實驗診斷學(xué)之出血、血栓、止血檢測課件

正常的止血和抗凝機制包括血管機制血小板機制凝血因子機制抗凝系統(tǒng)機制纖維蛋白溶解機制正常的止血和抗凝機制包括血管機制1血管收縮激活血小板激活凝血系統(tǒng)血管的止血作用血管收縮血管的止血作用2血小板止血作用保護血管完整性血小板具粘附,聚集功能,形成白色血栓血小板促凝活性血小板止血作用保護血管完整性3凝血因子止血作用血液由流動狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槟z狀態(tài)。凝血過程分三個階段：凝血活酶形成、凝血酶形成、纖維蛋白形成。瀑布學(xué)說凝血因子止血作用血液由流動狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槟z狀態(tài)。凝血過程分三個4體內(nèi)單核巨噬細胞系統(tǒng)通過其吞噬、清除、攝取或滅活作用，將某些凝血物質(zhì)除掉，起抗凝作用。

抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）和肝素共同滅活活化的凝血因子。由蛋白C，蛋白S，血栓素調(diào)節(jié)蛋白等組成

Ca2+

蛋白S

抑制凝血

蛋白C活性蛋白C

凝血酶

Ca2+

血栓調(diào)節(jié)素激活纖溶酶原

抗凝系統(tǒng)作用體內(nèi)單核巨噬細胞系統(tǒng)通過其吞噬、清除、攝取或滅活作用，將某些5纖維蛋白溶解機制纖溶酶原（PLG）組織型激活物凝血酶、胃蛋白酶尿激酶型激活物

抗纖溶酶纖溶酶（PL）無活性酶纖維蛋白原纖維蛋白

FgDPFDPFgDP（纖維蛋白原降解產(chǎn)物）、FDP（纖維蛋白降解產(chǎn)物）纖維蛋白溶解機制6出血性疾病是指因止血或抗凝機制異常而引起的、以自發(fā)性出血或血管損傷后出血不止為特征的一類疾病。主要包括：血管性紫癜（過敏性、擴張癥、單純性等）血小板減少性紫癜（特發(fā)性、繼發(fā)性）凝血因子數(shù)量或功能障礙（血友病、vWD、獲得性）抗凝及纖溶異常（抗凝或溶栓藥物過量，鼠藥中毒，毒蛇咬傷等）典型多重止血機制異常（DIC）出血性疾病是指因止血或抗凝機制異常而引起的、以自發(fā)性出血或血7血栓性疾病是指由血栓形成和血栓栓塞兩種病理過程引起一類疾病。血栓形成：在一定條件下血液有形成份在血管或心臟內(nèi)膜局部形成栓子的過程。血栓栓塞：指血栓在形成部位或由形成部位脫落，部分或全部堵塞某些血管，引起相應(yīng)器官或系統(tǒng)缺血、缺氧、壞死及淤血、水腫的病理現(xiàn)象。血栓形成機制主要與血管內(nèi)皮損傷，血液流變學(xué)異常有關(guān)。血栓性疾病是指由血栓形成和血栓栓塞兩種病理過程引起一類疾病。8有關(guān)血管功能的檢測毛細血管抵抗力試驗出血時間測定血管性血友病因子測定血漿6-酮-前列腺素F1α測定有關(guān)血管功能的檢測毛細血管抵抗力試驗9毛細血管抵抗力試驗（Capillaryresistancetest

CRT）又稱束臂試驗

原理和方法：毛細血管和血小板的相互作用在止血中的表現(xiàn)。在前臂加壓阻斷靜脈血流，5min內(nèi)觀察前臂尺側(cè)直徑5cm范圍內(nèi)新出血點的數(shù)目。正常參考值：男性<5個，女性<10個臨床意義：脆性增加見于1.血管性紫癜2.遺傳性出血性毛細血管擴張癥3.維生素C缺乏4.血管性血友病5.各種原因造成的血小板減少或功能缺陷6.血小板增多毛細血管抵抗力試驗（Capillaryresistance10出血時間的測定

（Bleedingtime，BT）

原理和方法：出血時間測定器法（標準化）將Cap刺破后，出血自然停止所需時間。主要受血小板數(shù)量和功能的影響，其次是血管壁的完整性和收縮功能，凝血因子的嚴重缺乏對試驗也有一定影響。參考值：>9min臨床意義：延長見于1.血小板數(shù)量減少或功能減低2.血管異常3.凝血因子缺乏4.抗凝藥物的使用出血時間的測定（Bleedingtime，BT）原理和11血管性血友病因子測定原理和方法：血管內(nèi)皮損傷vWF的合成和釋放增加。常使用免疫火箭電泳法測定其在血漿中的相對含量。臨床意義：降低見于vWD。增高見于1.血栓性疾病：心肌梗塞、腦栓塞等2.腎臟疾?。杭甭阅I炎，腎病綜合征等血管性血友病因子測定原理和方法：血管內(nèi)皮損傷vWF的合成和釋12血漿6-酮-前列腺素F1α測定

原理和方法：其是血管內(nèi)皮細胞膜磷脂進行花生四烯酸代謝，生成PGI2后最終代謝產(chǎn)物。當血栓形成時，代謝過程中TXA2生成增多，PGI2生成減少，因此該物質(zhì)也減少。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）測定其含量。臨床意義：在有血管內(nèi)皮受損的基礎(chǔ)疾病（如糖尿病、動脈粥樣硬化、惡性腫瘤、急性腎炎等）時，血漿6-酮-前列腺素F1α減低提示有血栓形成可能。血漿6-酮-前列腺素F1α測定

原理和方法：其是血管內(nèi)皮細胞13有關(guān)血小板功能的檢測血小板相關(guān)免疫球蛋白測定血小板粘附試驗血小板聚集試驗血漿β-血小板球蛋白和血小板第4因子測定有關(guān)血小板功能的檢測血小板相關(guān)免疫球蛋白測定14血小板相關(guān)免疫球蛋白測定原理和方法：大多數(shù)特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）和系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者體內(nèi)有抗血小板抗體，稱為血小板相關(guān)免疫球蛋白（PAIg），導(dǎo)致血小板破壞。一般采用ELISA檢測。臨床意義：1.診斷ITP和療效監(jiān)測的的重要試驗之一2.藥物性血小板減少性紫癜、輸血后紫癜、Even綜合癥、慢性活動性肝炎、多發(fā)性骨髓瘤等也呈一部分陽性反應(yīng)。血小板相關(guān)免疫球蛋白測定原理和方法：大多數(shù)特發(fā)性血小板減少性15血小板粘附試驗原理和方法：檢測血小板的粘附功能。血小板粘附試驗（PAdT）常用玻璃柱法，用一定量血液通過一定表面積的玻璃管，計數(shù)通過前后血小板量，差值為粘附百分率。臨床意義：1.增高見于高凝狀態(tài)和血栓性疾?。禾悄虿?、冠心病、高脂血癥、妊高癥、DVT等。2.減低見于血小板無力癥、血管性血友病、巨大血小板綜合癥、肝病、尿毒癥等。血小板粘附試驗原理和方法：檢測血小板的粘附功能。血小板粘附試16血小板聚集試驗原理和方法：檢測血小板的聚集功能。血小板聚集試驗(PAgT)采用比濁法，連續(xù)攪拌下在富血小板血漿(PRP)中加入聚集劑，記錄透光度的變化過程并繪制成聚集曲線，分析得出結(jié)果。臨床意義：同血小板粘附試驗。血小板聚集試驗原理和方法：檢測血小板的聚集功能。血小板聚集試17血漿β-TG和PF4測定原理和方法：檢測血小板的釋放反應(yīng)后產(chǎn)物。β-TG和PF4是血小板內(nèi)α顆粒中的特異蛋白，當血小板被激活后，這些物質(zhì)被大量釋放出來。常采用ELISA測定它們的含量。臨床意義：血漿β-TG和PF4增高提示血小板被激活及釋放反應(yīng)亢進。見于血液的高凝狀態(tài)和血栓性疾病，對心腦血管硬化性疾病、妊高癥、糖尿病、尿毒癥等易栓狀態(tài)有一定的早期診斷價值。血漿β-TG和PF4測定原理和方法：檢測血小板的釋放反應(yīng)后產(chǎn)18有關(guān)凝血因子的檢測凝血時間測定（clottingtest，CT）活化部分凝血活酶測定（activatedpartialthromboplastintime，APTT）血漿凝血酶原時間測定（prothrombintime，PT）血漿纖維蛋白原測定（fibrinogen，F(xiàn)ib）有關(guān)凝血因子的檢測凝血時間測定（clottingtest19凝血時間測定原理和方法：抽取靜脈血離體后發(fā)生凝固所需時間，主要反映內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的功能狀態(tài)。常用普通試管法。臨床意義：1.延長見于血友病A、B，Ⅴ、Ⅹ、Ⅰ因子缺乏，肝病，新生兒出血癥，DIC，應(yīng)用抗凝劑等2.縮短見于高凝狀態(tài)，血栓性疾病凝血時間測定原理和方法：抽取靜脈血離體后發(fā)生凝固所需時間，主20活化部分凝血活酶時間測定原理和方法：體外模擬內(nèi)源性凝血途徑，在待檢血漿中加入接觸激活因子和磷脂，再加入Ca++，觀察血漿凝固所需時間。參考值：32－43秒，延長10秒以上為異常臨床意義：同CT。試劑和操作的標準化使其準確性高，是目前推薦應(yīng)用的內(nèi)源凝血途徑的篩選試驗，又是監(jiān)測肝素抗凝治療的首選指標。活化部分凝血活酶時間測定原理和方法：體外模擬內(nèi)源性凝血途徑，21血漿凝血酶原時間測定原理和方法：體外模擬外源性凝血途徑，在待檢血漿中加入組織因子和Ca++，觀察血漿凝固所需時間。它是反映外源凝血系統(tǒng)缺陷的篩選試驗。參考值：1.11－13秒，延長3秒以上為異常。2.凝血酶原比值（PTR）：測定值/對照值，常用于繼發(fā)性凝血因子減少導(dǎo)致出血的危險程度，如嚴重肝病。3.國際標準化比值（INR）是PTRISI，口服抗凝劑的監(jiān)測指標。臨床意義：1.延長見于Ⅶ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅱ、Ⅰ缺乏，VitK缺乏，肝臟疾病，DIC等。2.口服抗凝劑的首選監(jiān)測指標，2.0－3.0為宜。血漿凝血酶原時間測定原理和方法：體外模擬外源性凝血途徑，在待22血漿纖維蛋白原測定原理和方法：體外模擬從纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白的過程，在待檢血漿中加入凝血酶和Ca++，血漿凝固后的濁度與纖維蛋白原的量成正比，間接計算算其含量。參考值：2－4克/升臨床意義：1.增高見于急性感染，惡性腫瘤，休克，急性腎炎，心肌梗塞，糖尿病，妊高癥等。2.減低見于見于DIC低凝期和纖亢期，原發(fā)性纖溶癥，重癥肝炎等。血漿纖維蛋白原測定原理和方法：體外模擬從纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維23有關(guān)抗凝功能的檢測血漿抗凝酶Ⅲ活性測定（AT-Ⅲ）蛋白C活性測定（PC）血漿肝素定量測定有關(guān)抗凝功能的檢測血漿抗凝酶Ⅲ活性測定（AT-Ⅲ）24血漿抗凝酶Ⅲ活性測定原理和方法：檢測血漿中的AT-Ⅲ活性，采用發(fā)色底物法，于受檢血漿中加入過量凝血酶，其與AT-Ⅲ形成1:1復(fù)合物，剩余凝血酶與特定發(fā)色底物作用產(chǎn)生顏色，顏色深淺與抗凝酶活性呈負相關(guān)。臨床意義：減低見于肝臟疾病，DIC，血栓前狀態(tài)等。血漿抗凝酶Ⅲ活性測定原理和方法：檢測血漿中的AT-Ⅲ活性，采25蛋白C活性測定原理和方法：檢測血漿中PC活性，同樣常采用發(fā)色底物法，但加入PC激活劑，活化后的PC直接作用于特定底物產(chǎn)生顏色，顏色深淺與APC呈正相關(guān)。臨床意義：同AT-Ⅲ活性測定蛋白C活性測定原理和方法：檢測血漿中PC活性，同樣常采用發(fā)色26血漿肝素定量測定原理和方法：檢測血漿中肝素含量。肝素與AT-Ⅲ形成1:1復(fù)合物可滅活Ⅹa，在待測血漿中加入過量Ⅹa后，測定剩余Ⅹa對于另一標準基質(zhì)血漿的促凝活性，基質(zhì)血漿凝固時間與標本中的肝素含量呈正相關(guān)。參考值：0.1U/ml臨床意義：用于監(jiān)測肝素的用量，血漿肝素定量測定原理和方法：檢測血漿中肝素含量。肝素與AT-27有關(guān)纖維蛋白溶解的檢測優(yōu)球蛋白溶解時間測定（ELT）血漿凝血酶時間測定（TT）血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物測定（FDP）血漿D-D二聚體測定（DD）有關(guān)纖維蛋白溶解的檢測優(yōu)球蛋白溶解時間測定（ELT）28優(yōu)球蛋白溶解時間測定原理和方法：測定血漿中纖溶酶原激活物的大致活性。將待測血漿加入酸溶液中，蛋白沉淀后離心除去纖溶抑制物獲得“優(yōu)球蛋白”，其含有纖維蛋白原，纖溶酶原，纖溶酶原激活物等。然后把沉淀溶于緩沖液中，加入Ca++或凝血酶形成纖維蛋白凝塊，再觀察凝塊完全溶解所需時間。臨床意義：時間縮短見于原發(fā)性纖溶癥、血栓形成疾病。優(yōu)球蛋白溶解時間測定原理和方法：測定血漿中纖溶酶原激活物的大29血漿凝血酶時間測定原理和方法：主要檢測纖溶產(chǎn)物。在待檢血漿中加入標準化（活性確定）的凝血酶，觀察血漿凝固所需時間。參考值：16－18秒，延長3秒以上為異常。臨床意義：延長見于纖溶期FDP量增高，低纖維蛋白原血癥，血液中存在過多的肝素或肝素樣物質(zhì)。血漿凝血酶時間測定原理和方法：主要檢測纖溶產(chǎn)物。在待檢血漿中30血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物測定原理和方法：常采用FDP抗體包被的乳膠顆粒懸液檢測待測血漿中FDP的相對含量。若血漿中的FDP含量>5mg/L，則乳膠顆粒發(fā)生凝集反應(yīng)。參考值：<5mg/L臨床意義：增高見于原發(fā)性纖溶，DIC，溶栓治療，和其它血栓形成性疾病。血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物測定原理和方法：常采用FDP抗體包31血漿D-D二聚體測定原理和方法：檢測交聯(lián)纖維蛋白的降解產(chǎn)物。常采用乳膠凝集法或ELISA法檢測。臨床意義：D-D二聚體是纖溶酶分解交聯(lián)的纖維蛋白所產(chǎn)生的特異性產(chǎn)物，因此陽性結(jié)果對判斷是否已有血栓形成具有較高的診斷價值。血漿D-D二聚體測定原理和方法：檢測交聯(lián)纖維蛋白的降解產(chǎn)物。32血液流變學(xué)檢測目前血液流變學(xué)主要是運用物理和化學(xué)的手段研究血液中的細胞成分和血漿成分在宏觀與微觀下的變形和流動特性。包括：全血粘度，血漿粘度，紅細胞變形性，紅細胞電泳時間測定。臨床意義：對于如動脈硬化，糖尿病，高脂血癥，高血壓等易形成血栓的基礎(chǔ)疾病，血液流變學(xué)指標可以監(jiān)測機體是否處于高凝狀態(tài)，及時進行抗凝治療，減少血栓發(fā)生的危險性。血液流變學(xué)檢測目前血液流變學(xué)主要是運用物理和化學(xué)的手段研究血33檢測項目的選擇和應(yīng)用（一）一期止血缺陷的選擇：一期止血缺陷是指血管壁和血小板缺陷所致的出血性疾病，較常見，稱第一層次。一般選用血小板計數(shù)（BPC）出血時間測定（BT）作為篩選試驗。常見結(jié)果有：1.BT和PC正常見于血管性紫癜，可進一步做CRT2.BT延長PC減少見于血小板減少性紫癜3.BT延長PC正常見于血小板功能異?；騰WD檢測項目的選擇和應(yīng)用（一）一期止血缺陷的選擇：一期止血缺陷是34（二）二期止血缺陷的選擇：二期止血缺陷是指凝血因子缺乏所致的出血性疾病，較少見，稱第二層次。一般選用PT和APTT作為篩選試驗，常見結(jié)果有：1.APTT延長PT正常內(nèi)源性凝血途徑缺陷如血友病A、B，Ⅺ因子缺乏2.APTT正常PT延長外源性凝血途徑缺陷如Ⅶ因子缺乏3.APTT、

PT都延長多見于繼發(fā)性凝血因子減少如肝病，尿毒癥，DIC等（二）二期止血缺陷的選擇：二期止血缺陷是指凝血因子缺乏所致的35（三）纖維蛋白溶解綜合癥：原發(fā)性纖溶指由于各種原因如含纖溶酶原激活物（PA）的器官或組織（胰腺、肺、卵巢、甲狀腺等）在創(chuàng)傷、手術(shù)等刺激下，大量釋放PA入血，激活纖溶酶，水解纖維蛋白原，引起廣泛而嚴重的出血，也見于使用溶栓藥物過量。繼發(fā)性纖溶指繼發(fā)于血栓形成后的纖溶亢進，如DIC。一般選用FDP、DD和BPC檢測來判斷是否為繼發(fā)性纖溶。（三）纖維蛋白溶解綜合癥：36（四）抗凝和溶栓治療的監(jiān)測1.肝素常用于預(yù)防血栓性疾病的抗凝治療，普通肝素治療監(jiān)測用⑴首選APTT檢測延長至50－100秒⑵BPC>100×109/L。低分子量肝素副作用少，一般劑量無需監(jiān)測。2.口服抗凝劑監(jiān)測首選PT檢測，以INR值為判斷標準2.0－3.0，以PTR為判斷標準1.5－2.0。3.溶栓治療的監(jiān)測常選用⑴Fib測定1.2－1.5g/L⑵APTT測定延長至50－100秒⑶BPC>100×109/L以防止出血并發(fā)癥的出現(xiàn)。（四）抗凝和溶栓治療的監(jiān)測37彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）實驗室檢查BPC＜100×109/L或進行性下降（肝病、白血?。?0×109/L），或有兩項BPC活化產(chǎn)物升高。血漿Fib含量＜1.5g/L或進行性下降（肝?。?g/L、白血?。?.8g/L），或＞4g/L。FDP＞20mg/L（肝?。?0mg/L），或D-D二聚體陽性。PT縮短或延長3s以上或動態(tài)變化（肝病延長5s以上）纖溶酶原含量降低彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）實驗室檢查38正常的止血和抗凝機制包括血管機制血小板機制凝血因子機制抗凝系統(tǒng)機制纖維蛋白溶解機制正常的止血和抗凝機制包括血管機制39血管收縮激活血小板激活凝血系統(tǒng)血管的止血作用血管收縮血管的止血作用40血小板止血作用保護血管完整性血小板具粘附,聚集功能,形成白色血栓血小板促凝活性血小板止血作用保護血管完整性41凝血因子止血作用血液由流動狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槟z狀態(tài)。凝血過程分三個階段：凝血活酶形成、凝血酶形成、纖維蛋白形成。瀑布學(xué)說凝血因子止血作用血液由流動狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槟z狀態(tài)。凝血過程分三個42體內(nèi)單核巨噬細胞系統(tǒng)通過其吞噬、清除、攝取或滅活作用，將某些凝血物質(zhì)除掉，起抗凝作用。

抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）和肝素共同滅活活化的凝血因子。由蛋白C，蛋白S，血栓素調(diào)節(jié)蛋白等組成

Ca2+

蛋白S

抑制凝血

蛋白C活性蛋白C

凝血酶

Ca2+

血栓調(diào)節(jié)素激活纖溶酶原

抗凝系統(tǒng)作用體內(nèi)單核巨噬細胞系統(tǒng)通過其吞噬、清除、攝取或滅活作用，將某些43纖維蛋白溶解機制纖溶酶原（PLG）組織型激活物凝血酶、胃蛋白酶尿激酶型激活物

抗纖溶酶纖溶酶（PL）無活性酶纖維蛋白原纖維蛋白

FgDPFDPFgDP（纖維蛋白原降解產(chǎn)物）、FDP（纖維蛋白降解產(chǎn)物）纖維蛋白溶解機制44出血性疾病是指因止血或抗凝機制異常而引起的、以自發(fā)性出血或血管損傷后出血不止為特征的一類疾病。主要包括：血管性紫癜（過敏性、擴張癥、單純性等）血小板減少性紫癜（特發(fā)性、繼發(fā)性）凝血因子數(shù)量或功能障礙（血友病、vWD、獲得性）抗凝及纖溶異常（抗凝或溶栓藥物過量，鼠藥中毒，毒蛇咬傷等）典型多重止血機制異常（DIC）出血性疾病是指因止血或抗凝機制異常而引起的、以自發(fā)性出血或血45血栓性疾病是指由血栓形成和血栓栓塞兩種病理過程引起一類疾病。血栓形成：在一定條件下血液有形成份在血管或心臟內(nèi)膜局部形成栓子的過程。血栓栓塞：指血栓在形成部位或由形成部位脫落，部分或全部堵塞某些血管，引起相應(yīng)器官或系統(tǒng)缺血、缺氧、壞死及淤血、水腫的病理現(xiàn)象。血栓形成機制主要與血管內(nèi)皮損傷，血液流變學(xué)異常有關(guān)。血栓性疾病是指由血栓形成和血栓栓塞兩種病理過程引起一類疾病。46有關(guān)血管功能的檢測毛細血管抵抗力試驗出血時間測定血管性血友病因子測定血漿6-酮-前列腺素F1α測定有關(guān)血管功能的檢測毛細血管抵抗力試驗47毛細血管抵抗力試驗（Capillaryresistancetest

CRT）又稱束臂試驗

原理和方法：毛細血管和血小板的相互作用在止血中的表現(xiàn)。在前臂加壓阻斷靜脈血流，5min內(nèi)觀察前臂尺側(cè)直徑5cm范圍內(nèi)新出血點的數(shù)目。正常參考值：男性<5個，女性<10個臨床意義：脆性增加見于1.血管性紫癜2.遺傳性出血性毛細血管擴張癥3.維生素C缺乏4.血管性血友病5.各種原因造成的血小板減少或功能缺陷6.血小板增多毛細血管抵抗力試驗（Capillaryresistance48出血時間的測定

（Bleedingtime，BT）

原理和方法：出血時間測定器法（標準化）將Cap刺破后，出血自然停止所需時間。主要受血小板數(shù)量和功能的影響，其次是血管壁的完整性和收縮功能，凝血因子的嚴重缺乏對試驗也有一定影響。參考值：>9min臨床意義：延長見于1.血小板數(shù)量減少或功能減低2.血管異常3.凝血因子缺乏4.抗凝藥物的使用出血時間的測定（Bleedingtime，BT）原理和49血管性血友病因子測定原理和方法：血管內(nèi)皮損傷vWF的合成和釋放增加。常使用免疫火箭電泳法測定其在血漿中的相對含量。臨床意義：降低見于vWD。增高見于1.血栓性疾?。盒募」Ｈ?、腦栓塞等2.腎臟疾?。杭甭阅I炎，腎病綜合征等血管性血友病因子測定原理和方法：血管內(nèi)皮損傷vWF的合成和釋50血漿6-酮-前列腺素F1α測定

原理和方法：其是血管內(nèi)皮細胞膜磷脂進行花生四烯酸代謝，生成PGI2后最終代謝產(chǎn)物。當血栓形成時，代謝過程中TXA2生成增多，PGI2生成減少，因此該物質(zhì)也減少。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）測定其含量。臨床意義：在有血管內(nèi)皮受損的基礎(chǔ)疾?。ㄈ缣悄虿?、動脈粥樣硬化、惡性腫瘤、急性腎炎等）時，血漿6-酮-前列腺素F1α減低提示有血栓形成可能。血漿6-酮-前列腺素F1α測定

原理和方法：其是血管內(nèi)皮細胞51有關(guān)血小板功能的檢測血小板相關(guān)免疫球蛋白測定血小板粘附試驗血小板聚集試驗血漿β-血小板球蛋白和血小板第4因子測定有關(guān)血小板功能的檢測血小板相關(guān)免疫球蛋白測定52血小板相關(guān)免疫球蛋白測定原理和方法：大多數(shù)特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）和系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者體內(nèi)有抗血小板抗體，稱為血小板相關(guān)免疫球蛋白（PAIg），導(dǎo)致血小板破壞。一般采用ELISA檢測。臨床意義：1.診斷ITP和療效監(jiān)測的的重要試驗之一2.藥物性血小板減少性紫癜、輸血后紫癜、Even綜合癥、慢性活動性肝炎、多發(fā)性骨髓瘤等也呈一部分陽性反應(yīng)。血小板相關(guān)免疫球蛋白測定原理和方法：大多數(shù)特發(fā)性血小板減少性53血小板粘附試驗原理和方法：檢測血小板的粘附功能。血小板粘附試驗（PAdT）常用玻璃柱法，用一定量血液通過一定表面積的玻璃管，計數(shù)通過前后血小板量，差值為粘附百分率。臨床意義：1.增高見于高凝狀態(tài)和血栓性疾?。禾悄虿?、冠心病、高脂血癥、妊高癥、DVT等。2.減低見于血小板無力癥、血管性血友病、巨大血小板綜合癥、肝病、尿毒癥等。血小板粘附試驗原理和方法：檢測血小板的粘附功能。血小板粘附試54血小板聚集試驗原理和方法：檢測血小板的聚集功能。血小板聚集試驗(PAgT)采用比濁法，連續(xù)攪拌下在富血小板血漿(PRP)中加入聚集劑，記錄透光度的變化過程并繪制成聚集曲線，分析得出結(jié)果。臨床意義：同血小板粘附試驗。血小板聚集試驗原理和方法：檢測血小板的聚集功能。血小板聚集試55血漿β-TG和PF4測定原理和方法：檢測血小板的釋放反應(yīng)后產(chǎn)物。β-TG和PF4是血小板內(nèi)α顆粒中的特異蛋白，當血小板被激活后，這些物質(zhì)被大量釋放出來。常采用ELISA測定它們的含量。臨床意義：血漿β-TG和PF4增高提示血小板被激活及釋放反應(yīng)亢進。見于血液的高凝狀態(tài)和血栓性疾病，對心腦血管硬化性疾病、妊高癥、糖尿病、尿毒癥等易栓狀態(tài)有一定的早期診斷價值。血漿β-TG和PF4測定原理和方法：檢測血小板的釋放反應(yīng)后產(chǎn)56有關(guān)凝血因子的檢測凝血時間測定（clottingtest，CT）活化部分凝血活酶測定（activatedpartialthromboplastintime，APTT）血漿凝血酶原時間測定（prothrombintime，PT）血漿纖維蛋白原測定（fibrinogen，F(xiàn)ib）有關(guān)凝血因子的檢測凝血時間測定（clottingtest57凝血時間測定原理和方法：抽取靜脈血離體后發(fā)生凝固所需時間，主要反映內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的功能狀態(tài)。常用普通試管法。臨床意義：1.延長見于血友病A、B，Ⅴ、Ⅹ、Ⅰ因子缺乏，肝病，新生兒出血癥，DIC，應(yīng)用抗凝劑等2.縮短見于高凝狀態(tài)，血栓性疾病凝血時間測定原理和方法：抽取靜脈血離體后發(fā)生凝固所需時間，主58活化部分凝血活酶時間測定原理和方法：體外模擬內(nèi)源性凝血途徑，在待檢血漿中加入接觸激活因子和磷脂，再加入Ca++，觀察血漿凝固所需時間。參考值：32－43秒，延長10秒以上為異常臨床意義：同CT。試劑和操作的標準化使其準確性高，是目前推薦應(yīng)用的內(nèi)源凝血途徑的篩選試驗，又是監(jiān)測肝素抗凝治療的首選指標?；罨糠帜蠲笗r間測定原理和方法：體外模擬內(nèi)源性凝血途徑，59血漿凝血酶原時間測定原理和方法：體外模擬外源性凝血途徑，在待檢血漿中加入組織因子和Ca++，觀察血漿凝固所需時間。它是反映外源凝血系統(tǒng)缺陷的篩選試驗。參考值：1.11－13秒，延長3秒以上為異常。2.凝血酶原比值（PTR）：測定值/對照值，常用于繼發(fā)性凝血因子減少導(dǎo)致出血的危險程度，如嚴重肝病。3.國際標準化比值（INR）是PTRISI，口服抗凝劑的監(jiān)測指標。臨床意義：1.延長見于Ⅶ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅱ、Ⅰ缺乏，VitK缺乏，肝臟疾病，DIC等。2.口服抗凝劑的首選監(jiān)測指標，2.0－3.0為宜。血漿凝血酶原時間測定原理和方法：體外模擬外源性凝血途徑，在待60血漿纖維蛋白原測定原理和方法：體外模擬從纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白的過程，在待檢血漿中加入凝血酶和Ca++，血漿凝固后的濁度與纖維蛋白原的量成正比，間接計算算其含量。參考值：2－4克/升臨床意義：1.增高見于急性感染，惡性腫瘤，休克，急性腎炎，心肌梗塞，糖尿病，妊高癥等。2.減低見于見于DIC低凝期和纖亢期，原發(fā)性纖溶癥，重癥肝炎等。血漿纖維蛋白原測定原理和方法：體外模擬從纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維61有關(guān)抗凝功能的檢測血漿抗凝酶Ⅲ活性測定（AT-Ⅲ）蛋白C活性測定（PC）血漿肝素定量測定有關(guān)抗凝功能的檢測血漿抗凝酶Ⅲ活性測定（AT-Ⅲ）62血漿抗凝酶Ⅲ活性測定原理和方法：檢測血漿中的AT-Ⅲ活性，采用發(fā)色底物法，于受檢血漿中加入過量凝血酶，其與AT-Ⅲ形成1:1復(fù)合物，剩余凝血酶與特定發(fā)色底物作用產(chǎn)生顏色，顏色深淺與抗凝酶活性呈負相關(guān)。臨床意義：減低見于肝臟疾病，DIC，血栓前狀態(tài)等。血漿抗凝酶Ⅲ活性測定原理和方法：檢測血漿中的AT-Ⅲ活性，采63蛋白C活性測定原理和方法：檢測血漿中PC活性，同樣常采用發(fā)色底物法，但加入PC激活劑，活化后的PC直接作用于特定底物產(chǎn)生顏色，顏色深淺與APC呈正相關(guān)。臨床意義：同AT-Ⅲ活性測定蛋白C活性測定原理和方法：檢測血漿中PC活性，同樣常采用發(fā)色64血漿肝素定量測定原理和方法：檢測血漿中肝素含量。肝素與AT-Ⅲ形成1:1復(fù)合物可滅活Ⅹa，在待測血漿中加入過量Ⅹa后，測定剩余Ⅹa對于另一標準基質(zhì)血漿的促凝活性，基質(zhì)血漿凝固時間與標本中的肝素含量呈正相關(guān)。參考值：0.1U/ml臨床意義：用于監(jiān)測肝素的用量，血漿肝素定量測定原理和方法：檢測血漿中肝素含量。肝素與AT-65有關(guān)纖維蛋白溶解的檢測優(yōu)球蛋白溶解時間測定（ELT）血漿凝血酶時間測定（TT）血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物測定（FDP）血漿D-D二聚體測定（DD）有關(guān)纖維蛋白溶解的檢測優(yōu)球蛋白溶解時間測定（ELT）66優(yōu)球蛋白溶解時間測定原理和方法：測定血漿中纖溶酶原激活物的大致活性。將待測血漿加入酸溶液中，蛋白沉淀后離心除去纖溶抑制物獲得“優(yōu)球蛋白”，其含有纖維蛋白原，纖溶酶原，纖溶酶原激活物等。然后把沉淀溶于緩沖液中，加入Ca++或凝血酶形成纖維蛋白凝塊，再觀察凝塊完全溶解所需時間。臨床意義：時間縮短見于原發(fā)性纖溶癥、血栓形成疾病。優(yōu)球蛋白溶解時間測定原理和方法：測定血漿中纖溶酶原激活物的大67血漿凝血酶時間測定原理和方法：主要檢測纖溶產(chǎn)物。在待檢血漿中加入標準化（活性確定）的凝血酶，觀察血漿凝固所需時間。參考值：16－18秒，延長3秒以上為異常。臨床意義：延長見于纖溶期FDP量增高，低纖維蛋白原血癥，血液中存在過多的肝素或肝素樣物質(zhì)。血漿凝血酶時間測定原理和方法：主要檢測纖溶產(chǎn)物。在待檢血漿中68血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物測定原理和方法：常采用FDP抗體包被的乳膠顆粒懸液檢測待測血漿中FDP的相對含量。若血漿中的FDP含量>5mg/L，則乳膠顆粒發(fā)生凝集反應(yīng)。參考值：<5mg/L臨床意義：增高見于原發(fā)性纖溶，DIC，溶栓治療，和其它血栓形成性疾病。血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物測定原理和方法：常采用FDP抗體包69血漿D-D二聚體測定原理和方法：檢測交聯(lián)纖維蛋白的降解產(chǎn)物。常采用乳膠凝集法或ELISA法檢測。臨床意義：D-D二聚體是纖溶酶分解交聯(lián)的纖維蛋白所產(chǎn)生的特異性產(chǎn)物，因此陽性結(jié)果對判斷是否已有血栓形成具有較高的診斷價值。血漿D-D二聚體測定原理和方法：檢測交聯(lián)纖維蛋白的降解產(chǎn)物。70血液流變學(xué)檢測目前血