利用免疫學(xué)進(jìn)行防治和診斷方法

第九章免疫學(xué)應(yīng)用第一節(jié)免疫學(xué)防治一、免疫學(xué)預(yù)防二、免疫學(xué)治療第二節(jié)免疫學(xué)診斷一、體外免疫學(xué)檢測(cè)二、體內(nèi)免疫學(xué)檢測(cè)第一頁，共二十六頁。第一節(jié)免疫學(xué)防治一、免疫學(xué)預(yù)防（一）人工自動(dòng)免疫：是給機(jī)體輸入疫苗或類毒素等抗

原物質(zhì)，剌激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫力。1、死疫苗：用物理或化學(xué)的方法將病原微生物殺死制備而成

的制劑。又稱滅活疫苗。

2、活疫苗：用人工變異或從自然界篩選獲得的減毒或無毒的

活的病原微生物制成的制劑。又稱減毒活疫苗。

3、類毒素：用0.3-0.4%甲醛處理外毒素，使其失去毒性，保

留抗原性的物質(zhì)。

4、新型疫苗：亞單位疫苗、合成疫苗、基因工程疫苗第二頁，共二十六頁。第一節(jié)免疫學(xué)防治死疫苗和活疫苗的比較

區(qū)別點(diǎn)

死疫苗

活疫苗制劑特點(diǎn)死、強(qiáng)毒株活、弱毒或無毒接種劑量及次數(shù)較多，2-3次較少，1次副作用較大較小保存及有效期易保存，1年不易保存4℃數(shù)周免疫效果較差，維持?jǐn)?shù)月至2年較好，維持3-5年或更長第三頁，共二十六頁。第一節(jié)免疫學(xué)防治一、免疫學(xué)預(yù)防（二）人工自動(dòng)免疫的注意事項(xiàng)1、接種對(duì)象：免疫力差、流行地區(qū)的易感者等；

2、接種劑量、次數(shù)和間隔時(shí)間：死疫苗2-3次，間隔7-10天；

活疫苗1次；類毒素2次，間隔4-6周。

3、接種途徑：死疫苗多皮下注射、活疫苗多皮內(nèi)注射、皮上

劃痕或以自然感染途徑接種。

4、接種后反應(yīng)：接種24小時(shí)左右局部出現(xiàn)紅腫、疼痛、淋巴

結(jié)腫大；短暫發(fā)熱、頭痛、惡心等，一般癥

狀輕微，數(shù)天恢復(fù)正常。

5、禁忌癥：高熱、嚴(yán)重心、肝、腎疾病、傳染病、惡性腫

瘤、孕婦等。第四頁，共二十六頁。第一節(jié)免疫學(xué)防治我國推行的兒童基礎(chǔ)免疫程序

年齡

疫苗

年齡

疫苗出生時(shí)卡介苗、乙肝疫苗8個(gè)月麻疹疫苗2個(gè)月三價(jià)脊髓灰質(zhì)炎疫苗11.5-2歲百白破43個(gè)月三價(jià)脊髓灰質(zhì)炎疫苗2，百白破14歲三價(jià)脊髓灰質(zhì)炎疫苗44個(gè)月三價(jià)脊髓灰質(zhì)炎疫苗3，百白破27歲卡介苗、麻疹疫苗、白破二聯(lián)疫苗5個(gè)月百白破312歲卡介苗（農(nóng)村）第五頁，共二十六頁。第一節(jié)免疫學(xué)防治二、免疫學(xué)治療（一）人工被動(dòng)免疫：是給機(jī)體輸入抗體，使機(jī)體獲得特異性免疫力。可立即獲得，但免疫維持時(shí)間短，2-3周，多用于治療或緊急預(yù)防。1、抗毒素：是抗細(xì)菌外毒素的抗體。多為馬血清制劑，具有抗體性和免疫原性。

2、人丙種球蛋白：從正常人血漿或健康產(chǎn)婦胎盤中提取制成。

3、人特異性免疫球蛋白：來源于恢復(fù)期病人及含高價(jià)特異性抗體供血者血漿，或接受類毒素和疫苗免疫者的血漿。第六頁，共二十六頁。第一節(jié)免疫學(xué)防治人工自動(dòng)免疫和人工被動(dòng)免疫的特點(diǎn)

項(xiàng)目

人工自動(dòng)免疫

人工被動(dòng)免疫輸入物質(zhì)抗原抗體產(chǎn)生免疫力時(shí)間慢（2-3周）快（輸注即生效）免疫力維持時(shí)間數(shù)月至數(shù)年2-3周主要用途預(yù)防治療或緊急預(yù)防第七頁，共二十六頁。第一節(jié)免疫學(xué)防治二、免疫學(xué)治療（二）免疫增強(qiáng)劑（IPA）：是增強(qiáng)、促進(jìn)和調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的生物或非生物制劑。主要用于惡性腫瘤、免疫缺陷病和傳染病的輔助治療。免疫增強(qiáng)劑分類

分類

舉例細(xì)胞因子制劑IL-2、TNF、IFN微生物制劑卡介苗、短小棒狀桿菌、脂磷壁酸化學(xué)藥物左旋咪唑、西咪替丁多糖類制劑茯苓多糖、人參多糖第八頁，共二十六頁。第一節(jié)免疫學(xué)防治（三）過繼免疫：是將供者的淋巴細(xì)胞或淋巴因子轉(zhuǎn)移給受

者，以增強(qiáng)其細(xì)胞免疫功能。

（四）免疫抑制劑：是一類抑制機(jī)體免疫功能的生物或非生

物制劑。常見免疫抑制劑種類

分類

舉例抗生素環(huán)孢霉素A、FK-506單克隆抗體制劑抗TC及亞群、抗MHC、抗IL和IL受體激素腎上腺皮質(zhì)類固醇烷化劑環(huán)磷酰胺抗代謝藥硫唑嘌呤、5-氟尿嘧啶第九頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷一、體外免疫學(xué)檢測(cè)（一）體液免疫檢測(cè)（血清學(xué)反應(yīng)）1、抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)：特異性可逆性比例性階段性第十頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷一、體外免疫學(xué)檢測(cè)1、抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)：抗體過剩比例適當(dāng)抗原過?？乖贵w的比例與其形成免疫復(fù)合物大小的關(guān)系第十一頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷一、體外免疫學(xué)檢測(cè)2、常見的體液免疫檢測(cè)法：（1）凝集反應(yīng)：間接凝集和間接凝集抑制試驗(yàn)第十二頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷（2）沉淀反應(yīng)：單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)第十三頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷（2）沉淀反應(yīng)：雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)第十四頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷（2）沉淀反應(yīng)：對(duì)流免疫電泳-+第十五頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷（3）補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)：補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)第十六頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷一、體外免疫學(xué)檢測(cè)3、免疫標(biāo)記技術(shù)：——免疫熒光技術(shù)免疫熒光直接法免疫熒光間接法第十七頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷3、免疫標(biāo)記技術(shù)：——免疫酶技術(shù)1、包被抗體

洗2、加抗原

洗3、加酶標(biāo)抗體

洗4、加底物顯色1、包被抗原

洗2、加抗體

洗3、加酶標(biāo)抗

球蛋白

洗4、加底物顯色ELISA雙抗體夾心法ELISA間接法第十八頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷3、免疫標(biāo)記技術(shù)：——放射免疫測(cè)定法（RIA）

放射免疫測(cè)定法（RIA）是將放射性核素分析的靈敏性和抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合的測(cè)定技術(shù)。具有靈敏、精確、特異性高、易規(guī)范化及自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)的一種先進(jìn)的免疫標(biāo)記技術(shù)。3、免疫標(biāo)記技術(shù)：——金免疫技術(shù)

金免疫技術(shù)是一處以膠體金作為標(biāo)記物的免疫標(biāo)記技術(shù)。是目前應(yīng)用廣泛、簡便、快速的檢驗(yàn)方法。第十九頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷一、體外免疫學(xué)檢測(cè)（二）細(xì)胞免疫檢測(cè)——T細(xì)胞總數(shù)測(cè)定（1）E花環(huán)試驗(yàn)：

正常情況下，外周血淋巴細(xì)胞中能形成花環(huán)的細(xì)胞（即

T細(xì)胞）約70%-80%。第二十頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷一、體外免疫學(xué)檢測(cè)（二）細(xì)胞免疫檢測(cè)——T細(xì)胞總數(shù)測(cè)定（2）熒光抗體染色

從外周血分離單個(gè)核細(xì)胞（PBM）后，用鼠抗人CD3的單克隆抗作第一抗體與PBM結(jié)合，再用熒光素（FITC）標(biāo)記的兔抗鼠IgG抗體作第二抗體進(jìn)行間接熒光染色。第二十一頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷一、體外免疫學(xué)檢測(cè)（二）細(xì)胞免疫檢測(cè)——T細(xì)胞亞群測(cè)定

用間接熒光法檢測(cè)CD4和CD8T細(xì)胞CD4/CD8正常比值為左右。第二十二頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷一、體外免疫學(xué)檢測(cè)（二）細(xì)胞免疫檢測(cè)——淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)第二十三頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷二、體內(nèi)免疫學(xué)檢測(cè)（一）體液免疫檢測(cè)1、I型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)

用常見變應(yīng)原作皮內(nèi)注射或劃痕后，在20分鐘內(nèi)引起紅斑及丘疹。如超過1cm或無紅腫但注射處有癢感，或全身有不適反應(yīng)者均為陽性，反之為陰性。

2、中和反應(yīng)皮膚試驗(yàn)

將微量外毒素注射于受試者前臂屈側(cè)皮內(nèi)，24-48小時(shí)局部出現(xiàn)皮膚紅腫者為陽性反應(yīng)，表示無免疫力。陰性反應(yīng)為有免疫力。第二十四頁，共二十六頁。第二節(jié)免疫學(xué)診斷二、體內(nèi)免疫學(xué)檢測(cè)（二）細(xì)胞免疫檢測(cè)

以特異性抗原或有絲分裂原注入皮內(nèi)，剌激體內(nèi)致敏T細(xì)胞分化增殖，釋放淋巴因子，引起局部皮膚的IV型超敏反應(yīng)。

1、特異性抗原皮膚試驗(yàn)：在受試者前臂內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注入少量可溶性抗原，24-48小時(shí)后，觀察局部皮膚紅腫硬結(jié)的大小。大于1cm即為陽性，表示有細(xì)胞免疫力。

2、植物血凝素（PHA）皮試：將PHA注射于受試者前臂屈側(cè)皮內(nèi)，6-12小時(shí)后局部出現(xiàn)紅斑硬結(jié)，24-48小時(shí)達(dá)高峰，即為陽性反應(yīng)，常用于檢測(cè)細(xì)胞免疫水平。第二十五頁，共二十六頁。內(nèi)容梗概第九章免疫學(xué)應(yīng)用。（一）人工自動(dòng)免疫：是給機(jī)體輸入疫苗或類毒素等抗

原物質(zhì)，剌激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫力。1、接種對(duì)象：免疫力差、流行地區(qū)的易感者等。2、接種劑量、次數(shù)和間隔時(shí)間：死疫苗2-3次，間隔7-10天。年齡?？ń槊?、麻疹疫苗、白破二聯(lián)疫苗。（一）人工被動(dòng)免疫：是給機(jī)體輸入抗體，使機(jī)體獲得特異性免疫力?？闪⒓传@得，但免疫維持時(shí)間短，2-3周，多用于治療或緊急預(yù)防。3、人特異性免疫球蛋白：來源于恢復(fù)期病人及含高價(jià)特異性抗體供血者血漿，或接受類毒素和疫苗免疫者的血漿。人工自動(dòng)免疫和人工被動(dòng)免疫的特點(diǎn)。（二）免疫增強(qiáng)劑（IPA）：是增強(qiáng)、促進(jìn)和調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的生物或非生物制劑。IL-2、TNF、IFN?？ń槊?、短小棒狀桿菌、脂磷壁酸?？筎C及亞群、抗MHC、抗IL和IL受體。（一）體液免疫檢測(cè)