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文檔簡介

實驗室檢查血常規(guī)檢驗血生化檢驗?zāi)虺R?guī)檢驗糞便檢測血常規(guī)檢查血常規(guī)檢查的必要性許多疾病都需要化驗血常規(guī)來判斷疾病的程度;預(yù)后的判斷基礎(chǔ)之一;獸醫(yī)師判斷疾病和指導(dǎo)動物主人治療的基礎(chǔ)工作;使獸醫(yī)師縮小疾病的疑似范圍,排出一些疾??;配合其它檢查(血液生化檢查、尿液檢查、B超診斷、X光片、糞便檢查等);內(nèi)容實驗?zāi)康呐c要求1血樣的采取與抗凝2血細(xì)胞計數(shù)檢查3目的與要求掌握動物血樣的采取與抗凝方法。掌握血紅蛋白測定、紅細(xì)胞及白細(xì)胞計數(shù)的操作方法與注意事項。血液血漿水(90%—92%)晶體物質(zhì)(2%—3%)血漿蛋白(5%—8%)白蛋白球蛋白纖維蛋白原血細(xì)胞(45%)紅細(xì)胞白細(xì)胞血小板紅細(xì)胞比容——壓緊的血細(xì)胞在全血中所占的容積百分比(Hematocrit)(Plasma)(55%)血液的組成血液的組成血液是由液態(tài)的血漿和懸浮在血漿中的血細(xì)胞組成。全血=45%血細(xì)胞+55%血漿血細(xì)胞:紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板;血漿:(90-92%)水+(8-10%)溶質(zhì)血液的理化特性1.顏色,密度,氣味:顏色:紅色動脈血:鮮紅(血紅蛋白)靜脈血:暗紅血細(xì)胞比容壓緊的血細(xì)胞在全血中所占的容積百分比,成為血細(xì)胞比容。由于白細(xì)胞的血小板在血細(xì)胞中所占的溶劑約為1%,常被忽略不計;因而,常將血細(xì)胞比容成為紅細(xì)胞比容或者紅細(xì)胞壓積(PCV)。血液比容反映血漿容積、紅細(xì)胞數(shù)量或體積的變化。臨床上測定紅細(xì)胞比容有助于診斷多種疾病,如:脫水、貧血和紅細(xì)胞增多癥。血量

血量是血漿和血細(xì)胞的總和。犬的平均血量是體重的5%-6%貓的平均血量是體重的6%-7%機(jī)體的血量一般比較恒定,但是隨著年齡、性別、體重、營養(yǎng)、妊娠、泌乳、健康狀況及環(huán)境的改變而稍有變化。血量減少:失血是主要原因。失血對機(jī)體的危害程度,與失血速度和失血量有關(guān);快速失血危害更大。失血量一次失血不超過血量的10%,一般不會影響健康;因為:這種失血縮損失的水分和無機(jī)鹽,在1-2小時內(nèi)可以從組織液中得到補(bǔ)充;血漿蛋白質(zhì)可以由肝臟在1-2天加速合成得到恢復(fù);血細(xì)胞可以由儲存血液的釋放得到暫時的補(bǔ)充,還可以由造血器官生成血細(xì)胞來逐漸恢復(fù)。一次急性失血達(dá)到血量的20%時,生命活動將受到明顯影響。一次失血量超過全身血量的30%時,會危及生命!紅細(xì)胞的生理特性膜通透性:水、尿素、氧、二氧化碳可以自由通過細(xì)胞膜;Cl-、HCO3-較易通過細(xì)胞膜,但正離子很難通過細(xì)胞膜。懸浮穩(wěn)定性:紅細(xì)胞第一個小時末下沉的距離表示紅細(xì)胞的沉降速度,稱為紅細(xì)胞的沉降率,簡稱血沉。某些疾病時,紅細(xì)胞能較快地彼此以凹面相貼,形成紅細(xì)胞疊連而使表面積與容積的比值降低,與血漿的摩擦力減小,血沉加快。滲透脆性:在低滲溶液中,水分會深入紅細(xì)胞內(nèi),紅細(xì)胞膨脹成球形,細(xì)胞膜最終破裂并釋放出血紅蛋白(Hb),這種現(xiàn)象稱為溶血。紅細(xì)胞在低滲溶液中抵抗破裂和溶血的特性稱為紅細(xì)胞滲透脆性。紅細(xì)胞的功能紅細(xì)胞的主要功能是運輸氧和二氧化碳、并對酸、堿物質(zhì)有緩沖作用,這些功能的實現(xiàn)主要依賴于紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白。血紅蛋白與氣體運輸:每100毫升的血液可以攜帶20毫升的氧。動物的年齡、性別、營養(yǎng)狀況等因素影響血液中血紅蛋白的含量;紅細(xì)胞與血紅蛋白都減少,或者其中之一明顯減少,可以視為貧血。血紅蛋白的酸堿緩沖功能:還原血紅蛋白(HHb)和氧合血紅蛋白(HbO2)在pH約7.4的環(huán)境下,兩種形式的血紅蛋白均為弱酸性物質(zhì);他們一部分以酸分子的形式存在,一部分與紅細(xì)胞內(nèi)的鉀離子構(gòu)成血紅蛋白鉀鹽,組成了KHb/Hhb和KHbO2/HHbO2兩個緩沖對,共同參與血液酸堿平衡的調(diào)節(jié)作用。紅細(xì)胞的生成紅細(xì)胞由紅骨髓的髓系多功能干細(xì)胞分化增殖而成。再生障礙性貧血:某些放射性物質(zhì)或藥物抑制骨髓的造血功能,而導(dǎo)致再生障礙性貧血。造血需要:骨髓造血機(jī)能+重組的造血原料+促進(jìn)紅細(xì)胞成熟的物質(zhì)。紅細(xì)胞生成的主要原料:蛋白質(zhì),鐵。供應(yīng)或攝取不足,出現(xiàn)營養(yǎng)性貧血。促進(jìn)紅細(xì)胞發(fā)育和成熟的物質(zhì):主要是VB12、葉酸和銅離子。缺乏VB12或葉酸可以引起巨幼細(xì)胞性貧血;VB12的吸收不足就可以引起貧血,如:長期大劑量使用抗生素,長期腸炎等。紅細(xì)胞的壽命和破壞紅細(xì)胞的存活時間因動物品種的不同而有較大的差異;脾臟是破壞紅細(xì)胞的主要場所。白細(xì)胞①白細(xì)胞的分類:白血病是一類有核的血細(xì)胞。根據(jù)形態(tài)、功能和來源,分為粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞三大類。根據(jù)粒細(xì)胞胞漿顆粒的嗜色性不同,又分為中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞。②白細(xì)胞的數(shù)量與比例:白細(xì)胞的數(shù)量隨著動物的生理狀態(tài)而變化,下午高于早晨,幼齡動物高于成年動物,劇烈運動、進(jìn)食和疼痛時白細(xì)胞增多;個體又差異。在正常情況下,白細(xì)胞中各種細(xì)胞的比例保持相對恒定。嗜酸性粒細(xì)胞的功能有吞噬機(jī)能,但是沒有殺菌能力(細(xì)胞內(nèi)不含溶菌酶)。主要機(jī)能嗜緩解過敏反應(yīng)和限制炎癥過程。當(dāng)機(jī)體發(fā)生抗原-抗體相互作用而引起過敏反應(yīng)時,大量的嗜酸性粒細(xì)胞趨向局部,吞噬抗原-抗體復(fù)合物,以減輕對機(jī)體的危害;因此,在皮膚過敏反應(yīng)中、在藥物過敏等反應(yīng)中,可以見到其增多。在寄生蟲性感染嚴(yán)重的時候,血液中的嗜酸性粒細(xì)胞也增多。嗜堿性粒細(xì)胞的功能與組織中的肥大細(xì)胞有許多相似之處,都含有組胺、肝素和5-羥色胺等生物活性物質(zhì),細(xì)胞本身不具備吞噬能力。組織胺增加局部炎癥區(qū)域毛細(xì)血管的通透性,有利于其它的白細(xì)胞的游走和吞噬活動;肝素對于局部炎癥部位有抗凝血作用。單核細(xì)胞的功能單核細(xì)胞有變形運動和吞噬能力,可以滲出血管變成巨噬細(xì)胞;能與組織中的巨噬細(xì)胞構(gòu)成單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng),在體內(nèi)發(fā)揮防御作用。白細(xì)胞的生成三種粒細(xì)胞:來源于骨髓的原始粒細(xì)胞;淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞:主要在脾、淋巴結(jié)、胸腺、消化道黏膜淋巴組織中發(fā)育成熟。白細(xì)胞的分化增殖受造血生長因子(HGF)的調(diào)節(jié)。白細(xì)胞的破壞:白細(xì)胞衰老死亡后,大部分被肝、脾的巨噬細(xì)胞吞噬和分解,小部分經(jīng)消化道和呼吸道粘膜排出。粒細(xì)胞在吞噬細(xì)菌后可釋放過多的溶酶體酶而“自我溶解”,與被破壞的細(xì)菌和組織碎屑一起形成膿液。血小板從骨髓成熟的巨核細(xì)胞胞漿裂解脫落下來的活細(xì)胞。血小板無核,但胞漿中含有多種與其功能有關(guān)的活性因子。①血小板的生理機(jī)能:主要包括:生理性止血、凝血功能、纖維蛋白溶解作用和維持血管壁的完整性。血小板的生理功能的實現(xiàn),與其具有黏附、聚集、釋放、吸收和收縮等生理特性密切相關(guān)。②血小板的生成:骨髓造血干細(xì)胞分化成巨核系祖細(xì)胞,再分化為形態(tài)上可以識別的巨核細(xì)胞,血小板由成熟的巨核細(xì)胞裂解而成。③血小板的破壞:血小板進(jìn)入血液后,壽命約10天,但是僅在最初的2-3天具有正常的生理功能。衰老的血小板可在脾、肝和肺組織中被吞噬;也會在發(fā)揮正常生理功能時被消耗。交叉配血實驗:供血者的紅細(xì)胞和受血者的血清進(jìn)行配血試驗,叫做交叉配血主側(cè);受血者的紅細(xì)胞和供血者的血清進(jìn)行配血試驗,叫做交叉配血次側(cè)。兩個試驗均無凝血,則血型相合,可以輸血;如果主側(cè)有凝集反應(yīng),則配血不和,不能輸血;如果主側(cè)不凝集,而次側(cè)出現(xiàn)凝集,只能在緊急情況下輸血,但速度要慢,輸血量也不能太多;兩側(cè)均有凝集出現(xiàn),絕對不能輸血!如何解讀結(jié)果?一、血樣的采取與抗凝1、血樣的采?、俨裳暗臏?zhǔn)備:采血用應(yīng)事先消毒滅菌、干燥處理。采血部位應(yīng)剪毛按常規(guī)消毒。②少量用血,一般可在耳尖、冠頂及靜脈末梢等處進(jìn)行采取。③多量用血,大動物可在頸靜脈處進(jìn)行采??;豬可在前腔靜脈處采??;禽類在翅內(nèi)靜脈處采取,必要時可進(jìn)行心臟穿刺采取。小動物一般采用心臟采血。各種動物的采血部位采血部位畜種采血部位畜種頸靜脈馬、牛、羊耳靜脈豬、羊、犬、貓、實驗動物前腔靜脈豬翼下肱靜脈家禽隱靜脈犬、貓、羊蹼間靜脈鴨、鵝前肢頭靜脈犬、貓、豬冠或肉髯雞心臟兔、家禽、豚鼠斷尾豬、實驗動物2、血樣的抗凝獸醫(yī)臨床常用的抗凝劑、使用方法及用圖,見下表??鼓齽┛鼓龣C(jī)制常用濃度使用方法用途肝素阻止凝血酶元轉(zhuǎn)化為凝血酶而阻止血凝0.5~1%溶液配制后應(yīng)及時使用,每10ml血液加入0.1~0.2ml。適用于多數(shù)血液實驗診斷檢驗,不宜用于血涂片檢查。檸檬酸鈉(枸櫞酸鈉)與鈣離子形成非離子的可溶性化合物而阻止血凝3.8%溶液每10ml血液加入1ml。適用于紅細(xì)胞沉降率、輸血用抗凝,但不宜用于血液生化指標(biāo)測定。EDTA-Na2螯合血中鈣離子而阻止血凝10%溶液每10ml血液加入0.1~0.2ml。適用與一般血液學(xué)檢查,不宜用于鈉、鈣的測定。草酸鹽合劑(草酸銨+草酸鉀)與鈣離子結(jié)合,形成不溶解的草酸鈣而阻止血凝1~2%的草酸鹽溶液取此液先作抗凝瓶。1ml此液可抗凝10ml血樣(制作抗凝瓶應(yīng)小于80℃)。有毒不能用于輸血的抗凝,不宜用于白細(xì)胞分類計數(shù)與血小板計數(shù)。肝素血液學(xué)檢查項目與采血后可保存的時間檢查項目保存時間(h)檢查項目保存時間(h)白細(xì)胞計數(shù)2~3血紅蛋白含量48紅細(xì)胞計數(shù)24紅細(xì)胞壓積容量24血小板計數(shù)1紅細(xì)胞沉降速率2~3網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)2~3白細(xì)胞分類計數(shù)1~2二、紅細(xì)胞計數(shù)(RBC):顯微鏡計數(shù)法1、原理血液經(jīng)200倍稀釋后,充入血細(xì)胞計數(shù)板,用顯微鏡觀察,計數(shù)一定容積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)并換算成每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。

2、器材與試劑改良紐巴氏計數(shù)板、蓋玻片、沙利氏吸管、5ml吸管、試管、小玻棒、顯微鏡、計數(shù)器、0.85%氯化鈉稀釋液。3、方法①用5毫升吸管準(zhǔn)確吸稀釋液2毫升于試管中,用沙利氏吸管吸取血樣10微升,用脫脂棉擦去沙利氏吸管外壁多余的血液后插入試管底部,輕輕壓出血液于稀釋液中,再用上清液吸、吹數(shù)次,以洗出沙利氏管內(nèi)黏附的血細(xì)胞,充分混勻后備用。②將稀釋后的血樣用小玻棒取一滴,置于計數(shù)板與蓋玻片交界的邊緣,讓其自然浸入,使稀釋血樣擴(kuò)散入計數(shù)室內(nèi),靜置2~3分鐘,鏡檢。③計數(shù)時用低倍鏡,依次計數(shù)中央大方格內(nèi)的四角和正中5個中方格,共80個小方格的紅細(xì)胞數(shù)。為避免重復(fù)和遺漏,計數(shù)時應(yīng)按一定順序進(jìn)行。注意壓在雙線上的紅細(xì)胞,遵守“數(shù)左不數(shù)右,數(shù)上不數(shù)下”計數(shù)法則。4、計算方法每mm3血液內(nèi)紅細(xì)胞總數(shù)=5個中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)×5×10×200×106=5個中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)×1010

單位:個/升式中×5—5個中方格換算成1個大方格

×10—1個大方格容積為0.1微升,換算成1.0微升

×200—血液的稀釋倍數(shù)

×106—由微升換算成升注意防凝、防溶、取樣正確。5、正常參考值健康動物除山羊的紅細(xì)胞數(shù)較多外,其他動物的紅細(xì)胞數(shù)約為6.0×1012~8.0×1012/L。6、臨床意義

①相對增多:脫水、急性胃腸炎、腸便秘、滲出性胸膜炎、滲出性腹膜炎、某些傳染??;

②絕對增多:紅細(xì)胞增多癥,見于代償性機(jī)能不全的心臟病及慢性肺部疾?。?/p>

減少:各種貧血、出血性、溶血性、骨髓造血功能不全性貧血、營養(yǎng)不良性貧血、繼發(fā)性貧血。

(三)紅細(xì)胞形態(tài)檢查1、正常紅細(xì)胞形態(tài)

正常紅細(xì)胞形態(tài)呈雙凹圓盤形,細(xì)胞大小均一,染色為淡粉紅色,血紅蛋白充盈良好,呈正常色素性。2、異常紅細(xì)胞形態(tài)(1)小紅細(xì)胞:出現(xiàn)較多染色過淺、淡染區(qū)擴(kuò)大的小紅細(xì)胞,提示血紅蛋白合成障礙,見于缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血。由長期慢性感染(炎癥)繼發(fā)的單純小細(xì)胞性貧血,僅有胞體偏小而無淡染區(qū)增大。(2)大紅細(xì)胞:常見于葉酸及維生素B12缺乏所致的巨幼細(xì)胞性貧血,表現(xiàn)在幼紅細(xì)胞內(nèi)DNA合成不足。當(dāng)這種幼紅細(xì)胞脫核之后,形成大的成熟紅細(xì)胞。也可見于溶血性貧血、骨髓增生異常綜合癥(MDS)等。(3)紅細(xì)胞大小不均:是指紅細(xì)胞之間直徑相差一倍以上。貧血常有此現(xiàn)象,巨幼細(xì)胞性貧血時尤為明顯,與骨髓造血功能減弱有關(guān)??赏ㄟ^紅細(xì)胞分布寬度(RDW)數(shù)值指標(biāo)反映出來。(4)球形紅細(xì)胞:直徑小,著色深,無中心淡染區(qū)。其與正常紅細(xì)胞的差別在于厚度增大。主要見于遺傳性球形細(xì)胞增多癥,血涂片中此類細(xì)胞常超過25%。(5)橢圓形紅細(xì)胞:紅細(xì)胞呈橢圓形、桿形,兩端鈍圓,長軸增大,短軸縮短。細(xì)胞只有成熟后才會呈現(xiàn)橢圓形,且將此種紅細(xì)胞置于高滲、等滲、低滲溶液或正常血清內(nèi),其橢圓形保持不變,而幼紅細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞,均不呈橢圓形。偶見于缺鐵性貧血、骨髓纖維化、鐮形紅細(xì)胞性貧血。(6)口形紅細(xì)胞:紅細(xì)胞中心蒼白區(qū)呈扁平狀,形似張開的嘴巴或魚口。此種紅細(xì)胞有膜異常,使Na+透過性增加,細(xì)胞膜變硬,因而脆性增加,致使細(xì)胞生存時間縮短??梢娪谙到y(tǒng)疾患引起的貧血、乙醇中毒、某些溶血性貧血及肝病等。

(7)鐮形紅細(xì)胞:紅細(xì)胞外形呈鐮刀狀、線條狀,或呈L、S、V形等。在缺氧的條件下,可產(chǎn)生大量鐮形紅細(xì)胞。(6)棘形細(xì)胞:紅細(xì)胞表面有針狀或指狀突起,其間距不等,突起的長度和寬度不一,突起的尾端略圓??梢娪谄⑶谐?、酒精中毒性肝臟疾病、尿毒癥。(7)皺縮紅細(xì)胞,也稱鈍鋸齒形紅細(xì)胞:可因制片不當(dāng)、高滲等原因引起,紅細(xì)胞周邊呈鈍鋸齒形,突起排列均勻、大小一致,外端較尖。(8)淚滴形細(xì)胞:成熟紅細(xì)胞形如淚滴樣或梨狀。貧血時也可見到。(9)裂片紅細(xì)胞:為紅細(xì)胞碎片或不完整的紅細(xì)胞,大小不一,外形不規(guī)則,系紅細(xì)胞通過因阻塞而管腔狹小的微血管所致。彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)、微血管病性溶血性貧血時增多。紅細(xì)胞形態(tài):貧血形態(tài)學(xué)分類MCV(fl)MCH(pg)MCHC(g/l)常見病因正常細(xì)胞性貧血82~9527~31320~360急性失血性貧血、急性溶血性貧血、再生障礙性貧血、白血病等大細(xì)胞性貧血>95>31320~360缺乏葉酸及維生素B12引起巨幼細(xì)胞性貧血、惡性貧血等單純小細(xì)胞性貧血<82<27320~360慢性感染、炎癥、尿毒癥、惡性腫瘤、風(fēng)濕性疾病等小細(xì)胞低色素性貧血<82<27<320慢性失血性貧血、缺鐵性貧血、地中海性貧血、鐵粒幼細(xì)胞性貧血等3、紅細(xì)胞中的異常結(jié)構(gòu)(1)何-喬氏小體:紅細(xì)胞內(nèi),紫色。見于嚴(yán)重貧血或脾切除。(2)卡伯環(huán):紅細(xì)胞內(nèi),線圈狀或8字形。見于鉛中毒或溶血性貧血。(3)海恩茲小體:新鮮血涂片,紅細(xì)胞內(nèi)或邊緣,一個或多個不等藍(lán)黑色小點,折光性。見于硒缺乏癥、牛羊的銅中毒、洋蔥中毒、甘藍(lán)中毒等。(六)細(xì)胞沉降速度的測定

紅細(xì)胞沉降率是指在室溫下觀察抗凝血中紅細(xì)胞在一定時間內(nèi)在血漿中的沉降速率。血沉與紅細(xì)胞串錢狀的形成、紅細(xì)胞數(shù)目的多少、血漿蛋白的組成以及測定時室溫的變化、血沉管傾斜的程度等因素有關(guān)??鼓?.8%枸櫞酸鈉液魏氏法魏氏血沉管:長30cm

內(nèi)徑為2.5mm

管壁有200個刻度每個刻度之間距離為1.0mm

附有特制的血沉架圖7-1魏氏血沉管 測定方法(1)取3.8%枸櫞酸鈉液0.4ml置于小試管中。(2)頸靜脈采血,沿管壁加入試管,輕輕混合。(3)用血沉管吸取抗凝血至刻度0處,用棉花擦去管外血液,直立于血沉架上。(4)經(jīng)15、30、45、60min,分別記錄紅細(xì)胞沉降的刻度數(shù),用分?jǐn)?shù)形式表示(分母代表時間,分子代表沉降mm數(shù))。①測定血沉?xí)r必須用新配制的抗凝血;②血液與抗凝劑混合要充分,柱面上不應(yīng)有氣泡,它可使血沉變慢;③用魏氏法測定時,事先應(yīng)檢查血沉架是否好用,以防漏用;④測定時室溫以20℃左右為宜,溫度過低可以減慢血沉。臨床意義

(1)血沉率加快:常見于各種貧血性疾病、炎癥性疾病及組織損傷或壞死(如結(jié)核病、風(fēng)濕熱、全身性感染等)。隨著疾病的好轉(zhuǎn),血沉率逐漸變慢并恢復(fù)正常。(2)血沉率減慢:常見于機(jī)體嚴(yán)重的脫水,如胃擴(kuò)張、腸阻塞、急性胃腸炎、瓣胃阻塞、發(fā)熱性疾病、酸中毒等。血液檢驗各種動物的正常血沉值動物種類15分30分45分60分測定方法馬驢黃牛水牛奶牛山羊豬31329.80.33497530.80.785396.7650.752055110.70.891.61.20.630六五型法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法六五型法血沉加快:見于梨形蟲病、結(jié)核、鼻疽、豬瘟、化膿性炎癥、風(fēng)濕癥等。血沉減慢:見于大出汗、多尿、劇烈腹瀉、馬流行性腦脊髓炎、破傷風(fēng)、牛瓣胃阻塞、腹痛癥等。(七)紅細(xì)胞壓積容量測定

紅細(xì)胞壓積又稱紅細(xì)胞比容,是指紅細(xì)胞在血液中所占容積的比值,測定時將抗凝血在一定的條件下離心沉淀,即可測得每升血液中血細(xì)胞所占容積的比值。器材(1)溫氏管:管長11cm,內(nèi)徑約2.5mm,管壁有100個刻度。一側(cè)自上而下標(biāo)有0~10,供測定血沉用,另一側(cè)標(biāo)有10~0,供測定比容用。(2)水平電動離心機(jī):轉(zhuǎn)速能達(dá)4000rpm。

圖7-5溫氏管及長針頭 臨床意義(1)紅細(xì)胞壓積增高:

1、由于紅細(xì)胞壓積增高的數(shù)值與脫水程度成正比,因此在臨床上可根據(jù)這一指標(biāo)的變化而推斷機(jī)體的脫水情況,并計算補(bǔ)液的數(shù)量及判斷補(bǔ)液量的實際效果。相對性增多:見于各種原因所引起的血液濃縮,使紅細(xì)胞相對性增多,如急性胃腸炎、腸便秘、腸變位、瓣胃阻塞、滲出性胸膜炎和腹膜炎,以及某些傳染病和發(fā)熱性疾病。絕對性增多見:于各種原因所致的紅細(xì)胞絕對性增多,如真性紅細(xì)胞增多癥、肺動脈狹窄、高鐵血紅蛋白血癥等。(2)紅細(xì)胞壓積降低:見于各種貧血,但降低的程度并不一定與紅細(xì)胞數(shù)一致,因為貧血有小細(xì)胞性貧血、大細(xì)胞性貧血及正細(xì)胞性貧血之分。(八)血紅蛋白的測定——沙利氏比色法血紅蛋白測定是指測定并計算出每升血液中血紅蛋白的克數(shù)。血紅蛋白是紅細(xì)胞的主要內(nèi)含物,每個正常紅細(xì)胞內(nèi)所含的血紅蛋白約占紅細(xì)胞重量的32%~36%,或紅細(xì)胞干重的96%。1.原理血液與鹽酸作用后,釋放出血紅蛋白,并被酸化后變?yōu)楹稚柠}酸高鐵血紅蛋白,與標(biāo)準(zhǔn)柱相比,求出每百毫升血液中血紅蛋白的克數(shù)或百分?jǐn)?shù)。2。器材與試劑(1)沙利氏血紅蛋白計一套。在測定管上有兩種刻度,一側(cè)表示血紅蛋白在每百毫升血液內(nèi)的克數(shù),另一側(cè)表示百分?jǐn)?shù)。國產(chǎn)的血紅蛋白計是以每百毫升血液含14.5g血紅蛋白做為100%而設(shè)制。(2)1%鹽酸一小瓶。方法(1)向沙利氏比色管內(nèi)加入鹽酸5滴。(2)用沙利氏吸血管吸血至20μl刻度處,擦去管外沾附的血液。(3)徐徐吹入沙利氏比色管內(nèi),不要產(chǎn)生氣泡,再反復(fù)吸、吹數(shù)次,以洗出沙利氏吸血管中的血液。輕輕振動比色管,使血液與鹽酸充分混合。(4)靜置10min,待血液變成褐色后,緩緩滴加蒸餾水,每加1滴,用細(xì)玻璃棒攪動一次,直到顏色與標(biāo)準(zhǔn)色柱完全相同為止。液柱凹面所指的刻度數(shù),即為每百毫升血液中血紅蛋白的克數(shù),用g或%表示。圖7-4沙利氏血紅蛋白計 臨床意義(1)血紅蛋白增多:主要是見于脫水,血紅蛋白相對增加。也見于真性紅細(xì)胞增多癥,是一種原因不明的骨髓增生性疾病,目前認(rèn)為是多能干細(xì)胞受累所致。其特點是紅細(xì)胞持續(xù)性顯著增多,全身總血量也增加,見于馬、牛、犬和貓。(2)血紅蛋白量減少:主要見于各種貧血。(九)紅細(xì)胞計數(shù)1.原理

血液經(jīng)稀釋后,充入血細(xì)胞計數(shù)板,用顯微鏡觀察,計數(shù)一定容積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)并換算成每μl內(nèi)的數(shù)目。2.器材(1)血細(xì)胞計數(shù)板:板中間有橫溝將其分為三個狹窄的平臺,兩邊的平臺較中間的平臺高0.1mm。中央平臺又有一縱溝相隔,其上各刻有一個計數(shù)室。每個計數(shù)室劃分為9個大方格,每一大方格面積為1.0mm2,深度為0.1mm;四角每一大方格劃分為16個中方格。中央一大方格用雙線劃分為25個中方格,每個中方格又劃分為16個小方格,共計400個小方格。(2)顯微鏡,計數(shù)器等。(3)稀釋液:0.85%氯化鈉溶液。圖7-6血細(xì)胞計數(shù)板構(gòu)造 圖7-7記數(shù)室的劃格 方法:采血、稀釋、加液圖7-9紅細(xì)胞記數(shù)順序 圖7-8記數(shù)室充液法

數(shù)左不數(shù)右,數(shù)上不數(shù)下

計算X/80×400×200×10=1mm3血液中紅細(xì)胞個數(shù)。X——5個中方格(即80個小方格)內(nèi)的紅細(xì)胞總數(shù)。400——一個大方格,即1mm2面積內(nèi)共有400個小方格。200——稀釋倍數(shù)。10——血蓋片與計數(shù)板的實際高度是1/10mm,乘10后則為1.0mm。上式簡化后為X×10,000=紅細(xì)胞數(shù)/mm3臨床意義(1)紅細(xì)胞增多:相對性增多:這是由于血漿中水分丟失,血液濃縮所致。見于嚴(yán)重嘔吐、腹瀉、大量出汗、急性胃腸炎、腸便秘、腸變位、瘤胃積食、瓣胃阻塞、真胃阻塞、滲出性胸膜炎、滲出性腹膜炎、日射病與熱射病、大面積燒傷等。絕對性增多:這是由于紅細(xì)胞增生活躍的結(jié)果。按發(fā)病原因分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩類:①原發(fā)性紅細(xì)胞增多:原發(fā)性紅細(xì)胞增多又稱真性紅細(xì)胞增多癥,是一種原因不明的骨髓增生性疾病,目前認(rèn)為是多能干細(xì)胞受累所致。其特點是紅細(xì)胞持續(xù)性顯著增多,全身總血量也增加,見于馬、牛、犬和貓。②繼發(fā)性增多:是非造血系統(tǒng)疾病,發(fā)病的主要環(huán)節(jié)是血中紅細(xì)胞生成素增多。A.紅細(xì)胞生成素代償性增加:因血氧飽和度減低,導(dǎo)致組織缺氧,紅細(xì)胞生成素增加,骨髓制造紅細(xì)胞的機(jī)能亢進(jìn)而引起紅細(xì)胞增多。紅細(xì)胞增多的程度與缺氧程度成正比。見于高原適應(yīng)、慢性阻塞性肺病、先天性心臟?。ㄈ绶蝿用}狹窄、動脈導(dǎo)管未閉、法樂氏四聯(lián)綜合癥)、血紅蛋白?。ㄈ绺哞F血紅蛋白癥、硫化血紅蛋白癥)。B.紅細(xì)胞生成素病理性增加:紅細(xì)胞生成素增加與腎臟疾病或腫瘤有關(guān),如腎囊腫、腎積水、腎血管缺陷、腎癌、腎淋巴肉瘤、小腦血管瘤、子宮肌瘤、肝癌等。(2)紅細(xì)胞數(shù)減少:見于貧血。每升血液中紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白量及紅細(xì)胞壓積容量低于正常參考值下限時,稱為貧血。按病因可將貧血分為4類:

失血性貧血:慢性失血性貧血見于胃潰瘍、球蟲病、鉤蟲病、捻轉(zhuǎn)胃蟲病、螨病、維生素C和凝血酶原缺乏等疾病。急性失血性貧血見于丙酮芐烴香豆素中毒、草木樨中毒、脾血管肉瘤、犬和貓自體免疫性血小板減少性紫癜、手術(shù)和外傷等。溶血性貧血:見于牛巴貝西蟲病、牛泰勒蟲病、鉤端螺旋體病、馬傳染性貧血;綿羊、豬、犢牛的甘藍(lán)中毒和野洋蔥中毒;新生騾駒溶血病、犬自體免疫性溶血性貧血等。營養(yǎng)性貧血:見于蛋白質(zhì)缺乏,銅、鐵、鈷等微量元素缺乏,維生素B1、B2、B6、B12、葉酸、煙酸缺乏等。再生障礙性貧血:見于輻射病、蕨中毒、馬穗狀葡萄菌毒病、梨孢鐮刀菌毒病、羊毛圓線蟲病、犬歐利希文病、貓傳染性泛白細(xì)胞減少癥、慢性粒細(xì)胞白血病、淋巴細(xì)胞白血病、垂體功能低下,腎上腺功能低下,甲狀腺功能低下等。三、白細(xì)胞計數(shù)(WBC):顯微鏡計數(shù)法1、原理:用白細(xì)胞稀釋液破壞紅細(xì)胞后,混勻充入計數(shù)池中,在顯微鏡下計數(shù)一定容積中的白細(xì)胞數(shù),經(jīng)換算求得每升血液中的白細(xì)胞總數(shù)。2、試劑與設(shè)備:改良紐巴氏計數(shù)板、蓋玻片、沙利氏吸管、1ml吸管、試管、小玻棒、顯微鏡、計數(shù)器、白細(xì)胞稀釋液(2%冰醋酸溶液或1%鹽酸溶液)。3、方法:用1毫升移液管吸取白細(xì)胞稀釋液0.4毫升于小試管中,再用沙利氏吸管吸取血樣至20微升處,用脫脂棉擦去吸管周圍多余血液,然后將吸管插入小試管底部,緩慢放出血液后用上清液反復(fù)吹洗數(shù)次,以洗凈管內(nèi)所粘附的血液,充分混勻振蕩,備用。取樣與計數(shù)方法與紅細(xì)胞計數(shù)方法相同,計數(shù)在計數(shù)室四角的四個大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。4、計算方法:每升血液內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)=

四個大方格白細(xì)胞數(shù)÷4×10×20×106

單位:個/升5、注意事項:初學(xué)者容易把塵埃異物與白細(xì)胞混淆,可用高倍鏡觀察,白細(xì)胞有細(xì)胞核的結(jié)構(gòu),而塵埃異物的形狀不規(guī)則,無細(xì)胞結(jié)構(gòu)。5、正常參考值(附后表)6、臨床意義①增多:細(xì)菌性感染、炎癥、白血病、惡性腫瘤、中毒性疾病。②減少:病毒性傳染病、犬瘟熱、貓泛白血病減少癥、各種疾病晚期;再生障礙性貧血;藥物性降低:磺胺類、氯霉素、青霉素、鏈霉素、氨基比林、水楊酸鈉等;血液原蟲病、血液孢子病。各種健康動物血紅蛋白數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)及白細(xì)胞數(shù)參考值動物Hb/(g·L-1)RBC/(1012·L-1)WBC/(109·L-1)水牛123.0±16.65.91±0.988.04±0.30黃牛95.5±10.07.24±1.578.43±2.08乳牛83.7±7.05.97±0.869.41±2.13綿羊92.6±5.18.42±1.208.45±1.90山羊118.0±10.315.23±1.0312.47±0.90豬112.3±13.75.51±0.3114.02±0.93犬133.6±13.56.57±0.3410.93±1.29雞84.9±30.43.04±0.28/資料見:安麗英編著.獸醫(yī)實驗診斷.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社.2000年:25.紅細(xì)胞RBC降低a.幼年犬貓

b.出血或溶血

c.紅細(xì)胞生成或分化障礙

d.慢性炎癥e.惡性腫瘤

f.營養(yǎng)缺乏

g.肝硬化-相對降低升高

相對:a.脫水

b.休克

c.興奮性脾臟收縮

d.大面積燒傷

絕對:

原發(fā)性:a.紅細(xì)胞增多癥

b.慢性肺心病繼發(fā)性:a.慢性氧不足,心血管問題引起代償性增多

b.腎腫瘤c.腎囊腫

d.內(nèi)分泌紊亂影響因素:a.白細(xì)胞顯著增多+

b.高脂血癥+

c.高膽色素血癥,溶血+血紅蛋白HGB最能直接反應(yīng)紅細(xì)胞運輸氧氣能力的因素

平均紅細(xì)胞體積MCV升高a.網(wǎng)織紅細(xì)胞增多

b.靈緹—生存周期短

c.貴賓犬

d.阿拉斯加犬,迷你雪納瑞犬

e.紅細(xì)胞凝集降低a.未成年動物

b.缺鐵性貧血

c.門靜脈分流

d.亞洲品種的犬平均紅細(xì)胞血紅蛋白量MCH

平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度MCHC升高

---一般無真性升高溶血脂血癥貓血中存在大量Heinz小體降低貧血(網(wǎng)織紅細(xì)胞)*這兩個參數(shù)不是特別有用,不過可用來檢測儀器

紅細(xì)胞分布寬度RDWc細(xì)胞大小細(xì)胞數(shù)量白細(xì)胞分類計數(shù)(DC)1、原理:細(xì)胞的染色反應(yīng),決定于細(xì)胞的化學(xué)結(jié)構(gòu)對染色物質(zhì)的親和力。將血液制成涂片,經(jīng)染色后鏡檢,根據(jù)顯示各種細(xì)胞形態(tài)和著色特點,測定血液中各種類型白細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)。2、試劑與設(shè)備:瑞氏染色液、磷酸鹽緩沖液、二甲苯、香柏油、載玻片、染色盆及支架、擦鏡紙、吸水紙、白細(xì)胞分類計數(shù)器、顯微鏡。

3、方法①血片的制作:左手持載玻片兩端,右手持推片,取被檢血一滴滴于載片一端,推片一端與血接觸呈45°角,并使其血液自由沿推片邊緣擴(kuò)散,待均勻后,以同等速度輕輕向另一端推動,使血均勻地涂抹在載片上。讓其自然干燥,待染。注意:載玻片必須無油脂、潔凈、干燥。否則會影響血細(xì)胞形態(tài)。②瑞氏染色法:是最常用的染色法之一。將干燥的血片,置于染色架上,滴加瑞氏染液于血片上,并計其滴數(shù),直至將血膜浸蓋為止。(也可將血液涂片的血膜向下,滴加染液時由玻片邊緣浸入,以覆蓋血膜。此法可避免顆粒狀物沉于血膜上,而影響計數(shù))。待染1~2min后,再加等量的緩沖液或蒸餾水,并輕輕吹動使其混勻。放置染色5~10min,然后用蒸餾水沖洗,吸干,油鏡觀察。合格的涂片1、良好的血片,血液分布均勻,厚度適當(dāng)。2、對光觀察時呈霓紅色,血膜應(yīng)位于玻片的中央。3、兩端留有空隙,以便注明畜別,編號及日期。注意:沖洗時應(yīng)將蒸餾水直接向血膜上傾倒,使液體自血邊緣溢出,沉淀物從液面浮去。切勿先將染液傾去再沖洗,否則沉淀物附著于血膜上不易沖掉。染色良好的血片呈櫻紅色,如呈淡紫色,是染色時間過長,呈紅色是染色時間過短。③白細(xì)胞分類計數(shù)法:白細(xì)胞分類時先用低倍鏡觀察白細(xì)胞的分布,然后滴上香柏油,用油鏡觀察計數(shù)。為避免重復(fù)計數(shù),可采用四角區(qū)法計數(shù)(在血片的四角各取一點,在此區(qū)域內(nèi)各計數(shù)25個,共計100個白細(xì)胞。也可用兩區(qū)、三區(qū)法計數(shù)等),按各類的白細(xì)胞所占有的百分?jǐn)?shù),計算其比值。各種白細(xì)胞的形態(tài)特征(瑞氏染色法)白細(xì)胞種類細(xì)胞核細(xì)胞漿位置形狀顏色核染色質(zhì)細(xì)胞核膜多少顏色透明帶顆粒嗜中性幼年型偏心性橢圓紅紫色細(xì)致不清楚中等藍(lán)色或粉紅色無紅或藍(lán),細(xì)致或粗糙嗜中性桿狀核中心或偏心性馬蹄或蠟?zāi)c性淺紫藍(lán)色細(xì)致存在多粉紅色無嗜中、嗜酸或嗜堿嗜中性分葉核中心或偏心性3~5葉者居多深紫藍(lán)色粗糙存在多淺粉紅色無粉紅色或紫紅色嗜酸性白細(xì)胞中心或偏心性2~3葉者居多較淺紫藍(lán)色粗糙存在多藍(lán)色或粉紅色無深紅,分布均勻,馬的最大,其他動物次之嗜堿性白細(xì)胞中心性葉狀核不太清楚較淺紫藍(lán)色粗糙存在多淺粉紅色無藍(lán)黑色,分布不均勻,大多數(shù)在細(xì)胞的邊緣淋巴細(xì)胞偏心性圓形或微凹入深紫藍(lán)色大塊或中等塊或致密致密少天藍(lán)深藍(lán)或淡紅色胞漿深染時存在無或有少數(shù)嗜亞尼林藍(lán)色顆粒大單核細(xì)胞中心或偏心性豆性山字形橢圓形淡藍(lán)紫色細(xì)致網(wǎng)狀邊緣不齊存在很多灰藍(lán)或云藍(lán)色無很多,非常細(xì)小、淡紫色嗜堿性白細(xì)胞淋巴細(xì)胞漿細(xì)胞單核細(xì)胞嗜中性中幼細(xì)胞嗜中性晚幼細(xì)胞嗜中性白細(xì)胞嗜酸性白細(xì)胞臨床意義

(1)白細(xì)胞增多:見于大多數(shù)細(xì)菌性傳染病和炎性疾病,如炭疽、腺疫、巴氏桿菌病、豬丹毒、纖維素性肺炎、小葉性肺炎、腹膜炎、腎炎、子宮炎、乳房炎、蜂窩織炎等疾病。此外,還見于白血病、惡性腫瘤、尿毒癥、酸中毒等。(2)白細(xì)胞減少:見于某些病毒性傳染病,如豬瘟、馬傳染性貧血、流行性感冒、雞新城疫、鴨瘟等;見于各種疾病的瀕死期和再生障礙性貧血。還見于長期使用某些藥物時,如磺胺類藥物、青霉素、鏈霉素、氯霉素、氨基比林、水楊酸鈉等。返回淋巴細(xì)胞LYM,LYM%升高a.病毒感染

b.慢性感染

c.淋巴細(xì)胞性白血病

d.白血性淋巴肉瘤e.生理性

f.腎上腺功能不足

g.血液寄生蟲感染降低

a.應(yīng)激或使用腎上腺皮質(zhì)激素

b.放射線

c.感染(病毒,立克次體,弓形蟲)

六、血小板計數(shù)(PLT,PT,BPC)PLT來自骨髓巨核細(xì)胞系,在血液循環(huán)中,血小板不與其他細(xì)胞發(fā)生作用,而是沿著毛細(xì)血管內(nèi)壁排列,維持其完整性,它具有黏附、聚集、分泌、促凝血和血塊收縮功能。當(dāng)血管局部受到損傷時,血小板的止血兼不機(jī)械性堵塞傷口和生物化學(xué)的黏附,聚集作用。⑴血小板增多:①原發(fā)性血小板增多癥:可發(fā)生血栓或血栓性并發(fā)癥;②骨髓增生性疾?。郝粤<?xì)胞白血病、真性紅細(xì)胞增多癥、骨髓纖維化癥等;③爭性大出血、急性溶血、急性化膿性感染;④脾切除手術(shù)后。⑵血小板減少:①血小板生成障礙:見于骨髓造血功能受損而致造血功能障礙性疾病,如再生障礙性貧血,急性白血病,放射病和放射治療、化療后,骨髓纖維化等;②血小板破壞或消耗過多:見于原發(fā)性血小板減少性紫癜、脾功能亢進(jìn)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)、血栓性血小板減少性紫癜、進(jìn)行體外體循環(huán)手術(shù)等;③服用某些藥物可使血小板減少:如氯霉素、鏈霉素、青霉素、磺胺類藥、阿司匹林、氯丙嗪、抗甲狀腺藥物等。[異常結(jié)果處理]⒈PLT顯著增多,必須警惕發(fā)生血栓,應(yīng)在醫(yī)師指導(dǎo)下降低血液黏度。⒉PLT顯著減少,必須防止出血,應(yīng)在醫(yī)師指導(dǎo)下輸血或輸注血小板,盡可能避免手術(shù)治療。全自動血液細(xì)胞分析儀檢驗動物種類多有12種動物檢測模式,如狗、貓、馬、牛、羊、猴、鼠,并有四種用戶自定義模式。適用范圍寵物醫(yī)院動物檢疫部門畜牧獸醫(yī)院動物園科研院校實驗中心操作方便嵌入式標(biāo)本處理和測量單元全新高精度血液處理技術(shù),抗凝全血9.6μl試劑自動加入,能直接感應(yīng)試劑余量排堵方便20項檢測結(jié)果及WBC、RBC、PLT直方圖同屏顯示9.6μl抗凝血只需按“計數(shù)“健即被吸取分析結(jié)果可靠界面鼠標(biāo)操作,參數(shù)支持人工調(diào)整提供配套的動物血檢測專用試劑有報告打印功能主要技術(shù)參數(shù)工作原理:電阻抗法,氰化高鐵血紅蛋白法及無氰化物的SFT法檢測參數(shù):白細(xì)胞三分群,23項參數(shù)(含WBC、RBC、PLT彩色直方圖)標(biāo)準(zhǔn)用量:9.6μl(全血模式)20μl(預(yù)稀釋模式)檢測速度:≥40樣本/小時,可24小時開機(jī)有自動休眠及喚醒功能結(jié)果存儲:主機(jī)自動存儲12000份樣本的全部參數(shù)包括直方圖、歷史數(shù)據(jù)的管理查詢更便捷操作語言:全中文動物種類:狗、貓、馬、牛、羊、猴、鼠等八種和四種用戶自定義模式質(zhì)控方式:X-B、L-J、、SD、CV標(biāo)準(zhǔn)方式:自動校準(zhǔn)

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