實(shí)驗(yàn)四小鼠精子畸形試驗(yàn)課件

RIM食品專地3經(jīng)口急性毒性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)且的食品李學(xué)安實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)結(jié)果院系:生化環(huán)院結(jié)果分析任課老師:吳雨龍任課班級(jí):09食品、行09食品上一張下一張照顧習(xí)開始衷〓南京莊學(xué)院RIM1宗驗(yàn)唧小鼠羲子形試RIM實(shí)驗(yàn)且的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容精子畸形試驗(yàn)是檢測(cè)受試化學(xué)毒物能實(shí)驗(yàn)材料否破壞哺乳動(dòng)物精子正常形態(tài)的實(shí)驗(yàn)方法。實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過實(shí)驗(yàn),學(xué)習(xí)和掌握小鼠精子畸形試驗(yàn)結(jié)果分析的原理和步驟。上一張下一張照照顧開始衷〓南京莊學(xué)院宗驗(yàn)唧小鼠羲子形試2RIM3求經(jīng)口急性毒性實(shí)驗(yàn)精子畸形是指精子的形狀異常和異常精子數(shù)量的增多。生殖系統(tǒng)對(duì)化學(xué)毒物的實(shí)驗(yàn)且的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容作用十分敏感,在其他系統(tǒng)還未出現(xiàn)毒性賣驗(yàn)材料反應(yīng)前,生殖系統(tǒng)可能已出現(xiàn)了損害作用實(shí)驗(yàn)步星正常情況下,哺乳動(dòng)物的精液中也存在少實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)暴分新量的畸形精子,但在某些化學(xué)毒物的作用下,特別是在可引起生殖細(xì)胞遺傳性損傷K的化學(xué)毒物作用下,哺乳動(dòng)物睪丸產(chǎn)生的上一張下一張畸形精子數(shù)量可大量增加。因此,可以用照顧習(xí)開始衷〓南京莊學(xué)院RIM3RIM3求經(jīng)口急性毒性實(shí)驗(yàn)檢查雄性動(dòng)物接觸化學(xué)毒物后精子畸形率的高低,來反映該化學(xué)毒物的生殖毒性和實(shí)驗(yàn)且的對(duì)生殖細(xì)胞潛在的致突變性。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)材料化學(xué)毒物引起精子畸形的機(jī)制尚未完賣驗(yàn)步全清楚。正常情況下,精子的成熟和正常數(shù)果分形態(tài)發(fā)生過程受多種基因調(diào)控,一旦這些基因中的一個(gè)或多個(gè)在化學(xué)毒物的作用下國發(fā)生突變,就會(huì)導(dǎo)致畸形精子數(shù)量的大量上一張下一張?jiān)黾?。一般認(rèn)為,常染色體上的基因控制照顧習(xí)開始衷〓南京莊學(xué)院RIM4RIM3求經(jīng)口急性毒性實(shí)驗(yàn)精子畸形,Y-性連鎖基因控制畸形精子的表現(xiàn)。某些特異的染色體重排,如性、常實(shí)驗(yàn)且的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容染色體易位,是化學(xué)毒物誘發(fā)哺乳動(dòng)物畸實(shí)驗(yàn)材料形率增高的主要機(jī)制實(shí)驗(yàn)步驟由于精子畸形有可能影響生殖。因此,實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果分析當(dāng)受檢物引起精子畸形率增高,即使不定是化合物誘發(fā)生殖細(xì)胞突變的結(jié)果,但也表明受試物直接或間接損害精子,從而上一張下一張可能影響生殖。照顧習(xí)開始衷〓南京莊學(xué)院RIM5RIM3)經(jīng)共經(jīng)口急性毒性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:體重18-22g小鼠。實(shí)驗(yàn)且的驗(yàn)內(nèi)>實(shí)驗(yàn)景材:實(shí)驗(yàn)材料灌胃針、注射器5套、眼科剪、眼實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)結(jié)果科鑷、顯微鏡、飼養(yǎng)籠等結(jié)果分析實(shí)驗(yàn)試劑:磷酸鹽緩沖液、生理鹽水、無水乙上一張下一張醇、2%伊紅水溶液、甲基磺酸甲酯照顧習(xí)或甲基磺酸乙酸或環(huán)磷酰胺開始衷〓南京莊學(xué)院RIM6RIM3去步康經(jīng)口急性毒性1.動(dòng)物選擇成熟的大鼠、小鼠均可使用。由于實(shí)驗(yàn)小鼠較為經(jīng)濟(jì),且有大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)小鼠在該試驗(yàn)系統(tǒng)中對(duì)化學(xué)毒物最為敏感,故一般采用雄實(shí)驗(yàn)且的性小鼠,年齡宜在6-8周實(shí)驗(yàn)內(nèi)容2.劑量與分組試驗(yàn)至少應(yīng)設(shè)3個(gè)以上劑量組,并實(shí)驗(yàn)材料同時(shí)設(shè)立陽性對(duì)照組和陰性對(duì)照組。接觸化學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)結(jié)果毒物后每組至少應(yīng)存活5只動(dòng)物。最高劑量組5d結(jié)果分析總劑量應(yīng)能使部分動(dòng)物死亡。一般可采用LD50的2-4倍劑量,或預(yù)先給予化學(xué)毒物的LD50,以求得最高總劑量,然后以它的上張下一張1/2(或1/5、1/10)作為下一劑量組的接觸劑量,依此類推。開始衷〓南京莊學(xué)院RIM7RIM3)實(shí)驗(yàn)經(jīng)口急性毒性陽性對(duì)照可用環(huán)碎酰胺20mg/kg或甲基磺酸甲酯實(shí)驗(yàn)75mg/kg或甲基磺酸乙酯60mg/kg,進(jìn)行腹腔注射,每天一次,連續(xù)5d。陰性對(duì)照選用給予相實(shí)驗(yàn)且的同體積的溶劑。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容3.染毒與采樣可采用一次或每天一次連續(xù)5d的實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)步驟方法進(jìn)行染毒。染毒途徑多用腹腔注射,也可實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用與人體實(shí)際接觸化學(xué)毒物相同的途徑,如結(jié)果分析經(jīng)口、吸入和皮膚接觸等一般認(rèn)為精原細(xì)胞后期或初級(jí)精母細(xì)胞早期對(duì)化學(xué)誘變劑較為敏感,在接觸化學(xué)毒物后4上-張下張5周精子畸形率最高,故選擇在第一次染毒后第HH35進(jìn)行采樣,也可在染毒后第1、第4和第10周開始結(jié)束二南京莊學(xué)院RIM8經(jīng)口急性毒性分三次采樣,或者在染毒后每周采樣一次,連續(xù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察,直至精子形態(tài)恢復(fù)正常。實(shí)驗(yàn)且的4.制片用頸椎脫臼法處死小鼠,剪開腹腔,分實(shí)驗(yàn)內(nèi)容離并摘取雙側(cè)附睪,將附睪放入盛有約3m1磷酸實(shí)驗(yàn)材料鹽緩沖液或生理鹽水的小平皿中,以眼科剪將實(shí)驗(yàn)步驟附睪尾剪成小塊,用吸管將懸浮液輕輕吹打5實(shí)驗(yàn)結(jié)果6次,靜置3-5min,用四層擦鏡紙濾除組織碎結(jié)果分析片,吸取此精子懸液滴于清潔載玻片上,均勻推片,待玻片晾千后用甲醇固定5min,干燥后即可鏡檢觀察精子形態(tài)。也可用2%的伊紅水溶上一張下一張液染色1-2h后再作鏡檢照顧習(xí)開始衷〓南京莊學(xué)院經(jīng)口急性毒性分三次采樣,或者在染毒后每周采樣一次,連續(xù)9經(jīng)口急性毒性5.閱片在高倍鏡下檢查精子形態(tài),可加上藍(lán)色或?qū)嶒?yàn)綠色濾光片。每只小鼠檢查完整的精子200-500個(gè),每個(gè)劑量組至少檢查1000個(gè)精子。精子畸形實(shí)驗(yàn)且的主要表現(xiàn)在精子的頭部,可分為:無鉤、香蕉形、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容無定形、雙頭、雙尾、尾折疊及胖頭等形態(tài)實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)步驟頭部重疊或全部重疊的精子、無尾精子不進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)數(shù)。結(jié)果分析上一張下一張照顧習(xí)開始衷〓南京莊學(xué)院經(jīng)口急性毒性10實(shí)驗(yàn)四小鼠精子畸形試驗(yàn)課件11實(shí)驗(yàn)四小鼠精子畸形試驗(yàn)課件12實(shí)驗(yàn)四小鼠精子畸形試驗(yàn)課件13實(shí)驗(yàn)四小鼠精子畸形試驗(yàn)課件14實(shí)驗(yàn)四小鼠精子畸形試驗(yàn)課件15實(shí)驗(yàn)四小鼠精子畸形試驗(yàn)課件16RIM食品專地3經(jīng)口急性毒性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)且的食品李學(xué)安實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)結(jié)果院系:生化環(huán)院結(jié)果分析任課老師:吳雨龍任課班級(jí):09食品、行09食品上一張下一張照顧習(xí)開始衷〓南京莊學(xué)院RIM17宗驗(yàn)唧小鼠羲子形試RIM實(shí)驗(yàn)且的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容精子畸形試驗(yàn)是檢測(cè)受試化學(xué)毒物能實(shí)驗(yàn)材料否破壞哺乳動(dòng)物精子正常形態(tài)的實(shí)驗(yàn)方法。實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過實(shí)驗(yàn),學(xué)習(xí)和掌握小鼠精子畸形試驗(yàn)結(jié)果分析的原理和步驟。上一張下一張照照顧開始衷〓南京莊學(xué)院宗驗(yàn)唧小鼠羲子形試18RIM3求經(jīng)口急性毒性實(shí)驗(yàn)精子畸形是指精子的形狀異常和異常精子數(shù)量的增多。生殖系統(tǒng)對(duì)化學(xué)毒物的實(shí)驗(yàn)且的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容作用十分敏感,在其他系統(tǒng)還未出現(xiàn)毒性賣驗(yàn)材料反應(yīng)前,生殖系統(tǒng)可能已出現(xiàn)了損害作用實(shí)驗(yàn)步星正常情況下,哺乳動(dòng)物的精液中也存在少實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)暴分新量的畸形精子,但在某些化學(xué)毒物的作用下,特別是在可引起生殖細(xì)胞遺傳性損傷K的化學(xué)毒物作用下,哺乳動(dòng)物睪丸產(chǎn)生的上一張下一張畸形精子數(shù)量可大量增加。因此,可以用照顧習(xí)開始衷〓南京莊學(xué)院RIM19RIM3求經(jīng)口急性毒性實(shí)驗(yàn)檢查雄性動(dòng)物接觸化學(xué)毒物后精子畸形率的高低,來反映該化學(xué)毒物的生殖毒性和實(shí)驗(yàn)且的對(duì)生殖細(xì)胞潛在的致突變性。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)材料化學(xué)毒物引起精子畸形的機(jī)制尚未完賣驗(yàn)步全清楚。正常情況下,精子的成熟和正常數(shù)果分形態(tài)發(fā)生過程受多種基因調(diào)控,一旦這些基因中的一個(gè)或多個(gè)在化學(xué)毒物的作用下國發(fā)生突變,就會(huì)導(dǎo)致畸形精子數(shù)量的大量上一張下一張?jiān)黾?。一般認(rèn)為,常染色體上的基因控制照顧習(xí)開始衷〓南京莊學(xué)院RIM20RIM3求經(jīng)口急性毒性實(shí)驗(yàn)精子畸形,Y-性連鎖基因控制畸形精子的表現(xiàn)。某些特異的染色體重排,如性、常實(shí)驗(yàn)且的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容染色體易位,是化學(xué)毒物誘發(fā)哺乳動(dòng)物畸實(shí)驗(yàn)材料形率增高的主要機(jī)制實(shí)驗(yàn)步驟由于精子畸形有可能影響生殖。因此,實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果分析當(dāng)受檢物引起精子畸形率增高,即使不定是化合物誘發(fā)生殖細(xì)胞突變的結(jié)果,但也表明受試物直接或間接損害精子,從而上一張下一張可能影響生殖。照顧習(xí)開始衷〓南京莊學(xué)院RIM21RIM3)經(jīng)共經(jīng)口急性毒性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:體重18-22g小鼠。實(shí)驗(yàn)且的驗(yàn)內(nèi)>實(shí)驗(yàn)景材:實(shí)驗(yàn)材料灌胃針、注射器5套、眼科剪、眼實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)結(jié)果科鑷、顯微鏡、飼養(yǎng)籠等結(jié)果分析實(shí)驗(yàn)試劑:磷酸鹽緩沖液、生理鹽水、無水乙上一張下一張醇、2%伊紅水溶液、甲基磺酸甲酯照顧習(xí)或甲基磺酸乙酸或環(huán)磷酰胺開始衷〓南京莊學(xué)院RIM22RIM3去步康經(jīng)口急性毒性1.動(dòng)物選擇成熟的大鼠、小鼠均可使用。由于實(shí)驗(yàn)小鼠較為經(jīng)濟(jì),且有大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)小鼠在該試驗(yàn)系統(tǒng)中對(duì)化學(xué)毒物最為敏感,故一般采用雄實(shí)驗(yàn)且的性小鼠,年齡宜在6-8周實(shí)驗(yàn)內(nèi)容2.劑量與分組試驗(yàn)至少應(yīng)設(shè)3個(gè)以上劑量組,并實(shí)驗(yàn)材料同時(shí)設(shè)立陽性對(duì)照組和陰性對(duì)照組。接觸化學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)結(jié)果毒物后每組至少應(yīng)存活5只動(dòng)物。最高劑量組5d結(jié)果分析總劑量應(yīng)能使部分動(dòng)物死亡。一般可采用LD50的2-4倍劑量,或預(yù)先給予化學(xué)毒物的LD50,以求得最高總劑量,然后以它的上張下一張1/2(或1/5、1/10)作為下一劑量組的接觸劑量,依此類推。開始衷〓南京莊學(xué)院RIM23RIM3)實(shí)驗(yàn)經(jīng)口急性毒性陽性對(duì)照可用環(huán)碎酰胺20mg/kg或甲基磺酸甲酯實(shí)驗(yàn)75mg/kg或甲基磺酸乙酯60mg/kg,進(jìn)行腹腔注射,每天一次,連續(xù)5d。陰性對(duì)照選用給予相實(shí)驗(yàn)且的同體積的溶劑。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容3.染毒與采樣可采用一次或每天一次連續(xù)5d的實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)步驟方法進(jìn)行染毒。染毒途徑多用腹腔注射,也可實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用與人體實(shí)際接觸化學(xué)毒物相同的途徑,如結(jié)果分析經(jīng)口、吸入和皮膚接觸等一般認(rèn)為精原細(xì)胞后期或初級(jí)精母細(xì)胞早期對(duì)化學(xué)誘變劑較為敏感,在接觸化學(xué)毒物后4上-張下張5周精子畸形率最高,故選擇在第一次染毒后第HH35進(jìn)行采樣,也可在染毒后第1、第4和第10周開始結(jié)束二南京莊學(xué)院RIM24經(jīng)口急性毒性分三次采樣,或者在染毒后每周采樣一次,連續(xù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察,直至精子形態(tài)恢復(fù)正常。實(shí)驗(yàn)且的4.制片用頸椎脫臼法處死小鼠,剪開腹腔,分實(shí)驗(yàn)內(nèi)容離并摘取雙側(cè)附睪,將附睪放入盛有約3m1磷酸實(shí)驗(yàn)材料鹽緩沖液或生理鹽水的小平皿中,以眼科剪將實(shí)驗(yàn)步驟附睪尾剪成小塊,用吸管將懸浮液輕輕吹打5實(shí)驗(yàn)結(jié)果6次,靜置3-5min,用四層擦鏡紙濾除組織碎結(jié)果分析片,吸取此精子懸液滴于清潔載玻片上,均勻推片,待玻片晾千后用甲醇固定5min,干燥后即可鏡檢觀察精子形態(tài)。也可用2%的伊紅水溶上一張下一張液染色1-2h后再作鏡檢照顧習(xí)開始衷〓南京莊學(xué)院經(jīng)口急性毒性分三次采樣,或者在染毒后每周采樣一次,連續(xù)25經(jīng)口急性毒性5.閱片在高倍鏡下檢查精子形態(tài),可加上藍(lán)色或?qū)嶒?yàn)綠色濾光片。每只小鼠檢查完整的精子200-500個(gè),每個(gè)劑量組至少檢查1000個(gè)