SARS檢測實驗室生物安全操作指南課件

臨床實驗室生物

安全導則衛(wèi)生部臨床檢驗中心申子瑜臨床實驗室生物

安全導則1病原微生物實驗室安全管理條例

（征求意見稿）病原微生物實驗室安全管理條例

（征求意見稿）2第一章總則

為了加強病原微生物實驗室(以下稱實驗室)安全管理，保護實驗室工作人員和公眾的健康，制定本條例。本條例所稱病原微生物：是指能夠使人或者動物致病的微生物。

第一章總則

為了加強病原微生物實驗室(以下3

條例目標及適用范圍保護實驗室工作人員、社會公眾和環(huán)境適應于從事病原微生物研究、教學、生產(chǎn)、診斷檢測等所有實驗室

條例目標及適用范圍保護實驗室工作人員、社會公眾和環(huán)境4

國家對病原微生物按照其對人類和動物以及環(huán)境的危害程度實行分類管理，對實驗室根據(jù)其對病原微生物的防護水平實行分級管理。國家實行統(tǒng)一的實驗室生物安全標準。國家對病原微生物按照其對人類和動物以及5病原微生物的分類和管理l、國家將病原微生物分為四類2、第三類、第四類稱為高致病性病原微生物3、衛(wèi)生部負責制定并調(diào)整四類病原微生物的種類

病原微生物的分類和管理6

第一類病原微生物，是指在通常情況下不會引起人或者動物疾病的微生物。第二類病原微生物，是指能夠引起人或者動物疾病，發(fā)生實驗室暴露可能引起感染，但不會引起嚴重危害，且能夠有效實施預防和治療的微生物。

第一類病原微生物，是指在通常情況下不會7第三類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴重疾病，但不易在人或者動物間傳播，且能夠有效實施預防和治療的微生物。第四類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴重疾病，容易在人或者動物間傳播，或者沒有有效的預防和治療措施的微生物。第三類、第四類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。第三類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴重疾病，8國家根據(jù)實驗室防護水平，將實驗室分為一級、二級、三級、四級。

國家根據(jù)實驗室防護水平，將實驗室分為一級9

臨床診斷、檢測檢驗工作可以在二級實驗室中進行。但是，發(fā)現(xiàn)高致病性病原微生物的其病原學的分離鑒定工作應當轉(zhuǎn)移到三級以上的實驗室中進行。臨床診斷、檢測檢驗工作可以在二級實驗室中進行10中華人民共和國國家標準

GB19489-2004

實驗室生物安全通用要求

中華人民共和國國家標準

GB19489-2004

實驗11一、實驗室生物安全防護分級一級生物安全防護實驗室，簡稱BSL1或P1二級生物安全防護實驗室，簡稱BSL2或P2三級生物安全防護實驗室，簡稱BSL3或P3四級生物安全防護實驗室，簡稱BSL4或P4一、實驗室生物安全防護分級一級生物安全防護實驗室，簡稱BSL12一級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物，如用于教學的普通微生物實驗室等。

一級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施、安全操作規(guī)13二級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物。

二級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施、安全操作規(guī)14三級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有預防傳染的疫苗。艾滋病毒的研究（血清學實驗室除外）應在三級生物安全防護實驗室中進行。

三級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施15四級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對人體具有高度的危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。

四級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施、安全操作規(guī)16SARS檢測實驗室生物安全操作指南課件17二、二級生物安全防護實驗室

安全設備和個體防護

可能產(chǎn)生致病微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作均應在生物安全柜(Ⅱ級生物安全柜為宜)或其他物理抑制設備中進行，并使用個體防護設備。處理高濃度或大容量感染性材料均必須在生物安全柜(Ⅱ級生物安全柜為宜)或其他物理抑制設備中進行，并使用個體防護設備。

上述材料的離心操作如果使用密封的離心機轉(zhuǎn)子或安全離心杯，且它們只在生物安全柜中開閉和裝載感染性材料，則可在實驗室中進行。當微生物的操作不可能在生物安全柜內(nèi)進行而必須采取外部操作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護裝置(護目鏡、面罩、個體呼吸保護用品或其他防濺出保護設備)。

二、二級生物安全防護實驗室

安全設備和個體防護

184.

在實驗室中應穿著工作服或罩衫等防護服。離開實驗室時，防護服必須脫下并留在實驗室內(nèi)。不得穿著外出，更不能攜帶回家。用過的工作服應先在實驗室中消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。5.當手可能接觸感染材料、污染的表面或設備時應戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或濺出，宜戴兩副手套。不得戴著手套離開實驗室。工作完全結(jié)束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。

4.在實驗室中應穿著工作服或罩衫等防護服。離開實驗室時19三、實驗室設計和建造的特殊要求每個實驗室應設洗手池，宜設置在靠近出口處。實驗室圍護結(jié)構(gòu)內(nèi)表面應易于清潔。地面應防滑、無縫隙。實驗臺表面應不透水，耐腐蝕、耐熱。實驗室中的家具應牢固。為易于清潔，各種家具和設備之間應保持一定間隙。應有專門放置生物廢棄物容器的臺(架)。實驗室應有可開啟的窗戶，應設置紗窗。在實驗室所在的建筑內(nèi)應高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗證，以保證符合要求。應設置洗眼設施，必要時應有應急噴淋裝置。實驗室門宜帶鎖、可自動關(guān)閉，門有可視窗。實驗室出口應有在黑暗中可明確辨識的標識。應通風，如使用窗戶自然通風，應有防蟲紗窗。

三、實驗室設計和建造的特殊要求20二級生物安全防護實驗室操作要點實驗室人口須貼上生物危險標志，注明危險因子、生物安全級別、負責人姓名和電話、進人實驗室的特殊要求及離開實驗室的程序；禁止非工作人員進人實驗室。參觀實驗室等特殊情況須經(jīng)實驗室負責人批準后方可進入；禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物；接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實驗室前要洗手；以移液器吸取液體，禁止口吸；制定尖銳器具的安全操作規(guī)程；按照實驗室安全規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生；每天至少消毒一次工作臺面，活性物質(zhì)濺出后要隨時消毒；二級生物安全防護實驗室操作要點219.所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室之前必須進行滅活，如高壓滅活。需運出實驗室滅活的物品必須放在專用密閉防漏的容器內(nèi)儲存、運輸及消毒滅菌；10.如有條件工作人員應接受必要的免疫接種(如卡介苗等)；11.必要時收集從事危險性工作人員的基本血清留底，并根據(jù)需要定期收集血清樣本，應有檢測報告，如有問題及時處理；12.將生物安全程序納入標準操作規(guī)范或生物安全手冊，由實驗室負責人專門保管，工作人員在進入實驗室之前要閱讀規(guī)范并按照規(guī)范要求操作；13.工作人員要接受有關(guān)的潛在危險知識的培訓，掌握預防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓；14.實驗設備在運出修理或維護前必須進行消毒；15.人員暴露于病毒時，及時向?qū)嶒炇邑撠熑藚R報并記錄。9.所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室之前必須進行滅活，如高22安全管理制度實驗室內(nèi)務管理制度尖銳器具安全使用制度實驗室消毒防護制度標本采集運輸制度廢棄物處理制度工作人員防護制度差錯事故處理制度安全管理制度實驗室內(nèi)務管理制度23尖銳器具安全使用制度除特殊情況外，禁止在實驗室使用針、注射器及其他利器。盡可能使用塑料器材代替玻璃器材。盡可能應用一次性注射器，用過的針頭禁止折彎、剪斷、折斷、重新蓋帽、從注射器取下，禁止用手直接操作。用過的針頭必須直接放入防穿透的容器中。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運送到特定區(qū)域消毒，最好進行高壓消毒。盡可能使用無針注射器和其他安全裝置。禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須消毒。尖銳器具安全使用制度除特殊情況外，禁止在實驗室使用針、注射器24四、為何需使用生物安全柜?考慮對操作人員，操作樣品，操作環(huán)境的保護。美國國家衛(wèi)生研究院NIH標準與美國國家疾病控制中心CDC實驗室生物安全級別標準中要求：應用于臨床、診斷、教學、研究、或者生產(chǎn)設施，開展有關(guān)內(nèi)源性和外源性病源的工作，若因暴露而吸入該病源,會引發(fā)嚴重的、可能致死的疾病。需使用ClassII級生物安全柜實驗人員受過專業(yè)訓練應有管道化的排氣系統(tǒng)，排出的空氣不再循環(huán)至建筑物內(nèi)的任何其他區(qū)域。建議生物安全柜每年經(jīng)過測試和確證

四、為何需使用生物安全柜?考慮對操作人員，操作樣品，操作環(huán)境25生物安全設備分類1.超凈臺2.抽風櫥3.CLASSI一級生物安全柜4.CLASSII二級生物安全柜5.CALSSIII三級生物安全柜（又稱手套柜）生物安全設備分類1.超凈臺261、超凈臺正壓柜氣流從頂部或底部經(jīng)過過濾器后從操作區(qū)正面流向工作臺面，被樣品污染的氣流排出柜外，沒有循環(huán)氣流。超凈臺保護樣品不受污染，適用于普通實驗室或1級生物安全水平中對人員和環(huán)境無保護要求的實驗。

1、超凈臺正壓柜272、CLASSI一級生物安全柜負壓柜氣流經(jīng)操作人員向內(nèi)進入工作臺面，被污染的氣流通過HEPA過濾器外排出柜外，沒有循環(huán)氣流。CLASSI級BSC保護操作人員和環(huán)境不受污染，適用于生物安全水平中對實驗樣品無保護要求的實驗。2、CLASSI一級生物安全柜負壓柜283、CLASSII二級生物安全柜層流負壓柜它們可以安全的保護樣品、人員和環(huán)境。II級生物安全柜分為A型（30%排在室內(nèi)）和B型；B型中又分為B1（70%接管道外排）、B2（100%接管道外排）、B3（30%接管道外排）。

3、CLASSII二級生物安全柜層流負壓柜29CLASSIIA生物安全柜（1）進入氣流最低流速平均為0.38米/秒)；（2）30%氣流經(jīng)HEPA過濾后外排在室內(nèi)；（3）被污染的管道和氣流通道為正壓狀態(tài)CLASSIIA生物安全柜（1）進入氣流最低流速平30生物安全柜空氣流向生物安全柜空氣流向31CLASSIIB1生物安全柜（1）進入的氣流最低流速平均為0.5米/秒；（2）70%氣流通過專用的管道經(jīng)HEPA過濾后接管道外排至室外；（3）所有受生物污染的管道和氣流通道均在負壓狀態(tài)下或被負壓的管道或氣流通道包圍。CLASSIIB1生物安全柜32CLASSIIB2生物安全柜（1）進入氣流最低流速平均為0.5米/秒；（2）所有向內(nèi)進入的氣流和向下的氣流均通過HEPA過濾后排到室外而不在柜內(nèi)循環(huán)，也不能排入實驗室；100%接管道外排。（3）所有的被污染的管道和氣流通道都在負壓狀態(tài)下或被直接外排的負壓管道或氣流管道所包圍。CLASSIIB2生物安全柜33CLASSIIB3生物安全柜（1）進入的氣流最低流速為0.5米/秒；（2）外排到室外的氣流（30%）經(jīng)過HEPA高效過濾；（3）所有經(jīng)生物污染的管道和氣流通道均為負壓狀態(tài)；（4）與CLASSIIA型氣流方向相同，但與CLASSA型不同的是，它30%外排氣是接管道排到室外的。CLASSIIB3生物安全柜（1）進入的氣流最低流速34II級生物安全柜Airflow

II級生物安全柜Airflow354.CLASSIII生物安全柜

（手套柜）全封閉的、氣密結(jié)構(gòu)的通風柜；通過橡膠手套進行操作；柜內(nèi)保持至少120Pa的負壓；供氣通過HEPA抽入內(nèi)；外排的氣流經(jīng)過雙層HEPA過濾或經(jīng)HEPA后再經(jīng)燃燒處理。

CLASSIII型BSC適用于BSL3、BSL4的生物實驗。

4.CLASSIII生物安全柜

（手套柜）全封閉的、36高效空氣過濾工作人員安全無渦流單向流空氣實驗對象不受污染手套箱式操作口抽風櫥無是是否否I級有是否否否II級有是是是否III級有是是是是生物安全裝置異同高效空氣過濾工作人員安全無渦流單向流空氣實驗對象不受污染手套37Ⅰ級、Ⅱ級和Ⅲ級生物安全柜的區(qū)別BSC表面風速（m/s）%氣流在循環(huán)排除排風系統(tǒng)Ⅰ級0.360100硬管道Ⅱ級A1型0.38-0.517030派到室內(nèi)或套管式的連接向室外排風的Ⅱ級A2型0.517030派到室外或套管式的連接Ⅱ級B1型0.513070硬管道Ⅱ級B2型0.510100硬管道Ⅲ級型NA0100硬管道Ⅰ級、Ⅱ級和Ⅲ級生物安全柜的區(qū)別BSC表面風速%氣流排風系統(tǒng)38根據(jù)保護類型的需要選擇適宜的生物安全柜保護類型BSC的選擇針對危險組1-3微生物的人員保護Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級針對危險組4微生物的人員保護，手套箱實驗室Ⅲ級針對危險組1-3微生物的人員保護,防護服實驗室Ⅰ級、Ⅱ級產(chǎn)品保護Ⅱ級,僅當涉及層流時用Ⅲ級針對微量的不穩(wěn)定的放射性核/化學藥品的保護Ⅱ級B1,向室外排風的Ⅱ級A2針對不穩(wěn)定的放射性核/化學藥品的保護Ⅰ級、Ⅱ級B2，Ⅲ級根據(jù)保護類型的需要選擇適宜的生物安全柜保護類型BSC的選擇針39對各級生物安全水平實驗室的要求生物安全柜生物安全級別一級二級三級四級Ⅰ級不需要隨意需要不需要Ⅱ級不需要最好有需要需要，在防護服實驗室中使用Ⅲ級不需要不需要最好有需要，在安全柜室使用對各級生物安全水平實驗室的要求生物安全柜生物安全級別一級二級40五、廢棄物處理國務院《醫(yī)療廢物管理條例》衛(wèi)生部令《醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》衛(wèi)生部文件《醫(yī)療廢物分類目錄》》五、廢棄物處理國務院《醫(yī)療廢物管理條例》41什么是醫(yī)療廢物？醫(yī)療廢物醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)在醫(yī)療、預防、保健以及其他相關(guān)活動中產(chǎn)生的具有直接或者間接感染性、毒性以及其他危害性的廢物。什么是醫(yī)療廢物？醫(yī)療廢物醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)在醫(yī)療、預防、保健以及其42醫(yī)療廢物分類感染性廢物病理性廢物損傷性廢物藥物性廢物化學性廢物醫(yī)療廢物分類感染性廢物43要點醫(yī)療廢物集中處置包裝物要防滲漏、防銳器穿透，明顯標識和警示說明醫(yī)療廢物儲存設備定期消毒醫(yī)療廢物制病原體的培養(yǎng)基、標本和菌種、毒種保存液等高危險廢物，在交醫(yī)療廢物集中處置前應就地消毒要點醫(yī)療廢物集中處置44第四章實驗室安全管理第二十二條實驗室的生物安全級別通過生物危害評估確定。第二十三條實驗室設計與建造應當與其生物安全防護級別相適應。第二十四條實驗室應當建立并嚴格遵守安全管理制度與安全操作規(guī)程。第二十五條實驗室應當加強對工作人員的安全防護培訓。第二十六條實驗室應當配備必要的安全設備（如生物安全柜）和個人防護用品。第二十七條實驗室的醫(yī)療廢物應當按照《醫(yī)療廢物管理條例》和《醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》等有關(guān)規(guī)定管理。第四章實驗室安全管理第二十二條實驗室的生物安全級別通過生45THEEND

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THANKS46臨床實驗室生物

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安全導則47病原微生物實驗室安全管理條例

（征求意見稿）病原微生物實驗室安全管理條例

（征求意見稿）48第一章總則

為了加強病原微生物實驗室(以下稱實驗室)安全管理，保護實驗室工作人員和公眾的健康，制定本條例。本條例所稱病原微生物：是指能夠使人或者動物致病的微生物。

第一章總則

為了加強病原微生物實驗室(以下49

條例目標及適用范圍保護實驗室工作人員、社會公眾和環(huán)境適應于從事病原微生物研究、教學、生產(chǎn)、診斷檢測等所有實驗室

條例目標及適用范圍保護實驗室工作人員、社會公眾和環(huán)境50

國家對病原微生物按照其對人類和動物以及環(huán)境的危害程度實行分類管理，對實驗室根據(jù)其對病原微生物的防護水平實行分級管理。國家實行統(tǒng)一的實驗室生物安全標準。國家對病原微生物按照其對人類和動物以及51病原微生物的分類和管理l、國家將病原微生物分為四類2、第三類、第四類稱為高致病性病原微生物3、衛(wèi)生部負責制定并調(diào)整四類病原微生物的種類

病原微生物的分類和管理52

第一類病原微生物，是指在通常情況下不會引起人或者動物疾病的微生物。第二類病原微生物，是指能夠引起人或者動物疾病，發(fā)生實驗室暴露可能引起感染，但不會引起嚴重危害，且能夠有效實施預防和治療的微生物。

第一類病原微生物，是指在通常情況下不會53第三類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴重疾病，但不易在人或者動物間傳播，且能夠有效實施預防和治療的微生物。第四類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴重疾病，容易在人或者動物間傳播，或者沒有有效的預防和治療措施的微生物。第三類、第四類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。第三類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴重疾病，54國家根據(jù)實驗室防護水平，將實驗室分為一級、二級、三級、四級。

國家根據(jù)實驗室防護水平，將實驗室分為一級55

臨床診斷、檢測檢驗工作可以在二級實驗室中進行。但是，發(fā)現(xiàn)高致病性病原微生物的其病原學的分離鑒定工作應當轉(zhuǎn)移到三級以上的實驗室中進行。臨床診斷、檢測檢驗工作可以在二級實驗室中進行56中華人民共和國國家標準

GB19489-2004

實驗室生物安全通用要求

中華人民共和國國家標準

GB19489-2004

實驗57一、實驗室生物安全防護分級一級生物安全防護實驗室，簡稱BSL1或P1二級生物安全防護實驗室，簡稱BSL2或P2三級生物安全防護實驗室，簡稱BSL3或P3四級生物安全防護實驗室，簡稱BSL4或P4一、實驗室生物安全防護分級一級生物安全防護實驗室，簡稱BSL58一級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物，如用于教學的普通微生物實驗室等。

一級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施、安全操作規(guī)59二級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物。

二級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施、安全操作規(guī)60三級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有預防傳染的疫苗。艾滋病毒的研究（血清學實驗室除外）應在三級生物安全防護實驗室中進行。

三級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施61四級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對人體具有高度的危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。

四級生物安全防護實驗室

實驗室結(jié)構(gòu)和設施、安全操作規(guī)62SARS檢測實驗室生物安全操作指南課件63二、二級生物安全防護實驗室

安全設備和個體防護

可能產(chǎn)生致病微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作均應在生物安全柜(Ⅱ級生物安全柜為宜)或其他物理抑制設備中進行，并使用個體防護設備。處理高濃度或大容量感染性材料均必須在生物安全柜(Ⅱ級生物安全柜為宜)或其他物理抑制設備中進行，并使用個體防護設備。

上述材料的離心操作如果使用密封的離心機轉(zhuǎn)子或安全離心杯，且它們只在生物安全柜中開閉和裝載感染性材料，則可在實驗室中進行。當微生物的操作不可能在生物安全柜內(nèi)進行而必須采取外部操作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護裝置(護目鏡、面罩、個體呼吸保護用品或其他防濺出保護設備)。

二、二級生物安全防護實驗室

安全設備和個體防護

644.

在實驗室中應穿著工作服或罩衫等防護服。離開實驗室時，防護服必須脫下并留在實驗室內(nèi)。不得穿著外出，更不能攜帶回家。用過的工作服應先在實驗室中消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。5.當手可能接觸感染材料、污染的表面或設備時應戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或濺出，宜戴兩副手套。不得戴著手套離開實驗室。工作完全結(jié)束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。

4.在實驗室中應穿著工作服或罩衫等防護服。離開實驗室時65三、實驗室設計和建造的特殊要求每個實驗室應設洗手池，宜設置在靠近出口處。實驗室圍護結(jié)構(gòu)內(nèi)表面應易于清潔。地面應防滑、無縫隙。實驗臺表面應不透水，耐腐蝕、耐熱。實驗室中的家具應牢固。為易于清潔，各種家具和設備之間應保持一定間隙。應有專門放置生物廢棄物容器的臺(架)。實驗室應有可開啟的窗戶，應設置紗窗。在實驗室所在的建筑內(nèi)應高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗證，以保證符合要求。應設置洗眼設施，必要時應有應急噴淋裝置。實驗室門宜帶鎖、可自動關(guān)閉，門有可視窗。實驗室出口應有在黑暗中可明確辨識的標識。應通風，如使用窗戶自然通風，應有防蟲紗窗。

三、實驗室設計和建造的特殊要求66二級生物安全防護實驗室操作要點實驗室人口須貼上生物危險標志，注明危險因子、生物安全級別、負責人姓名和電話、進人實驗室的特殊要求及離開實驗室的程序；禁止非工作人員進人實驗室。參觀實驗室等特殊情況須經(jīng)實驗室負責人批準后方可進入；禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物；接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實驗室前要洗手；以移液器吸取液體，禁止口吸；制定尖銳器具的安全操作規(guī)程；按照實驗室安全規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生；每天至少消毒一次工作臺面，活性物質(zhì)濺出后要隨時消毒；二級生物安全防護實驗室操作要點679.所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室之前必須進行滅活，如高壓滅活。需運出實驗室滅活的物品必須放在專用密閉防漏的容器內(nèi)儲存、運輸及消毒滅菌；10.如有條件工作人員應接受必要的免疫接種(如卡介苗等)；11.必要時收集從事危險性工作人員的基本血清留底，并根據(jù)需要定期收集血清樣本，應有檢測報告，如有問題及時處理；12.將生物安全程序納入標準操作規(guī)范或生物安全手冊，由實驗室負責人專門保管，工作人員在進入實驗室之前要閱讀規(guī)范并按照規(guī)范要求操作；13.工作人員要接受有關(guān)的潛在危險知識的培訓，掌握預防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓；14.實驗設備在運出修理或維護前必須進行消毒；15.人員暴露于病毒時，及時向?qū)嶒炇邑撠熑藚R報并記錄。9.所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室之前必須進行滅活，如高68安全管理制度實驗室內(nèi)務管理制度尖銳器具安全使用制度實驗室消毒防護制度標本采集運輸制度廢棄物處理制度工作人員防護制度差錯事故處理制度安全管理制度實驗室內(nèi)務管理制度69尖銳器具安全使用制度除特殊情況外，禁止在實驗室使用針、注射器及其他利器。盡可能使用塑料器材代替玻璃器材。盡可能應用一次性注射器，用過的針頭禁止折彎、剪斷、折斷、重新蓋帽、從注射器取下，禁止用手直接操作。用過的針頭必須直接放入防穿透的容器中。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運送到特定區(qū)域消毒，最好進行高壓消毒。盡可能使用無針注射器和其他安全裝置。禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須消毒。尖銳器具安全使用制度除特殊情況外，禁止在實驗室使用針、注射器70四、為何需使用生物安全柜?考慮對操作人員，操作樣品，操作環(huán)境的保護。美國國家衛(wèi)生研究院NIH標準與美國國家疾病控制中心CDC實驗室生物安全級別標準中要求：應用于臨床、診斷、教學、研究、或者生產(chǎn)設施，開展有關(guān)內(nèi)源性和外源性病源的工作，若因暴露而吸入該病源,會引發(fā)嚴重的、可能致死的疾病。需使用ClassII級生物安全柜實驗人員受過專業(yè)訓練應有管道化的排氣系統(tǒng)，排出的空氣不再循環(huán)至建筑物內(nèi)的任何其他區(qū)域。建議生物安全柜每年經(jīng)過測試和確證

四、為何需使用生物安全柜?考慮對操作人員，操作樣品，操作環(huán)境71生物安全設備分類1.超凈臺2.抽風櫥3.CLASSI一級生物安全柜4.CLASSII二級生物安全柜5.CALSSIII三級生物安全柜（又稱手套柜）生物安全設備分類1.超凈臺721、超凈臺正壓柜氣流從頂部或底部經(jīng)過過濾器后從操作區(qū)正面流向工作臺面，被樣品污染的氣流排出柜外，沒有循環(huán)氣流。超凈臺保護樣品不受污染，適用于普通實驗室或1級生物安全水平中對人員和環(huán)境無保護要求的實驗。

1、超凈臺正壓柜732、CLASSI一級生物安全柜負壓柜氣流經(jīng)操作人員向內(nèi)進入工作臺面，被污染的氣流通過HEPA過濾器外排出柜外，沒有循環(huán)氣流。CLASSI級BSC保護操作人員和環(huán)境不受污染，適用于生物安全水平中對實驗樣品無保護要求的實驗。2、CLASSI一級生物安全柜負壓柜743、CLASSII二級生物安全柜層流負壓柜它們可以安全的保護樣品、人員和環(huán)境。II級生物安全柜分為A型（30%排在室內(nèi)）和B型；B型中又分為B1（70%接管道外排）、B2（100%接管道外排）、B3（30%接管道外排）。

3、CLASSII二級生物安全柜層流負壓柜75CLASSIIA生物安全柜（1）進入氣流最低流速平均為0.38米/秒)；（2）30%氣流經(jīng)HEPA過濾后外排在室內(nèi)；（3）被污染的管道和氣流通道為正壓狀態(tài)CLASSIIA生物安全柜（1）進入氣流最低流速平76生物安全柜空氣流向生物安全柜空氣流向77CLASSIIB1生物安全柜（1）進入的氣流最低流速平均為0.5米/秒；（2）70%氣流通過專用的管道經(jīng)HEPA過濾后接管道外排至室外；（3）所有受生物污染的管道和氣流通道均在負壓狀態(tài)下或被負壓的管道或氣流通道包圍。CLASSIIB1生物安全柜78CLASSIIB2生物安全柜（1）進入氣流最低流速平均為0.5米/秒；（2）所有向內(nèi)進入的氣流和向下的氣流均通過HEPA過濾后排到室外而不在柜內(nèi)循環(huán)，也不能排入實驗室；100%接管道外排。（3）所有的被污染的管道和氣流通道都在負壓狀態(tài)下或被直接外排的負壓管道或氣流管道所包圍。CLASSIIB2生物安全柜79CLASSIIB3生物安全柜（1）進入的氣流最低流速為0.5米/秒；（2）外排到室外的氣流（30%）經(jīng)過HEPA高效過濾；（3）所有經(jīng)生物污染的管道和氣流通道均為負壓狀態(tài)；（4）與CLASSIIA型氣流方向相同，但與CLASSA型不同的是，它30%外排氣是接管道排到室外的。CLASSIIB3生物安全柜（1）進入的氣流最低流速80II級生物安全柜Airflow

II級生物安全柜Airflow814.CLASSIII生物安全柜

（手套柜）全封閉的、氣密結(jié)構(gòu)的通風柜；通過橡膠手套進行操作；柜內(nèi)保持至少120Pa的負壓；供氣通過HEPA抽入內(nèi)；外排的氣流經(jīng)過雙層HEPA過濾或經(jīng)HEPA后再經(jīng)燃燒處理。

CLASSIII型BSC適用于BSL3、BSL4的生物實驗。

4.CLASSIII生物安全柜

（手套柜）全封閉的、82高效空氣過濾工作人員安全無渦流單向流空氣實驗對象不受污染手套箱式操作口抽風櫥無是是否否I級有是否否否II級有是是是否III級有是是