦油中分離出來的苯胺染料為原料制成的。這類色素大多對人體有害，表現(xiàn)在3方面，即一般毒性、致瀉性和致癌性。因此，要嚴格管理，不得濫用。我國規(guī)定的人工合成色素也只有5種，就是莧菜紅、胭脂紅、檸檬黃、靛藍和日落黃，其最大容許使用量都0.01%莧菜紅、胭脂紅、檸檬黃、靛藍和日落黃

標準色譜圖食品污染物分析

霉菌毒素（黃曲霉毒素、黃桿菌毒素、大腸桿菌毒素等）、微量元素、農藥殘留等。其中黃曲霉素存在最為普遍，是食品貯存時由真菌產生的毒素，有致癌作用。3.醫(yī)藥中的應用合成藥物：抗生素、抗憂郁藥物（冬眠靈、氯丙咪嗪、安定、利眠寧、苯巴比妥等）、黃胺類藥等天然藥物生物堿（吲哚堿、顛茄堿、鴉片堿、強心甙）等生物堿類是存在于生物體（主要為植物）中的一類含氮的堿性有機化合物，大多數(shù)有復雜的環(huán)狀結構，氮素多包含在環(huán)內，有顯著的生物活性，是中草藥中重要的有效成分之一。在現(xiàn)代的分析手段中，高效液相法是分析和分離生物堿類化合物的主要手段之一?；前奉愃幬锼苄跃S生素的分離4.化工中的應用

主要應用在無機化工產品、合成高分子化合物、表面活性劑、洗滌劑成分、化妝品、染料等。偶氮染料偶氮染料偶氮基兩端連接方基的一類有機化合物)是紡織品服裝在印染工藝中應用最廣泛的一類合成染料，用于多種天然和合成纖維的染色和印花，也用于油漆、塑料、橡膠等的著色。在特殊條件下，它能分解產生20多種致癌芳香胺，經過活化作用改變人體的DNA結構引起病變和誘發(fā)癌癥。

需要檢測偶氮的產品1服裝、被褥、毛巾、假發(fā)、假眉毛、帽子、尿布以及其他的清潔衛(wèi)生用品、睡袋2鞋、手套、手表帶、手提袋、各種錢包、公文包、椅子套3紡織或皮革玩具、帶有紡織或皮革服裝的玩具、合成染料有機化合物染料24種禁用偶氮染料標準品色譜圖含氯苯酚含氯苯酚作為一種防腐、防霉、防蛀劑使用在皮革等生態(tài)紡織品行業(yè)中，三氯苯酚具有一定的防霉效果，但是對人體具有較大的生物毒性，因其有升華的特性，揮發(fā)性極強，吸入或經皮膚吸收可引起頭痛、疲倦、眼睛、粘膜及皮膚的刺激癥狀、神經痛、多汗、呼吸艱難、發(fā)紺、肝、腎損害等。含氯苯酚標準品色譜圖5.生物

主要有：氨基酸、多肽、蛋白質、核糖核酸、生物胺、多糖、酶、天然高分子化合物等。多肽色譜圖果糖色譜圖6.材料高分子材料：以高分子化合物為基礎的材料，是由相對分子質量較高的化合物構成的。主要包括橡膠、塑料、纖維、涂料、膠粘劑和高分子基復合材料，所有的生命體都可以看作是高分子的集合。環(huán)氧樹脂含量色譜圖熒光增白劑色譜圖

四、生產液相色譜儀器的廠家

進口儀器品牌

國產儀器品牌（含國內組裝）進口儀器品牌沃特世（Waters）、安捷倫（Agilent）、日本島津（Shimadzu）、戴安（Dionex）、PE（PerkinElmer）、瓦里安（Varian，被安捷倫收購）、熱電（Thermo）、日立（Hitachi、天美代理）、日本分光（Jasco、華洋科儀代理）、德國諾爾（Knauer）、貝克曼（Bekman）還有韓國英麟（YoungLin）、澳大利亞GBC、吉爾森（Gilson）等。國產儀器品牌

天瑞儀器大連依利特賽智科技北分瑞利北京東西電子北京創(chuàng)新通恒上海天美上海伍豐北京創(chuàng)新通恒

成立于2000年，是中國國內專業(yè)從事液相色譜儀研發(fā)、生產和銷售的高科技企業(yè)，生產LC2000