實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較

實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁!目的：觀察附子炮制前后的毒性變化。實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁!器材：小鼠籠、電子天平、注射器（1ml）、小鼠灌胃針頭。實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁!動物：小鼠，體重18-22g，♂、♀不拘。小白鼠是野生鼷鼠的變種，屬于動物界，脊椎動物門，哺乳綱，嚙齒目，鼠種。我國目前飼養(yǎng)最廣泛的是1946年從印度某研究所引入到云南昆明飼養(yǎng)的品種，又名昆明種。50年代由昆明引到北京生物制品研究所，以后輸送到全國各地飼養(yǎng)。實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁!標記編號對隨機分組后的實驗動物進行標記編號，是動物實驗準備工作中相當重要的一項工作。標記編號方法應保證編號不對動物生理或?qū)嶒灧磻a(chǎn)生影響，且號碼清楚、易認、耐久和適用。目前常用的標記編號方法有染色法、耳孔法、烙印法、掛牌法等標記編號方式。此外還有針刺法、斷趾編號法、剪尾編號法、被毛剪號法、籠子編號法等。實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁!單色涂染法單色涂染法是用單一顏色的染色劑涂染實驗動物不同部位的方法。常規(guī)的涂染順序是從左到右、從上到下。左前肢為1號、左側腹部2號、左后肢3號、頭部4號、背部5號、尾根部6號、右前肢為7、右側腹部8號、右后肢9號、不作染色標記為10號。此法簡單、易認，在每組實驗動物不超過10只的情況下適用。實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁!雙色涂染法雙色涂染法是采用兩種顏色同時進行染色標記的方法。例如用苦味酸（黃色）染色標記作為個位數(shù)，用品紅（紅色）染色標記作為十位數(shù)。個位數(shù)的染色標記方法同單色涂染法；十位數(shù)的染色標記方法參照單色涂染法，即左前肢為10號、左側腹部20號、左后肢30號、頭部40號、背部50號、尾根部60號、右前肢70號、右側腹部80號、右后肢90號，第100號不作染色標記。比如標記第12號實驗動物，在其左前肢涂染品紅（紅色），在其左側腹部涂上苦味酸（黃色）即可。雙色法色法可標記100位以內(nèi)的號碼。實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁!耳孔法耳孔法是用打孔機直接在實驗動物的耳朵上打孔編號，根據(jù)打在動物耳朵上的部位和孔的多少，來區(qū)分實驗動物的方法。用打孔機在耳朵打孔后，必須用消毒過的滑石粉抹在打孔局部，以免傷口愈合過程中將耳孔閉合。耳孔法可標記三位數(shù)之內(nèi)的號碼。另一種耳孔法是用剪刀在實驗動物的耳郭上剪缺口的方法，作為區(qū)分實驗動物的標記。實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁!掛牌法掛牌法是將編好的號碼烙印在金屬牌上，掛在實驗動物頸部、耳部、肢體或籠具上，用來區(qū)別實驗動物的一種方法。金屬牌應選用不生銹、刺激小的金屬材料，制成輕巧、美觀的小牌子。實驗人員可根據(jù)實驗動物品種、實驗類型及實驗方式，選擇合適的標記編號方法。一般來說，大、小鼠多采用染色法，家兔宜使用耳孔法，犬、猴、貓較適合掛牌法，犬還可用烙印法。實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁!灌胃技術要點具體操作過程如下：1.準備灌胃針頭。一般可以從市場上面買到，實在沒有的話，可以用12號的針頭，剪去針尖，用砂紙將頭端磨平，也可以用。但是買的灌胃針頭的頭端用錫或者適宜的方法處理了針頭的銳口，自己用砂紙不可能將所有的銳口都磨掉，用這樣的針頭灌胃，損失小鼠食道的可能性比較大。2.抓住小鼠，使其頭、頸和身體呈一直線。抓小鼠的動作很簡單，左手的小指和無名指抓住小鼠的尾巴，另外三個手指抓住小鼠的頸部即可。因為小鼠始終在活動中，若一次抓的感覺不是很順手，要放開重新抓，不要逞強進行下一步操作。3.抓好小鼠就可以灌胃了，一般用1ml的注射器配灌胃針頭。灌胃針頭從小鼠的嘴角進入，壓住舌頭，抵住上顎，輕輕向內(nèi)推進，進入食管后會有一個刺空感，進入食道后就可以推注藥液了。（我認為，所謂的灌胃，不必要灌胃針頭進入小鼠的胃部，進入食管后就可以推藥了，這樣對小鼠食道的損傷要小點，特別是要長期灌胃給藥的情況下。）當然，灌胃針頭也可以再往里面深入一點，防止藥液從口中流出。4.灌胃容積一般是0.1～0.2ml/10g，最大0.35ml/10g，每只小鼠的灌胃最大容積不超過0.8ml."..\..\中藥藥理學課件-本科\小鼠灌胃_320x240.3gp實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁!結果：綜合全班實驗結果，記入表內(nèi)。并分別計算出動物中毒率、死亡率，并用統(tǒng)計學方法進行分析。生附子和熟附子毒性比較組別動物數(shù)中毒動物數(shù)中毒率死亡動物數(shù)死亡率生附子熟附子實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁!藥品：生附子和熟附子水煎液1g/ml、苦味酸。實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁!實驗步驟：1.取6只小鼠，稱重，用苦味酸標記后隨機分為兩組。分組分組原則

實驗動物分組應嚴格按照隨機分組的原則進行，使每只動物都有同等機會被分配到各個實驗組中去，盡量避免人為因素對實驗造成的影響。建立對照組實驗動物分組時應特別注意建立對照組。對照組可分自身對照組和平行對照組。自身對照組自身對照是把實驗動物本身在動物實驗前、后兩階段的各項相關數(shù)據(jù)，分別作為對照組和實驗組的結果并進行統(tǒng)計學處理。平行對照組平行對照組分正對照組和負對照組（空白對照組）兩種。正對照組是對實驗動物實施與實驗動物相同但排除了所要觀察的目的因子（如治療手段或藥物）的處理，負對照組則不作任何處理，這種方法就是平行對照組。例如要觀察某種藥物的藥效，對實驗組動物采用肌肉注射的給藥方法；正對照組動物同樣進行肌肉注射，但注射的不是藥物而是同等劑量的生理鹽水，以便排除肌肉注射生理鹽水可能產(chǎn)生的影響；負對照組動物則不進行肌肉注射，并與實驗組動物和正對照組動物在相同的環(huán)境和條件下飼養(yǎng)，作為空白對照。實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁!染色法染色法是用化學藥品在實驗動物身體明顯的部位，如被毛、四肢等處進行涂染，以染色部位、顏色不同來標記區(qū)分實驗動物，是最常用、最易掌握的經(jīng)濟犯罪分子方法。1．1

常用染色劑（1）3%~5%苦味酸溶液，可染成黃色。（2）0.5%中性紅或品紅溶液,可染成紅色。（3）2%硝酸銀溶液，可染成咖啡色（涂染后在可見光下暴露十分鐘）。（4）煤焦油酒精溶液，可染成黑色。實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁!1號2號3號4號5號6號右前肢為7、右側腹部8號、右后肢9號、不作染色標記為10號實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁!直接標號法直接標號法是使用染色劑直接在實驗動物被毛、肢體上編寫號碼的方法。實驗動物太小或號碼位數(shù)太多時，不宜采用此方法。染色法雖然簡單方便，不會給實驗動物造成損傷和痛苦，但是長時間實驗會使涂染劑自行褪色，或由于實驗動物互相嬉鬧、舔毛、摩擦、換毛、糞尿和飲水浸濕被毛等原因，易造成染色標記模糊不清，因而染色法對慢性實驗不適用。如果所做慢性實驗只能采用此種染色方法，則應注意不斷地補充和加深染色。另外，常用染色劑的毒性對實驗動物的影響也是需要注意的一個問題。實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁!烙印法烙印法是直接把標記編號烙印在實驗動物身體上的方法，尤如蓋印章一樣。烙印方法有兩種，對犬等大動物，可將標記號碼烙印在其皮膚上（如耳、面、鼻、四肢等部位），對家兔、豚鼠等動物，可用數(shù)字號碼鉗在其耳朵上刺上號碼；烙印完成后，傷口涂抹酒精黑墨等顏料，即可清楚讀出號碼。烙印法對實驗成績動物會造成輕微損傷，操作時宜輕巧、敏捷，必要時麻醉，以減少痛苦。實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁!小鼠灌胃方法比較簡單，需要關注的只有兩點：一是要保持小鼠的頭部和頸部成一直線，方便灌胃針頭進入；二是動作要輕柔，從口角進入，防止損失食道。2.分別灌胃0.3ml／10g（體重）的生附子和炮制后的熟附子水煎液。實驗1附子炮制前后致小鼠死亡情況比較共20頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁!3.20分鐘后觀察兩組小鼠中毒癥狀出現(xiàn)情況，動物出現(xiàn)腹部收縮，身體搖